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Efectos de Cistanche deserticola en elmorfologíae histoquímica de testículos y epidídimos en ratones

Wang Dejun, Sheng Shuqing, Liang Hong

【Resumen】 Objetivo: Observar los efectos deCistanche deserticasobre la morfología e histoquímica detestículoyepidídimoen ratones. Métodos: Treinta ratones Kunming machos fueron seleccionados y divididos al azar en el grupo de medicación Ⅰ, el grupo Ⅱ y el grupo de control. Dio el estómago conCistanche deserticadecocción (4 g·kg -1·d-1 y 8 g·kg -1·d-1), y el grupo de control se alimentó con solución salina normal. Tres semanas después, los ratones fueron sacrificados y losespermaSe determinó el recuento en el semen. Indicadores morfológicos como la viabilidad, la velocidad de carrera y el contenido de fructosa en plasma seminal. Observación histoquímica detestículoyepidídimoreacción de succinato deshidrogenasa y lipasa no específica. Resultados: Los indicadores anteriores del grupo de drogas fueron más altos que los del grupo de control. Conclusión: sugiere queCistanchedeserticolatiene el efecto de fortalecer el yang y nutrir el riñón.

Cistanche deserticaestá catalogada como una planta de la familia Dang. Es un tónico ciegamente valioso, que tiene los efectos de nutrir el riñón, fortalecer el yang, fortalecer el hígado y el riñón y nutrir la esencia y el qi. [1]Cistanche deserticaes la droga más utilizada en las prescripciones para nutrir el riñón y fortalecer el yang en el pasado. También es una de las drogas tónicas famosas, solo superada por el ginseng [2]. Con el fin de explorar más a fondo el mecanismo deCistanchedeserticola, observamos la morfología e histoquímica de lostestículoyepidídimode ratones en el grupo de medicación y el grupo de control.

Cistanche desertica

1 Material y métodos

1.1 Materiales

Medicamento:Cistanchedeserticolafue producido en Alexa, Mongolia Interior, y fue identificado por el Instituto de Control de Drogas de Mongolia Interior, que cumple con las regulaciones de la Farmacopea Nacional. PrensaCistanchedeserticolaextracto: agua=100g: 400ml, remojar durante 30min, calentar y hervir, luego freír durante 30min a fuego templado, verter la solución medicinal y volver a freír según la proporción de 100g:200ml. Concentrar las dos decocciones al equivalente de 1 g de droga cruda por mililitro para su uso.

Animales: ratones Kunming, 30 machos, con un peso de 25g -30g. Proporcionado por el Centro Animal de la Facultad de Medicina de la Universidad de Yangzhou.

Cistanchedeserticola puede mejorar la calidad del esperma al nutrirtestículo y epidídimo

1.2 Método

Los animales de experimentación se dividieron aleatoriamente en los grupos Ⅰ y Ⅱ, con 10 animales en cada grupo. Ellos fueron dadosCistanchedeserticoladecocción por sonda, y la dosis diaria fue de 4 g/kg y 8 g/kg, respectivamente. El grupo de control (10 ratas) recibió el mismo volumen de solución salina normal por sonda. Se administra una vez al día durante 3 semanas consecutivas. 24 horas después de la última administración, los animales fueron sacrificados.

1.2.1 Observación al microscopio Tomar ratónepidídimo[3], colocar en 10ml de solución salina normal de 37 grados, debidamente troceada, baño tibio por 10 minutos, obtenerespermasuspensión y registrar laespermadensidad vista bajo el microscopio según el método de conteo de glóbulos blancos (D),espermaviabilidad (A),espermatasa de deformidad (T) yespermavelocidad de carrera (V).

1.2.2 Determinación del contenido de fructosa: tomar semen de ratón usando el método de color del resorcinol [4], espectrofotómetro a una longitud de onda colorimétrica de 50 nm, usar fructosa estándar para dibujar una curva estándar después del mismo tratamiento, determinar el contenido de fructosa en el semen.

