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Los glucósidos feniletanoides de Cistanche tubulosa inducen la apoptosis en células de carcinoma hepatocelular H22 a través de vías de señalización tanto extrínsecas como intrínsecas

Yuan Pengfei¹ y otros

Resumen

Fondo: Cistanche tubulosa(Schenk) R. Wight es una medicina tradicional china que parasita las raíces de la planta Tamarix y se ha utilizado para tratar la impotencia masculina, la esterilidad, la debilidad corporal y como tónico. Sin embargo, su efecto antitumoral sobre el carcinoma hepatocelular aún es difícil de alcanzar. Aquí, investigamos el efecto antitumoral deCistanche tubulosa glucósidos feniletanoides(CTPG) en células de carcinoma hepatocelular H22 tanto in vitro como in vivo y sus mecanismos.

Métodos:La morfología, viabilidad,apoptosis, el ciclo celular y el potencial de membrana mitocondrial (Δψm) de las células H22 se analizaron mediante microscopía invertida, ensayo MTT y citometría de flujo, respectivamente. La expresión y activación de proteínas en elapoptosiscamino fueron detectados por Western blot. El efecto antitumoral in vivo se evaluó en un modelo de ratón tumoral establecido utilizando ratones Kunming macho.

Resultados:El tratamiento con CTPG suprimió significativamente el crecimiento de células H22 de una manera dependiente de la dosis y el tiempo, lo que se correlacionó con el aumentoapoptosisy detención del ciclo celular en las fases G0/G1 y G2/M. Además, se observó condensación cromosómica en células H22 tratadas con CTPG. El tratamiento con CTPG aumentó significativamente la relación Bax/Bcl-2, redujo Δψm y mejoró la liberación de citocromo c. Los niveles de caspasa-8 y caspasa-9 escindidas en las vías de señalización tanto extrínseca como intrínseca aumentaron significativamente y activaron secuencialmente la caspasa-7 y-3 para escindir PARP. Finalmente, CTPG inhibió el crecimiento de células H22 en ratones y mejoró la tasa de supervivencia de ratones tumorales.

Conclusiones: Estos resultados sugirieron que CTPG suprimió el crecimiento de células H22 a través de ambos, extrínseco e intrínseco.apoptosiscaminos

Palabras clave: Cistanche tubulosa, Glucósidos feniletanoides, Apoptosis, Vía de señalización, Modelo tumoral en ratón

Cistanche tubulosaglucósidos feniletanoides

Fondo

El cáncer de hígado ocupó el sexto lugar en incidencia de cáncer y el cuarto lugar en muertes por cáncer en todo el mundo. Además, ocupó el cuarto lugar en incidencia de cáncer y el primero en mortalidad por cáncer en países con un índice sociodemográfico bajo [1]. En China, el cáncer de hígado es la tercera causa principal de muerte relacionada con el cáncer en 2015 [2]. Más del 90 por ciento de los cánceres primarios de hígado son carcinomas hepatocelulares (HCC) en el mundo [3]. Actualmente, la resección hepática es la principal opción para el tratamiento del CHC. Sin embargo, menos del 30 % de los pacientes con CHC cumplieron los criterios de resección hepática curativa y la tasa de supervivencia general de 5-años sigue siendo tan baja como el 35-50 % debido a la alta tasa de recurrencia [4, 5] . La disponibilidad de opciones de tratamiento para pacientes con CHC intermedio a avanzado es muy limitada. El sorafenib, un fármaco dirigido molecularmente, ha sido aprobado por la FDA como tratamiento de primera línea para el CHC avanzado. Sin embargo, sorafenib solo prolonga unos 3 meses de supervivencia y la tasa de respuesta es inferior al 4 % [6, 7]. Es urgente desarrollar nuevos fármacos o estrategias contra el CHC.

