Análisis de componentes químicos en especies de cistanche

Contacto:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Yong Jiang, Peng-Fei Tu y otros

Resumen

Especies del género deCistanche(Rou Cong Rong en chino) son hierbas parásitas perennes y se distribuyen principalmente en tierras áridas y desiertos cálidos. Como tónico superior para el tratamiento de la insuficiencia renal, la impotencia, la infertilidad femenina, la leucorrea mórbida, la metrorragia profusa y el estreñimiento senil.Cistanchehierbasganó el honor de "Ginseng del desierto". Recientemente, ha habido una creciente atención científica a Herba Cistanche por sus notables bioactividades que incluyen la antioxidación, la neuroprotección y el envejecimiento. Los constituyentes químicos deCistancheplantasincluyen principalmente aceites volátiles y no volátilesfeniletanoideglucósidos(PhGs), iridoides, lignanos, alditoles, oligosacáridos y polisacáridos. Los estudios farmacológicos muestran que las PhG son los principales componentes activos para curar la deficiencia renal, la antioxidación y la neuroprotección; el galactitol y los oligosacáridos son los representantes para el tratamiento del estreñimiento senil, mientras que los polisacáridos se encargan de mejorar la inmunidad del organismo. En este trabajo, los avances sobre los constituyentes químicos deCistancheplantasy se revisan sus correspondientes análisis.

Palabras clave:Cistanche Herba, Cistanches Químicos, Análisis de constituyentes, Glicósidos feniletanoides

1. Introducción

CistancheHoffmg. Et Link, uno de los géneros de la familia Orobanchaceae, con 22 especies en el mundo, se distribuye principalmente en las tierras áridas y desiertos del hemisferio norte, como Xinjiang, Mongolia Interior, regiones autónomas de Ningxia y Gansu, provincias de Qinghai de China, así como Irán, India, Mongolia, etc. [1]. Sus ambientes de crecimiento son muy severos: clima árido extremo, variación severa de temperaturas, sol intenso, menos de 250 mm de precipitación anual y suelos empobrecidos [2,3]. losCistancheLas especies pertenecen a las hierbas parásitas perennes, que comúnmente se adhieren a las raíces de las plantas fijadoras de arena, como Haloxylox ammodendron, H. persicum, Kalidium foliated y plantas Tamarix, etc. [3]. Hay seis especies de Cistanche en China, según el registro del Índice taxonómico de plantas superiores chinas [4]. Sin embargo, un estudio posterior confirmó que sólo cuatro especies y una variación deCistancheexisten en China, es decirCistanchedeserticolaYC Ma, C. tubulosa (Schenk) R. Wight, C. salsa (CA Mey.) G. Beck, C. salsa var. albiflflora PF Tu et ZC Lou y C. sinensis G. Beck [5].

Rou CongRong (HerbaCistanche), registrada por primera vez en la Materia médica china de Shen Nong, se refiere a los tallos secos y suculentos de laCistancheplantas.HerbaCistancheha sido considerado como un tónico superior y se ganó el honor de "Ginseng de los desiertos". Los valores científicos de Herba Cistanche radican en el tratamiento de la insuficiencia renal, la impotencia, la infertilidad femenina, la leucorrea mórbida, la profusametrorragia y el estreñimiento senil[6,7]. Ha sido el fármaco recetado con mayor frecuencia contra la insuficiencia renal en China durante sucesivas dinastías. Entre las especies de Cistanche, solo C. deserticola ha sido reordenada en la Farmacopea China (edición de 2000) [8], y C. tubulosa se agregó a la Farmacopea China de 2005 como alternativa, por sus componentes químicos similares, actividades farmacológicas y su relativamente recurso abundante en comparación con C. deserticola [9-11]. Sin embargo, en los últimos años, la C. deserticola silvestre está al borde de la extinción debido a la sobreexplotación, y ha sido recolectada como una de las plantas de Clase II que necesitan protección en China. Debido a la deficiencia de los recursos naturales de los oficialesHerbaCistanche, otras especies de este género, como C. salsa y C. sinensis, también se utilizan como sustitutos en muchas áreas [10].

