¿Cómo alivia Apelin-13 la nefropatía diabética de manera eficaz?

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Apelin-13 alivia la nefropatía diabética al mejorar la producción de óxido nítrico y suprimir la fibrosis del tejido renal

ZHUO GAO, XIN ZHONG, YING-XIA TAN Y DONG LIU

Resumen

La diabetes es una enfermedad metabólica grave y el daño renal inducido por la diabetes también afecta gravemente a la supervivencia de los pacientes. Apelin es una molécula que juega un papel crucial en el metabolismo de los lípidos, y estudios recientes han revelado queapelín-13, un subtipo de apelina, juega un papel importante en la regulación de los niveles de glucosa en sangre. Sin embargo, el papel deapelín-13ennefropatía diabéticaaún no está claro. En el presente estudio, un modelo de rata dediabéticonefropatíafue construido por la inyección de estreptozocina (STZ). Durante este proceso, estas ratas fueron inyectadas conapelín-13. Los niveles de glucosa en sangre, proteínas en orina e insulina se determinaron semanalmente. A continuación, se determinó la expresión de la proteína asociada al receptor de tipo 1 del dominio de angiotensina (APJ), la óxido nítrico sintasa endotelial (eNOS), la E-cadherina y la actina del músculo liso (a-SMA) en los tejidos renales con transferencia Western. Luego, las células endoteliales de los vasos glomerulares se cultivaron con medio alto en glucosa. Estas células fueron tratadas conapelín-13durante 24 h. Finalmente, la viabilidad celular de estas células y la expresión de APJ, eNOS.E-cadherina y -SMA en estas células se determinaron con transferencia Western. Como resultado, el tratamiento deapelín-13indujo niveles más bajos de glucosa en sangre y proteína en orina. Además, la aplicación deapelín-13promovió la producción de insulina y alivió la resistencia a la insulina. Tratamiento conapelín-13promovió la expresión de APJ, eNOS y E-cadherina mientras suprimía la expresión de -SMA en tejidos renales de ratas y células endoteliales de vasos glomerulares. Además, la aplicación deapelín-13también promovió la viabilidad celular de estas células. En conclusión,apelín-13aliviadodiabéticonefropatíaal promover la producción de óxido nítrico (NO) y aliviar la fibrosis de los tejidos renales.

Introducción

La diabetes es una enfermedad metabólica y el trastorno del metabolismo de la glucosa es la principal manifestación clínica(1). Estudios previos han indicado que, debido a la popularidad de las dietas altas en azúcar y grasas y al estilo de vida sedentario de las personas, se prevé que la incidencia de diabetes continúe aumentando en los próximos años(2,3). La aparición de la diabetes suele ir acompañada de daño en varios órganos y los pacientes con diabetes a largo plazo a menudo son diagnosticados con insuficiencia renal grave (4,5). Un estudio anterior informó que el 30 por ciento de los pacientes con diabetes tipo 1 y el 25 por ciento de los pacientes con diabetes tipo 2 desarrollarondiabéticonefropatía(6). Además, la aparición y el desarrollo dediabéticonefropatíacondujo a un aumento en la mortalidad de los pacientes con diabetes.DiabéticonefropatíaEl daño podocitario y capilar renal inducido es el principal factor que afecta la supervivencia de los pacientes(7). Por lo tanto, desarrollar un tratamiento paradiabéticonefropatíaes crucial para mejorar la tasa de supervivencia de los pacientes con diabetes.

Apelin se encuentra en la región cromosómica Xq25-26.1 y está codificado por el gen APLN (8) y es el ligando endógeno de la proteína asociada al receptor (APJ) tipo 1 del dominio de angiotensina del receptor acoplado a proteína G, que es generalmente secretada y producida por el tejido adiposo blanco (9). Apelin y su receptor APJ se expresan ampliamente en varios tejidos, incluidas las células endoteliales del cerebelo, el corazón y los vasos sanguíneos, especialmente en el sistema cardiovascular (10). Apelin fue identificado como una adipocina asociada con el metabolismo de los lípidos en un estudio reciente(11). Sin embargo, un estudio previo ha indicado que la apelina juega un papel crucial en la regulación de la homeostasis energética del cuerpo, el metabolismo de la glucosa y el agua, así como otras funciones biológicas(12). Se ha revelado previamente que la expresión de apelina mejora la resistencia a la insulina, la aterosclerosis y el daño vascular inducido por la diabetes(13). Sin embargo, un estudio diferente reveló que la expresión de apelina indujo la aparición y el desarrollo de la retinopatía diabética(14). Por lo tanto, el papel de la apelina en la aparición y el desarrollo de complicaciones relacionadas con la diabetes sigue sin estar claro.

