AbstractoObjetivo: Investigar los efectos dePolisacáridos de cistanche (CPS)sobre la apoptosis en ratas con hiperplasia prostática benigna (HPB) mediante la regulación de la vía de señalización PI3K/AKT/mTOR.Métodos: Se estableció un modelo de rata BPH mediante orquiectomía bilateral combinada con inyección subcutánea de propionato de testosterona. Las ratas modeladas con éxito se dividieron aleatoriamente en un grupo de BPH, un grupo de CPS en dosis baja (100 mg/kg), un grupo de CPS en dosis media (200 mg/kg), un grupo de CPS en dosis alta (400 mg/kg) y un grupo de CPS en dosis alta + activador de PI3K factor de crecimiento similar a la insulina 1 (IGF-1) (400 mg/kg de CPS + 5 mg/mL IGF-1). Después de la intervención, se pesó el peso húmedo de la próstata con una balanza electrónica para calcular el índice prostático; la apoptosis del tejido prostático se detectó mediante tinción con TUNEL; La expresión de caspasa-3 se midió mediante inmunohistoquímica; y mediante transferencia Western se detectaron proteínas relacionadas con la vía, así como genes apoptóticos Bcl-2 y Bax.Resultados: En comparación con el grupo de operación simulada, el grupo de BPH mostró daño patológico severo, aumento significativo del peso húmedo e índice de la próstata, proporciones de p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT, p-mTOR/mTOR y expresión de la proteína Bcl-2, así como una disminución significativa del índice apoptótico, la expresión positiva de Caspasa-3 y la expresión de Bax (P<0.05). Compared with the BPH group, the low-, medium-, and high-dose CPS groups exhibited improved pathological damage, significantly reduced prostate wet weight and index, ratios of p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT, p-mTOR/mTOR, and Bcl-2 protein expression, along with significantly increased apoptotic index, Caspase-3 positive expression, and Bax expression (P<0.05), with statistically significant differences among different CPS doses. Compared with the high-dose CPS group, the high-dose CPS + IGF-1 group showed slightly aggravated pathological damage, significantly increased prostate wet weight and index, ratios of p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT, p-mTOR/mTOR, and Bcl-2 protein expression, as well as significantly decreased apoptotic index, Caspase-3 positive expression, and Bax expression (P<0.05).Conclusión: CPS inhibe eficazmente la progresión de la BPH en ratas al suprimir la vía de señalización PI3K/AKT/mTOR para promover la apoptosis de las células prostáticas.

Palabras clave:Hiperplasia prostática benigna; Vía de señalización PI3K/AKT/mTOR; polisacáridos de cistanche; Apoptosis; ratas

 

CUÁLES SON LOS BENEFICIOS DE CISTANCHE PARA LA PRÓSTATA

 

 

Introducción

La hiperplasia prostática benigna (HPB) es una enfermedad del sistema urinario relacionada con la edad con una incidencia creciente a medida que aumenta la edad, caracterizada por una sobreproliferación benigna de células epiteliales y estromales prostáticas. El agrandamiento de la próstata provoca trastornos urinarios, como micción frecuente y urgente, lo que provoca malestar físico y mental y afecta gravemente la calidad de vida. Aunque los inhibidores y bloqueadores de la 5 -reductasa se utilizan para la HPB, sus efectos secundarios (p. ej., disfunción sexual y eréctil) limitan la aplicación clínica. Por tanto, es fundamental desarrollar agentes alternativos seguros y eficaces. La patogénesis de la HPB es compleja e involucra envejecimiento, factores de crecimiento, apoptosis y células inflamatorias.

cistanche, una hierba medicinal tradicional china de primera calidad, se ha utilizado durante mucho tiempo comoHierba para apoyar la salud de la próstata.y mejorar el confort urinario. Como principal componente activo de Cistanche,Polisacáridos de cistanche (CPS)ejercen efectos inmunorreguladores, antioxidantes, antitumorales y antiproliferativos. Notablemente,cistanche tubulosa(la variedad en la que nos especializamos) contiene niveles significativamente más altos de compuestos activos, incluidos CPS y glucósidos feniletanoides, que las especies de Cistanche convencionales, lo que brinda una actividad biológica más fuerte.

