Abstracto

El estrés oxidativo inducido por un exceso de radicales libres es uno de los principales impulsores del envejecimiento celular humano, la inflamación crónica y múltiples trastornos metabólicos degenerativos. Los ingredientes nutracéuticos de origen vegetal procedentes de recursos homólogos de alimentos y medicamentos han ganado una amplia atención mundial como alternativas antioxidantes naturales a los aditivos antioxidantes sintéticos.licio rutenico, también conocida como baya de goji negra, yCistanche deserticola(escoba del desierto) son recursos vegetales endémicos representativos de plantas medicinales comestibles originarios del corredor Hexi en el noroeste de China. Contienen abundantes componentes fitoquímicos característicos que incluyen antocianinas, polifenoles, polisacáridos bioactivos y glucósidos feniletanoides. Aunque las actividades biológicas individuales de estas dos materias primas se han documentado en múltiples estudios existentes, una investigación limitada se ha centrado en cómo las condiciones de la digestión gastrointestinal humana alteran la bioaccesibilidad y el potencial antioxidante real de su compuesto en polvo mezclado. En esta investigación, se utilizó polvo de un solo componente y tres grupos de polvo mixto con diferentes proporciones de masa (licio rutenico : Cistanche deserticola= 1:2, 1:1, 2:1) fueron preparados. Se implementó un modelo de digestión gastrointestinal in vitro estático de dos etapas, que consistía en una digestión gástrica simulada de 2 horas a pH 2,0 con pepsina, seguida de una digestión intestinal simulada de 2 horas a pH 7,0 suplementada con tripsina. El muestreo dinámico se realizó en múltiples intervalos de tiempo durante la incubación de la digestión. Determinamos cuantitativamente los contenidos solubles de polifenoles totales, polisacáridos, antocianinas y glucósidos de feniletanoides, junto con la capacidad de eliminación de radicales libres de DPPH y ABTS. Se realizó un análisis de correlación de Pearson para revelar relaciones internas entre las concentraciones de compuestos bioactivos y los indicadores de antioxidantes. Los resultados experimentales demostraron que la digestión gástrica mejoró significativamente la solubilidad de cuatro fitoquímicos funcionales principales, lo que mejoró aún más el rendimiento de eliminación de radicales tanto del DPPH como del ABTS. Durante la siguiente fase de digestión intestinal, la solubilidad de los polifenoles y los glucósidos feniletanoides siguió aumentando, mientras que los contenidos mensurables de polisacáridos y antocianinas disminuyeron significativamente. La digestión intestinal ejerció efectos promotores sobre la actividad eliminadora de radicales ABTS, pero no generó ninguna mejora positiva en la tasa de eliminación de radicales libres DPPH. Los polifenoles, antocianinas y glucósidos feniletanoides mostraron correlaciones lineales estadísticamente significativas con los parámetros de capacidad antioxidante (P < 0.05). Among all three blending formulations, the mixing ratio of 2:1 (licio rutenicoaCistanche deserticola) exhibieron una capacidad antioxidante integral superior después de una simulación completa de la digestión gastrointestinal. Este estudio aclaró las reglas de variación de sustancias bioactivas en un entorno gastrointestinal simulado para polvo de retama de retama del desierto y baya de goji negra simple y combinada. Nuestros resultados brindan un sólido respaldo experimental para el desarrollo de nuevos suplementos dietéticos funcionales que utilizan materiales vegetales del desierto de Hexi-Corridor.

