Efecto antioxidante de los glucósidos totales de Cistanche Deserticola en tejidos de ratón
Mar 10, 2023
Objetivo: Estudiar el efecto antioxidante de los glucósidos totales de cistanche deserticola (GCS) en tejidos de ratón. Métodos: La actividad de SOD, el contenido de MDA y lipofuscina en el corazón, hígado, cerebro y riñón de ratones se determinaron mediante métodos de autooxidación de pirogalol, ácido tiobarbitúrico (TBA) y fluorescencia. Resultados: el grupo GCS (125 mg/kg, 250 mg/kg) podría aumentar significativamente la actividad de SOD en el tejido cerebral y renal, aumentar la actividad de SOD en el corazón y el tejido hepático a 250 mg/kg y reducir significativamente el contenido de MDA y lipofuscina en cada tejido. Conclusión: Los resultados sugieren que GCS puede mejorar efectivamente la capacidad antioxidante de los tejidos y prevenir el daño por peroxidación de lípidos tisulares.
Palabras clave: glucósidos totales deCistanche desertica, superóxido dismutasa, malondialdehído, lipofuscina, antioxidante
Cistanche desertica ,Según la investigación farmacológica moderna, Cistanche deserticola puede mejorar la función inmunológica del cuerpo [1], promover la memoria, mejorar la inteligencia [2] y resistir el envejecimiento [3]. La preparación cruda de Cistanche deserticola reduce significativamente el contenido de lipofuscina miocárdica[3]. En este artículo, se estudiaron los efectos de los glucósidos totales de Cistanche deserticola (GCS) sobre la oxidación y el contenido de lipofuscina en el corazón, hígado, cerebro y riñón de ratones.
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1 Materia
1.1 Los glucósidos totales de cistanche deserticola son preparados por el Xinjiang Medical College
1.2 Extraído e identificado por la sala de fitoquímica del Departamento de Farmacia [4].
Pyrogallol, producido por Zunyi No. 2 Chemical Plant; ácido tiobarbital, producido por Shanghai No. 2 Reagent Factory; Quinina, Segunda Fábrica de Reactivos de Shanghai; El 1,1,3,3-tetraetoxisilano (TEP) y el azul brillante de Coomassie son productos de Sigma.
1.2 Ratones animales NIH, proporcionados por el Centro de Experimentación Animal del Instituto de Enfermedades Endémicas de Xinjiang.
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2 Métodos y resultados
2.1 Efecto de GCS sobre la actividad de SOD y el contenido de MDA en tejidos de ratón: 40 ratones NIH sanos de cinco meses de edad que pesaban (33,5 ± 2) g, tanto machos como hembras, se dividieron aleatoriamente en un grupo de control de solución salina normal (NS) y diferentes dosis del grupo GCS (62,5125250 mg · kg-1 · d-1, ig) según balance de peso corporal, durante 30 días consecutivos; Además, 10 ratones jóvenes NIH de un mes de edad, que pesaban (15,2 ± 1,5) g, ig con el mismo volumen de NS, se administraron una vez al día durante 30 días. Cada grupo murió por espondilosis cervical 1,5 horas después de la última administración, y se abrieron el pecho y el abdomen. Inmediatamente se extrajeron los tejidos de corazón, hígado, cerebro y riñón, se lavaron con NS congelada, se pesaron, molieron y prepararon homogeneizado de tejido, se centrifugaron durante 30 min a 3000 r·min-1 y se tomó su sobrenadante para medición. La actividad de la SOD en los tejidos se determinó mediante el método de autooxidación del pirogalol [5]; El contenido de MDA en el tejido se midió mediante el método de color TBA [6]; La proteína tisular se determinó mediante el método del azul brillante de Coomassie [7]. Los resultados mostraron que la actividad de SOD en el corazón y el tejido hepático del grupo NS de 5-meses fue significativamente menor que la del grupo NS de 1-meses, y el contenido de MDA en cada fue significativamente mayor que la del grupo NS de 1-meses de edad. En comparación con el grupo NS de 5-meses de edad, la actividad de SOD en el corazón y el tejido hepático del grupo GCS aumentó significativamente a 250 mg · kg-1, que fue similar a la del { {39}}grupo NS de un mes; El contenido de MDA en el corazón y el tejido hepático del grupo de 125250 mg · kg-1 disminuyó, cerca del grupo de 1-meses de edad; El grupo de 125250 mg · kg-1 aumentó significativamente la actividad de SOD en los tejidos cerebral y renal, y disminuyó significativamente el contenido de MDA, que estaba cerca del grupo de 1-meses (Tabla 1).