La medicina tradicional china (MTC), sola o combinada con otras estrategias, se ha utilizado para tratar el CHC y ha demostrado los beneficios clínicos que incluyen un tiempo de supervivencia prolongado, una mejor calidad de vida, menos reacciones adversas, etc. [8, 9]. Cistanche, un tipo de medicina tradicional china, tiene varias funciones biológicas, como antioxidante, antiinflamatoria, antienvejecimiento y neuroprotectora [10, 11].Glucósidos feniletanoideshan sido considerados los principales componentes activos de Cistanche, que tienen diversas actividades que incluyen antioxidación, antiinflamación, hepatoprotección y neuroprotección [12–15]. Nuestro grupo ha informado queCistanche tubulosa glucósidos feniletanoides(CTPG) podría inducirapoptosisen células B16-F10 de melanoma e inhibir el crecimiento de tumores en ratones [16]. En este estudio, medimos el efecto antitumoral de CTPG en células HCC H22 tanto in vitro como in vivo e investigamos sus mecanismos. Encontramos que CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)inducidoapoptosisen células H22 a través de vías de señalización tanto extrínsecas como intrínsecas y suprimió el crecimiento de tumores H22 en ratones.

Métodos

Línea celular

Las células de carcinoma hepatocelular H22 de ratón se obtuvieron del Laboratorio Clave de Recursos Biológicos e Ingeniería Genética de Xinjiang, Universidad de Xinjiang (Urumqi, Xinjiang, China) y se cultivaron en medio RPMI 1640 (Gibco) suplementado con 100 U/ml de penicilina y 100 ug/ml estreptomicina y 10 por ciento de suero bovino fetal inactivado por calor (Gibco) a 37 grados en una atmósfera humidificada de 5 por ciento de CO2.

ensayo MTT

CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)se compró a Hetian Dichen Biotech Co., Ltd. (Hetian, Xinjiang, China), y los compuestos principales de CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)fueron calificados y cuantificados por cromatografía líquida de alta resolución [16]. La viabilidad celular se evaluó mediante 3-(4, 5-dimetiltiazol-2-il)-2, 5-bromuro de difeniltetrazolio (MTT) (Sigma, St. Louis, MO , EE.UU.) ensayo. Se inocularon células H22 en 96-placas de pocillos a una densidad de 2 × 104 células en 100 ul de medio por pocillo y se cultivaron a 37 grados. Después de 24 h, las células se trataron con diferentes concentraciones de CTPG (0, 100, 200, 300 y 400 ug/ml) o DMSO al 0,3 por ciento (igual que en 400 ug/ml de CTPG) durante 24, 48 y 72 h, respectivamente. Tras centrifugar a 1000 rpm durante 7 min, se descartó el sobrenadante y se añadieron a cada pocillo 100 ul de solución de MTT (5 mg/ml en PBS). Las placas se incubaron a 37 grados durante 4 hy se añadieron 100 ul de DMSO para disolver los cristales de formazán formados. Los valores de OD490 fueron detectados por un lector de microplacas de 96-pocillos (Bio-Rad Laboratories, CA, EE. UU.). La viabilidad celular se calculó de acuerdo con la fórmula: Viabilidad celular (porcentaje)=(OD tratada/OD no tratada) x 100 por ciento.

Cistanche tubulosa glucósidos feniletanoides

Detección de apoptosis

Las células H22 se trataron con diferentes concentraciones de CTPG.(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)({{0}}, 100, 200, 300 y 400 ug/ml) o DMSO al 0,3 % durante 24 h y luego teñido con anexina VFITC/yoduro de propidio (PI)ApoptosisKit de detección (YEASEN, China) según instrucciones del fabricante. Las muestras se analizaron por citometría de flujo (BD FACSCalibur, EE. UU.).

Detección del potencial de membrana mitocondrial

Las células H22 se trataron con diferentes concentraciones de CTPG.(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)(0, 200 y 400 ug/ml) durante 24 h y luego se tiñeron con el colorante JC-1 permeable a la membrana (Beyotime, China) durante 20 min a 37 grados. Después de lavar dos veces con tampón JC-1, las muestras se resuspendieron con 300 ul de tampón JC-1 y se analizaron por citometría de flujo (BD FACSCalibur, EE. UU.).

Análisis del ciclo celular

Se inocularon células H22 en placas de cultivo de 60 mm y se trataron con diferentes concentraciones de CTPG (0, 100,200, 300 y 400 ug/ml) o 0,3 % de DMSO durante 24 h . Todas las células se recogieron y se lavaron dos veces con PBS. Las células se fijaron en etanol helado al 70 por ciento a -20 grados durante 2 h y se lavaron dos veces con PBS, luego se resuspendieron en 300 ul de tampón de tinción de yoduro de propidio/RNasa (BD Biosciences). Después de 10 min a temperatura ambiente, las muestras se recolectaron por citometría de flujo (BD FACSCalibur, EE. UU.) y la distribución del ciclo celular se analizó con el software ModFit LT 3.0.