Estudios recientes destacan el papel clave de laVía de señalización PI3K/AKT/mTORen BPH: los andrógenos pueden activar esta vía para estimular la síntesis de proteínas y la proliferación de células prostáticas al suprimir la apoptosis. Este estudio se centró en la vía PI3K/AKT/mTOR para explorar cómo CPS regula la apoptosis en ratas BPH, proporcionando evidencia científica de Cistanche como unhierba para el bienestar de la próstatay una solución natural para el soporte de la BPH.

1. Materiales y Métodos

1.1 Materiales

1.1.1 Animales experimentalesSe compraron setenta y tres ratas Sprague-Dawley macho SPF de 7 semanas de edad (250 ± 20 g) sanas en el Centro de Animales de Laboratorio de la Universidad de Medicina China de Heilongjiang. Condiciones de alojamiento: temperatura (18±2) grados, humedad (30±10)%, dieta estándar y agua ad libitum. El estudio fue aprobado por el Comité de Ética Animal (Aprobación No. 2023-13).

1.1.2 Reactivos e instrumentospolisacáridos de Cistanche (CPS, lote: IA0570); kit de tinción HE; IGF-1 (Señalización Celular, EE. UU.); kit BCA (Sigma); anticuerpos primarios contra p-PI3K, p-AKT, p-mTOR, PI3K, AKT, mTOR, Bcl-2, Bax, Caspasa-3 y anticuerpos secundarios (Abcam); kit TUNEL (Biotecnología del Puente Dorado de Zhongshan); reactivo ECL (Biomiga); agente cromogénico DAB-H₂O₂ (DAKO); balanza analítica electrónica; microscopio óptico; cortadora de parafina.

 

 

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1.2 Métodos

1.2.1 Establecimiento e intervención del modelo BPHSesenta y una ratas se sometieron a orquiectomía bilateral e inyección subcutánea de propionato de testosterona (0,5 mg/kg) durante 4 semanas para inducir la HPB; 12 ratas recibieron una cirugía simulada. Se modelaron con éxito cincuenta ratas y se aleatorizaron en 5 grupos (n=10): grupo BPH, dosis baja de CPS (100 mg/kg), dosis media de CPS (200 mg/kg), dosis alta de CPS (400 mg/kg) y dosis alta de CPS + IGF-1 (5 mg/mL, ip). Todas las intervenciones duraron 14 días.

1.2.2 Índice y peso húmedo de la próstataSe diseccionaron y pesaron los tejidos de la próstata; índice prostático=peso húmedo de la próstata (mg)/peso corporal (g).

1.2.3 Observación histopatológicaLos tejidos de la próstata se fijaron, deshidrataron, incluyeron, seccionaron y tiñeron con HE para su examen microscópico (400 ×).

1.2.4 Tinción TUNEL para apoptosisSe tiñeron las células apoptóticas; índice apoptótico=(células apoptóticas/células totales) × 100%.

1.2.5 Inmunohistoquímica para caspasa-3Tasa de expresión positiva de caspasa-3=(área de tinción positiva/área total) × 100%.

1.2.6 Transferencia WesternLa expresión de proteínas de p-PI3K, PI3K, p-AKT, AKT, p-mTOR, mTOR, Bcl-2 y Bax se cuantificó y analizó mediante ImageJ.

1.3 Análisis estadístico

Los datos se analizaron utilizando SPSS 27.0, presentados como media ± DE. Se utilizaron las pruebas ANOVA unidireccional y SNK-q; PAG<0.05 indicated statistical significance.