Investigación científica sobreCistancheplantascomenzó en la década de 1980 [12], y el análisis químico indicó que varios compuestos, incluidos los aceites esenciales,feniletanoideglucósidos(PhGs), iridoides, lignanos, alditoles, oligosacáridos y polisacáridos son los principales componentes deCistancheplantas[13,14]. La investigación farmacológica mostró que los extractos deCistanchelas plantas poseen un amplio espectro de actividades, como curar la deficiencia renal y el estreñimiento senil, mejorar la capacidad de aprender y memorizar, tratar la enfermedad de Alzheimer, mejorar la inmunidad, combatir el envejecimiento y la fatiga [14–21]. Con la mejora del nivel de vida y la llegada de una sociedad que envejece,Cistancheplantashan ganado más atención y se han utilizado cada vez más debido a sus distinguidas actividades farmacológicas.

Ha habido varias revisiones sobre el estudio de los constituyentes químicos y las actividades farmacológicas deCistancheplantas[13–15]. El presente trabajo se centra en el análisis químico de este género y los avances en los estudios de constituyentes químicos.

2. Compuestos volátiles

Los métodos de extracción comúnmente utilizados para los compuestos volátiles de los MTC incluyen la destilación al vapor y la extracción con disolventes orgánicos lipofílicos. Usando destilación al vapor, se extrajeron los aceites esenciales de C. salsa y C. tubulosa, y se identificaron 38 y 21 componentes por GC-MS, respectivamente (Tabla 1). Los principales constituyentes de los aceites esenciales de C. salsa consisten en alcanos, alcoholes, aldehídos y algunos compuestos heterocíclicos, mientras que el ácido palmítico y el ácido linoleico son los dos constituyentes principales de los aceites totales de C. tubulosa [22,23]. Los compuestos volátiles de C. deserticola se extrajeron con éter de petróleo y se identificaron 25 componentes mediante GC-MS. Los tres constituyentes más ricos son el 14-metilpentadecanoato de metilo (13,61 por ciento), el palmitato de etilo (12,39 por ciento) y el 2,5,6-trimetiloletano (7,60 por ciento) [24]. Otro informe sobre los componentes volátiles de C. deserticola mostró que el eugenol era el componente principal cuando se usaba un método de destilación y extracción simultánea [25]. Los diferentes resultados analíticos de estos dos documentos [24,25] pueden deberse a diferentes métodos de extracción y diferentes condiciones analíticas de GC-MS.

Además de estos, Ma informó sobre un método de extracción de fluidos supercríticos (SFE) para extraer los constituyentes no polares de C. salsa. El análisis del extracto por GC-MS mostró la existencia de algunos ésteres y compuestos de bajo peso molecular que contenían oxígeno o nitrógeno, además de los alcanos. Este resultado demostró que SFE podría extraer más compuestos polares mediante la adición de un modificador polar [26].

3. Compuestos no volátiles

Los compuestos no volátiles deCistancheplantasincluyen principalmente feniletanoides, iridoides, lignanos, alditoles, oligosacáridos y polisacáridos. Hasta el momento se han aislado más de 100 compuestos no volátiles deplanta de cistanche. La distribución de varios tipos de compuestos enCistancheplantasse enumera en la Tabla 2. En 1995, Moriya [27,28] informó que el material vegetal de C. salsa se había identificado erróneamente antes cuando investigó las fuentes de Herba Cistanches de los mercados médicos japoneses, por lo que los componentes químicos aislados de C. salsa en los años 80 se han reasignado a C. deserticola en esta revisión.

3.1. Glucósidos feniletanoides

3.1.1. Estructuras químicas de PhG

PhGs han sido considerados como los principales componentes activos deCistancheespecies. Hasta la fecha, 34 PhG(pheniletanoideglucósidos)han sido aislados deplantas de cistanche, incluidos 22 glucósidos disacáridos, 10 glucósidos trisacáridos y 2 glucósidos monosacáridos (Tabla 3). Al analizar las estructuras de PhGs enCistanche, se han resumido las siguientes características estructurales: el resto de azúcar de los glucósidos de disacárido consta de glucosa y ramnosa, con un enlace Glc (3→1) Rha. La glucosa comúnmente se une directamente con la aglicona, y en su posición de C4 o C6, donde suele ubicarse un cumaroilo o cafeoilo. Cuando la PhG va a ser un glucósido de trisacárido, normalmente aparece glucosa o ramnosa adicional en la posición C6 de la glucosa interior. Entre esos PhG (pheniletanoideglucósidos)deCistancheespecie, el crenatosido (34) es excepcional, ya que existe un anillo de éter entre la posición de la aglicona y la posición C-2 de la glucosa interna en su estructura [34]. Recientemente, la estructura monocristalina de rayos X de salidroside (15), una PhG aislada de C. deserticola, ha sido reportada por primera vez [44].