glucósidos feniletanoidesenCistanche tubulosa

Tinción Hoechst 33,258

Los cambios morfológicos de los núcleos de células H22 se analizaron mediante tinción Hoechst 33.258 con colorante de unión a ADN permeable a la membrana. Las células H22 se sembraron en una placa de 6-pocillos a una concentración de 1 × 105 células/pocillo en un medio de 2 ml. Después de una confluencia del 60 por ciento ~ 70 por ciento, las células se trataron con CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)(0, 100, 200, 300 y 400 ug/ml) durante 24 h. Las células se recogieron y se fijaron con paraformaldehído helado al 4 por ciento a 4 grados durante 10 min. Después de lavar con PBS, las células se tiñeron con Hoechst 33258 (Beyotime, China) a 4 grados durante 10 min. Las muestras se observaron con un microscopio de fluorescencia invertido (Nikon Eclipse Ti-E, Japón).

mancha occidental

Anti-caspasa-3, anti-caspasa escindida-3, Anti-Bcl-2 y anti-Bax se adquirieron de Beyotime Biotech Co., Ltd. (Shanghai, China). Anticaspasa-7, anticaspasa escindida-7,anticaspasa-8, anticaspasa escindida-8, anticaspasa-9, anti caspasa escindida-9, anti-PARP, anti-PARP escindida, IgG-HRP anti-ratón e IgG-HRP anti-conejo se adquirieron de Cell Signaling Technology. La anti- -actina se adquirió de Beijing ComWin Biotech Co., Ltd. (Beijing, China).

Las células H22 se trataron con diferentes concentraciones de CTPG.(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)({{0}}, 100, 200, 300 y 400 ug/ml) o DMSO al 0,3 por ciento durante 24 h. Las células se recolectaron y lisaron con Cell Lysis Solution RIPA (Beijing ComWin Biotech Co., Ltd) durante 30 min en hielo. Las muestras se centrifugaron (12, 000 g durante 15 min a 4 grados) para recolectar los sobrenadantes y las concentraciones de proteína se midieron con el kit BCA (Thermo Fisher Scientific, EE. UU.). Se aisló una cantidad igual de proteína en cada muestra mediante SDS-PAGE al 12 por ciento y se transfirió a membranas de PVDF (Biosharp, China). Después de bloquear con tampón TBST que contenía leche descremada al 5 por ciento, las membranas se incubaron con los anticuerpos primarios correspondientes y los anticuerpos secundarios conjugados con peroxidasa de rábano picante (HRP), respectivamente. Después de lavar con TBST, las proteínas objetivo se detectaron mediante el kit de ensayo ECL (Beyotime, China).

Declaración sobre animales y ética

Se adquirieron ratones Kunming machos de 6-8 semanas de edad en el Animal Laboratory Center, Xinjiang Medical University (Urumqi, Xinjiang, China). Los ratones se mantuvieron en una instalación para animales de ciclo ligero con temperatura controlada estándar de la Universidad de Xinjiang. Todos los estudios con animales se llevaron a cabo de acuerdo con las pautas del Comité de uso y cuidado de animales de la Universidad de Xinjiang. El protocolo fue aprobado por el Comité de Ética de Experimentos con Animales del Laboratorio Clave de Recursos Biológicos e Ingeniería Genética de Xinjiang (BRGE-AE001), Universidad de Xinjiang.

Estudio de tumores en ratones

Para la inducción del modelo de ratón tumoral, se inyectó por vía subcutánea a ratones Kunming machos 1 × 106 células H22 en 100 ul de PBS en el flanco derecho. Después de 3 días, los ratones se dividieron aleatoriamente en 3 grupos (7 ratones/grupo). Al grupo de control se le inyectó 0,1 ml de DMSO por vía subcutánea alrededor del tumor. Los grupos CTPG-200 y CTPG-400 se inyectaron por vía subcutánea con 200 o 400 mg/kg de CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)en 0,1 ml de DMSO alrededor del tumor. Los ratones se trataron cada 2 días durante un máximo de 21 días. Los tamaños de los tumores se midieron usando calibradores hasta 25 días y el volumen del tumor se calculó de acuerdo con la fórmula: volumen del tumor (mm3)=(largo × ancho 2)/2. Después de 25 días, la supervivencia de los ratones con tumor se controló todos los días hasta el final de este estudio.