 

2. Resultados

2.1 Efectos de la CPS sobre el peso húmedo y el índice de la próstata

En comparación con el grupo simulado, el grupo con HPB tuvo un peso e índice de próstata significativamente mayores (P<0.05). CPS dose-dependently reduced these measures (P<0.05). IGF-1 reversed the effects of high-dose CPS (P<0.05).

 

Tabla 2. Comparación del índice apoptótico del tejido prostático de rata entre grupos ( xˉ±s\\bar{x}\\pm sxˉ±s )

Grupo	n	Índice apoptótico (%)
Grupo operado de forma simulada	10	58.45±5.96
grupo de HPB	10	14.64±1.55ᵃ
APS–dosis baja	10	28.61±2.94ᵇ
APS–Dosis media	10	39.25±4.02ᵇᶜ
APS – dosis alta	10	52.24±5.31ᵇᶜᵈ
APS–Dosis alta + IGF‑1	10	28.17±3.69ᵉ

F: 154.468
P: 0.000

Tabla 1. Comparación del peso húmedo de la próstata y el índice de próstata en ratas ( xˉ±s\\bar{x}\\pm sxˉ±s )

Grupo	n	Peso húmedo de la próstata (mg)	Índice de próstata (mg/g)
Grupo operado de forma simulada	10	447.52±46.25	1.09±0.11
grupo de HPB	10	1202.21±122.01ᵃ	2.62±0.27ᵃ
APS–dosis baja	10	814.34±85.67ᵇ	2.16±0.22ᵇ
APS–Dosis media	10	600.67±61.84ᵇᶜ	1.55±0.16ᵇᶜ
APS – dosis alta	10	462.51±47.31ᵇᵈ	1.11±0.12ᵇᵈ
APS–Dosis alta + IGF‑1	10	808.71±81.44ᵉ	2.11±0.22ᵉ

F: 130,828 (peso húmedo); 104.771 (índice)
P: 0.000; 0.000

2.2 Efectos de la CPS sobre la histopatología de la próstata

El grupo simulado mostró glándulas prostáticas ordenadas. El grupo de BPH mostró próstatas agrandadas, epitelio engrosado y acinos irregulares. El CPS alivió el daño patológico de manera dependiente de la dosis, y el grupo de dosis altas mostró la mejor mejora. IGF-1 revirtió parcialmente esta protección.

2.3 Índice apoptótico

El grupo BPH tuvo un índice apoptótico más bajo que el grupo simulado (P<0.05). CPS significantly increased apoptosis in a dose-dependent manner (P<0.05); IGF-1 reduced apoptosis in the high-dose CPS group (P<0.05).

2.4 Expresión positiva de caspasa-3

La expresión de caspasa-3 fue menor en el grupo de BPH (P<0.05). CPS dose-dependently upregulated Caspase-3 (P<0.05); IGF-1 blocked this effect (P<0.05).

Tabla 3. Comparación de la tasa de expresión positiva de caspasa-3 en tejido prostático de rata entre grupos ( xˉ±s\\bar{x}\\pm sxˉ±s )

Grupo	n	Tasa de expresión positiva de caspasa-3 (%)
Grupo operado de forma simulada	10	46.52±4.72
grupo de HPB	10	18.51±1.92ᵃ
APS–dosis baja	10	26.48±2.77ᵇ
APS–Dosis media	10	34.82±3.55ᵇᶜ
APS – dosis alta	10	45.37±4.62ᵇᶜᵈ
APS–Dosis alta + IGF‑1	10	29.66±3.02ᵉ

F: 94.001
P: 0.000

 