Los estudios de actividad farmacológica de PhGs(pheniletanoideglucósidos)han demostrado que tienen diversas funciones, como la antioxidación, la neuroprotección, la mejora de la función inmune y sexual, la hepatoprotección, la antirradiación, etc. [15–17,40,48–50]. Entre ellos, la neuroprotección se está convirtiendo en un tema candente. Algunos componentes individuales o fracciones de PhG(pheniletanoideglucósidos)se ha informado que inhiben la apoptosis de las células neuronales inducida por varios productos químicos [51–57], y su neuroprotección in vitro también ha sido probada por varios modelos animales in vivo [58–64]. Estos resultados indican que las PhG(pheniletanoideglucósidos)podría ser un candidato atractivo para el tratamiento de trastornos neurodegenerativos, como la demencia o la enfermedad de Parkinson.

3.1.2. Análisis de PhG

Como los principales componentes activos enCistancheplantas, PhG(pheniletanoideglucósidos)Suelen utilizarse como marcadores para la evaluación de la calidad de fármacos crudos o sus correspondientes formulaciones.

3.1.2.1. Análisis de PhGs por cromatografía en capa fina (TLC).

Zhang estableció por primera vez un método de identificación TLC para acteósido (2), equinacósido (11) y cistanosido A (3) enHerbaCistanchespor gel de sílice, usando acetato de etilo-metanol-9 por ciento de ácido acético (20:3:2) como solvente de desarrollo, y solución de FeCl3 como reactivos colorantes [65]. Este método también se usó en la Farmacopea China (2000) para la identificación del acteósido (2) [8]. Sin embargo, en la Farmacopea China (2005), se ha cambiado el adsorbente de la cromatografía en capa fina de gel de sílice a poliamida para obtener un efecto de separación mucho mejor, y se ha utilizado metanol-ácido acético-agua (2:1:7). como disolvente de desarrollo. Dos principales PhG enHerbaCistanches, Echinacoside (11) y acteoside (2) podrían identificarse simultáneamente [9].

3.1.2.2. Análisis de PhGs por Espectrofotometría Ultravioleta (UV).

Como se mencionó anteriormente, el grupo cinamoilo a menudo existe en las estructuras de las PhG, por lo tanto, las PhG podrían determinarse directamente por UV o por el método colorimétrico después de reaccionar con algunos reactivos colorantes [66–72]. Sin embargo, como sabemos, el método colorimétrico no es un enfoque razonable para la determinación precisa de los componentes químicos en los TCM, debido a su inestabilidad, escasa reproducibilidad y gran error de prueba. Además, es más tedioso preprocesar las muestras detectadas por UV que por los otros métodos. Por lo tanto, ahora, el método UV ya no se usa para la cuantificación del compuesto puro, sino solo para la determinación del PhG total ocasionalmente.

3.1.2.3. Análisis de PhGs por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Entre todos los métodos de análisis, HPLC es el más utilizado para la cualitativa y cuantificación de PhGs, y la Tabla 4 resume los métodos publicados sobre el análisis de PhGs por HPLC en la literatura, que se detallarán a continuación.

3.1.2.3.1. Análisis de PhGs en fármacos crudos, muestras biológicas y productos complejos por HPLC.

En 1995, Xu realizó una comparación de los componentes químicos de C. deserticola con su sustituto C. salsa. El análisis HPLC mostró que la composición química de PhGs(pheniletanoideglucósidos)entre estas dos especies fue similar, pero su cantidad fue diferente [73]. En el mismo año, Moriya hizo una comparación entre los componentes químicos de C. deserticola (Cd), C. tubulosa (Ct) y C. salsa (Cs), utilizando siete PhG como marcadores. Los resultados mostraron que los cistanósidos A (3), C (5) y una pequeña cantidad de tubulósido A (17) existían en Cd y Cs, mientras que solo existía el tubulósido A (17) en Ct, sin los cistanósidos A (3) y C (5). Además, se encontró que las cantidades totales de PhG en las plantas de Ct y Cs eran mayores que las de las plantas de Cd [28]. Es valioso que este artículo haya comparado la diferencia entre losCistanchegénero mediante análisis multicomponente; sin embargo, es lamentable que la cuantificación de estos siete PhG(pheniletanoideglucósidos)se realizó solo por el método estándar externo de un punto, sin una validación sistemática de la metodología.