análisis estadístico

La significación estadística se calculó mediante un análisis de varianza de una vía entre los grupos de tratamiento y control. Todos los datos se expresaron como media ± desviación estándar (DE). p < 0.05="" se="" consideró="" estadísticamente="">

Resultados

CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)redujo la viabilidad de las células H22 in vitro

Con el fin de explorar el efecto antitumoral de CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)en HCC, las células H22 se trataron con diferentes concentraciones de CTPG (0, 100, 200, 300 y 400 ug/ml) in vitro. Después de 24 h, se observó la morfología de las células H22 usando un microscopio invertido. Encontramos que la morfología de las células H22 cambió drásticamente por el tratamiento con CTPG. Con el aumento de la concentración de CTPG, las células se volvieron pequeñas y redondas y el número de células también se redujo considerablemente (Fig. 1a). El ensayo MTT se utilizó para analizar la viabilidad de las células H22 después del tratamiento con CTPG durante 24, 48 y 72 h, respectivamente. CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)redujo significativamente la viabilidad de las células H22 de una manera dependiente de la dosis y del tiempo (Fig. 1b). CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)a 300 ug/ml llegó a la mejor tasa inhibitoria (Fig. 1c). Los valores de IC50 de CTPG para células H22 son de 236 ug/ml a las 24 hy de 169,8 ug/ml a las 48 h.

CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)apoptosis inducida en células H22

Para investigar si la disminución de la viabilidad de las células H22 está mediada por la inducción deapoptosis, las células H22 se trataron con diferentes concentraciones de CTPG (0, 100, 200, 300 y 400 ug/ml) durante 24 h y se tiñeron con PI y anexina V. Los resultados de la citometría de flujo mostraron que CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)significativamente inducidoapoptosisde células H22 (incluidas las tempranas y tardías)apoptosis) de forma dependiente de la dosis (fig. 2a). Aunque la dosis alta de CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)También aumentó significativamente la necrosis de las células H22, la necrosis juega un papel menor en la inhibición del crecimiento de las células H22 debido a su menor proporción (8,3 por ciento) en comparación con la deapoptosis(52,6 por ciento). Además, las proteínas totales de las células H22 se aislaron después de CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)El tratamiento y las expresiones de linfoma 2 de células B antiapoptóticas (Bcl-2) y proteína X asociada a BCL-2-proapoptótica (Bax) se detectaron mediante transferencia Western. Los datos de escaneo en escala de grises mostraron que los niveles de expresión de Bax y Bcl-2 aumentaron y disminuyeron, respectivamente. La relación Bax/Bcl-2 aumentó significativamente (Fig. 2b). Estos resultados sugieren que CTPG induceapoptosisen células H22.

CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)induce la condensación cromosómica y la detención del ciclo celular en células H22

Se ha informado que el daño del ADN y la detención del ciclo celular inducidos por fármacos pueden inhibir el crecimiento de células tumorales y causarapoptosisen células tumorales [17, 18]. Para detectar la morfología de los núcleos en células H22 después de CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)tratamiento durante 24 h, las células H22 se tiñeron con Hoechst 33,342 y se observaron mediante microscopía de fluorescencia invertida. CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)las células tratadas mostraron un aumento dependiente de la dosis de cromatina de núcleos brillantemente condensada, mientras que las células no tratadas mostraron núcleos teñidos homogéneamente (Fig. 3a). La distribución del ciclo celular en células H22 se analizó adicionalmente mediante tinción con PI después del tratamiento con CTPG durante 24 h. Como se muestra en la Fig. 3b, CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)el tratamiento aumentó significativamente la proporción de células en fase G0/G1- y G2/M y disminuyó significativamente la proporción de células en fase S, lo que sugiere que CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)detención de fase G0/G1 y G2/M inducida en células H22. La dosis alta de CTPG también aumentó significativamente la proporción de células sub G1.

CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)disminución del potencial de membrana mitocondrial y aumento de la liberación de citocromo c

vía mitocondrial-dependiente juega un papel importante en la inducción deapoptosis[19, 20]. Los cambios en el potencial de membrana mitocondrial (Δψm) pueden ser

monitoreado por tinción JC-1 debido a que el agregado JC-1 (fluorescencia roja) puede desintegrarse en monómero (fluorescencia verde) con la reducción de Δψm [21]. Después de CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)tratamiento durante 24 h, las células H22 se tiñeron con colorante JC-1. Los datos de citometría de flujo mostraron que la fluorescencia roja en el canal FL-2 y la fluorescencia verde en el canal FL-1 se redujeron y aumentaron significativamente con CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)tratamiento. La proporción de células PE-FITC plus aumentó significativamente (Fig. 4a), lo que sugiere que CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)redujo el Δψm en células H22. Esto es coherente con el aumento de la relación Bax/Bcl-2. En consecuencia, observamos que la liberación de citocromo c aumentó significativamente con CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)tratamiento (Fig. 4b). Estos resultados indicaron que CTPG podría inducir parcialmenteapoptosisen células H22 a través de una vía (intrínseca) dependiente de mitocondrias.

CTPG activó la vía de la caspasa e impidió la reparación del ADN

A continuación, la activación de caspasa inducida por CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)a través de vías de señalización tanto extrínseca como intrínseca. Después de CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)tratamiento durante 24 h, las proteínas totales se aislaron de las células H22 y los niveles de procaspasas y escindidas se detectaron mediante transferencia de Western. En comparación con el control sin tratar o con DMSO, CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)el tratamiento aumentó significativamente no solo el nivel de caspasa escindida-8 (vía extrínseca) sino también el nivel de caspasa escindida-9 (vía intrínseca) (Fig. 5). Secuencialmente, la caspasa activada-8 y -9 escindió la pro-caspasa corriente abajo-3 y -7 que se observaron en la Fig. 5. La caspasa activada-3 escindió el ADN enzima reparadora de poli(ADP-ribosa) polimerasa (PARP) para prevenir la reparación del ADN y acumular daños en el ADN como se observa en la Fig. 3a. Estos resultados indicaron que CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)inducidoapoptosisen células H22 a través de vías de señalización tanto extrínsecas como intrínsecas.

CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)suprime el crecimiento de H22 HCC in vivo y mejora la tasa de supervivencia de los ratones tumorales

Finalmente, el efecto antitumoral de CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)sobre HCC se evaluó en un modelo de ratón tumoral, que se estableció mediante inyección subcutánea de células H22. Después de 3 días de inyección de células H22, los ratones tumorales se trataron con CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)8 veces El peso corporal de los ratones y los tamaños de los tumores se controlaron en los puntos de tiempo indicados. Como se muestra en la Fig. 6a, el peso corporal de los ratones en cada grupo no tiene una diferencia significativa, lo que sugiere que las dosis seleccionadas de CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)no tienen efectos secundarios obvios. Curiosamente, el crecimiento tumoral en ratones tratados con 200 mg/kg y 400 mg/kg de CTPG se inhibió significativamente (Fig. 6b). Además, las dos dosis de CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)el tratamiento mejoró enormemente la supervivencia de los ratones con tumor (3/7, 3/7) en comparación con el grupo de control (0/7) al final del experimento (Fig. 6b). También encontramos que CTPG mejoró significativamente la proliferación de esplenocitos aislados de ratones Kunming macho de una manera dependiente de la dosis (Fig. 6c), lo que sugiere que CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)tiene un efecto inmunoestimulador.

Discusión

La MTC se ha utilizado para tratar diversas enfermedades, incluido el cáncer, durante mucho tiempo. Se ha informado que la MTC puede inducirapoptosisen diferentes tipos de células tumorales a través de vías de señalización tanto extrínsecas (mediadas por receptores de muerte) como intrínsecas (dependientes de mitocondrias) para ejercer efectos antitumorales [22–25]. Las dos vías pueden activar caspasa-8 y -9, respectivamente [24, 26]. Aquí, encontramos que CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)suprimió significativamente el crecimiento de células H22 a través de la inducción de la apoptosis y la detención del ciclo celular. CTPG aumentó significativamente los niveles de caspasa escindida-8 y -9(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)tratamiento, lo que sugiere que tanto las vías de señalización extrínsecas como las intrínsecas estaban involucradas en la inducción deapoptosis. Nuestro estudio anterior mostró que CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)indujo apoptosis en células de melanoma B16-F10 mediante una vía dependiente de mitocondrias que aumentó el nivel de caspasa escindida-9 pero no de caspasa-8 [16]. CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)podría activar distintas vías de señalización en diferentes tipos de células tumorales.

