Actividad antifatiga del extracto rico en feniletanoide de Cistanche Deserticola
Mar 24, 2022
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Run-Lan Cai, Mei-Hua Yang, Yue Shi, Jun Chen, Yong-Chao Li y Yun Qi*
A extracto rico en feniletanoide(DCE) deCistanche deserticola YC Ma, una planta holoparásita y una valiosa medicina tradicional china, fue evaluada paraanti fatigaactividad en ratones ICR. ECD ({{0}}.25, 0.50, 1.00 g/kg) se administró por vía oral a ratones durante 3 semanas. El tiempo de natación hasta el agotamiento fue mayor en los grupos de tratamiento (0,50, 1,00 g/kg) que en el grupo de control (p < 0,01).="" los="" niveles="" séricos="" de="" creatina="" quinasa,="" lactato="" deshidrogenasa="" y="" ácido="" láctico="" disminuyeron="" significativamente="" en="" los="" grupos="" de="" tratamiento="" en="" comparación="" con="" el="" grupo="" de="" control,="" mientras="" que="" los="" contenidos="" de="" hemoglobina="" y="" glucosa="" aumentaron="" significativamente.="" en="">DCEpareció mejorar la capacidad de natación de los ratones al disminuir el daño muscular, retrasar la acumulación de ácido láctico y mejorar el almacenamiento de energía. Estos resultados proporcionan evidencia científica de la práctica médica tradicional china deC. deserticola.

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INTRODUCCIÓN
Cistanche desertica(Orobanchaceae), una planta holoparásita, se puede encontrar en la región desértica del noroeste de China. Se utiliza como un tónico chino tradicional para la deficiencia renal, caracterizada por impotencia, dolor en los lomos y las rodillas, esterilidad femenina y estreñimiento debido a la sequedad del intestino en las seniles. La planta es llamada 'ginseng del desierto' por los habitantes locales debido a sus efectos tónicos similares al ginseng. De hecho, C. deserticola se usaba con frecuencia en recetas antiguas para el desarrollo de la fuerza física. Su eficacia para aumentar la resistencia física se registró en los antiguos libros médicos chinos (Shang, 1993).
Los estudios farmacológicos mostraron que los extractos de C. deserticola poseían efectos antinociceptivos, antiinflamatorios (Lin et al., 2002) y sedantes (Lu, 1998). Se informó que los feniletanoides y polisacáridos, que son los principales componentes activos de esta planta, tienen un efecto antioxidante (Xiong et al., 1996), protector de hepatocitos (Xiong et al., 1998), actividad de eliminación de radicales NO (Xiong et al. , 2000), y actividad inmunológica (Dong et al., 2007). Sin embargo, pocos estudios se han centrado enanti fatigaactividad. Un estudio anterior encontró que el extracto rico en polisacáridos contribuyó poco a laanti fatigaactividad de C. deserticola (datos no mostrados). Se planteó la hipótesis de queextracto rico en feniletanoide(ECD), que contiene otro grupo importante de constituyentes químicos, puede desempeñar un papel importante en su actividad antifatiga. El propósito de este estudio fue evaluar el efecto deDCEsobre la fuerza física y la resistencia de los ratones durante los experimentos de natación forzada.

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MATERIALES Y MÉTODOS
Material vegetal.
Los tallos tímidos flfl frescos de C. deserticola fueron proporcionados por la plantación Yongning C. deserticola (Ningxia, China). Se depositó un espécimen de prueba en el Herbario del Instituto de Desarrollo de Plantas Medicinales (Academia China de Ciencias Médicas, China).