Tu realizó un análisis cualitativo de seis PhG(pheniletanoideglucósidos)y un análisis cuantitativo de dos PhG del género Cistanche por Rp-HPLC. Los resultados mostraron que los componentes químicos de C. deserticola, C. salsa, C. salsa var. albiflflora y C. tubulosa fueron similares, mientras que las de C. sinensis fueron diferentes a las demás [10]. Wang estableció un método para el análisis de siete PhG en C. deserticola, C. tubulosa y C. salsa con HPLC/MS/MS, y los resultados mostraron que la distribución de ingredientes químicos de los siete PhG de referencia es diferente en cada especie [ 74]. Las vías de fragmentación de los enlaces glucosídicos, el enlace éster y algunas pérdidas neuronales interesantes de las PhG se discutieron en este artículo [74] y en otro [75]. Sin embargo, la ventaja de la técnica HPLC-MS no se ha demostrado completamente en estos análisis, porque solo se estudió el mecanismo de fragmentación de los estándares de PhG. Se ha descuidado la adopción de estos mecanismos para dilucidar compuestos de PhG desconocidos para dar más información química, y se ha descuidado el estudio del mecanismo de fragmentación de otros compuestos del esqueleto.

Además del análisis cualitativo, también hay muchos informes sobre el análisis cuantitativo deHerbaCistanches, especialmente de dos principales PhG(pheniletanoideglucósidos), echinacósido (11) y acteósido (2). En 2000, Zhang estableció un estándar de calidad para C. deserticola, incluida la determinación del contenido de acteoside (2) por HPLC, combinado con la identificación cualitativa de cinco componentes por TLC [65]. En 2003, se estableció un método Rp-HPLC para la detección de echinacósido (11) y actósido (2) en Herba Cistanches cultivadas en diferentes plantas hospedantes y hábitats. El autor usó dos fases móviles diferentes para la determinación de echinacósido (11) y acteósido (2), es decir, acetonitrilo-agua-ácido acético glacial (13:86:1) para equinacósido y metanol-agua-ácido acético glacial (32:67:1) para acteósido. El resultado preliminar mostró que los contenidos de echinacósido y acteósido estaban obviamente influenciados por diferentes huéspedes, y los contenidos de estos dos compuestos en C. tubulosa alojada en Tamalrix L. cultivada fueron los más altos [76].

Teniendo en cuenta que es un poco tedioso determinar dos constituyentes en la misma planta usando dos solventes diferentes, se estableció un método Rp-HPLC más simple para la detección simultánea de equinacósido (11) y acteósido (2) [77]. Luego, Chen adoptó este método para determinar los contenidos de echinacósido (11) y acteósido (2) en C. tubulosa silvestre y cultivada [78]. Los resultados mostraron que el contenido de echinacósido (11) fue notablemente mayor que el de acteósido (2) en todas las muestras, y el contenido de estos dos componentes activos en la naturaleza fue mayor que en el cultivo [78]. Vale la pena mencionar que la preparación de la muestra en este documento adoptó el método de mezclar lotes múltiples, lo que significa que el autor ha considerado las diferencias de calidad individuales obvias enHerbaCistanches.

