Funciones emergentes de los cloroplastos epidérmicos móviles en la inmunidad de las plantas

Abstracto:

La epidermis de la planta contiene pequeños cloroplastos atípicos. Sin embargo, el papel fisiológico de este orgánulo no está claro en comparación con el de los grandes cloroplastos del mesófilo, cuya función bien conocida es la fotosíntesis. Aunque el conocimiento de la participación de los cloroplastos en la inmunidad de las plantas se ha ampliado hasta la fecha, las diferencias entre los cloroplastos epidérmicos y mesófilos están más allá del alcance de este estudio. Dado el papel de la epidermis de la planta como barrera contra el estrés ambiental, incluidos los ataques de patógenos, y la función inmunológica de los cloroplastos, la investigación de defensa de las plantas en los cloroplastos epidérmicos es un campo emergente. Estudios recientes han revelado los movimientos dinámicos de los cloroplastos epidérmicos en respuesta a patógenos fúngicos y oomicetos. Además, se han informado proteínas asociadas a cloroplastos epidérmicos y eventos celulares que están estrechamente relacionados con la resistencia epidérmica contra patógenos. En esta revisión, me he centrado en el progreso reciente en la inmunidad vegetal mediada por cloroplastos epidérmicos.

Palabras clave: cloroplasto epidérmico; movimiento de cloroplastos; estrómula; patógeno de plantas; penetración; resistencia no hospedante; defensa preinvasiva; Arabidopsis thaliana; Nicotiana benthamiana; CHUP1.

La inmunidad vegetal y la inmunidad humana son dos mecanismos de defensa diferentes, y existen diferencias obvias:

1. Diferentes patógenos contra los que luchar: las plantas resisten principalmente patógenos biológicos como bacterias, hongos y virus, mientras que la inmunidad humana resiste principalmente bacterias y virus.

2. Diferentes métodos de respuesta inmunitaria: la inmunidad vegetal se defiende principalmente contra los patógenos a través del aislamiento físico, la inhibición química y la regulación génica, mientras que la inmunidad humana resiste principalmente a los patógenos a través de macrófagos, células T y células B.

3. Especificidad inmune diferente: La inmunidad vegetal adopta el mismo método de defensa contra todos los patógenos, es decir, inmunidad no específica, mientras que la inmunidad humana es específica, capaz de reconocer y producir respuestas inmunes correspondientes contra patógenos específicos.

4. Memoria inmunológica diferente: Las plantas no tienen la capacidad de memoria inmunológica, es decir, una vez que han resistido a un determinado patógeno, aún necesitan reiniciar la respuesta inmunológica la próxima vez que se enfrenten al mismo patógeno. El sistema inmunitario humano tiene la capacidad de la memoria inmunitaria, es decir, después de resistir a un patógeno, tendrá una memoria inmunitaria a largo plazo para este patógeno, y la próxima vez que se encuentre con el mismo patógeno, podrá generar rápidamente una respuesta inmunitaria. , controlando así eficazmente el patógeno infectar. Entonces, en comparación, nuestra inmunidad humana también es muy importante. Tenemos que centrarnos en mejorar nuestra inmunidad. Cistanche deserticola puede hacerlo. Los polisacáridos de la carne pueden regular la respuesta inmunitaria del sistema inmunitario humano y mejorar la capacidad de estrés de las células inmunitarias. , Mejorar el efecto bactericida de las células inmunes.

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1. Introducción

La epidermis de los organismos multicelulares, incluidas las plantas, actúa como una barrera para proteger contra una variedad de tensiones, como cambios en el entorno externo y ataques de patógenos. Desde la perspectiva de los patógenos, atravesar las células epidérmicas de la planta es un primer paso esencial en la invasión; en particular, los patógenos fúngicos y oomicetos necesitan penetrar directamente en la epidermis de la planta y desarrollar hifas invasivas en su interior para una infección exitosa. Por ejemplo, la especie de hongo de antracnosis Colletotrichum y el hongo del añublo del arroz Pyricularia oryzae (sinónimo de Magnaporthe oryzae) forman una célula en forma de cúpula melanizada llamada apresorio en la superficie de la planta para desarrollar una clavija de penetración en la epidermis de las plantas hospedantes, seguida de una invasiva extensión hifal y el brote de enfermedad destructiva [1].

Sin embargo, si la planta no es huésped, estos patógenos fúngicos pueden formar un apresorio melanizado, pero no pueden penetrar en la célula epidérmica debido a la resistencia preinvasiva de plantas no huésped (NHR, por sus siglas en inglés), que generalmente proporciona inmunidad duradera, robusta y de amplio espectro y previene eficazmente la invasión de un gran número de hongos y oomicetos no adaptados en interacciones incompatibles [2,3]. En la planta modelo de brasicáceas Arabidopsis thaliana, se ha informado que muchas vías y componentes inmunes sustentan el despliegue de NHR epidérmico en una manera multicapa contra la entrada de patógenos fúngicos y oomicetos no adaptados, como Blumeria graminis f. sp. hordei [4–12], Colletotrichum tropicale [13–16], P. oryzae [17–22] y Phytophthora infestans [6,7]. Sin embargo, una comprensión completa de la base molecular de la NHR preinvasiva sigue siendo difícil de alcanzar. Para obtener una comprensión integral de NHR, es importante identificar eventos y componentes desconocidos relacionados con el sistema inmunológico en la epidermis de la planta.

En las plantas superiores, excepto en algunas plantas, como el tabaco, durante mucho tiempo se creyó que no existen cloroplastos en las células epidérmicas distintas de las células protectoras [23-26]. La mayoría de los estudios sobre el cloroplasto se centran en las células del mesófilo, donde numerosos cloroplastos grandes típicos están altamente diferenciados para la fotosíntesis [27–29]. Sin embargo, también se han observado pequeños cloroplastos atípicos que contienen clorofila en las células del pavimento epidérmico de A. thaliana, aunque los tilacoides, que son responsables de las reacciones de fotosíntesis dependientes de la luz, están poco desarrollados [30-36]. Por lo tanto, el papel fisiológico de los cloroplastos epidérmicos es un tema emergente en el campo de la ciencia de las plantas.

Se sabe que los cloroplastos funcionan como sensores ambientales contra múltiples estreses bióticos y abióticos [37,38]. Por ejemplo, para las respuestas inmunitarias de las plantas contra los patógenos, los mensajeros secundarios, como las especies reactivas de oxígeno (ROS) y el calcio (Ca2 plus), y los precursores de las fitohormonas, como el ácido salicílico (SA), el ácido jasmónico y el ácido abscísico, son necesarios. todos derivados de los cloroplastos [39–42]. Hay muchas reseñas excelentes sobre el papel de los cloroplastos en la inmunidad de las plantas. Refiero a los lectores a revisiones recientes, que proporcionarán una descripción general de las respuestas de defensa de las plantas relacionadas con los cloroplastos [43–47].