Palabras clave: licio rutenico; Cistanche deserticola; digestión gastrointestinal in vitro; bioaccesibilidad; polifenoles; glucósidos de feniletanoides; antocianinas; actividad antioxidante; homología alimento-medicamento

1. Introducción

El envejecimiento de la población y la creciente búsqueda pública de intervenciones subsanitarias han convertido la investigación nutricional antienvejecimiento en un punto caliente dentro de las industrias nutracéuticas y de alimentos funcionales a nivel mundial. La hipótesis del envejecimiento por radicales libres ha sido ampliamente aceptada para interpretar el mecanismo de senescencia del organismo. La acumulación continua de especies reactivas de oxígeno dentro del cuerpo humano desencadenará la peroxidación lipídica, dañará la estructura del ADN y la función de las proteínas, acelerará la senescencia celular y aumentará el riesgo de morbilidad por aterosclerosis, enfermedades inflamatorias crónicas y síntomas degenerativos relacionados con la edad. La ingesta dietética de antioxidantes fitoquímicos naturales se considera una estrategia nutricional suave y segura para mitigar el estrés oxidativo en comparación con las intervenciones farmacéuticas. Los antioxidantes sintéticos como el BHT y el BHA se enfrentan gradualmente a un escrutinio regulatorio más estricto en muchos mercados regionales, lo que alimenta aún más la demanda del mercado de materias primas antioxidantes naturales de origen vegetal.

Los recursos herbarios tradicionales del sistema homólogo de medicina alimentaria del este de Asia han despertado un interés creciente entre los investigadores de nutrición y los fabricantes de suplementos occidentales.licio rutenicoMurr., una especie de arbusto perenne de la familia Solanaceae, se distribuye en zonas áridas y semiáridas del noroeste de China. Su fruto de color púrpura oscuro se gana la reputación de "rey de las antocianinas", debido a la concentración excepcionalmente alta de derivados de antocianinas acilados que rara vez aparecen en las frutas comunes. Además de las antocianinas, la baya de goji negra también es rica en mezclas complejas de polifenoles, polisacáridos solubles en agua, compuestos flavonoides y diversos oligoelementos. Experimentos previos in vitro y de cultivo celular han validado sus fuertes bioactividades inmunomoduladoras, antiinflamatorias y eliminadoras de radicales. La mayoría de las publicaciones existentes sobrelicio rutenicocentrarse en la identificación de componentes de materias primas, la optimización del proceso de extracción y la evaluación de antioxidantes del extracto crudo.

Cistanche deserticola, comúnmente llamada retama del desierto, es una planta holoparásita obligada perteneciente a la familia Orobanchaceae. Durante miles de años, esta planta se ha utilizado como material herbario tónico en la práctica de la medicina tradicional china. Sus principales componentes bioactivos característicos son los glucósidos feniletanoides, incluidos el equinacósido y el acteósido, junto con fracciones específicas de polisacáridos solubles en agua. Las investigaciones farmacológicas modernas revelan que los glucósidos feniletanoides deCistanche deserticolaposee efectos antioxidantes, neuroprotectores e inmunorreguladores, mientras que sus fracciones de polisacáridos pueden modular la respuesta inmune de los macrófagos. La materia prima se concentra geográficamente en las zonas de oasis desérticos del corredor Gansu Hexi y la zona desértica de Mongolia Interior.

Desde la perspectiva industrial local, ambas especies de plantas son cultivos económicos característicos del corredor Gansu Hexi. Las empresas agrícolas locales están explorando productos alimenticios funcionales con valor agregado basados ​​en estas dos plantas del desierto. La teoría clásica china de la compatibilidad a base de hierbas sugiere que la combinaciónlicio rutenicoyCistanche deserticolaPuede producir efectos tónicos sinérgicos. Actualmente, la mayoría de los artículos publicados sólo evalúan cada planta por separado. Se dispone de datos experimentales muy limitados sobre su fórmula compuesta.

Es fundamental tener en cuenta que el contenido fitoquímico total detectado en el polvo crudo no puede representar directamente el efecto antioxidante real dentro del tracto gastrointestinal humano. Una vez que el polvo de la planta se consume por vía oral, las moléculas bioactivas sufrirán cambios ambientales drásticos: una fuerte condición gástrica ácida con hidrólisis de proteasa, seguida de un ambiente neutro-alcalino del intestino delgado con catálisis de enzimas pancreáticas. Muchas sustancias fenólicas, antocianinas y polisacáridos son sensibles al pH; pueden disolverse, transformarse, degradarse o conjugarse durante el procedimiento de digestión. La fracción bioaccesible real, en lugar del contenido total original, determina la función fisiológica.