Desde lo salvajeCistancheespecies están al borde de la extinción, la siembra de C. deserticola y C. tubulosa se está realizando en Xinjiang y Mongolia Interior, China. Con el fin de dar una guía teórica para el cultivo, se han analizado diferentes muestras cultivadas. Cao determinó el contenido de PhGs(pheniletanoideglucósidos)en primavera y otoño con LC-MS, para comparar muestras de C. deserticola recolectadas en diferentes estaciones. cuatro phg(pheniletanoideglucósidos), es decir, echinacósido (11), acteoside (2), cistanoside A (3) y 2 -acetylacteoside (1) fueron seleccionados como marcadores, y se observó que su contenido total era mayor en primavera que en otoño [79] . Wang realizó un estudio sobre la variación de los constituyentes químicos en diferentes épocas de crecimiento y diferentes partes de la C. tubulosa cultivada, utilizando la huella digital y el contenido de equinacósido (11) como índice. Encontró que la distribución química de PhGs(pheniletanoideglucósidos)fue similar entre diferentes muestras, pero la cantidad de cada PhG, especialmente de equinacósido (11), fue significativamente diferente entre varias muestras. Después de la comparación, concluyó que el tiempo de cultivo de C. tubulosa debe ser superior a tres años, y su tiempo de cosecha debe controlarse estrictamente antes de la floración. En este artículo, se encontró que la calidad de las plantas cultivadas no era mejor que la de las silvestres, por lo que el autor sugirió que se debería promover la tecnología de cultivo para mejorar el contenido de compuestos activos [80]. Yang estudió la acumulación de materia seca y el contenido de equinacósido (11) de C. tubulosa en la llanura de Huabei. El resultado mostró que la acumulación de materia seca de C. tubulosa estaba en la variante en forma de "S", y el contenido de equinacósido (11) fue el más alto cuando C. tubulosa creció durante 5 meses [81].

Además de estos, la huella digital, una nueva técnica que se centra en las características sistémicas y completas de las muestras analizadas, también se ha utilizado para la evaluación de la calidad deCistancheplantas. Como se mencionó anteriormente, Wang analizó los componentes químicos y su variación en C. tubulosa cultivada mediante el uso de huellas dactilares y otros indicadores [80]. Xie estableció una huella digital cromatográfica de C. deserticola por HPLC (Fig. 1) y la utilizó para evaluar la diferencia de cualidades inherentes de muestras de diferentes hábitats. Finalmente, se encontraron diferencias notables en la calidad de las muestras de diferentes hábitats [82]. Incluso se observó el mismo fenómeno durante nuestra investigación sobre la evaluación de la calidad de C. deserticola, por lo que más adelante se debe prestar más atención a la consistencia de la calidad de las especies de Cistanche.

Salvo siembra, el cultivo por células o callos es otra alternativa atractiva para solucionar la escasez de recursos de HerbaCistanche. Durante el proceso de cultivo, se han establecido muchos métodos analíticos para analizar el resultado del cultivo y optimizar las condiciones de cultivo [83–88]. Las condiciones analíticas correspondientes también se han resumido en la Tabla 4.

En cuanto al análisis de PhG en productos complejos, Zhang informó un método de cuantificación de isoactósido (12) en el totalCistanchecápsulas de glucósidos por HPLC [89]. Establecimos un método para el análisis de acteoside (2) en cápsulas Shenqiyinao por HPLC [90], y Lei hizo una determinación de echinacoside (11) en espíritu Congrong por HPLC [91]. El punto clave del análisis de PhG(pheniletanoideglucósidos)en los productos complejos es evitar la perturbación de otros componentes, por lo que suele ser necesario el pretratamiento de la muestra y la optimización de las condiciones cromatográficas.

3.1.2.3.2. Análisis metabólico de PhGs por HPLC.

En 2001, Lei informó por primera vez sobre el proceso de metabolismo de las PhG.(pheniletanoideglucósidos)en el intestino gastrointestinal de perros beagle, y se aislaron cuatro metabolitos, echinacósido (11), actósido (2), isoactósido (12) y 2 -acetilactósido (1) de las heces mediante HPLC preparativa [96]. En 2006, el metabolismo del acteósido (2) y el equinacósido (11), los principales componentes activos deHerbaCistanchesrespectivamente, y se analizaron su farmacocinética y biodisponibilidad en ratas [97,98,134]. Establecimos un método LC-MS/MS sensible con una extracción en fase sólida simple para la detección de acteoside (2) en plasma de rata y homogeneizados de tejido para la investigación de la biodisponibilidad y la distribución cerebral en ratas que se mueven libremente [97,134]. Jia desarrolló un acoplamiento HPLC rápido y simple con el método UV para determinar el contenido de equinacósido (11) en suero de rata [98]. Sin embargo, se encontró que las biodisponibilidades del echinacósido y el acteósido eran solo {{10}}.83 por ciento y 0.12 por ciento, respectivamente, lo que contradecía los efectos biológicos significativos de las PhG.(pheniletanoideglucósidos)en animales [58–64]. En el futuro, se deben realizar más investigaciones para dilucidar el proceso metabólico y el mecanismo de absorción de las PhG.(pheniletanoideglucósidos).