Sin embargo, hay muy pocos estudios de defensa de las plantas que se centren en los cloroplastos epidérmicos, y las diferencias funcionales entre los cloroplastos epidérmicos y mesófilos en el sistema inmunológico de la planta no han llamado mucho la atención. Recientemente, algunos informes demostraron la participación de los cloroplastos epidérmicos en la inmunidad de las plantas. En esta revisión, el enfoque principal está en los cloroplastos epidérmicos y se ha descrito el progreso reciente en la inmunidad epidérmica de las plantas.

2. La respuesta del cloroplasto epidérmico controla la entrada de patógenos fúngicos en A. thaliana

2.1. Movimientos intracelulares de cloroplastos epidérmicos en respuesta a patógenos fúngicos en A. thaliana

En el estado estacionario de A. thaliana, los cloroplastos epidérmicos no se observan cerca de la pared periclinal superior (superficie) de las células del pavimento, porque generalmente se ubican en las paredes periclinal inferior (fondo) y anticlinal. En un informe reciente, descubrí que los cloroplastos epidérmicos emergían en la superficie de las células del pavimento en respuesta a hongos Colletotrichum con formación de apresorio melanizado, y llamé a este fenómeno respuesta epidérmica de cloroplastos (ECR) (Figura 1) [48].

Interestingly, ECR occurs more strongly against nonadapted fungi such as the Japanese flowering cherry pathogen Colletotrichum nymphaea PL1-1-b, the cosmos pathogen Colletotrichum fioriniae CC1, and the apple pathogen Colletotrichum siamense MAF1, compared to the adapted Brassicaceae pathogen Colletotrichum higginsianum Abr1-5, which readily penetrates and infects wild-type plants of A. thaliana [48]. Furthermore, the frequency of ECR varies according to the nonadapted fungal strains; the order of ECR-inducing ability in the wild-type plant is as follows: C. nymphaea PL1-1-B > C. fioriniae CC1 > C. siamense MAF1, while two other nonadapted strains, hau tree pathogen C. siamense COC4, and cucurbit pathogen Colletotrichum orbiculare 104-T, do not trigger ECR in the wild-type plant [48]. Importantly, C. siamense COC4 and C. orbiculare 104-T sufficiently induce ECR in plants with a mutation in the PEN2 gene [48], which encodes an atypical myrosinase that works as a core preinvasive NHR contributor against many fungal and oomycete pathogens [6,9,13,17,48–50], although these two nonadapted pathogens cannot invade pen2 mutants. The frequencies of ECR in the pen2 mutant against C. fioriniae CC1 and C. siamense MAF1 are also higher than those in the wild-type plant, whereas other single mutants of immune-related genes such as EDR1, GSH1 EDS5, and CAS have little effect on ECR [48]. These results suggest that ECR is preferentially activated when PEN2-based antifungal preinvasive defense becomes ineffective in epidermal cells. Similarly, in penetration tests on multiple Arabidopsis mutants with many immune-related mutations, these five nonadapted Colletotrichum strains displayed the differential abilities to overcome preinvasive NHR in the same order as the ECR-inducing ability; C. nymphaea PL1-1-B and C. fioriniae CC1 can invade the epidermis of the wild-type plant to some degree and more of the pen2 mutant, whereas C. siamense MAF1, COC4, and C. orbiculare 104-T can break through the epidermal NHR only in the presence of pen2 mutation or with additional mutations such as edr1, gsh1, eds5, and cas (Figure 2, Redrawn from [51]) [48,51]. Thus, there is a tight link between ECR induction in plants and the invasion ability of the nonadapted Colletotrichum fungi, which implies the involvement of ECR in epidermal preinvasive NHR, because these fungal pathogens are incompatible with and definitely cannot infect A. thaliana. The contribution of ECR to preinvasive NHR is described in a later section. Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, x FOR PEER REVIEW 3 of 17 readily penetrates and infects wild-type plants of A. thaliana [48]. Furthermore, the frequency of ECR varies according to the nonadapted fungal strains; the order of ECR-inducing ability in the wild-type plant is as follows: C. nymphaea PL1-1-B > C. fioriniae CC1 >C. siamense MAF1, mientras que otras dos cepas no adaptadas, el patógeno del árbol hau C. siamense COC4 y el patógeno de cucurbitáceas Colletotrichum orbiculare 104-T, no activan la ECR en la planta de tipo salvaje [48].

Es importante destacar que C. siamense COC4 y C. orbiculare 104-T inducen suficientemente la ECR en plantas con una mutación en el gen PEN2 [48], que codifica una mirosinasa atípica que funciona como un contribuyente central de NHR preinvasivo contra muchos hongos y oomicetos. [6,9,13,17,48–50], aunque estos dos patógenos no adaptados no pueden invadir mutantes pen2. Las frecuencias de ECR en el mutante pen2 contra C. fioriniae CC1 y C. siamense MAF1 también son más altas que las de la planta de tipo salvaje, mientras que otros mutantes individuales de genes relacionados con el sistema inmunitario como EDR1, GSH1 EDS5 y CAS tienen poca respuesta. efecto sobre ECR [48]. Estos resultados sugieren que ECR se activa preferentemente cuando la defensa preinvasiva antifúngica basada en PEN2-se vuelve ineficaz en las células epidérmicas.

De manera similar, en las pruebas de penetración en múltiples mutantes de Arabidopsis con muchas mutaciones relacionadas con el sistema inmunitario, estas cinco cepas de Colletotrichum no adaptadas mostraron capacidades diferenciales para superar la NHR preinvasiva en el mismo orden que la capacidad de inducir ECR; C. nymphaea PL1-1-B y C. fioriniae CC1 pueden invadir la epidermis de la planta de tipo salvaje hasta cierto punto y más del mutante pen2, mientras que C. siamense MAF1, COC4 y C. orbiculare {{8 }}T puede atravesar el NHR epidérmico solo en presencia de la mutación pen2 o con mutaciones adicionales como edr1, gsh1, eds5 y cas (Figura 2, Redibujado de [51]) [48,51]. Por lo tanto, existe un estrecho vínculo entre la inducción de ECR en plantas y la capacidad de invasión de los hongos Colletotrichum no adaptados, lo que implica la participación de ECR en NHR epidérmico preinvasivo, porque estos patógenos fúngicos son incompatibles y definitivamente no pueden infectar a A. thaliana. La contribución de ECR al NHR preinvasivo es que los mutantes de Arabidopsis no hospedantes se evaluaron en función de las tasas de entrada mediada por apresorio melanizado (MAE) y se clasificaron. La tasa de MAE (porcentaje) se calculó usando la siguiente fórmula numérica: (el número de apresorios melanizados con formación de hifa invasiva)/(el número de apresorios melanizados). Adaptado C. higginsianum Abr1-5 (MAFF305635) se muestra como control. El porcentaje de pruebas de entrada de hongos como "−", " plus /−", " plus ", " plus plus ", " plus plus plus " y " plus plus plus plus " es 0–2 por ciento , 2–10 por ciento , 10–20 por ciento, 20–35 por ciento, 35–60 por ciento y 60–100 por ciento, respectivamente. nd: no determinado. Adaptado de [51].