1.2.3 Observación de la sección de tejido: Tomar ratóntestículoyepidídimo, fijar con formalina 4, incluida en parafina, sección, tinción HE, observar el estado histológico al microscopio óptico.

1.2.4 Observación histoquímica: tome el ratóntestículoyepidídimo, fíjelo en formalina 4, sección congelada, observe los cambios de succinato deshidrogenasa SDH y lipasa no específica NSE [5].

2 resultados

2.1 El efecto de Cistanche deserticola en la densidad, viabilidad, velocidad de carrera y tasa de deformidad de los espermatozoides en el semen

Tabla 1 El efecto deCistanchedeserticolaenespermaD, A, T, V (x ± DE N=10)

2.2 El efecto de Cistanche deserticola sobre el contenido de fructosa en semen de ratón

Tabla 2 Cambios en el contenido de fructosa en semen de ratón (mg/ 100ml x ±DE)

El contenido de fructosa en el grupo de medicación fue significativamente mayor que en el grupo de control, P<>

2.3 Observación histomorfológica

Grupo de control: La envoltura testicular es lisa y completa, y los túbulos seminíferos se pueden ver en la sección transversal de los túbulos seminíferos. 4 a 5 capas de espermatogonias y espermatocitos,espermacélulas, yespermaen diferentes etapas de desarrollo se organizan de manera ordenada, formando una variedad de morfología de imágenes de epitelio seminífero. Se aprecian células de Sertoli y su morfología es normal. Hay pocas células en el intersticio deltestículo, y algunas células intersticiales se encuentran en un estado similar a los fibroblastos, con más vacuolas en el citoplasma, tinción ligera y acumulación de gotitas de lípidos y pigmento. El grosor de la membrana basal alrededor de los túbulos seminíferos es de aproximadamente 6-8um

Grupo de medicamentos: los túbulos seminíferos están intactos, con un grosor de aproximadamente 10 ~ 14 um, y hay células similares a músculos lisos en el medio. La apariencia de los túbulos seminíferos es relativamente regular, con todos los niveles de células espermatogénicas en una disposición ordenada, alrededor de 6 a 8 capas. Las espermatogonias se encuentran en la base, la cromatina es de grano fino y la tinción es profunda. Hay 1-2 áreas ligeramente teñidas en el núcleo con nucleolos evidentes. El número de espermatocitos primarios ha aumentado y su tamaño es de unas 17 um de diámetro. El espermatozoide parece un renacuajo, con la cabeza mirando hacia la membrana basal y con una tinción profunda. Las células del estroma testicular se distribuyen en grupos, el número aumenta y los vasos sanguíneos son abundantes.

2.4 El efecto de Cistanche deserticola sobre la succinato deshidrogenasa (SDH) y la lipasa no específica (NSE) en testículos y epidídimo de ratón

2.4.1 Succinato deshidrogenasa (SDH): Hay reacciones de SDH en el citoplasma de las células espermatogénicas en todos los niveles, entre las cuales las espermatogonias son más fuertes y las células mesenquimales tienen una reacción fuerte (Tabla 3). Las partículas positivas para SDH se encuentran dispersas en las células epiteliales del tubo epididimario, con más áreas supranucleares. La respuesta SDH del grupo de medicación fue más fuerte que la del grupo de control.

2.4.2 Lipasa no específica (NSE):testículoyepidídimotienen partículas de reacción positivas, especialmente células del estroma testicular, y las células de apoyo son fuertemente positivas. El número de partículas positivas en la superficie basal de las células epiteliales del conducto del epidídimo en el grupo de medicación aumentó (consulte la Tabla 3).

Tabla 3 Comparación de la intensidad de reacción deCistanchedeserticolaa SDH y NSE de ratóntestículoyepidídimo

3 Discusión

En este experimento, la decocción deCistanchedeserticolase usó para alimentar ratones macho a dosis de 4 g/kg y 8 g/kg durante 2 a 3 semanas. losespermael conteo y la viabilidad de los ratones aumentaron significativamente, elespermala velocidad de carrera aumentó, y elespermatasa de deformidad fue La gota. Según la observación histomorfológica, la función espermatogénica deltestículoen el grupo de medicación se mejoró, se mejoró el microambiente del tubo epididimario y se incrementó el contenido de fructosa. Los estudios histoquímicos han demostrado que SDH y NSE son fuertemente positivos.