Tabla 4. Niveles relativos de expresión de proteínas en tejido de próstata de rata ( xˉ±s\\bar{x}\\pm sxˉ±s, n=10)

p‑PI3K/PI3K, p‑AKT/AKT, p‑mTOR/mTOR, Bcl‑2, Bax

Grupo	n	p‑PI3K/PI3K	p‑AKT/AKT	p‑mTOR/mTOR	Bax/‑actina	Bcl‑2/‑actina
Grupo operado de forma simulada	10	0.24±0.03	0.14±0.02	0.11±0.02	1.10±0.11	0.48±0.05
grupo de HPB	10	0.85±0.09ᵃ	0.78±0.08ᵃ	0.88±0.09ᵃ	0.26±0.03ᵃ	1.56±0.16ᵃ
APS–dosis baja	10	0.67±0.07ᵇ	0.58±0.06ᵇ	0.52±0.06ᵇ	0.56±0.06ᵇ	1.18±0.13ᵇ
APS–Dosis media	10	0.41±0.05ᶜ	0.33±0.04ᶜ	0.31±0.04ᶜ	0.78±0.08ᶜ	0.78±0.08ᶜ
APS – dosis alta	10	0.26±0.03ᵈ	0.17±0.02ᵈᵉ	0.15±0.02ᵈᵉ	0.98±0.10ᵈᵉ	0.51±0.06ᵈᵉ
APS–Dosis alta + IGF‑1	10	0.64±0.07ᵇ	0.52±0.06ᵇ	0.55±0.06ᵇ	0.54±0.06ᵇ	1.11±0.12ᵇ

F: 164.045; 235.650; 284.474; 158.535; 160.167
P: 0.000; 0.000; 0.000; 0.000; 0.000

 

2.5 Vía y expresión de proteínas relacionadas con la apoptosis

El grupo BPH mostró proporciones elevadas de p-PI3K/PI3K, p-AKT/AKT, p-mTOR/mTOR y Bcl-2, con Bax reducido (P<0.05). CPS dose-dependently suppressed PI3K/AKT/mTOR activation, downregulated Bcl-2, and upregulated Bax (P<0.05). IGF-1 reversed these changes (P<0.05).

 

3. Discusión

La HPB implica un crecimiento prostático descontrolado que puede provocar disfunción urinaria, lesión de la vejiga e insuficiencia renal. La terapia con medicamentos sigue siendo la opción de primera línea, lo que impulsa la demanda de alternativas naturales y seguras.

cistanchees un celebradohierba para el apoyo de la próstataen la medicina tradicional. Nuestra materia prima-cistanche tubulosa-contiene niveles mucho más altos de polisacáridos y glucósidos activos que el Cistanche común, lo que lo hace mucho más potente para la salud de la próstata. CPS, el componente activo principal, modula las vías de supervivencia y muerte celular con baja toxicidad.

La progresión de la HPB está estrechamente relacionada con la alteración del equilibrio de la apoptosis. Caspasa-3 es un ejecutor clave de la apoptosis; Bax promueve la apoptosis mientras que Bcl-2 la inhibe. Nuestro estudio confirma que CPS mejora la apoptosis en el tejido prostático con HPB al regular positivamente Caspasa-3 y Bax y regular negativamente Bcl-2.

ElVía PI3K/AKT/mTOREs un regulador maestro de la proliferación y supervivencia celular. Su sobreactivación suprime la apoptosis y alimenta la BPH. Descubrimos que CPS inhibe notablemente la fosforilación de PI3K, AKT y mTOR, desactivando así esta vía. El activador PI3K IGF-1 revirtió los efectos antiproliferativos y proapoptóticos del CPS, comprobando que el CPS actúamediante la supresión de la vía PI3K/AKT/mTOR.

 

4. Conclusión

Polisacáridos de cistanche (CPS), especialmente de alta potenciacistanche tubulosa, reducen el peso y el índice de la próstata, promueven la apoptosis de las células prostáticas y alivian el daño patológico en ratas con BPH. Estos beneficios ocurreninhibiendo la vía de señalización PI3K/AKT/mTOR.

Como natural, seguro.hierba para la salud de la próstata, El extracto de Cistanche tubulosa es un suplemento dietético prometedor para apoyar la función urinaria y mantener el tamaño normal de la próstata, ideal para el desarrollo de productos para la salud masculina.

 

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