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2.2 Efecto de GCS sobre el contenido de lipofuscina en tejidos de ratón: 40 ratones NIH sanos de 5-meses de edad, con un peso (32 ± 1,5) g, tanto machos como hembras, se dividieron en cuatro grupos según el equilibrio del peso corporal, el grupo de control NS y diferentes dosis del grupo GCS (62,5125250 mg · kg-1 · d-1, ig), durante 30 días consecutivos, y 10 ratones NIH de un mes de edad, con un peso (15 ± 1,5) g, ig, el mismo volumen de NS, una vez al día, durante 30 días consecutivos. Cada grupo se sacrificó 1,5 horas después de la última administración, se extrajo la vértebra cervical, se tomaron los tejidos de corazón, hígado, cerebro y riñón, y se absorbió el agua con papel de filtro, pesando 0,2 g de cada tejido. Según el método de Sohal [8], el tejido se divide en 8 ml de homogeneizado con una mezcla de cloroformo-metanol (2:1). Incubarlo en un baño de agua a 40 grados durante 5 min y centrifugarlo a 3000 r · min-1 durante 10 min. Tome la capa de cloroformo y colóquela en el espectrofotómetro de fluorescencia Shimadzu RF-540, con una longitud de onda de excitación de 351,6 nm y una longitud de onda de emisión de 451,1 nm. Mida la intensidad de fluorescencia según el sulfato de quinina 1 μ La intensidad de fluorescencia de g · ml-1 es de 100 unidades, y se calcula la unidad de recuento de fluorescencia por gramo de tejido húmedo, expresada en U · g-1.
Tabla 1 Efecto de los glucósidos totales de Cistanche deserticola sobre la actividad de SOD y el contenido de MDA en corazón, hígado, cerebro y riñón de ratones
Los resultados se muestran en la Tabla 2. En comparación con el grupo de NS de 5-meses, el contenido de lipofuscina en el hígado y el cerebro del grupo de NS de 1-meses es significativamente menor que el de los Grupo NS de 5-mes de edad. El contenido de lipofuscina en el tejido del corazón del grupo GCS250mg · kg-1 es significativamente menor, y el contenido de lipofuscina en el tejido hepático y renal es significativamente menor a 125250mg · kg-1 y la disminución es más evidente a 250 mg · kg-1.
Tabla 2 Efecto sobre el contenido de lipofuscina en corazón, hígado, cerebro y riñón de ratones
3 Discusión
De acuerdo con la teoría de los radicales libres del envejecimiento, con el envejecimiento, la producción y eliminación de radicales libres en el cuerpo están desequilibradas, lo que reduce la actividad de la enzima SOD que elimina los radicales libres, provoca la peroxidación lipídica de una membrana biológica, destruye la estructura y la función de las macromoléculas biológicas, y daña el corazón, el hígado, el cerebro, los riñones y otros órganos importantes del cuerpo. Además, la lipofuscina es producto de la oxidación por radicales libres, y su contenido en los tejidos se correlaciona positivamente con la peroxidación lipídica, que es un indicador del envejecimiento. Por lo tanto, es muy importante mantener la homeostasis y el equilibrio de los radicales libres en el cuerpo, eliminar las reacciones dañinas de los radicales libres, interrumpir la peroxidación de lípidos y reducir los productos de peroxidación de lípidos para retrasar el envejecimiento, que depende de mejorar la actividad de la enzima eliminadora de radicales libres. sistema.
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En la actualidad, se cree que el mecanismo antienvejecimiento de la mayoría de la medicina tradicional china puede estar relacionado con su efecto antioxidante [9].En este estudio, se encontró que el componente activo deCistanche deserticapuede aumentar significativamente la actividad de la enzima SOD que elimina los radicales libres en los tejidos del corazón, el hígado, el cerebro y los riñones de ratones de 5-meses de edad, y es sensible a la acción de los tejidos del cerebro y los riñones. También se redujeron los contenidos de MDA y lipofuscina en los tejidos anteriores. Se sugiere que GCS tiene efectos antioxidantes y antienvejecimiento.