La espermatogénesis es un proceso complejo de múltiples fases, que incluye tres etapas: mitosis de las espermatogonias, maduración y división de los espermatocitos y metamorfosis de los espermatozoides.espermacélulas. Cada etapa tiene su propio tipo especial de metabolismo. La división y la espermatogénesis de las células espermatogénicas en todos los niveles de los túbulos seminíferos requieren nutrientes adecuados y la regulación de las hormonas endocrinas. La medicina tradicional de la patria cree queCistanchedeserticolatiene un buen efecto de nutrir el riñón y fortalecer el yang, y puede mostrar efectos similares a los andrógenos y las gonadotropinas para regular la función del eje de la glándula endocrina [6]. Los andrógenos son hormonas esenciales en el proceso de espermatogénesis. losepidídimoes el microambiente para la posterior maduración, desarrollo y diferenciación deesperma. En este proceso,espermase basa en el efecto sinérgico del epitelio del epidídimo. Las actividades de secreción, absorción y transporte de material de las células epiteliales se utilizan principalmente para regular el desarrollo y la diferenciación deespermaen el lumen, así como almacenamiento y almacenamiento. El microambiente en reposo. El contenido de fructosa en el plasma seminal es un componente importante que refleja la función del epidídimo, y el contenido de fructosa en el grupo de medicación fue significativamente mayor que en el grupo de control. SDH es una enzima del sistema succinato oxidasa, que se organiza en cadenas en las mitocondrias. SDH es la primera enzima en este sistema. Existe en todas las células de la respiración aeróbica y está firmemente unido a la membrana mitocondrial. Es la deshidrogenasa más importante. Las enzimas se usan comúnmente en reacciones histoquímicas para reflejar la condición del ciclo del ácido tricarboxílico y convertirse en enzimas marcadoras. La actividad NSE está relacionada con la hidrólisis del colesterol y la síntesis de esteroides y se usa comúnmente para medir la función de las células del estroma testicular [7]. El número de fármacos con fuertes reacciones positivas de SDH y NSE en los testículos yepidídimodel grupo de medicación fue significativamente mayor que la del grupo de control, lo que demostró queCistanchedeserticolade hecho puede promover la espermatogénesis de los testículos y mejorar el microambiente delepidídimo. Proporciona una base morfológica fiable para el mecanismo deCistanche deserticaEfectos nutritivos renales y afrodisíacos.

Cistanche deserticola mejora la calidad del esperma

Referencias

1. Li Shizhen. Compendio de Materia Médica. Beijing: Editorial Médica Popular, 1977: 727-728.

2. Huang Baomin, Li Xinwu. Investigación y análisis de recetas antiguas para el antienvejecimiento y la longevidad. Revista de la Universidad de Medicina Tradicional China de Hunan, 1987; 2(7):1- 2.

3. Editado por Li Yikui. Metodología Experimental de la Farmacología de la Medicina Tradicional China. Shanghái: Prensa de ciencia y tecnología de Shanghái, 509-511.

4. Luo Jianhua, editor en jefe. Tecnología de diagnóstico de laboratorio de infertilidad. Editorial Xuelin, 1994:44-46.

5. Chen Xiaomei. Manual de histoquímica. Beijing: People's Medical Publishing House, 1982: 130,224.

6. Él Wei, Shu Xiaofen, Zong Guizhen. Estudio sobre el efecto deCistanchedeserticolaen nutrir el riñón y fortalecer el yang antes y después del procesamiento. Revista China de Materia Médica China, 1996; 21(9): 534-539.

7. Wang Yifei, Wu Jingmei, Qiu Yixuan. Indicadores histoquímicos para medir la función de las células intersticiales. Revista de Biología Celular, 1980; 2(4): 27-30.