El glucósido A de Cistanche inhibe la actividad de los osteoclastos a través de la vía JNK/MAPK

Cistanche deserticola YCMa, una medicina tradicional china para tonificar el riñón, figura en la edición de 2015 de la Farmacopea China. Es un tallo suculento del género Cistanche de la familia Lewandaceae, distribuido principalmente en Mongolia Interior, Ningxia, Gansu, Qinghai y Xinjiang. Cistanche deserticola y Tubular Cistanche deserticola tienen un valor medicinal extremadamente alto. Entran en los meridianos del riñón y del intestino grueso. El Compendio de Materia Médica registra que Cistanche deserticola "es una sustancia nutritiva pero no severa, por eso se llama Cistanche deserticola" y "es cálida pero puede humedecer, reponer pero no secar, suave pero no produce diarrea".

Cistanche desierto

Tiene los efectos de tonificar el yang del riñón, beneficiar la esencia y la sangre, humedecer los intestinos y defecar. Tradicionalmente, se utiliza para la deficiencia de yang de riñón, deficiencia de esencia y sangre, impotencia, infertilidad, dolor de cintura y rodillas, debilidad de músculos y huesos y estreñimiento debido a la sequedad intestinal. Es el medicamento tonificante de yang de riñón más utilizado. en la historia. La investigación farmacológica moderna muestra que Cistanche deserticola tiene muchos efectos, como mejorar la función sexual, antienvejecimiento, mejorar la capacidad de aprendizaje y memoria, contra la enfermedad de Alzheimer, defecación, etc. Se usa ampliamente en prescripciones clínicas de la medicina china, medicinas tradicionales chinas patentadas. y preparaciones y productos sencillos para el cuidado de la salud.

Los principales componentes químicos de Cistanche deserticola son los glucósidos feniletanoides, los iridoides y sus glucósidos, lignanos y polisacáridos. Los estudios farmacológicos modernos han demostrado que los glucósidos feniletanoides son las sustancias activas más importantes de Cistanche deserticola y tienen efectos evidentes contra la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson, la isquemia miocárdica y otros.

Principales componentes químicos de Cistanche deserticola

Cistanósido A (CisA): Una clase de glucósidos feniletanoides extraídos de Cistanche deserticola, con actividades biológicas antiinflamatorias, antioxidantes y antiosteoporosis.

La vía de la proteína quinasa activada por mitógenos (MAPK) es una importante cadena de transmisión de información en las células, que puede participar en procesos como el desarrollo neuronal, la diferenciación de osteoclastos, la migración celular y el cáncer promoviendo la apoptosis y proliferación celular, además de regular las funciones. de diversas citocinas.

El glucósido de feniletanol es el principal componente activo de Cistanche deserticola

Fondo: Los estudios han confirmado que el glucósido A de Cistanche deserticola tiene efectos antiinflamatorios, antioxidantes y antiosteoporosis, pero aún faltan investigaciones sobre sus efectos y mecanismos potenciales sobre la diferenciación y función de los osteoclastos.

Objetivo: Investigar los efectos y mecanismos del glucósido A de Cistanche deserticola sobre la diferenciación de osteoclastos in vitro y la resorción ósea inducida por el ligando activador del receptor del factor nuclear kappa B.

Método:Se extrajeron y cultivaron macrófagos de médula ósea del fémur y la tibia de ratones C57BL/6 de 4-6 semanas de edad. La toxicidad de diferentes concentraciones de glucósido A de Cistanche deserticola (5, 10, 20, 40, 80, 160 μ mol/L) en macrófagos de médula ósea se probó mediante el ensayo de toxicidad CCK-8. Se utilizó la tinción con fosfatasa ácida resistente a tartrato para observar la intervención de diferentes concentraciones de glucósido A de Cistanche deserticola en la diferenciación de osteoclastos y determinar la concentración de intervención efectiva del fármaco. El experimento se dividió en grupos de control positivo, grupos de dosis baja, media y alta de glucósido A de Cistanche deserticola (40, 80, 160 μmol/L). Después de la adhesión celular, se agregaron a cada grupo 50 ng/ml de ligando activador del receptor del factor nuclear kappa B para inducir la diferenciación de osteoclastos. Los grupos de dosis baja, media y alta de glucósido A de Cistanche deserticola se intervinieron con dosis correspondientes de glucósido A de Cistanche deserticola. El efecto del glucósido A de Cistanche deserticola sobre la formación de osteoclastos se detectó mediante tinción con péptido con pluma fantasma de anillo de actina y tinción con DAPI; Observación del efecto de los glucósidos A de Cistanche sobre la función de resorción ósea de los osteoclastos mediante tabletas trituradoras de huesos teñidas con azul de toluidina; Se utilizó Western blot para detectar la expresión de proteínas aguas arriba y aguas abajo en la vía JNK/MAPK; Se utilizó RT qPCR para detectar la expresión de genes relacionados con la diferenciación de osteoclastos y la función de resorción ósea, como la fosfatasa ácida resistente a tartrato, DC-STAMP, Nfatc-1, Ctsk y c-Fos.

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Resultados y conclusión:

① La tinción con fosfatasa ácida resistente a tartrato, la tinción con anillo de actina y la tinción con azul de toluidina en las fosas óseas mostraron que, en comparación con el grupo de control positivo, los glucósidos A de Cistanche tenían un efecto inhibidor significativo y dependiente de la dosis sobre la diferenciación y la función de resorción ósea de los osteoclastos inducida por energía nuclear. Ligando activador del receptor del factor kappa B in vitro.

② Los resultados de RT qPCR mostraron que, en comparación con el grupo de control positivo, los niveles de expresión de ARNm de fosfatasa ácida resistente a tartrato, DC-STAMP, Nfatc-1, Ctsk y c-Fos en dosis altas y bajas Los grupos de glucósido A de Cistanche deserticola se redujeron significativamente, y el efecto de reducción del glucósido A de Cistanche deserticola fue más significativo en el grupo de dosis alta. Los resultados de la transferencia Western mostraron que el glucósido A de Cistanche deserticola en dosis altas inhibió significativamente la expresión de la proteína p-JNK en 10, 20, 30 y 60 minutos de intervención; En comparación con el grupo de control positivo, los grupos de dosis baja, media y alta de glucósido A de Cistanche deserticola inhibieron significativamente la expresión de las proteínas Nfatc1 y c-Fos de una manera dependiente de la dosis. Los resultados indican que el glucósido A de Cistanche deserticola puede inhibir la formación. y la función de resorción ósea de los osteoclastos al reducir el nivel de proteína p-JNK, suprimiendo la activación de la vía MAPK y la expresión de genes clave en los osteoclastos.

El objetivo de la publicación en la Revista China de Investigación en Ingeniería Organizacional es la construcción organizacional; células óseas; Condrocitos; Cultivo celular; Fibroblastos; Células endoteliales vasculares; osteoporosis; ingeniería de tejidos

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Palabras clave: Cistanche glucósidos A, osteoclastos, MAPK, JNK, RANKL, RANK, osteoporosis, glucósido feniletanoide