3.1.2.4. Análisis de PhG(pheniletanoideglucósidos)por cromatografía en contracorriente de alta velocidad (HSCCC).

HSCCC, una cromatografía de partición líquido-líquido sin soporte, elimina la adsorción irreversible de la muestra en la fase estacionaria y se ha utilizado ampliamente en la separación preparativa de productos naturales. En comparación con la cromatografía en columna sólido-líquido tradicional, produce una mayor recuperación y eficiencia. Lei aplicó HSCCC a la separación y purificación de acteoside (2) y 2-acetylacteoside (1) de C. salsa con un sistema solvente bifásico cuaternario compuesto de acetato de etilo-n-butanol-etanol-agua ( 4:0.6:0.6:5, v/v). El análisis HPLC de las fracciones CCC reveló que los dos PhG(pheniletanoideglucósidos)tenían más del 98 por ciento de pureza [99]. Más tarde, Li estableció un método utilizando dos sistemas de disolventes, uno que consiste en acetato de etilo-etanol-agua (5:0.5:4.5, v/v/v), y el otro de acetato de etilo-n-butanol –etanol-agua ({{10}}.5:0.5:0.1:1, v/v/v/v) para aislar PhG(pheniletanoideglucósidos)de C. deserticola. Cinco PhG(pheniletanoideglucósidos), echinacósido (11), cistanósido A (3), acteósido (2), isoactósido (12) y 2 -acetilactósido (1) se aislaron y purificaron, y la pureza de estos compuestos aislados superó el 92,5 % como determinado por HPLC [100]. Estos métodos proporcionaron buenas referencias para el futuro aislamiento y purificación de los estándares de PhG.

3.2. Glucósidos de bencilo

Recientemente, Lei informó sobre el aislamiento y la elucidación de la estructura de tres nuevos glucósidos de bencilo, salsósidos A–C (35–37, Fig. 2) de C. salsa, que también eran glucósidos de bencilo aislados deCistancheplantaspor primera vez [47]. Las características estructurales de estos glucósidos de bencilo son similares a las de los feniletanoides aislados de este género, excepto que el alcohol bencílico sustituyó al fenetilol en la aglicona.

3.3. iridoides

Hasta el momento, se han aislado tres agliconas iridoides y catorce glucósidos iridoides deCistancheplantas(38–54, Cuadro 5) [102–109]. Las características estructurales de los glucósidos iridoides deCistancheplantasse resumen como sigue: la glucosa se presenta en la posición C1 de la aglicona, con una configuración en H5 y H9; la hidroxilación a menudo ocurre en las posiciones C8 y C10; a veces, la deshidratación puede ocurrir entre los hidroxilos de C10 con C1 o C3 para dar un resto epoxi.

3.4. Lignanos

Se han aislado una aglicona de lignano y cinco glucósidos de lignano de plantas C. deserticola y C. tubulosa (55–60, Tabla 6). Los esqueletos básicos de estos compuestos son los lignanos de tetrahidrofurano y benzofurano. Las fuentes de esa C. tubulosa de la que se han aislado varios lignanos proceden principalmente de Pakistán, mientras que se han aislado pocos lignanos de la C. tubulosa recolectada en China. Esto probó además que existían diferencias químicas entre C. tubulosa de China y Pakistán [27,28].

3.5. sacáridos y sus derivados

3.5.1. Estudio químico de los sacáridos y sus derivados

Los carbohidratos comprenden una alta proporción de la masa seca de las plantas de la especie Cistanche [110]. Entre ellos, uno de los monosacáridos, el galactitol, se ha informado como el principal componente activo con actividad laxante en Herba Cistanches [18,19,103,104]. Mientras que los polisacáridos han sido considerados como los constituyentes activos con actividades de inmunidad corporal avanzada, antienvejecimiento y anticancerígenas enHerbaCistanches[20,21,111–113].