El ensayo estático de digestión gastrointestinal simulada in vitro es una herramienta de investigación preliminar estandarizada ampliamente adoptada en la ciencia de los alimentos. Este sistema de simulación de laboratorio puede imitar la variación del pH y las condiciones de hidrólisis de proteasas del estómago y el intestino delgado humanos. Los investigadores pueden rastrear los cambios dinámicos de los fitoquímicos bioaccesibles sin necesidad de realizar ensayos de alimentación animal de alto costo ni pruebas de intervención de voluntarios humanos. Este método se aplica ampliamente para evaluar frutas, verduras, hierbas en polvo y materias primas nutracéuticas.

Hasta ahora, ningún informe público ha descrito las características de la digestión gastrointestinal in vitro del polvo compuesto mixto delicio rutenicocombinado conCistanche deserticola. Por lo tanto, el presente estudio llevó a cabo experimentos de digestión gastrointestinal simulada estática en polvo de una sola materia prima y tres grupos de polvos mixtos con variantes de proporciones. Monitoreamos continuamente los cambios dinámicos de los polifenoles solubles, polisacáridos, antocianinas, glucósidos de feniletanoides, así como la capacidad de eliminación de radicales DPPH y ABTS en múltiples momentos de la digestión. Se realizó un análisis de correlación estadística entre la concentración de componentes bioactivos y los índices de antioxidantes. Nuestros objetivos incluyen: (1) aclarar cómo el entorno simulado gástrico e intestinal afecta la solubilidad y estabilidad de las principales sustancias funcionales de la baya de goji negra y la retama del desierto; (2) comparar el rendimiento antioxidante de diferentes proporciones de mezcla después de la digestión; (3) seleccionar la proporción de mezcla óptima para el polvo funcional compuesto. Los hallazgos de este trabajo pueden proporcionar evidencia experimental básica para el desarrollo de alimentos funcionales antioxidantes de nueva generación y productos de suplementos dietéticos derivados de los recursos vegetales locales del Corredor Hexi.

2. Materiales y métodos

2.1 Materias primas vegetales

frutos maduros delicio rutenicose recolectaron de una plantación forestal artificial en la ciudad de Huahai, ciudad de Yumen, provincia de Gansu, China, en el año 2022. Las frutas recolectadas en el campo se sometieron a un proceso de secado natural a la sombra a temperatura ambiente ventilada. Los frutos dañados, los pedicelos de los frutos y los restos de impurezas se eliminaron manualmente. Se pulverizaron frutos secos limpios y se tamizaron a través de un tamiz de malla 50 para obtener un polvo de baya de goji negro homogéneo para experimentos de digestión.

Tallos carnosos frescos deCistanche deserticolase recolectaron en mayo de 2022 a partir de inoculados artificialmenteAmmodendron haloxilónBosque de dunas ubicado en el condado de Gaotai, provincia de Gansu. Los pañuelos de papel frescos se lavaron minuciosamente para eliminar la contaminación de la superficie con arena, se cortaron en rodajas finas y se sumergieron inmediatamente en una solución protectora del color para evitar la reacción fenólica de pardeamiento. Las rodajas preprocesadas se liofilizaron al vacío. El sólido liofilizado se trituró y se pasó por un tamiz de malla 50 para prepararlo.Cistanche deserticolamuestra de polvo liofilizado.