La integridad de la membrana mitocondrial está estrechamente regulada por los miembros de la familia de proteínas BCL-2, incluidas Bax y Bcl-2 [27, 28]. La proporción de Bax a Bcl-2 juega un papel crítico en la dependencia de las mitocondrias.apoptosisvía [29]. En células H22 tratadas con CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide), Bax/Bcl-2 se reguló significativamente, lo que podría causar la reducción de Δψm y la liberación de citocromo c observada en este estudio. En consecuencia, se escindió y activó la pro-caspasa-9. Finalmente, los iniciadores de caspasa activa-8 y -9 activaron el ejecutor de caspasa-3 para dividir PARP y evitar la reparación del ADN. Tomados en conjunto, estos resultados sugirieron que CTPG indujoapoptosisen células H22 a través de vías de señalización tanto extrínsecas como intrínsecas. En un modelo de ratón con tumor, CTPG suprimió significativamente el crecimiento de HCC H22 y mejoró en gran medida la supervivencia de los ratones con tumor. Curiosamente, CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)dependiente de la dosis promovió la proliferación de esplenocitos de ratones Kunming, lo cual es consistente con nuestro estudio anterior [16]. Estos resultados sugirieron que CTPG podría suprimir el crecimiento de HCC H22 en ratones a través del efecto antitumoral directo y la mejora inmunológica indirecta.

Cistanche tululosaproductos

Conclusiones

CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)suprimió el crecimiento de células H22 tanto in vitro como in vivo e indujoapoptosisen células H22 a través de vías de señalización tanto extrínsecas como intrínsecas. Estos datos indicaron que CTPG(Cistanche tubulosa glucósidos de feniletanoide)podría ser un candidato potencial para el tratamiento del CHC.

abreviaturas

Bax: proteína X asociada a BCL-2-; Bcl-2: linfoma de células B 2; CTPG:Cistanche tubulosa glucósidos feniletanoides; CHC: carcinoma hepatocelular; HRP: peroxidasa de rábano picante; MTT: bromuro de 3-(4, 5-dimetiltiazol-2-il)-2, 5-difeniltetrazolio; PARP: enzima reparadora de ADN de poli (ADP-ribosa) polimerasa; MTC: medicina tradicional china; Δψm: potencial de membrana mitocondrial

Fondos

Este trabajo fue apoyado por el Proyecto de Introducción de Talento de Alto Nivel de la Región Autónoma Uigur de Xinjiang a JL, la Subvención de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (31460241) a JL, y el Fondo de Inicio de Doctorado de la Universidad de Xinjiang (BS160261 a XW y BS150236 a YL).

Disponibilidad de datos y materiales.

Los datos sin procesar para este estudio están disponibles previa solicitud razonable al autor correspondiente.

Contribuciones de los autores

JL y JL diseñaron los experimentos. PY, JL, AA y YY realizaron los experimentos. LX, XW e YL analizaron los datos. PY, JL y JL escribieron el manuscrito. Todos los autores contribuyeron y aprobaron el manuscrito final.

Aprobación ética

El estudio con animales fue aprobado por el Comité de Ética de Experimentos con Animales del Laboratorio Clave de Recursos Biológicos e Ingeniería Genética de Xinjiang, Universidad de Xinjiang.

Conflicto de intereses

Los autores declaran que no tienen intereses contrapuestos.

Nota del editor

Springer Nature se mantiene neutral con respecto a los reclamos jurisdiccionales en mapas publicados y afiliaciones institucionales.

Detalles del autor

¹Laboratorio Clave de Recursos Biológicos e Ingeniería Genética de Xinjiang, Facultad de Ciencias de la Vida y Tecnología, Universidad de Xinjiang, 666 Shengli Road, Urumqi, Xinjiang 830046, China.²Facultad de Ciencias de la Vida, Universidad Normal de Xinjiang, 102 Xinyi Road, Urumqi 830054, Xinjiang, China.³Hospital de Tumores Afiliado de la Universidad Médica de Xinjiang, Urumqi 830011, China.

Cistanche tululosaproductos

De: 'Cistanche tubulosa glucósidos feniletanoidesinducirapoptosisen células de carcinoma hepatocelular H22 a través de vías de señalización tanto extrínsecas como intrínsecas' por Pengfei Yuan1 et al

---Yuan et al. BMC Medicina Complementaria y Alternativa (2018) 18:275 https://doi.org/10.1186/s12906-018-2201-1

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