ECR no es específico de Colletotrichum. Los cloroplastos epidérmicos también emergen en la superficie después de la inoculación con el patógeno no adaptado P. oryzae, que muestra una invasión de plantas de tipo de entrada mediada por apresorio (MAE) melanizada pero está filogenéticamente relacionado lejanamente con Colletotrichum [48]. La frecuencia de ECR inducida por P. oryzae también aumenta en el mutante pen2. Por lo tanto, ECR puede ser una respuesta epidérmica de amplio espectro a una amplia variedad de patógenos fúngicos. Esta idea es consistente con el nuevo hallazgo de que el hongo no adaptado Alternaria alternata, que no es un patógeno de tipo MAE y forma conidios melanizados, también induce ECR en el A. thaliana que no es huésped, especialmente en presencia de la mutación pen2 (Figura 3) .

2.2. El desencadenante de la respuesta del cloroplasto epidérmico

Aunque la forma en que la epidermis de la planta reconoce los patógenos fúngicos e induce la ECR sigue siendo una pregunta abierta, algunos datos indican una correlación fascinante entre las características relacionadas con el ensayo de entrada de hongos y la inducción de la ECR [48]. Algunas de las moléculas derivadas de patógenos bien estudiadas son patrones moleculares asociados a patógenos/microbios (PAMP/MAMP), que están muy conservados entre los patógenos de amplio espectro y contribuyen a su viabilidad [52]. Los patrones moleculares asociados al daño (DAMP), moléculas derivadas del huésped como Pep1 liberadas extracelularmente durante la invasión de patógenos, también son señales de respuestas inmunitarias innatas [53]. Los PAMP/DAMP son reconocidos por los receptores de reconocimiento de patrones de plantas (PRR), y la inmunidad desencadenada por PAMP/DAMP se inicia a través de proteínas asociadas a PRR, como RLP 23 y RLP30, proteínas similares a receptores integrados en membrana (RLP), FLS2 y BAK1 , quinasas tipo receptor incrustadas en la membrana (RLK), y BIK1 y PBL1, quinasas citoplasmáticas tipo receptor (RLCK) [54–61].

Varios investigadores han publicado revisiones excepcionales sobre la señalización de PRR en la inmunidad de las plantas [62–65]. Curiosamente, ECR no depende de BAK1, BIK1, PBL1, RLK de detección de Pep1-, PEPR1 y PEPR2; por lo tanto, los eventos de señalización de PAMP y/o DAMP, al menos aquellos mediados por estos RLK y RLCK, no están involucrados en la inducción de ECR [48]. Además, la cuantificación de ECR en la planta mutante pen2 frente a múltiples mutantes de C. orbicular deficientes en diferentes pasos de la morfogénesis relacionada con la invasión reveló que la formación de la clavija de penetración, una estructura fúngica en forma de aguja que emerge del apresorio para entrar con éxito en la planta epidermis, es esencial para la inducción de ECR [48].

Los hongos patógenos de plantas y los oomicetos secretan un arsenal de proteínas de virulencia, llamadas efectores, para manipular los procesos celulares de las plantas e inducir la supresión inmunológica. Se han publicado numerosas revisiones sobre los efectores de los patógenos vegetales [66–70]. En Colletotrichum, las proteínas efectoras marcadas con fluorescencia se acumulan preferentemente en el poro inferior del apresorio para la secreción a través de la clavija de penetración [71,72]. Esta secreción efectora depende de la ruta de tráfico intracelular mediada por v-SNARE SEC22-en el hongo [72] y, curiosamente, se correlaciona con la inducción de ECR [48]. Estas observaciones apuntan a los siguientes candidatos potenciales como desencadenantes de ECR: (i) molécula(s) derivada(s) de patógenos secretada(s) por la clavija de penetración durante los ensayos de entrada de hongos y (ii) señal(es) derivada(s) de plantas generadas en respuesta al grado de Progresión fúngica en el intento de penetración. La ECR es un evento universal contra muchos tipos de patógenos fúngicos, incluidas las especies de Colletotrichum, P. oryzae y A. alternata (Figura 3) [48]. Por lo tanto, los efectores típicos que se limitan a un rango estrecho de patógenos fúngicos por su especificidad de huésped podrían no ser una señal de ECR; más bien, las enzimas comunes que degradan la pared celular o los efectores centrales altamente conservados de una amplia gama de hongos patógenos o las señales de daño de las plantas no asociadas con Pep1 podrían desencadenar la ECR en la epidermis de las plantas.

2.3. Los reguladores de la respuesta de los cloroplastos epidérmicos y la resistencia preinvasiva no hospedante de Arabidopsis

Los cloroplastos grandes del mesófilo muestran movimientos intracelulares basados ​​en la intensidad de la luz para una fotosíntesis segura y eficiente; escapan de la luz fuerte y migran a las paredes anticlinales de la célula para evitar el fotodaño (respuesta de evitación) y se mueven hacia la luz débil y se asientan en las paredes periclinales para aumentar la eficiencia fotosintética (respuesta de acumulación). Muchas proteínas reguladoras de este fenómeno adaptativo, llamados movimientos de fotorrelocación de cloroplastos, se han identificado dentro de las células del mesófilo [73]. Sin embargo, existen pocos informes y se sabe poco sobre los componentes que controlan el movimiento intracelular de los cloroplastos epidérmicos [74,75]. En este contexto, recientemente demostré que ECR en células epidérmicas comparte proteínas reguladoras comunes con los movimientos de fotorreubicación del cloroplasto del mesófilo [48]. La proteína de unión a actina CHUP1 genera una fuerza motriz basada en cloroplasto-actina y es esencial para las respuestas de acumulación y evitación [76–78], mientras que la proteína JAC1 del dominio J similar a la auxilina regula la aparición y desaparición de los filamentos de cloroplasto-actina y se requiere para la respuesta de acumulación [79]. La A. thaliana genéticamente modificada muestra que la sobreexpresión de las proteínas CHUP1 provoca una fuerte supresión de la ECR.

