Identificación integral y análisis químico de Cistanche Senegalensis silvestre en Kenia: morfología, códigos de barras de ADN y fitoquímica

2. Identificación molecular mediante códigos de barras de ADN

Identificación molecular de la naturaleza.Muestras de cistanche de Keniay sus plantas hospedantes se realizó utilizando dos pares de cebadores, ITS2F/ITS3R y psbA-trnH [11]. Ambas muestras silvestres de Cistanche de Kenia fueron emparejadas exitosamente comocistanche tubulosaen el sistema de códigos de barras de ADN de la Medicina Tradicional China, con una similitud de secuencia del 96,7%. En la base de datos GenBank, las secuencias coincidieron con múltiples especies, mostrando un 100% de similitud conCistanche senegalensis y más del 98% de similitud concistanche tubulosa. La planta huésped no coincidió con ningún registro en el sistema de códigos de barras de ADN de la Medicina Tradicional China, pero mostró una alta similitud (97,55%) con las especies de Amaranthaceae.Sericocomopsis hildebrandtiien GenBank.

Para aclarar aún más la relación, los más similaresCistanche senegalensisLa secuencia psbA-trnH (Accesión: LT715293) y la secuencia ITS2 (Accesión: LT715483) se descargaron de GenBank, junto con las secuencias ITS2 y psbA de cuatro especies chinas de Cistanche. Los árboles filogenéticos se construyeron utilizando el software MEGA X (ver Figura 3). Como se muestra en la Figura 3, las muestras silvestres de Cistanche de Kenia (K1, K2) se agrupan en la misma rama queCistanche senegalensis, con una distancia genética de 0 a 0,0016, lo que sugiere que pueden pertenecer a la misma especie. Por el contrario, se dividen en ramas diferentes de las cuatro especies chinas de Cistanche, lo que indica diferencias significativas entre especies. Comparativamente, la distancia filogenética entre K1, K2 ycistanche tubulosaes relativamente cercana (0,0089–0,0098), mientras que la distancia aCistanche deserticolaes mucho mayor (0,1193–0,2961). Esto sugiere que el Cistanche salvaje de Kenia está más estrechamente relacionado concistanche tubulosa, lo que implica una ascendencia compartida pero una divergencia posterior debido a diferentes presiones ambientales y procesos evolutivos.

 

 

cistanche tubulosa

3. Determinación del contenido de ingredientes activos y análisis de huellas dactilares en diferentes muestras de Cistanche

Se utilizó cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) para determinar simultáneamente el contenido de cinco glucósidos feniletanoides y cinco alcoholes sacáridos en dos muestras de Cistanche silvestres de Kenia, así como de muestras chinas.cistanche tubulosayCistanche deserticola(ver Tablas 1 y 2).

Con respecto a los glucósidos feniletanoides, se encontraron niveles consistentemente altos de equinacósido y acteósido en todas las muestras de Cistanche, lo que respalda la justificación de su selección como compuestos marcadores en la Farmacopea China. Notablemente,Cistanche senegalensisde Kenia exhibió un contenido significativamente mayor de tubulosido A, lo que lo distingue de la especie Cistanche china y puede servir como un rasgo característico del Cistanche keniano.

En términos de contenido total de alcohol sacárido,Cistanche deserticolamostró niveles mucho más altos que amboscistanche tubulosayCistanche senegalensis. No se detectó betaína encistanche tubulosa, aunque los contenidos de fructosa, manitol y glucosa fueron similares a los deCistanche deserticola, excepto por un contenido de sacarosa mucho menor. En contraste,Cistanche senegalensiscontenía betaína detectable pero no glucosa, y los niveles de otros alcoholes sacáridos también diferían considerablemente de las especies chinas de Cistanche.

Cistanche tubulosa Raíz Fresca

Contacta ahora conoce a los agricultores de cistanche en china

 

 

 

Cuadro 1 Contenido de cinco glucósidos feniletanoides en plantas de Cistanche (%, n=3, media ± DE). GH: C. tubulosa; HM: C. deserticola; "-" indica no detectado