Se prepararon tres grupos de polvos mixtos mezclandolicio rutenicopolvo yCistanche deserticolaPolvo liofilizado en diferentes proporciones de masa:

Grupo A: relación de masa 1: 2 (licio rutenico : Cistanche deserticola)

Grupo B: relación de masa 1: 1 (licio rutenico : Cistanche deserticola)

Grupo C: relación de masa 2: 1 (licio rutenico : Cistanche deserticola)

La masa total de la muestra para cada sistema de reacción de digestión se fijó en 0,75 g, la relación sólido-líquido se controló en 1: 40 (p/v).

2.2 Reactivos químicos

La pepsina (actividad 3 000 U/g), tripsina (actividad 250 U/mg), sustancia estándar de ácido gálico, reactivo de Folin-Ciocalteu, DPPH (1,1-difenil-2-picrilhidrazilo), ABTS (ácido 2,2′-azino-bis-(3-etilbenzotiazolina-6-sulfónico)) se adquirieron de Macklin Biochemical Co., Ltd., Shanghai, China. El ácido clorhídrico, el bicarbonato de sodio, el carbonato de sodio, el fenol, el ácido sulfúrico concentrado y otros agentes químicos inorgánicos eran reactivos comerciales domésticos de calidad analítica.

2.3 Equipos e instrumentos de laboratorio.

baño María digital de temperatura constante DK‑98‑Ⅱ (Taist Instrument Co., Ltd., Tianjin, China); Balanza analítica electrónica QUINTIX‑224 (Sartorius, Alemania); centrífuga refrigerada de alta velocidad de escritorio GL‑12B (Hunan Hexi Instrument Equipment Co., Ltd., China); espectrofotómetro ultravioleta-visible DR6000 (Hach Company, EE. UU.); Incubadora termostática en baño de agua con agitación serie SPH‑110X (Shanghai Shiping Instrument Co., Ltd., China).

2.4 Protocolo de digestión gastrointestinal estática in vitro

El procedimiento de digestión en dos fases se modificó y optimizó en referencia a los protocolos de digestión gastrointestinal estática publicados anteriormente para la matriz de alimentos vegetales. Cada prueba de digestión se realizó con tres réplicas biológicas paralelas.

Fase de digestión gástrica (GD, tiempo total de incubación=2 h):Pesamos con precisión 0,75 g de muestra de polvo y la transferimos a un tubo de centrífuga de polipropileno de 50 ml. Se añadió un volumen apropiado de agua desionizada para humedecer completamente la matriz de polvo sólido. El valor del pH de la suspensión de la muestra se ajustó cuidadosamente a pH 2,0 usando una solución acuosa de ácido clorhídrico de 1 mol/l. Posteriormente, se suplementaron 4 ml de líquido gástrico simulado previamente preparado; El líquido gástrico simulado contenía 3 g de pepsina disueltos en 50 ml de solución de HCl de 0,01 mol/l. Los tubos de centrífuga se colocaron en una incubadora con agitación termostática, la temperatura de incubación se mantuvo a 37 grados para imitar la temperatura corporal fisiológica humana y la velocidad de rotación de la agitación se estableció en 100 r/min. En los momentos de muestreo programados (0 h, 0,5 h, 1,0 h, 1,5 h, 2,0 h), se extrajo la mezcla de reacción parcial. La actividad enzimática se detuvo calentando en baño de agua hirviendo durante 10 minutos. La mezcla tratada se centrifugó a 4 grados, velocidad de rotación 6 000 r/min durante 15 min. Se recogió y conservó el líquido sobrenadante transparente para posteriores ensayos de cuantificación fitoquímica y actividad antioxidante.

Fase de digestión intestinal (ID, tiempo total de incubación=2 h):Después de completar la incubación de la digestión gástrica de 2 horas, el valor del pH del digesto se ajustó desde pH 2,0 hasta pH neutro 7,0 añadiendo gota a gota una solución de bicarbonato de sodio de 1,0 mol/L. Luego se añadió la solución de trabajo de tripsina al sistema de digestión; Esta solución de trabajo se preparó disolviendo 0,3 g de tripsina en polvo en 50 ml de una solución de carbonato de sodio de 0,01 mol/l. Las condiciones de incubación de la fase intestinal se mantuvieron constantes: temperatura 37 grados, velocidad de agitación 100 r/min. Los puntos de tiempo de muestreo para la digestión intestinal se establecieron en 0 h, 0,5 h, 1,0 h, 1,5 h y 2,0 h. Después del muestreo, los pasos de desactivación de enzimas, centrifugación refrigerada y recolección de sobrenadante fueron idénticos a las operaciones de la fase gástrica.