Normalmente, los cloroplastos epidérmicos apenas se detectan en la superficie, incluso después de la inoculación con patógenos fúngicos no adaptados [48]. Sin embargo, la sobreexpresión de JAC1 o la eliminación de CHUP1 conduce al posicionamiento constitutivo de los cloroplastos epidérmicos en la superficie, independientemente de la inoculación fúngica [48]. Por lo tanto, CHUP1 y JAC1 regulan negativa y positivamente, respectivamente, el posicionamiento de los cloroplastos epidérmicos en la superficie de las células del pavimento (Figura 4). Cabe señalar que la inoculación del mutante chup1 con altas concentraciones de hongos no adaptados solo aumentó ligeramente la población de cloroplastos superficiales, lo que sugiere el deterioro de ECR por el agotamiento de la proteína CHUP1. Por el contrario, las fototropinas 1 y 2, que son receptores de luz azul responsables de los movimientos de fotorreubicación de los cloroplastos [80–82], son prescindibles para la activación de ECR [48]. Por lo tanto, la ubicación de la foto del cloroplasto y la ECR tienen diferentes sistemas de reconocimiento de estímulos para la luz y los patógenos, respectivamente, pero comparten al menos algunos componentes reguladores aguas abajo. Desde el punto de vista de las diferencias entre el mesófilo y los cloroplastos epidérmicos, la versatilidad de los sistemas adaptativos frente a diferentes estreses ambientales podría reflejar la elaborada estrategia de supervivencia de la planta.

Si ECR contribuye a la inmunidad de las plantas en las células epidérmicas de A. thaliana es una pregunta fascinante. Para aclarar la participación de ECR en NHR preinvasivo, se han investigado los efectos de las deficiencias de ECR al sobreexpresar o agotar las proteínas CHUP1 en la tasa de MAE de múltiples hongos no adaptados en la epidermis de la planta [48]. C. nymphaea PL1-1-B, que exhibió una incompatibilidad relativamente menor con A. thaliana en comparación con otros hongos no adaptados, mostró una mayor tasa de MAE en plantas con problemas de ECR (Figura 2) [48]. Además, en plantas con pen2 u otras mutaciones adicionales como edr1, gsh1, eds5 y cas, un aumento o disminución en los niveles de proteínas CHUP1 promovió la tasa de MAE de C. fioriniae CC1, C. siamense MAF1, COC4 y C orbicular 104-T (Figura 2) [48]. Se obtuvieron resultados similares para la tasa MAE de P. oryzae. En consecuencia, la ECR es una respuesta al estrés de la planta, mediante la cual se potencia el NHR preinvasivo en las células epidérmicas cuando los patógenos fúngicos intentan invadir a través de la clavija de penetración.

Como se ha descrito, ECR se activa preferentemente en ausencia de una vía de defensa relacionada con PEN2-. De manera similar, la inoculación de C. fioriniae CC1 no adaptada también indujo la expresión de muchos genes relacionados con la defensa, como PAD3, CYP79B2, CYP71A13, PDF1.2a, MYB51, PR1, FRK1 y NHL10, solo en el caso de la mutación pen2. aunque el umbral para la ECR fue menor que el de la expresión de estos genes [48]. Basado en la estructura en capas del NHR de la planta, ECR es una de las respuestas de defensa que está programada para respaldar el NHR preinvasivo cuando las vías involucradas en la defensa preinvasiva de capa superior, incluidas las vías relacionadas con PEN2-, son ineficaces [ 48,51].

Esto es consistente con la relación entre A. thaliana y el patógeno no adaptado incompatible inferior C. nymphaea PL1-1-B, que supera en parte las defensas preinvasoras de capa alta [51]; C. nymphaea PL1-1-B activa fuertemente la ECR y también induce genes relacionados con la defensa en la planta de tipo salvaje [48]. Se supone que existen en la naturaleza varios hongos fitopatógenos, como C. nymphaea PL1-1-B, que superan en parte las defensas preinvasoras de la capa superior de A. thaliana. Por lo tanto, las plantas han desarrollado ECR como uno de los mecanismos de NHR epidérmico contra este tipo de patógenos fúngicos (Figura 4).

3. Los componentes inmunitarios localizados en cloroplastos epidérmicos contribuyen a la resistencia preinvasiva antifúngica no hospedante de Arabidopsis

3.1. La localización preferencial de componentes relacionados con la inmunidad a los cloroplastos epidérmicos móviles en A. thaliana

Cómo ECR contribuye a NHR preinvasivo contra patógenos fúngicos no adaptados queda por dilucidar por completo. Las imágenes de células vivas de fluorescencia revelaron que los componentes relacionados con el sistema inmunitario, como la -glutamilcisteína sintetasa GSH1, el receptor de detección de Ca2 plus CAS, el transportador de la familia MATE EDS5, la isocorismato sintasa ICS1/SID2 y la aminotransferasa ALD1, se localizaron en los pequeños cloroplastos epidérmicos (Figura 4) [15,48,83–86]. Curiosamente, las señales fluorescentes de estos componentes en los cloroplastos epidérmicos son mucho más fuertes que las de los cloroplastos grandes del mesófilo [48,83,85,86]. En células del pavimento activadas con ECR después de la inoculación con CC1 de C. fioriniae no adaptada, se encontró que las proteínas GSH1, EDS5 y CAS se localizaban en el área de la superficie junto con los cloroplastos epidérmicos móviles, lo que sugiere un estrecho vínculo entre la ECR y el posicionamiento intracelular de estos. componentes inmunes [48]. Estas observaciones podrían reforzar la importancia de los cloroplastos epidérmicos en la inmunidad de las plantas

3.2. Componentes inmunitarios localizados en cloroplastos epidérmicos y defensa preinvasiva en A. thaliana

GSH1 contribuye a la defensa de la planta a través de la biosíntesis de glutatión en interacciones A. thaliana-patógeno compatibles e incompatibles [15,87]. CAS está involucrado en la señalización transitoria de Ca2 plus en los cloroplastos durante la inmunidad de la planta [88], y el efector fúngico dirigido a CAS de Sclerotinia sclerotiorum interfiere con la señalización de SA en la planta huésped [89]. ICS1/SID2 y EDS5 son necesarios para la biosíntesis y el transporte de precursores de SA, respectivamente, durante la respuesta inmunitaria de la planta [85,90,91]. El estrecho vínculo entre estos componentes inmunes y los cloroplastos epidérmicos implica su participación en la NHR epidérmica contra los patógenos fúngicos que desencadenan la ECR. Se han demostrado las contribuciones de GSH1, CAS, EDS5 e ICS1/SID2 al NHR preinvasivo contra hongos no adaptados; C. nymphaea PL1-1-B mostró un aumento de MAE en la epidermis de los mutantes únicos gsh1, cas y eds5 en comparación con la planta de tipo salvaje [51], mientras que los efectos similares de estas mutaciones en MAE de C. fioriniae CC1, C. siamense MAF1 y P. oryzae se observaron en cada mutante doble con mutación pen2 (Figura 2) [48].