Además, apelin está presente en diferentes subtipos (apelin-36, apelin-17 yapelín-13)en el cuerpo a través de la cizalla del retículo endoplásmico. Se reveló que cuanto más corta es la cadena peptídica de la apelina, más fuerte es su actividad biológica(15). Un estudio anterior indicó que la apelina mejoró la sensibilidad a la insulina e indujo niveles más bajos de azúcar en la sangre al reducir la inflamación crónica en pacientes con diabetes tipo 2, mejorando así el metabolismo de la glucosa y los lípidos (16). Sin embargo, el efecto de apelin endiabéticonefropatíaactualmente es controvertido. Un estudio anterior informó que los niveles de apelina/APJ en el suero de pacientes condiabéticonefropatíaelevados, favoreciendo la aparición y desarrollo dediabéticonefropatía(17). Por otro lado, otro estudio reveló queapelín-13podría inhibir los cambios morfológicos de las células epiteliales de los túbulos renales en un entorno rico en glucosa, inhibiendo así la aparición y el desarrollo del proceso de transición epitelial-mesenquimatosa (EMT) en las células glomerulares y, en última instancia, retrasando la aparición dediabéticonefropatía(18). Por lo tanto, el efecto de la apelina sobre las complicaciones renales inducidas por la diabetes sigue sin estar claro.

En el presente estudio, el papel deapelín-13en el proceso dediabéticonefropatíafue investigado más a fondo mediante la construcción de un modelo de rata dediabéticonefropatía.

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materiales y métodos

Ensayos con animales. Se obtuvieron un total de 30 ratas macho Sprague Dawley (6-8semanas de edad;200-230g) de Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co.Ltd. y alojado en una habitación con temperatura controlada (25 grados) y libre de patógenos específicos con humedad constante (40-50 por ciento) en un ciclo de luz/oscuridad de 12- h y recibió alimentos y agua ad libitum durante 1 semana . A continuación, estas ratas se dividieron por igual en seis grupos (Control, Modelo, Ap-E40, Ap-E400, Ap-L40 y Ap-L400). Las ratas en el grupo de control fueron tratadas con nada. Las ratas de los otros grupos fueron alimentadas con una dieta alta en azúcar y grasa (Thermo Fisher Scientific, Inc.) y recibieron una inyección intravenosa de estreptozocina (STZ; 40 mg/kg; producto no. S0130; Merck KGaA) cada semana. Después de 3 semanas, las ratas Ap-E40 y Ap-E400 fueron tratadas conapelín-13(40 y 400 pmol/kg, respectivamente; producto n.º A6469; Merck KGaA). Un total de 6 semanas después de la inyección de STZ, las ratas de los grupos Ap-L40 y Ap-L400 fueron tratadas conapelín-13(40 y 400 pmol/kg, respectivamente). Después de ocho inyecciones de STZ, las ratas se sacrificaron con pentobarbital sódico (160 mg/kg, ip). Después de la eutanasia, se recogieron el suero y los órganos. El peso de las ratas se detectó mediante balanzas electrónicas cada semana, desde 1 semana antes de la inyección de STZ y hasta la eutanasia. Los niveles de glucosa en sangre se detectaron cada semana usando un medidor de glucosa en sangre (Thermo Fisher Scientific, Inc.). Los niveles de proteína en orina también se detectaron mediante un kit de ensayo BCA (cat.no. P0012S; Beyotime Institute of Biotechnology) todas las semanas. La insulina sérica en ayunas también se detectó cada semana usando un kit comercial (cat.no.RAB0904; Merck KGaA) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. El índice de resistencia a la insulina se calculó mediante la siguiente fórmula: (Niveles de insulina en sangre x niveles de glucosa en sangre)/22,5. Todos los experimentos se realizaron de acuerdo con la Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio, 8.ª edición(19) y fueron aprobados (n.º de aprobación2020-79-PJO1) por el Comité de Ética del Centro Médico de la Fuerza Aérea (Beijing, China) .