2.5 Determinación de componentes funcionales bioactivos.

El contenido total de polifenoles solubles se analizó mediante el método colorimétrico de Folin-Ciocalteu, los resultados del cálculo se expresaron como miligramos equivalentes de ácido gálico por gramo de muestra (mg GAE/g). El contenido total de polisacáridos solubles se midió utilizando el método cuantitativo colorimétrico de ácido fenolsulfúrico. El contenido total de antocianinas se detectó mediante espectrofotometría diferencial de pH. El contenido total de glucósidos feniletanoides se cuantificó mediante el método de determinación espectrofotométrica ultravioleta. Cada muestra de sobrenadante se midió por triplicado técnico para reducir la desviación de la prueba.

2.6 Medición de la capacidad antioxidante

2.6.1 Ensayo de eliminación de radicales libres DPPH

El porcentaje de eliminación de radicales de DPPH se calculó de acuerdo con la Fórmula (1): \\(\\text{tasa de eliminación de radicales de DPPH (\\%)}= \\left(1-\\frac{A_1-A_2}{A_0}\\right)\\times 100 \\tag{1}\\) Donde:A₁representa la lectura de absorbancia de la solución mixta que contiene el sobrenadante de la muestra y la solución de trabajo DPPH;A₂representa la absorbancia del sobrenadante de la muestra mezclado con el blanco de muestra de agua desionizada;A₀representa la absorbancia de la solución de trabajo de DPPH mezclada con el grupo de control de agua desionizada pura.

2.6.2 Ensayo de eliminación de cationes de radicales libres ABTS

La tasa de eliminación de cationes radicales ABTS se calculó siguiendo la Fórmula (2): \\(\\text{Tasa de eliminación de cationes ABTS (\\%)}= \\left(1-\\frac{A_1-A_2}{A_0}\\right)\\times 100 \\tag{2}\\) Definiciones del parámetro de absorbanciaA₁, A₂, A₀Mantenga una lógica consistente como cálculo DPPH.

2.7 Procesamiento de datos estadísticos

Todos los experimentos de digestión se repitieron para tres réplicas biológicas independientes. Se adoptó el paquete de software estadístico SPSS 22.0 para el análisis de varianza unidireccional (ANOVA), la prueba de significancia y el cálculo del coeficiente de correlación de Pearson. Se aplicó el software Origin 2018 para trazar figuras experimentales. El umbral de significación estadística se definió comoP < 0.05; P < 0.01 was judged as extremely significant difference. Different lowercase letters marked on chart bars indicate significant statistical difference between different treatment groups.

3. Resultados

3.1 Cambios de sustancias bioactivas y capacidad antioxidante por separado.licio rutenicopolvo

En un entorno de digestión gástrica simulada, el contenido de polifenoles solubles del polvo de baya de goji negra aumentó notablemente en las primeras 1,5 h de incubación y mostró una ligera disminución en la etapa posterior de la digestión gástrica. La condición de acidez gástrica promovió en gran medida la disolución de las moléculas de polisacáridos y los componentes de antocianinas (P < 0.05). Once the digesta transferred to intestinal digestion alkaline environment, detected soluble polysaccharide and anthocyanin contents showed obvious decreasing tendency. Experimental observation confirmed that alkaline pH value of simulated intestinal fluid constituted the primary driving factor for anthocyanin molecular degradation.