Las mayores tasas de MAE de C. siamense COC4 y C. orbiculare 104-T más incompatibles se confirmaron en plantas mutantes pen2 con múltiples mutaciones en genes relacionados con el sistema inmunitario (Figura 2) [48]. Por lo tanto, los efectos pen2-dependientes de estos genes mutados, que codifican proteínas epidérmicas localizadas en los cloroplastos, se correlacionan con la ECR desencadenada por cada patógeno fúngico. Este estudio propone que las células epidérmicas de Arabidopsis implementen una respuesta inmunitaria centrada en ECR, en la que el reposicionamiento intracelular de proteínas relacionadas con el sistema inmunitario podría mejorar el NHR antifúngico (Figura 4) [48]. La proteína específica del cloroplasto epidérmico, ALD1, es esencial para la resistencia local a enfermedades y la resistencia sistémica adquirida frente a patógenos bacterianos tanto virulentos como avirulentos, y ejerce su efecto controlando la acumulación de SA [86,92–94]. En el futuro, se debe dilucidar si ALD1 también funciona en el NHR preinvasivo contra patógenos fúngicos.

4. Los cloroplastos epidérmicos se acumulan en la interfaz con el patógeno oomiceto y se requiere CHUP1 para la resistencia a la penetración en Nicotiana benthamiana

4.1. Acumulación focal de cloroplastos epidérmicos en la interfaz con el patógeno oomiceto en N. benthamiana

El papel de los cloroplastos epidérmicos en respuesta al oomiceto patógeno P. infestans también se ha estudiado en la planta solanácea modelo N. benthamiana [95–97]. En esta sección, menciono investigaciones recientes sobre la dinámica de los movimientos de los cloroplastos epidérmicos y la participación de CHUP1 en la inmunidad de actinomicetos, aunque existe ambigüedad con respecto a las características adaptativas o no adaptativas de P. infestans a N. benthamiana, que muestra una resistencia ambigua relacionada con la edad. a P. infestans; las plantas maduras son resistentes, mientras que las plantas jóvenes son susceptibles [98].

Durante la respuesta de N. benthamiana a P. infestans, los cloroplastos epidérmicos muestran movimientos intracelulares y se acumulan en la interfaz con el haustorio del patógeno, hifas especializadas relacionadas con la infección, de manera independiente de BAK1- (Figura 5) [96] . Por lo tanto, se ha propuesto inmunidad focal mediada por cloroplastos epidérmicos en N. benthamiana-P. patosistema infestans. Se observó un fenómeno similar en las células activadas por ECR de A. thaliana durante la respuesta antifúngica; sin embargo, la mayoría de los cloroplastos de la superficie se dispersaron en el caso de ECR y, al menos bajo el microscopio, no se asociaron con la interfaz del patógeno [48]. Dado que el cloroplasto epidérmico de N. benthamiana generalmente se detecta en el área superficial de las células del pavimento, independientemente de la inoculación del patógeno, los mecanismos de trabajo de los cloroplastos epidérmicos en respuesta a los ataques de patógenos no fueron del todo iguales entre A. thaliana y N. benthamiana.

Además, la ECR relacionada con CHUP1-y la acumulación focal de cloroplastos epidérmicos en los sitios de penetración de hongos pueden ser eventos independientes en A. thaliana porque la acumulación de cloroplastos epidérmicos específica de la interfaz del patógeno en N. benthamiana es CHUP{{2} }independiente (Figura 5) [97]. En este contexto, queda por dilucidar si una parte de los cloroplastos epidérmicos de A. thaliana, que se acumulan focalmente en los sitios de penetración de hongos, tiene un papel distinto de los cloroplastos epidérmicos asociados a ECR, así como en N .benthamiana.

4.2. CHUP1-Deposición de calosa dependiente en el sitio de penetración de los oomicetos durante la resistencia epidérmica de N. benthamiana

Salvaje et al. informaron que el posicionamiento de los cloroplastos epidérmicos en la interfaz entre N. benthamiana y los haustorios de P. infestans se produjo independientemente de CHUP1 [97], que era ligeramente diferente de Arabidopsis ECR [48]. Sin embargo, demostraron que se requiere CHUP1 para la resistencia a la penetración en células epidérmicas de N. benthamiana contra P. infestans [97]. El silenciamiento o eliminación de dos alelos CHUP1 en N. benthamiana aumenta la susceptibilidad a P. infestans, mientras que la acumulación de cloroplastos epidérmicos alrededor de los haustorios no se ve afectada en el mutante desactivado en CHUP1 (chup1) [97]. El mutante chup1 de Arabidopsis también mostró una disminución del NHR preinvasivo contra MAE de patógenos fúngicos no adaptados [48], lo que sugiere la importancia de la proteína CHUP1 asociada al cloroplasto en la inmunidad de la planta epidérmica contra patógenos fúngicos y oomicetos.

Curiosamente, la deposición de calosa focal en los haustorios de P. infestans, que es una de las respuestas de defensa de la planta, depende de CHUP1-, lo que sugiere que la proteína CHUP1 asociada al cloroplasto contribuye a la inmunidad epidérmica contra el patógeno oomiceto al mejorar resistencia a la penetración a través de la deposición callosa (Figura 5) [97]. La pregunta clave es cómo existe el vínculo entre esta deposición de calosa y la acumulación focal de los cloroplastos epidérmicos en la interfaz del patógeno porque CHUP1 es una proteína asociada a los cloroplastos. Al respecto, Savage et al. no mostró correlación entre la deposición de calosa y la presencia de cloroplastos alrededor del haustorio [97]. De acuerdo con este hallazgo, en A. thaliana-C. interacción orbicular incompatible, el depósito de calosa no se correlaciona con la activación de ECR; la callosa se deposita suficientemente en los sitios de intentos de penetración de patógenos en la planta de tipo salvaje, donde la ECR apenas se activa debido a una función previa de defensa preinvasiva de capa alta [48]. La eliminación del gen CHUP1 en N. benthamiana no afecta otros procesos inmunitarios centrales, como la fosforilación de MAPK desencadenada por PAMP, la muerte celular similar a la respuesta hipersensible (HR) inducida por MEK2DD constitutivamente activa y la muerte celular HR desencadenada por efectores [97].