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Preparación de los extractos.
El material vegetal secado al aire se pulverizó y se extrajo por percolación con EtOH al 70 por ciento. El percolado se evaporó a presión reducida y el fluido residual se filtró. El filtrado se concentró y cromatografió en una columna de resina macroporosa AB-8 (The Chemical Plant of Nankai University, China) usando 50 por ciento y 95 por ciento de EtOH en agua como eluyentes. El eluyente de EtOH al 50 por ciento se concentró y se secó a presión reducida para obtener una fracción rica en feniletanoide. El rendimiento de la fracción fue de aproximadamente 3,33 por ciento y el contenido de feniletanoides fue de 58,9 por ciento. El verbascoside y el echinacoside eran dos componentes principales de esta fracción, con un contenido de 5,6 por ciento y 33,3 por ciento, respectivamente.
Animales, agrupaciones y diseño de experimentos.
Ratones ICR macho de cuatro semanas de edad se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos.DCEa dosis de {{0}}.25, 0.50, 1.00 g/kg de peso corporal se administró a ratones por administración intragástrica, medicación sucesiva durante 3 semanas, mientras el grupo de control recibió el mismo volumen de solución salina al 0,9 por ciento. Los ratones fueron entrenados para nadar durante 20 min dos veces por semana para personalizar la natación. Después de 3 semanas, los ratones ayunaron durante la noche antes de realizar estudios de natación forzada o muestras de sangre. Todos los experimentos se llevaron a cabo de acuerdo con la Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio de los Institutos Nacionales de Salud y fueron aprobados por el Comité de Ética Animal del Instituto de Desarrollo de Plantas Medicinales de la Academia China de Ciencias Médicas.
Prueba de natación con peso.
Cincuenta y seis ratones se usaron en este experimento como se muestra en la Tabla 1. El procedimiento de prueba fue el mismo que el descrito por Porsolt et al. (1977). Brevemente y, 30 min después de la última administración intragástrica, los ratones se colocaron individualmente en una piscina (65 × 45 × 40 cm) con una profundidad de agua de 35 cm mantenida a 25,5 ± 0,5 ºC. Se cargó un alambre de estaño (5 por ciento del peso corporal) en la base de la cola del ratón. El agotamiento se determinó observando la falta de nado y el período de nado se consideró como el tiempo que el ratón pasó flotando en el agua luchando y haciendo los movimientos necesarios hasta agotar sus fuerzas y ahogarse. Se evaluó que los ratones estaban exhaustos cuando no lograban salir a la superficie del agua para respirar en un período de 10 s. El tiempo de natación hasta el agotamiento se utilizó como índice de la capacidad de natación forzada.

Tabla 1. Efecto de ECD en prueba de natación forzada en ratones
Determinación de glucógeno tisular.
Después de la prueba de natación con peso, el hígado y el músculo gastrocnemio del ratón se disecaron inmediatamente, se congelaron en hielo seco y se mantuvieron a -80 ºC hasta que se realizó el análisis del contenido de glucógeno. El contenido de glucógeno se midió siguiendo el método descrito en otro lugar (Chun y Yin, 1998).
Determinación de parámetros bioquímicos sanguíneos.
Con el fin de recolectar suficiente sangre para el ensayo, se utilizaron otros 48 ratones. Luego, 30 min después de la última administración intragástrica deDCE, los ratones fueron obligados a nadar en la piscina (sin peso) durante 90 min. Después de la anestesia con éter, la sangre se recogió en tubos heparinizados y sin anticoagulante, respectivamente, extirpando el globo ocular izquierdo. Las muestras de sangre total se utilizaron para determinar la hemoglobina y el ácido láctico según el método HiCN (hemoglobin cianide) (ASTM F 756-93, -86) y el método modificado de Barker-Summerson (Pryce, 1969), respectivamente. El suero se preparó por centrifugación a 1000 × g, 4 ºC durante 15 min y los niveles de creatina quinasa sérica, lactato deshidrogenasa, nitrógeno ureico, proteína total y glucosa se determinaron mediante un analizador bioquímico automático (Hitachi 7060, Hitachi, Ltd, Japón). ) con kits comerciales (Biosino Biotechnology Co., Ltd, Beijing, China).