Detección de nitrógeno ureico en sangre (BUN) y creatinina sérica (Ser). Los niveles de BUN (cat. no.ml076479) y Scr (cat. no.ml059158) en la sangre se determinaron utilizando kits comerciales (Shanghai Enzyme-linked Biotechnology Co., Ltd.) después de 3 y 8 semanas de inyección de STZ, respectivamente. . Todos los pasos de este ensayo se realizaron de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

Detección de óxido nítrico (NO), angiotensina II (Ang Il) y endotelina-1(ET-1). Los niveles de NO, Ang II y ET-1 en el suero y los tejidos nefridiales se detectaron usando el kit de NO (n.º de cat. S0021; Beyotime Institute of Biotechnology), kit de Ang II (n.º de producto RAB0010; Merck KGaA ), y kit ET-1 (cat.no.E-EL-R1458c; Elabscience Biotechnology, Inc.). Todos los pasos de los ensayos se realizaron de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

Tinción con hematoxilina y eosina (H&E). Después de la eutanasia, se recogieron los tejidos renales y se lavaron con solución salina tamponada con fosfato (PBS) preenfriada. Luego se separó el riñón y se fijó con paraformaldehído al 4 por ciento durante la noche a temperatura ambiente. Los tejidos de riñón embebidos en parafina se cortaron en secciones 5-um. A continuación, estas secciones se deshidrataron en una solución de etanol al 70 y 90 por ciento durante 10 minutos cada una. Finalmente, se realizó tinción con H&E a temperatura ambiente durante 3 min para detectar cambios patológicos. Todos los pasos de este ensayo se realizaron de acuerdo con las instrucciones del fabricante del kit de tinción H&E (cat.no.C0105S; Beyotime Institute of Biotechnology).

Inmunohistoquímica. La inmunohistoquímica se llevó a cabo usando el método estándar de peroxidasa/DAB y contratinción con hematoxilina de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Después de bloquearse con albúmina de suero bovino al 5 % (BSA; Instituto de Biotecnología Beyotime) durante 20 min a temperatura ambiente, las secciones se incubaron con anticuerpo primario anti-APJ (cat.no.PA5-114830;Thermo Fisher Scientific, Inc. durante la noche a 4 grados .Después del lavado con PBS, las secciones se incubaron con anticuerpo secundario conjugado con peroxidasa de rábano picante anti-conejo de cabra (código de producto ab6721;1:1,000; Abcam) a 4C durante 50 min, seguido de Lavado con PBS.Luego, las secciones se trataron con solución DAB y se contrastaron con hematoxilina a temperatura ambiente durante 5 min.Finalmente, las imágenes se obtuvieron utilizando un microscopio óptico (Olympus Corporation).

Cultivo celular y tratamiento. Se obtuvo una línea de células endoteliales microvasculares glomerulares renales humanas (hRGEC) de BioVector NTCC, Inc. y se cultivó en medio RPMI-1640 (Thermo Fisher Scientific, Inc., complementado con suero fetal bovino (FBS) al 10 % en medio humidificado aire a 37 grados C con 5 por ciento de CO. Estas células se dividieron en los grupos de control, modelo, Ap-L (Apelin-bajo) y Ap-H (Apelin-alto). las células se cultivaron en medio RPMI-1640 alto en glucosa (25 mmol/l: Cytiva), y las células del grupo de control se cultivaron en medio RPMI-1640con contenido normal de glucosa (5,5 mmol/l). A continuación, Las células del grupo Ap-L se trataron con niveles bajos deapelín-13（0.1 μmol/） y las células del grupo Ap-H se trataron con altos niveles deapelín-13(1 µmol/).

Experimento de formación de tubos. La formación de tubos en células hRGEC se determinó utilizando un kit comercial (nº de producto K905-50; AmyJet Scientific, Inc). Todas las imágenes se obtuvieron utilizando un microscopio óptico (aumento, x4; Olympus Corporation). Todos los pasos de este ensayo se realizaron de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

Ensayo del kit de recuento de células-8(CCK-8). Se sembraron células hRGEC de varios grupos en tres 96-placas de pocillos (2,5x104/pocillo). Después de 24, 48 y 72 h de incubación a 37 grados, se diluyeron 0,10 ul de reactivo CCK-8 (Dojindo Molecular Technologies, Inc.) con el medio de cultivo y se añadió a las 96-placas de pocillos. A continuación, estas células se colocaron en una incubadora durante 1 hora. Finalmente. la absorbancia de estas células se detectó utilizando un espectrofotómetro (Thermo Fisher Scientific, Inc.) a una longitud de onda de 450 nm.