Desde la perspectiva de la actividad antioxidante, los porcentajes de eliminación de radicales tanto de DPPH como de ABTS ascendieron continuamente durante la incubación de la digestión gástrica. Cuando la digestión entró en la fase intestinal, la capacidad de eliminación de radicales del DPPH disminuyó drásticamente.

Los resultados del cálculo de correlación de Pearson indicaron que, en condiciones de digestión gástrica, el contenido de polifenoles poseía una correlación positiva significativa con la tasa de eliminación de DPPH. Los polifenoles y las antocianinas mostraron una correlación positiva extremadamente significativa con el rendimiento de eliminación de radicales de ABTS (P < 0.01). In intestinal digestion environment, polyphenol concentration presented significant negative correlation with antioxidant indexes. This phenomenon suggested partial degradation and structural transformation of phenolic compounds under intestinal‑simulated condition. Meanwhile, polysaccharide and anthocyanin still maintained positive correlation with radical‑scavenging capability throughout intestinal digestion process.

3.2 Cambios de sustancias bioactivas y capacidad antioxidante por separado.Cistanche deserticolapolvo

Para liofilizadoCistanche deserticolaEn polvo, la concentración de polifenoles solubles alcanzó el valor máximo a las 1,5 h durante la incubación en fase gástrica, seguido de una tendencia descendente. Durante la digestión intestinal, el contenido de polifenoles aumentó rápidamente en las primeras 0,5 h, disminuyó después y volvió a aumentar cerca del final de las 2 horas de incubación intestinal. El contenido de polisacáridos solubles mostró una tendencia general a la baja en las etapas de digestión gástrica e intestinal. La concentración de glucósido feniletanoide soluble mantuvo un crecimiento continuo durante todo el procedimiento de digestión gástrica de 2 horas.

En términos de rendimiento antioxidante, la digestión gástrica mejoró la tasa de eliminación de radicales DPPH en la primera hora y media y luego el valor antioxidante disminuyó. Después de cambiar al entorno de digestión intestinal, la tasa de eliminación de DPPH primero disminuyó y luego se recuperó gradualmente. La tasa de eliminación de radicales de ABTS mostró un patrón de disminución inicial y elevación posterior durante todo el transcurso del tiempo de digestión.

Los resultados estadísticos de correlación demostraron que los polifenoles y los glucósidos feniletanoides tenían una correlación positiva extremadamente significativa con la capacidad de eliminación de radicales del DPPH durante la digestión gástrica (P < 0.01). In intestinal digestion environment, phenylethanoid glycoside concentration showed significant correlation with both DPPH and ABTS scavenging indicators. This result strongly proved phenylethanoid glycosides act as the dominant antioxidant‑active constituents for Cistanche deserticolamateria prima.

3.3 Compuestos bioactivos y rendimiento antioxidante del polvo mixto bajo digestión gástrica simulada

Tres formulaciones de polvo mixto (Grupo A 1:2, Grupo B 1:1, Grupo C 2:1) presentaron patrones de fluctuación de componentes distinguibles bajo simulación de digestión gástrica. Para los polifenoles solubles: el grupo A y el grupo B experimentaron una disminución inicial seguida de un aumento del contenido a medida que se prolongaba el tiempo de digestión. El grupo C mostró una tendencia descendente sostenida de polifenoles solubles durante la incubación gástrica. Los contenidos de polisacáridos solubles, antocianinas y glucósidos feniletanoides exhibieron características de fluctuación dependientes de la proporción. En términos generales, el ambiente gástrico ácido facilitó la disolución de estas cuatro clases de fitoquímicos bioactivos de la matriz vegetal en polvo mixto.

Los resultados de las pruebas de antioxidantes revelaron que los porcentajes de eliminación de radicales de DPPH y ABTS de los tres grupos mixtos aumentaron significativamente con un tiempo de digestión gástrica prolongado (P < 0.05). Comparative analysis among three formula groups demonstrated that Group C (2:1 ratio, higher proportion of licio rutenico) alcanzaron valores de eliminación de radicales relativamente más altos después de la digestión en fase gástrica.