ID de muestra	Origen	Forma de crecimiento	Fecha de recogida	equinacósido	Tubulosido A	Acteosido	isoactósido	2'-Acetilactósido	Total
GH1	Yutian, Sinkiang	Cultivado	2023.11	9.47 ± 0.070	0.63 ± 0.003	4.34 ± 0.032	1.43 ± 0.007	0.11 ± 0.001	15.98
GH2	Yutian, Sinkiang	Cultivado	2023.11	13.31 ± 0.347	0.64 ± 0.012	4.34 ± 0.032	1.33 ± 0.07	0.17 ± 0.001	19.52
GH3	Yutian, Sinkiang	Cultivado	2023.11	24.64 ± 0.043	0.84 ± 0.014	5.75 ± 0.091	2.06 ± 0.038	0.06 ± 0.003	33.35
HM1	Turfán, Xinjiang	Cultivado	2023.11	1.93 ± 0.094	0.04 ± 0.003	0.15 ± 0.026	0.03 ± 0.006	0.02 ± 0.001	2.17
HM2	Turfán, Xinjiang	Cultivado	2023.11	2.76 ± 0.140	0.05 ± 0.003	0.16 ± 0.018	0.03 ± 0.004	0.03 ± 0.001	3.05
HM3	Turfán, Xinjiang	Cultivado	2023.11	2.44 ± 0.174	0.06 ± 0.004	0.15 ± 0.008	0.03 ± 0.002	0.02 ± 0.001	2.69
K1	Kenia	Salvaje	2023.08	3.83 ± 0.027	2.69 ± 0.034	2.70 ± 0.27	0.27 ± 0.003	0.74 ± 0.001	10.23
K2	Kenia	Salvaje	2023.08	1.46 ± 0.018	1.51 ± 0.001	0.15 ± 0.001	0.08 ± 0.001	0.03 ± 0.001	3.23

---

Tabla 2 Contenidos de alcoholes de azúcar y betaína en plantas de Cistanche (%, n=3, media ± DE)

ID de muestra	Origen	Forma de crecimiento	Fecha de recogida	Betaína	Fructosa	manitol	Glucosa	sacarosa	Total
GH1	Yutian, Sinkiang	Cultivado	2023.11	-	11.66 ± 0.084	5.56 ± 0.112	5.45 ± 0.054	2.29 ± 0.042	24.96
GH2	Yutian, Sinkiang	Cultivado	2023.11	-	8.75 ± 0.061	4.94 ± 0.159	3.34 ± 0.081	1.70 ± 0.092	18.73
GH3	Yutian, Sinkiang	Cultivado	2023.11	-	9.44 ± 0.107	5.09 ± 0.089	4.31 ± 0.455	1.80 ± 0.149	20.29
HM1	Turfán, Xinjiang	Cultivado	2023.11	6.62 ± 0.136	7.60 ± 0.119	3.22 ± 0.049	3.55 ± 0.150	23.18 ± 0.425	44.16
HM2	Turfán, Xinjiang	Cultivado	2023.11	6.46 ± 0.105	7.82 ± 0.104	4.82 ± 0.038	4.98 ± 0.104	28.57 ± 0.449	52.65
HM3	Turfán, Xinjiang	Cultivado	2023.11	6.65 ± 0.148	8.29 ± 0.159	3.90 ± 0.084	4.88 ± 0.009	26.90 ± 0.629	50.62
K1	Kenia	Salvaje	2023.08	9.41 ± 0.021	5.31 ± 0.333	7.06 ± 0.045	-	8.44 ± 0.102	30.22
K2	Kenia	Salvaje	2023.08	6.29 ± 0.034	-	-	-	-	6.29

---

Nota:
"-" indica no detectado.
GH =cistanche tubulosa, SM =Cistanche deserticola, K=Kenia salvajecistanche.

 

Las huellas cromatográficas de muestras de Cistanche de diferentes regiones se muestran en la Figura 4, y los resultados del análisis de similitud de huellas dactilares se presentan en la Tabla 3. La similitud entre la muestra K1 de Cistanche salvaje de Kenia y las muestras GH1-GH3 (cistanche tubulosade China) osciló entre 0,785 y 0,899, mientras que la similitud con las muestras HM1-HM3 (Cistanche deserticolade China) osciló entre 0,630 y 0,745. Para la muestra K2 de Kenia, la similitud con las muestras GH1-GH3 fue de 0,840 a 0,859, y con las muestras HM1-HM3 fue de 0,775 a 0,824. Estos resultados indican que la composición química del Cistanche salvaje de Kenia es más similar a la del chino.cistanche tubulosaque aCistanche deserticola.