Tabla 2. Efecto de ECD en la bioquímica sérica y el glucógeno tisular de ratones
Estadísticas.
Los resultados se expresaron como la media ± DE. Las comparaciones entre grupos se realizaron mediante la prueba t de Student.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
La Tabla 1 muestra que el tiempo de natación fue significativamente mayor en los grupos a los que se les administró ECD (0.50, 1.00 g/kg). Este resultado demostró queDCEposeía unanti fatigaefecto. Con el fin de aclarar su mecanismo, los parámetros bioquímicos relacionados con la fatiga se evaluaron en ratones de natación forzada tratados con ECD y no tratados.
Se sabe que la creatina quinasa y la lactato deshidrogenasa son indicadores precisos del daño muscular (Burr et al., 1997; Coombes y McNaughton, 2000). Un aumento en el nivel de creatina quinasa y lactato deshidrogenasa en la sangre indica que se ha producido o se está produciendo daño muscular. La Tabla 2 muestra que los niveles de lactato deshidrogenasa y creatina quinasa se redujeron significativamente en los grupos a los que se les administró ECD (0,50 g/kg o 1,00 g/kg), lo que indica queDCEpodría disminuir el daño muscular durante la natación forzada.
Se dice comúnmente que la hemoglobina es uno de los principales factores que pueden mejorar la capacidad de resistencia al transportar oxígeno a los tejidos. El nivel de ácido láctico, como subproducto metabólico de la glucólisis anaeróbica, tiene una relación inversa con el tiempo de natación. Se observó que el nivel de hemoglobina aumentó significativamente y el ácido láctico disminuyó significativamente en los grupos a los que se les administró ECD (0.50, 1.00 g/kg).
Sorprendentemente, se encontró poca diferencia en el contenido de glucógeno del hígado o del músculo entre los grupos de control y tratados con ECD después de la prueba de natación (Tabla 2). Como es sabido, la glucogenólisis predomina sobre la gluconeogénesis durante el ejercicio violento. Por lo tanto, un ligero aumento en la cantidad de glucógeno hepático, junto con un aumento significativo en el contenido de glucosa en los grupos tratados con ECD (0.50, 1.00 g/kg), sugirió queDCEpodría mejorar el almacenamiento de glucógeno hepático.
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En conclusión, ECD mejoró la capacidad de natación de los ratones al disminuir el daño muscular, retrasar la acumulación de ácido láctico y mejorar el almacenamiento de energía. Sin embargo, aún se necesitan más estudios para dilucidar el mecanismo más exacto del efecto de laDCEsobre la fatiga y/o la durabilidad del ejercicio.
REFERENCIAS
Burr JR, Reinhart GA, Swenson RA, Swaim SE, Vaughn DM, Bradley DM. 1997. Valores bioquímicos séricos en perros de trineo antes y después de competir en carreras de larga distancia. J Am Vet Med Assoc 211: 175–179.
Chun Y, Yin ZD. 1998. Ensayo de glucógeno para el diagnóstico de la infección genital femenina por Chlamydia trachomatis. J Clin Microbiol 36: 1081–1082.
Coombes JS, McNaughton LR. 2000. Efectos de la suplementación con aminoácidos de cadena ramificada sobre la creatina quinasa sérica y la lactato deshidrogenasa después del ejercicio prolongado. J Sports Med Phys Fitness 40: 240–246.
Dong Q, Yao J, Fang JN, Dinq K. 2007. Caracterización estructural y actividad inmunológica de dos polisacáridos extraíbles en agua fría de Cistanche deserticola YC Ma. Carbohydr Res 342: 1343–1349.
Lin LW, Tsuen H, Tsai FH, Wang WH, Wu CR. 2002. Actividad antinociceptiva y antiinfl atoria causada por Cistanche deserticola en roedores. J Etnofarmacol 83: 177–182.
Lu MC. 1998. Estudios sobre el efecto sedante de Cistanche deserticola. J Etnofarmacol 59: 161–165.
Porsolt RD, Bertin A, Jalfre M. 1977. Desesperación conductual en ratones: una prueba de detección primaria para un antidepresivo. Arco Int Phamacodyn Ther 229: 327–336.
Pryce JD. 1969. Modificación del método de Barker-Summerson para la determinación del ácido láctico. Analista 152: 1151–1152.
Shang ZJ. 1993. Materia médica clasificada. Editorial Huaxia: Pekín.
Xiong Q, Hase K, Texuka Y, Tani T, Namba T, Kadota S. 1998. Actividad hepatoprotectora de los feniletanoides de Cistanche deserticola. Planta Med 64: 120–125.
Xiong Q, Kadota S, Tani T, Namba T. 1996. Efectos antioxidantes de los feniletanoides de Cistanche deserticola. Biol Pharm Bull 19: 1580–1585.
Xiong Q, Texuka Y, Kaneko T et al. 2000. Inhibición del óxido nítrico por feniletanoides en macrófagos activados. Eur J Pharmacol 400: 137–144.