Por lo tanto, Savage et al. especuló que en el CHUP1-knockout N. benthamiana, la reducción en la producción de moléculas derivadas del cloroplasto epidérmico, como los precursores de ROS y SA, podría causar el deterioro de la acumulación de calosa alrededor del haustorio. Tampoco excluyeron la posibilidad de que las imágenes instantáneas no reflejaran con precisión la participación de la movilización de cloroplastos epidérmicos en los haustorios en la deposición de callosa focal, porque los cloroplastos pueden haberse alejado de los haustorios después de la deposición de callosa [97]. Espero que la investigación futura aclare el mecanismo regulador de la deposición de calosa en la interfaz del patógeno a través de CHUP1 asociado al cloroplasto en N. benthamiana, y lo compare con las respuestas inmunitarias relacionadas con el cloroplasto epidérmico en A. thaliana.

5. Morfología dinámica de cloroplastos epidérmicos e interacciones entre orgánulos en la inmunidad vegetal

5.1. Formación, agrandamiento y formación de cavidades de Stromule

El mesófilo y los cloroplastos epidérmicos desarrollan extensiones tubulares dinámicas llamadas estrómulas, que se llenan de estroma [99]. En las células epidérmicas de N. benthamiana, las estrómulas aumentan durante las inmunidades antiviral y antibacteriana, donde se produce la muerte de las células HR desencadenadas por efectores [95]. N. benthamiana también induce la formación de estrómulas durante la inmunidad desencadenada por PAMP contra el oomiceto INF1 además de flg22 bacteriano y quitina fúngica de manera dependiente de BAK1- [95,96]. Curiosamente, la inducción de estromula es suprimida por el efector AVR3a de P. infestans [96]. La inducción de estromulas en los cloroplastos epidérmicos también se observó durante la inmunidad antibacteriana en A. thaliana [95]. En conjunto, estas observaciones implican la posible participación de stromules en las respuestas de defensa de las plantas. Es importante destacar que los movimientos de los cloroplastos y las conexiones con otros orgánulos, como los núcleos, están mediados por estromules durante la respuesta inmune de la planta [95,100]. Además, las estrómulas pueden transportar la molécula de señalización relacionada con la defensa ROS y la proteína de defensa del cloroplasto NRIP1 al núcleo en N. benthamiana [95,101]. NRIP1 es necesario para la resistencia antiviral en N. benthamiana [102]. Las proteínas relacionadas con el sistema inmunitario GSH1, EDS5 y CAS también se localizan en las estrómulas que se extienden desde los cloroplastos epidérmicos en A. thaliana, aunque la señal de localización de la proteína tilacoide CAS en las estrómulas es más débil que la de las otras dos proteínas y puede ser un artefacto. de sobreexpresión [48].

Por lo tanto, en las células epidérmicas, los componentes relacionados con el sistema inmunitario pueden alterar dinámicamente su posicionamiento a través de los movimientos de los cloroplastos y expandir aún más su ubicación hacia el exterior de los cloroplastos a través de estromulas durante las respuestas inmunitarias. Sin embargo, también es muy controvertido si el aumento de las estrómulas tiene efectos positivos sobre la resistencia a los antimicrobianos. Caplán et al. informó que los mutantes de N. benthamiana y Arabidopsis chup1 silenciados por el gen CHUP1 mostraron un aumento de estrómulas, que se visualizaron con la proteína de fusión NRIP1-GFP, en ausencia de patógenos y promovieron la muerte de células HR desencadenada por efectores durante la respuesta inmune antiviral y antibacteriana [95]. Por el contrario, Savage et al. demostraron que los mutantes chup1 de N. benthamiana y A. thaliana exhibieron una disminución de las estrómulas, que se visualizaron con GFP, en ausencia de patógenos [97].

Además, el mutante chup1 de N. benthamiana puede inducir suficientemente la formación de estromulas cuando se enfrenta a P. infestans, a pesar de su mayor susceptibilidad a este patógeno [97]. También se ha informado una disminución del NHR preinvasivo en Arabidopsis con una mutación chup1 contra patógenos fúngicos de tipo MAE [48]. Estas discrepancias pueden ser explicadas en futuros estudios. Cabe señalar que, en la inmunidad de las plantas, la inducción de estromulas y los movimientos de los cloroplastos, como la ECR y la acumulación focal en la interfaz del patógeno, son eventos más relacionados pero diferentes, ya que la primera depende de la quinasa de señalización BAK1 de PAMP, mientras que la segunda no. Por lo tanto, distintas señales derivadas de patógenos pueden integrarse a través de un sistema epidérmico centrado en el cloroplasto para armonizar las respuestas de defensa.

Los cloroplastos epidérmicos son considerablemente más pequeños que los cloroplastos del mesófilo. Sin embargo, curiosamente, se pudieron observar cloroplastos epidérmicos agrandados en células activadas por ECR, y la población de cloroplastos agrandados aumentó gradualmente durante la incubación con los patógenos fúngicos no adaptados (Figura 6). No se observaron cloroplastos agrandados en la etapa temprana de la ECR. Se confirmó la formación de cavidades dentro de los cloroplastos epidérmicos agrandados (Figura 6). La importancia fisiológica de estos cambios en la morfología de los cloroplastos epidérmicos durante la ECR actualmente no está clara, pero los cloroplastos epidérmicos pueden mejorar el NHR preinvasivo a través de estos eventos adicionales en la última etapa de la ECR. Alternativamente, la morfología de los organelos de las plantas podría verse afectada por efectores de patógenos, ya que se ha informado que la expresión transitoria de las proteínas efectoras de Colletotrichum conduce al agrandamiento de los núcleos en las células epidérmicas de N. benthamiana [103]. Si tales expansiones de organelos se encuentran entre las estrategias de infección de patógenos a través de efectores, es consistente con el hecho de que muchos efectores de patógenos ingresan a los cloroplastos y se dirigen a las proteínas localizadas en los cloroplastos [46,47].

5.2. Agrupación perinuclear de cloroplastos epidérmicos y movimientos nucleares

Se sabe que los cloroplastos se agrupan alrededor del núcleo para la comunicación entre orgánulos, donde se produce la transmisión de señales retrógradas en respuesta a diversas tensiones ambientales (37,38,104-106). En las respuestas de defensa de N. benthamiana, se ha informado la señalización de ROS retrógrado desde cloroplastos de agrupamiento perinuclear al núcleo a través de estrómulas (95); lo mismo ha sido propuesto en A. thaliana (88,107,108). Curiosamente, la pérdida del gen CHUP1 conduce a un aumento de la agrupación perinuclear de cloroplastos epidérmicos tanto en N. bnethamiana como en A. thaliana (97. También se observó agrupación perinuclear de cloroplastos epidérmicos durante la ECR de Arabidopsis después de la inoculación del patógeno o en CHUP1- condiciones de agotamiento sin patógeno [48].Por lo tanto, estas dos especies de plantas tienen mecanismos reguladores similares para controlar la agrupación perinuclear de los cloroplastos epidérmicos, en los que CHUP1 muestra efectos negativos.Dado el deterioro de la ECR y el NHR preinvasivo por el posicionamiento superficial constitutivo de cloroplastos epidérmicos en el mutante chup1 de A. thaliana [48], una mayor agrupación perinuclear de cloroplastos epidérmicos también podría deteriorarse funcionalmente. De acuerdo con esta idea, CHUP1-knockout N. benthamiana es más susceptible a P. infestans [97] .