 

Figura 4 Cromatogramas de huellas dactilares de Cistanche silvestre en Kenia y C. tubulosa y C. deserticola cultivadas en Xinjiang

 

Tabla 3 Resultados de la evaluación de similitud de muestras de Cistanche

Muestra	K1	K2	HM1	HM2	HM3	GH1	GH2	GH3	Referencia
K1	1	0.881	0.647	0.745	0.630	0.899	0.834	0.785	0.852
K2	0.881	1	0.783	0.824	0.775	0.859	0.854	0.840	0.875
HM1	0.647	0.783	1	0.988	1	0.887	0.950	0.975	0.945
HM2	0.745	0.824	0.988	1	0.985	0.946	0.986	0.997	0.983
HM3	0.630	0.775	1	0.985	1	0.876	0.942	0.969	0.937
GH1	0.899	0.859	0.887	0.946	0.876	1	0.987	0.967	0.988
GH2	0.834	0.854	0.950	0.986	0.942	0.987	1	0.996	0.999
GH3	0.785	0.840	0.975	0.997	0.969	0.967	0.996	1	0.993
Referencia	0.852	0.875	0.945	0.983	0.937	0.988	0.999	0.993	1

---

Nota: K1, K2: Cistanche salvaje de Kenia; HM1-HM3:Cistanche deserticolade Turpan, Xinjiang; GH1-GH3: *

 

Discusión

Kenia cuenta con una rica diversidad de plantas y una larga tradición de uso de plantas con fines medicinales. Sin embargo, la investigación sobre muchas plantas africanas en términos de taxonomía, química y farmacología sigue siendo limitada, lo que da como resultado que muchas plantas medicinales valiosas se pasen por alto y se investiguen poco [9]. Aunque hay informes que sugieren que Cistanche está ampliamente distribuido en Kenia [15], actualmente no hay registros de su uso medicinal en el país. Para aclarar el estado y el valor medicinal de los recursos de Cistanche en Kenia, nuestro equipo de investigación realizó un estudio de campo y descubrió queCistanche senegalensisEstá ampliamente distribuido en el suroeste de Kenia. Los períodos de floración local de Cistanche son de marzo a mayo y de octubre a diciembre. Como nuestra encuesta se realizó en agosto, solo pudimos recolectar dos muestras. A pesar de esta limitación, identificamos las especies de Cistanche silvestre de Kenia mediante análisis morfológicos, histológicos y moleculares de ADN, y determinamos su composición química, brindando apoyo para la conservación y el desarrollo de los recursos de Cistanche en Kenia.

Cistanche deserticola

 

El tallo suculento del Cistanche silvestre de Kenia es aplanado y cilíndrico, parecidoCistanche deserticolaen apariencia, pero que difieren notablemente del tallo fusiforme decistanche tubulosa. La sección transversal del Cistanche salvaje de Kenia muestra haces vasculares dispersos, lo que es consistente con thlas características decistanche tubulosa. However, while the anther base of cistanche tubulosaes romo y redondeado sin una punta aguda; esta característica está ausente en el Cistanche silvestre de Kenia [1,7]. Según el análisis de secuencia de ITS2 y psbA-trnH, es probable que el Cistanche salvaje de KeniaCistanche senegalensis, y ambas regiones genéticas muestran una gran similitud con los chinoscistanche tubulosa. Informes anteriores indican queC. senegalensisSe distribuye principalmente desde Senegal en el noreste de África hacia el sur hasta Kenia y otras partes del sureste de África [15]. El estudio filogenético más reciente y completo del género Cistanche lo divide en cuatro clados principales: Asia oriental, África noroccidental, Asia sudoccidental y un clado generalizado. Debido a la hibridación entre especies o cambios geográficos, el clado generalizado se caracteriza por una baja resolución filogenética, lo que dificulta distinguir especies según la morfología y las secuencias de ADN. AmbosC. tubulosayC. senegalensiscaen en este clado generalizado, y cuatro muestras identificadas comoC. tubulosafueron encontrados dentro delC. senegalensisrama en el estudio, lo que hace que sea difícil distinguir entre los dos incluso a nivel de secuencias nucleares ITS2 y cloroplasto psbA-trnH [8].