En los años 90, los estudios sobre polisacáridos deCistanchese había centrado en el aislamiento/purificación y el análisis de la composición de los monosacáridos [110,112,114–116]. Las estructuras exactas de los polisacáridos deCistanchelas especies no se aclararon hasta 1997. En la Tabla 7, se enumeran las propiedades estructurales dilucidadas de los polisacáridos aislados de especies de Cistanche. Curiosamente, todos estos han sido aislados de C. deserticola y los polisacáridos en otrosCistancheplantasno han sido estudiados.

Excepto estos, algunos derivados de oligosacáridos, como el cistanosido F, el cistanosido I, las cistantubulosas A1/A2 y la cistansinensosa A1/A2 también se han aislado deHerbaCistanches(Fig. 3), que en realidad son los residuos de PhGs(pheniletanoideglucósidos)después de perder la aglicona de fenetilol. Dado que existen configuraciones en la naturaleza de la glucosa, a veces, estos derivados de oligosacáridos también existen como anómeros, y este fenómeno podría observarse a partir de las señales de RMN emparejadas [37,39,40,11,45].

3.5.2. Análisis de sacáridos y sus derivados

Para evaluar la calidad deHerba CistanchesDe manera integral, el galactitol, el principal componente activo con actividad laxante en Herba Cistanches [18,19,97,98] ha sido recientemente seleccionado como indicador para evaluar la calidad deHerbaCistanches, combinado con PhG(pheniletanoideglucósidos). Con el fin de evaluar exhaustivamente la calidad de C. tubulosa de diferentes áreas, Cai desarrolló un método de cuantificación de galactitol acoplado con echinacósido (11) y acteósido (2) por HPLC. Se seleccionó ELSD como detector de galactitol, debido a su débil absorción terminal en el espectro UV, y para su separación se utilizó una columna de gel polimérico Prevail Carbohydrate ES. Se midieron lotes de C. deserticola y C. tubulosa de varios hábitats, y el método de procesamiento de piezas frescas de decocción de C. tubulosa también se optimizó mediante este método [92,93]. Sus resultados mostraron que los contenidos de galactitol, echinacósido (11) y acteósido (2) en la pieza de decocción de C. tubulosa por el método descrito fueron varias veces más altos que los secados por insolación o por el método tradicional [93]. Además, Zhang estableció un método de identificación TLC de manitol en C. deserticola, usando acetato de etilo-piridina-agua (7:2:1) como solvente de desarrollo y una solución de KMnO4 al 1 por ciento como agente colorante [65].

En cuanto a la determinación del contenido de polisacáridos enCistancheespecies, el fenol-ácido sulfúrico es el método más utilizado, y se determinó que el contenido de polisacáridos en C. salsa a través de diferentes métodos de extracción es de 11,61 por ciento a 13,22 por ciento [123-125]. Sin embargo, estos son solo algunos resultados analíticos preliminares debido a la limitación del método colorimétrico.

3.6. Alcaloides y su correspondiente análisis

Hasta el momento sólo se han aislado dos alcaloides deCistancheespecies, es decir, betaína (65) y éster metílico de N, N-dimetilglicina (66) (Fig. 3) [126]. La betaína (65) es un alcaloide de distribución común en las plantas, por lo que existen más reportes sobre su análisis cualitativo y cuantitativo. Zhang comparó la variación del contenido de betaína en C. deserticola antes y después del procesamiento, utilizando una identificación TLC combinada con un método colorimétrico [127]. Este método TLC también se recopiló en la Farmacopea China 2000 [8], mientras que el método de cuantificación por colorimetría fue adoptado posteriormente por otros para optimizar la tecnología de extracción deHerbaCistanches[128,129]. En 2007, Gong informó sobre un método de HPLC para la detección de betaína en plantas Cistanche acopladas con el detector ELSD, y se descubrió que la betaína existe solo en C. deserticola, pero no en C. tubulosa. Por lo tanto, el autor sugirió que la betaína debería usarse como marcador para distinguir estos dos tipos de plantas Cistanche [101]. Sin embargo, considerando que los lotes de muestra son solo dos para cada especie, y uno de los hábitats de C. tubulosa (Yunnan) es incierto, recomendamos que esta conclusión se pruebe más. Además, la identificación TLC de betaína para Herba Cistanche se eliminó de la Farmacopea China desde 2005, debido a su propiedad no específica. Por lo tanto, tomarlo como único indicador para optimizar la tecnología de extracción de Herba Cistache no era razonable [129].