El movimiento nuclear inducido por la luz en el mesófilo de Arabidopsis y en las células del pavimento epidérmico depende de CHUP1-[74,78]. CHUP1 se localiza específicamente en la envoltura de los cloroplastos, pero no en los núcleos, y regula los movimientos de los cloroplastos; por lo tanto, el movimiento intracelular mediado por CHUP1-de los cloroplastos epidérmicos es una fuerza motriz para el movimiento nuclear en respuesta a la luz fuerte [74,78]. De manera similar, los núcleos, junto con los cloroplastos agrupados perinucleares, migran al área superficial durante la ECR en A. thaliana, lo que está estrechamente relacionado con la cantidad de proteínas CHUP1 [48]. El retículo endoplásmico perinuclear también se reposiciona en la superficie epidérmica durante la ECR [48]. En N. benthamiana, el núcleo se desplaza hacia los sitios de penetración del oomiceto P. infestans [96,109]. Esto también se observa en otros patosistemas de plantas que utilizan patógenos fúngicos y oomicetos [110-112]. La acumulación focal del núcleo no estuvo influenciada por el aumento de la agrupación perinuclear de cloroplastos epidérmicos en CHUP1-knockout N. benthamiana [97]. Dado que la sobreexpresión y el agotamiento de las proteínas CHUP1 tienen efectos opuestos en los movimientos de los cloroplastos epidérmicos durante la ECR de Arabidopsis, sería interesante determinar si la sobreexpresión de CHUP1 en N. benthamiana suprime la agrupación perinuclear de los cloroplastos epidérmicos y, por lo tanto, si la acumulación focal de la el núcleo en la interfase de P. infestans está perturbado.

6. Conclusiones

La importancia de la función de los cloroplastos en la inmunidad de las plantas es ampliamente reconocida. La investigación que se centra en los tipos de cloroplasto ahora está surgiendo en el campo de las respuestas antimicrobianas. Dada la función de la epidermis de la planta como un bastión principal para repeler al enemigo, como los patógenos fúngicos y oomicetos con capacidad de penetración directa, los cloroplastos atípicos epidérmicos son un tema de investigación ideal debido a su pequeña cantidad de información en comparación con los cloroplastos mesófilos típicos bien conocidos. .

En particular, estudios recientes han revelado un vínculo entre la dinámica intracelular de los cloroplastos epidérmicos y la inmunidad epidérmica de las plantas, donde la ECR, la acumulación focal de cloroplastos epidérmicos en la interfaz del patógeno, la formación de estromulas, la comunicación entre orgánulos y otros procesos podrían orquestarse para mejorar la resistencia a los antimicrobianos [48,95–97,113]. CHUP1 localizado en cloroplastos, que se identificó originalmente como un regulador de los movimientos de fotorreubicación de cloroplastos en las células del mesófilo [76], tiene una función clave en los eventos epidérmicos relacionados con el cloroplasto en respuesta a patógenos. JAC1, un regulador de la respuesta de acumulación fotoinducida de los cloroplastos, también participa en el posicionamiento intracelular de los cloroplastos epidérmicos durante la ECR [48]. Para comprender el mecanismo que subyace a la inmunidad epidérmica a través de respuestas centradas en cloroplastos móviles, se necesita más análisis sobre cuáles y cómo los componentes empleados en el sistema de fotorreubicación de cloroplastos contribuyen a las respuestas de defensa en la epidermis de las plantas.

Fondos:

Esta investigación fue financiada por JSPS KAKENHI Grant Numbers 15K18648, 18K05643 y 21H02194, y por el programa Leading Initiative for Excellent Young Researchers (LEADER) de MEXT.

Expresiones de gratitud:

Agradezco a Yoshitaka Takano por su ayuda y útiles debates.

Conflictos de interés:

El autor declara que no hay conflicto de interés.

Referencias

1. Kubo, Y.; Furusawa, I. Biosíntesis de melanina: requisito previo para la invasión exitosa de la planta huésped por appressoria de Colle-totrichum y Pyricularia. En La espora fúngica y la iniciación de enfermedades en plantas y animales; Cole, GT, Hoch, HC, Eds.; Plenum Publishing: Nueva York, NY, EE. UU., 1991; págs. 205–217.

2. Brezo, resistencia a MC Nonhost y defensas vegetales inespecíficas. actual Opinión Biol. vegetal 2000, 3, 315–319. [Referencia cruzada]

3. Lee, H.-A.; Lee, H.-Y.; Seo, E.; Lee, J.; Kim, S.-B.; Oh, S.; Choi, E.; Choi, E.; Lee, SE; Choi, D. Comprensión actual de la resistencia de plantas no hospedantes. mol. Interacción planta-microbio. 2017, 30, 5–15. [Referencia cruzada] [PubMed]

4. Collins, Carolina del Norte; Thordal-Christensen, H.; Lipka, V.; Bau, S.; Kombrink, E.; Qiu, J.-L.; Hckelhoven, R.; Stein, M.; Freialdenhoven, A.; Somerville, Carolina del Sur; et al. Resistencia a enfermedades mediada por la proteína SNARE en la pared celular de la planta. Naturaleza 2003, 425, 973–977. [Referencia cruzada] [PubMed]

5. Jacobs, Alaska; Lipka, V.; Burton, R.; Panstruga, R.; Strizhov, N.; Schulze-Lefert, P.; Fincher, GB Se requiere una callosa sintasa de Arabidopsis, GSL5, para la formación de callosas en heridas y papilares. Célula vegetal 2003, 15, 2503–2513. [Referencia cruzada]

6. Lipka, V.; Dittgen, J.; Bednarek, P.; Bat, R.; Wiermer, M.; Stein, M.; Landtag, J.; Brandt, W.; Rosahl, S.; Scheel, D.; et al. Las defensas previas y posteriores a la invasión contribuyen a la resistencia del no huésped en Arabidopsis. Ciencia 2005, 310, 1180–1183. [Referencia cruzada] [PubMed]

7. Stein, M.; Dittgen, J.; Sánchez-Rodríguez, C.; Hou, B.-H.; Molina, A.; Schulze-Lefert, P.; Lipka, V.; Somerville, S. Arabidopsis PEN3/PDR8, un transportador de casete de unión a ATP, contribuye a la resistencia de los no huéspedes a patógenos inapropiados que ingresan por penetración directa. Célula vegetal 2006, 18, 731–746. [Referencia cruzada] [PubMed]