Según la investigación [15], anfitriones deC. senegalensisSuaeda monoica(Amaranthaceae),salvadora persica(Salvadoráceas),Zigofiloespecies (Zygophyllaceae), yVachellia tortilis(Fabáceas). En este estudio, el huésped del Cistanche salvaje de Kenia fue identificado comoSericocomopsis hildebrandtii(Amaranthaceae), un subarbusto o arbusto cuyas raíces se utilizan localmente como etnomedicina para tratar la malaria, el dolor de estómago, la hepatitis, el estreñimiento y otras dolencias [16,17]. En China, los anfitriones deCistanche deserticolaincluirAmmodendron haloxilón, persicum(ambas Amaranthaceae), yAtriplex canescens(Quenopodiáceas) [18]; mientras que las huestes chinascistanche tubulosason varias especies deTamarix(Tamaricáceas). En comparación con la gama relativamente limitada de hospedantes de especies chinas de Cistanche,C. senegalensisen Kenia utiliza una variedad más amplia de huéspedes de diferentes géneros, lo que sugiere una adaptabilidad ecológica más amplia.

Ambas muestras deC. senegalensisrecolectados en este estudio contenían los cinco glucósidos feniletanoides, aunque los niveles variaron mucho, posiblemente debido a diferencias en la etapa de floración. La muestra K1 se recolectó antes de que la planta emergiera del suelo, con un tallo más pequeño y reservas de nutrientes no consumidas, lo que resultó en un mayor contenido de ingrediente activo; La muestra K2 se recolectó durante el período de floración, cuando los nutrientes se habían agotado, lo que resultó en un menor contenido de ingrediente activo, de acuerdo con estudios previos [19]. El contenido total de los cinco glucósidos feniletanoides en K1 era mayor que el de los chinos.Cistanche deserticolapero más bajo que en chinocistanche tubulosa. Además, el contenido total de los cuatro alcoholes de azúcar y betaína en K1 fue mayor que encistanche tubulosapero más bajo que enCistanche deserticola. En particular, tanto las muestras de K1 como de K2 contenían niveles relativamente altos de betaína, algo que nunca se ha detectado en los chinos.cistanche tubulosapero se sabe que está presente en grandes cantidades en los chinosCistanche deserticola[6]. Otra diferencia significativa es que ni K1 ni K2 contenían glucosa, pero debido al pequeño tamaño de la muestra, no está claro si esto es una característica deC. senegalensiso simplemente una variación individual; esto requerirá una mayor verificación con más muestras en el futuro.

En resumen, a través de investigaciones y trabajos de campo, este estudio identificó la distribución del Cistanche silvestre en Kenia, aclaró sus especies comoCistanche senegalensis, y encontró similitudes y diferencias con los chinos.Cistanche deserticolaycistanche tubulosa. Estas diferencias pueden verse influenciadas por los métodos de cultivo, el entorno ecológico y otros factores, y justifican una mayor investigación y seguimiento.

 

Referencias

[1] Comisión de Farmacopea China. Farmacopea de la República Popular China (中华 人民共和国药典) [S]. Vol 1. 2025 Ed. Beijing: China Medical Science Press, 2025: 319-320.

[2] Tu PF, Jiang Y. Actualización de la investigación de la literatura clásica sobre Cistanches Herba [J]. China J Chin Mater Med (中国中药杂志), 2022, 47: 5670-5679.

[3] Fu Z, Fan X, Wang X, et al. Cistanches Herba: una visión general de su química, farmacología,

[4] Xu CH, Tuerdimaimaiti N, Wang YX, et al. Progresos en la bioactividad de los glucósidos feniletanoides en Cistanches [J]. Alimentos y medicamentos (食品与药品), 2023, 25: 261-266.

[5] Song ZH, Lei L, Tu PF. Avances en la investigación de la actividad farmacológica en plantas de Cistanche Hoffing et Link [J]. Medicamentos herbarios Chin Tradit (中草药), 2003, 34: 113-115.

[6] Gao YJ, Jiang Y, Dai F, et al. Estudio sobre los componentes laxantes en Cistanche deserticola YC Ma [J]. Mod Chin Med (中国现代中药), 2015, 17: 307-310, 314.

[7] Comité Editorial de Flora Reipublicae Popularis Sinicae, Academia de Ciencias de China. Flora de China (中国植物志) [M]: Vol 69. Beijing: Science Press, 1999: 86.

[8] Ataei N, Schneeweiss GM, García MA, et al. Una filogenia multilocus de la planta parásita no fotosintética Cistanche (Orobanchaceae) refuta la taxonomía actual e identifica cuatro clados principales morfológicamente distintos [J]. Mol Phylogenet Evol, 2020, 151: 106898.

[9] Nankaya J, Gichuki N, Lukhoba C, et al. Plantas medicinales de los masai de Kenia: una revisión [J]. Plantas, 2020, 9: 44