3.4 Compuestos bioactivos y rendimiento antioxidante del polvo mezclado bajo digestión intestinal simulada

Después de entrar en la etapa de digestión intestinal, la solubilidad de los polifenoles y glucósidos feniletanoides del polvo mixto podría mantener una tendencia creciente. Sin embargo, los contenidos detectables de polisacáridos solubles y antocianinas generalmente sufrieron pérdida de sustancia. La tasa de eliminación de radicales del DPPH disminuyó en el momento inicial de la digestión intestinal y se recuperó en el período de incubación posterior. La tasa de eliminación de radicales de ABTS presentó una tendencia descendente estadísticamente significativa para los tres grupos mixtos en la incubación de la digestión intestinal completa (P < 0.05).

Una comparación exhaustiva que considera el nivel de retención de sustancias bioactivas, así como la capacidad antioxidante integrada después de una digestión gástrica-intestinal secuencial completa, ilustró que el Grupo C con una proporción de mezcla de 2:1 (licio rutenico : Cistanche deserticola) ofrecieron un rendimiento antioxidante general superior, en comparación con el Grupo A y el Grupo B.

4. Discusión

Nuestros resultados experimentales de digestión in vitro muestran claramente que el ambiente gástrico ácido es favorable para liberar polifenoles, polisacáridos, antocianinas y glucósidos feniletanoides solubles de ambos.licio rutenicoyCistanche deserticolamatriz de polvo vegetal. Los efectos combinados de la hidrólisis ácida a bajo pH, la incubación con agitación mecánica y la pepsina proteasa pueden alterar la estructura parcial de la pared celular de la planta, lo que acelera la disolución fitoquímica intracelular en el sobrenadante de digestión acuosa. Esta mejora de la disolución mejora directamente la concentración de sustancias antioxidantes bioaccesibles y la capacidad de eliminación de radicales.

Once the digestion system transfers to neutral‑alkaline intestinal environment, different phytochemical categories behave distinct stability characteristics. Anthocyanins originating from black goji berry are well‑known pH‑sensitive molecules. Alkaline intestinal condition accelerates anthocyanin ring‑structure degradation, leading to measurable content reduction in supernatant. This observation is consistent with previous research conclusions obtained from other anthocyanin‑rich berry materials. Partial polysaccharide molecules may suffer hydrolytic cleavage under combined influence of intestinal pH and trypsin catalytic action, causing decrease of detected soluble polysaccharide concentration. On the contrary, parts of polyphenol compounds and phenylethanoid glycosides can still keep dissolving from plant residual matrix even under intestinal‑simulated incubation.

Existe una diferencia notable entre los resultados del ensayo DPPH y del ensayo ABTS. El sistema de reacción DPPH opera en circunstancias de solvente mixto orgánico-acuoso parcial y exhibe una mayor sensibilidad hacia las moléculas fenólicas lipófilas. El sistema de ensayo ABTS puede detectar compuestos antioxidantes hidrófilos y lipofílicos simultáneamente. Esta diferencia metodológica proporciona una explicación parcial de nuestro fenómeno: la digestión intestinal mejoró el rendimiento de eliminación de radicales de ABTS pero no logró promover la tasa de eliminación de DPPH. Algunas moléculas fitoquímicas originales se degradan durante la incubación simulada intestinal y producen metabolitos secundarios con potencia antioxidante alterada. Esos productos de descomposición recién generados remodelarán los resultados finales de las pruebas de eliminación de radicales.