8. Jensen, MK; Hagedorn, PH; de Torres-Zabala, M.; Subvención, MR; peldaño, JH; Collinge, DB; Lyngkjaer, MF La regulación transcripcional por un factor de transcripción NAC (NAM-ATAF1,2-CUC2) atenúa la señalización ABA para una defensa basal eficiente contra Blumeria graminis f. sp. hordei en Arabidopsis. Planta J. 2008, 56, 867–880. [Referencia cruzada] [PubMed]

9. Bednarek, P.; Pi´slewska-Bednarek, M.; Svatoš, A.; Schneider, B.; Doubsky, J.; Mansurova, M.; Humphry, M.; Consonni, C.; Panstruga, R.; Sánchez-Vallet, A.; et al. Una Vía de Metabolismo de Glucosinolatos en Células Vegetales Vivas Media la Defensa Antifúngica de Amplio Espectro. Ciencia 2009, 323, 101–106. [Referencia cruzada]

10. Pinosa, F.; Buhot, N.; Kwaaitaal, M.; Fahlberg, P.; Thordal-Christensen, H.; Ellerström, M.; Andersson, MX La fosfolipasa Dδ de Arabidopsis está involucrada en la defensa basal y la resistencia de los no huéspedes a los hongos del mildiú polvoroso. Fisiol vegetal. 2013, 163, 896–906. [Referencia cruzada]

11. Campe, R.; Langenbach, C.; Leissing, F.; Popescu, G.; Popescu, Carolina del Sur; Goellner, K.; Beckers, GJM; Conrath, U. El transportador ABC PEN 3/ PDR 8/ ABCG 36 interactúa con la calmodulina que, como PEN 3, se requiere para la resistencia de Arabidopsis que no es huésped. Fitol nuevo. 2015, 209, 294–306. [Referencia cruzada]

12. Nielsen, ME; Jürgens, G.; Thordal-Christensen, H. VPS9a activa la GTPasa ARA7 de Rab5 para conferir inmunidad innata de plantas pre y posinvasiva distinta. Célula vegetal 2017, 29, 1927–1937. [Referencia cruzada] [PubMed]

13. Hiruma, K.; Onozawa-Komori, M.; Takahashi, F.; Asakura, M.; Bednarek, P.; Okuno, T.; Schulze-Lefert, P.; Takano, Y. Modo de entrada: función dependiente de una vía de glucosinolato de indol en Arabidopsis para la resistencia de los no huéspedes contra los patógenos de la antracnosis. Célula vegetal 2010, 22, 2429–2443. [Referencia cruzada]

14. Hiruma, K.; Nishiuchi, T.; Kato, T.; Bednarek, P.; Okuno, T.; Schulze-Lefert, P.; Takano, Y. Arabidopsis LA RESISTENCIA A LA ENFERMEDAD MEJORADA 1 es necesaria para la expresión de defensinas vegetales inducida por patógenos en la resistencia no hospedante y actúa a través de la interferencia de la función represora mediada por MYC2-. Planta J. 2011, 67, 980–992. [Referencia cruzada] 15. Hiruma, K.; Fukunaga, S.; Bednarek, P.; Pi´slewska-Bednarek, M.; Watanabe, S.; Narusaka, Y.; Shirasu, K.; Takano, Y. El glutatión y el metabolismo del triptófano son necesarios para la inmunidad de Arabidopsis durante la respuesta hipersensible a hemibiotrófica. proc. nacional Academia ciencia EE. UU. 2013, 110, 9589–9594. [Referencia cruzada] [PubMed]

16. Irieda, H.; Inoué, Y.; Mori, M.; Yamada, K.; Oshikawa, Y.; Saitoh, H.; Uemura, A.; Terauchi, R.; Kitakura, S.; Kosaka, A.; et al. El efector fúngico conservado suprime la inmunidad desencadenada por PAMP al atacar las quinasas inmunes de las plantas. proc. nacional Academia ciencia EE. UU. 2018, 116, 496–505. [Referencia cruzada] [PubMed]

17. Maeda, K.; Houjyou, Y.; Komatsu, T.; Hori, H.; Kodaira, T.; Ishikawa, A. AGB1 y PMR5 contribuyen a la resistencia previa a la invasión mediada por PEN2-a Magnaporthe oryzae en Arabidopsis thaliana. mol. Interacción planta-microbio. 2009, 22, 1331–1340. [Referencia cruzada]

18. Nakao, M.; Nakamura, R.; Kita, K.; Inukai, R.; Ishikawa, A. Resistencia no huésped a la penetración y crecimiento de hifas de Magnaporthe oryzae en Arabidopsis. ciencia Rep. 2011, 1, 171. [CrossRef] [PubMed]

19. Okawa, C.; Ishikawa, A. MPK6 Contribuye a la resistencia de los no huéspedes a Magnaporthe oryzae en Arabidopsis thaliana. Biosci. Biotecnología. Bioquímica 2013, 77, 1320–1322. [Referencia cruzada]

20. Takahashi, T.; Shibuya, H.; Ishikawa, A. SOBIR1 contribuye a la resistencia de los no huéspedes a Magnaporthe oryzae en Arabidopsis. Biosci. Biotecnología. Bioquímica 2016, 80, 1577–1579. [Referencia cruzada]

21. Takahashi, T.; Shibuya, H.; Ishikawa, A. ERECTA contribuye a la resistencia de los no huéspedes a Magnaporthe oryzae en Arabidopsis. Biosci. Biotecnología. Bioquímica 2016, 80, 1390–1392. [Referencia cruzada]

22. Takahashi, T.; Murano, T.; Ishikawa, A. SOBIR1 y AGB1 contribuyen de forma independiente a la resistencia de los no huéspedes a Pyricularia oryzae (sinónimo de Magnaporthe oryzae) en Arabidopsis thaliana. Biosci. Biotecnología. Bioquímica 2018, 82, 1922–1930. [Referencia cruzada] [PubMed]

23. DuPree, P.; Pwee, K.-H.; Gray, JC Expresión de fusiones de promotores de genes de fotosíntesis en células epidérmicas de hojas de plantas de tabaco transgénicas. Planta J. 1991, 1, 115–120. [Referencia cruzada]

24. Bowes, BG; Mauseth, JD Plant Structure: una guía de colores, 2ª ed.; Manson Publishing, Ltd.: Londres, Reino Unido, 2008. 25. Vaughan, K. Inmunocitoquímica de células vegetales; Springer: Dordrecht, Países Bajos, 2013.

For more information:1950477648nn@gmail.com