3.7. Otros compuestos

Existen pequeñas cantidades de otros compuestos, como glucósidos fenólicos, monoterpenoides, esteroles o sus glucósidos, ácidos grasos, aminoácidos y algunos elementos traza, etc. en las plantas de Cistanche [13,41,42,103,105,130–133].

4. Conclusiones

En esta revisión, los componentes químicos deCistancheSe han descrito las especies y sus métodos de análisis. Entre los análisis existentes, la mayoría se ha concentrado en PhGs(pheniletanoideglucósidos), y HPLC ha sido el método más utilizado debido a su alta eficiencia y precisión. A través del análisis de los trabajos de investigación anteriores, combinados con nuestros años de estudio sobre las especies de Cistanche, algunos de los principales problemas existentes en el análisis deCistancheplantasse han resumido de la siguiente manera: el primero es el uso mixto de la especie fuente: C. deserticola y C. tubulosa son dos especies oficiales recopiladas en la Farmacopea china. Sin embargo, otras dos especies de Cistanche, C. salsa y C. sinensis también se utilizan en algunas áreas debido a la escasez de recursos. Aunque ha habido varias publicaciones que se refieren a la comparación entre diferentes especies [6–8], no son lo suficientemente convincentes debido a los lotes de muestras y marcadores limitados. Por lo tanto, es necesario establecer un método integral, como la tecnología de huellas dactilares para analizar comparativamente las drogas crudas de diferentes fuentes. La segunda es que no se ha prestado mucha atención a la inconsistencia de calidad de Herba Cistanches. Las especies de Cistanche son hierbas parásitas. Hay muchos factores que influyen en su calidad, como el clima, los hábitats, los huéspedes, el tiempo de cosecha, el método de procesamiento y las diferentes partes de la misma planta. Nuestros estudios mostraron que la calidad de las especies de Cistanche no es estable, especialmente la de C. deserticola silvestre [80,82,92]. Sin embargo, este problema se había descuidado en algunos de los análisis anteriores y solo se habían utilizado una o dos muestras [74,76], lo que podría llevar a conclusiones inexactas. Entonces, en el futuro, se deben recolectar y analizar muchas más muestras para obtener una conclusión más objetiva. La tercera es que los presentes análisis se concentran principalmente en dos principales PhG.(pheniletanoideglucósidos), echinacósido (11) y acteósido (2), pero como sabemos, la acción farmacológica de la MTC es la cooperación de múltiples componentes o diferentes tipos de constituyentes. Por lo tanto, la determinación simultánea de los componentes múltiples activos es más significativa para el control de calidad de la medicina tradicional china. Sin embargo, hasta el momento no se ha realizado un análisis cuantitativo de más de tres GPH enHerbaCistanches, incluso no hay un informe sobre el análisis de glucósidos de bencilo, iridoides y lignanos. Por tanto, futuras investigaciones deberían reforzar su estudio analítico y farmacológico. En general, la investigación actual sobre el análisis de las especies de Cistanche aún se encuentra en un estado de nivel inferior. Herba Cistanches son fármacos tónicos importantes, pero en realidad, su calidad no pudo ser controlada de manera efectiva solo por dos representantes de PhG.(pheniletanoideglucósidos)[9]. La combinación de la determinación de múltiples componentes con huellas dactilares se ha considerado como un enfoque poderoso para el control de calidad de los TCM. En el futuro, el nivel de investigación de las especies de Cistanche en estos dos campos debería mejorar aún más. Establecer un método, que podría realizar simultáneamente análisis cualitativo y cuantitativo de PhG, iridoides y otros constituyentes activos enHerbaCistanchesserá una dirección de investigación significativa.

Cistanchetubulosatiene muchos efectos, haga clic aquí para saber más

Expresiones de gratitud

Este trabajo fue apoyado financieramente por la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (No. 30472070), y por el Programa de Talento del Nuevo Siglo, Ministerio de Educación de China (No. 985-2-102-113), y los autores también agradecen a Xiaoming Liu, Zhihong Song, LiLei de la Universidad de Pekín por su asistencia técnica experta.

De: 'Análisis de constituyentes químicos enCistancheespecies' por Yong Jiang, Peng-Fei Tu

---Revista de cromatografía A, 1216 (2009) 1970–1979