El análisis estadístico de correlación confirma que las antocianinas sirven como principales contribuyentes antioxidantes paralicio rutenico, mientras que los glucósidos feniletanoides dominan la actividad antioxidante deCistanche deserticola. Después de la mezcla física de estos dos polvos de materia prima, estos dos conjuntos de ingredientes bioactivos característicos coexisten dentro del sobrenadante de digestión y determinan en colaboración la capacidad antioxidante total del polvo mezclado compuesto. El cribado comparativo entre tres proporciones de mezcla identifica 2:1 (licio rutenico : Cistanche deserticola) como fórmula óptima para maximizar la capacidad antioxidante in vitro después de una simulación completa de la digestión gastrointestinal.

Es esencial discutir las limitaciones intrínsecas de este modelo estático de digestión in vitro en modo discontinuo. Esta simulación de laboratorio no puede reproducir completamente los complicados procesos fisiológicos dinámicos del tracto gastrointestinal humano real. Factores como el movimiento de la peristalsis gastrointestinal, la secreción continua de jugos digestivos, la participación de sales biliares y el proceso de fermentación de la microbiota intestinal no están incluidos en la configuración experimental actual. Además, el paso de desactivación de enzimas en baño de agua hirviendo aplicado en nuestro protocolo puede inducir una pérdida menor de componentes fitoquímicos termolábiles. En este estudio se adoptó como muestra de prueba polvo grueso crudo en lugar de extractos purificados. Por lo tanto, nuestros resultados experimentales pueden actuar como datos de referencia preliminares, pero no pueden equivaler completamente a la biodisponibilidad real de sustancias dentro del cuerpo humano. Se requieren ensayos de seguimiento de alimentación animal o estudios de intervención dietética en humanos para validar aún más los efectos fisiológicos prácticos de esta fórmula compuesta en polvo.

Desde la perspectiva del desarrollo de productos industriales, esta investigación ofrece una referencia teórica para la producción de complementos alimenticios funcionales compuestos en polvo utilizando materias primas de baya de goji negra y jopo del desierto procedentes de las regiones productoras del Corredor Hexi. Durante el diseño de la formulación del producto y la evaluación de la vida útil en almacenamiento, los fabricantes deben prestar mucha atención a la propiedad de estabilidad química dependiente del pH de los componentes de antocianinas y feniletanoides-glucósidos. Se deben adoptar ajustes razonables en la formulación y control de las condiciones de almacenamiento para minimizar la degradación de los ingredientes bioactivos durante la vida útil del producto comercial.

5. Conclusiones

La digestión gástrica simulada mejora significativamente la solubilidad de los polifenoles, polisacáridos, antocianinas y glucósidos feniletanoides para ambos.licio rutenicopolvo yCistanche deserticolapolvo y simultáneamente mejora la actividad de eliminación de radicales libres de DPPH y ABTS.

En un entorno simulado de digestión intestinal, la solubilidad de los polifenoles y los glucósidos feniletanoides sigue aumentando, mientras que los contenidos detectables de polisacáridos y antocianinas disminuyen. La digestión intestinal promueve la capacidad de eliminación de radicales de ABTS, pero no muestra ningún efecto promotor positivo para la tasa de eliminación de radicales de DPPH. Los polifenoles, antocianinas y glucósidos feniletanoides presentan una correlación lineal significativa con los indicadores antioxidantes. Las antocianinas y los glucósidos feniletanoides contribuyen de manera dominante al rendimiento antioxidante de estos dos materiales vegetales del desierto.

Entre las tres proporciones de mezcla probadas, la proporción de mezcla2 : 1 (licio rutenico : Cistanche deserticola) logra la mayor capacidad antioxidante integral después de un procedimiento completo de digestión gastrointestinal simulada.

Esta investigación proporciona una base experimental fundamental para desarrollar productos alimenticios funcionales innovadores utilizando característicaslicio rutenicoyCistanche deserticolarecursos vegetales en el noroeste de China.

Expresiones de gratitud

Este trabajo recibió apoyo financiero del Proyecto de Apoyo a la Industria de la Universidad Provincial de Gansu (Subvención No. 2021CYZC-56).

Conflictos de intereses

Los autores declaran que no existe ningún conflicto de intereses.

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