transferencia occidental. Las proteínas totales se recogieron de tejido nefridial y células hRGEC usando tampón de lisis RIPA (Santa Cruz Biotechnology, Inc.). La concentración de proteínas se determinó usando un kit de ensayo BCA. A continuación, se separaron cantidades iguales de proteína (40 ugs) mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio al 10 por ciento (SDS-PAGE) (Instituto de Biotecnología Beyotime) y se transfirieron a una membrana de fluoruro de polivinilideno (PVDF) (EMD). Millipore). que se bloqueó con albúmina de suero bovino (BSA) al 5 por ciento (Instituto de Biotecnología Beyotime) a 37 grados durante 1,5 h. Luego, las membranas se incubaron con los siguientes anticuerpos primarios a 4 grados durante la noche: receptor Ang II tipo 1 (AT1R:1:1,000; código de producto ab124734; Abcam), NO sintasa endotelial (eNOS;1:1, 000; código de producto ab5589;Abcam), APJ(1:1,000;cat.no.PA5-114830; Thermo Fisher Scientific, Inc),receptor del factor de crecimiento transformante (TGBR: 1:1.000;código de producto ab97459; Abcam), E-cadherina (1:1,000:código de producto ab212059; Abcam), -actina de músculo liso( -SMA;1:1. 000: producto n.º 19245; Cell Signaling Technology, Inc.) y GAPDH (1:2500; código de producto ab9485; Abcam). Después de la incubación del anticuerpo primario, las membranas se lavaron con PBS-Tween-20(0,1 por ciento) y se incubaron con anticuerpo conjugado con HRP (1:2,000; código de producto ab6721; Abcam) durante 2 h. a temperatura ambiente(7) Finalmente, las señales inmunorreactivas se evaluaron utilizando un kit Pierce ECL Western Blotting Substrate (Thermo Fisher Scientific, Inc.) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Las intensidades relativas de las inmunotransferencias se midieron con un generador de imágenes moleculares Versa Doc MP 5000 y el software Cantidad Uno (versión 4.6) (ambos de Bio-Rad Laboratories, Inc.).

Análisis estadístico. El análisis estadístico se realizó utilizando Graph Pad Prism 7.0(GraphPad Software, Inc.). Se usaron pruebas t de Student no apareadas para comparar dos grupos. Las comparaciones entre diferentes grupos se evaluaron utilizando ANOVA unidireccional seguido de la prueba posthoc de Tukey. Todos los datos se presentan como media ± desviación estándar (DE) y todos los experimentos se repitieron tres veces. PAGS<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Resultados

Apelín-13disminuye el peso y los niveles de glucosa en sangre y aumenta los niveles de insulina dediabéticonefropatíaratas a las 8 semanas. El peso y los niveles de glucosa en sangre de las ratas se detectaron semanalmente durante el proceso de crianza de las mismas. Los resultados (Fig. 1A y B) revelaron que el peso y los niveles de glucosa en sangre de las ratas en los grupos Ap-E40 y Ap-E400 no se alteraron significativamente después de la inyección deapelín-13a las 3 semanas Los mismos parámetros en las ratas de los grupos Ap-L40 y Ap-L400 se redujeron después de laapelín-13inyección a las 8 semanas en comparación con la de 3 semanas. Los niveles de insulina en la sangre también se redujeron después de laapelín-13inyección a las 8 semanas en comparación con la de 3 semanas (Fig. 1C).

Apelín-13La terapia mejora la función renal dediabéticonefropatíaratas Los niveles elevados de BUN y Scr indicaron la aparición y el desarrollo de lesión renal(20). Se reveló que los niveles de BUN y Scr eran más altos después de laapelín-13inyección a las 8 semanas en comparación con la de 3 semanas (Fig. 2A). De manera similar, el contenido de proteína urinaria y la extensión de la lesión patológica de los tejidos renales también revelaron las mismas tendencias (Fig. 2B y C).

Apelín-13aliviadiabéticonefropatíamodulando la producción de NO, Ángel y ET-1. Se detectó la expresión de APJ y los resultados (Fig. 3A) revelaron que la expresión de APJ en los tejidos renales de ratas disminuyó después de laapelín-13inyección a las 8 semanas en comparación con la de 3 semanas. NINGUNA producción podría aliviar eldiabéticonefropatía-daño vascular inducido en el tejido renal (21). Por lo tanto, se detectó la producción de NO, Ang II y ET-1 en los tejidos renales. Los resultados revelaron que los niveles de NO disminuyeron después de la inyección deapelín-13a las 8 semanas en comparación con el de las 3 semanas. Sin embargo, los niveles de Ang II y ET-1 han aumentado después de la inyección deapelín-13a las 8 semanas en comparación con las 3 semanas (Fig. 3B y C). A continuación, se detectó la expresión de eNOS y AT1R mediante transferencia Western. Como se revela en la Fig. 4A, la expresión de AT1R se suprimió después de la inyección deapelín-13a las 3 y 8 semanas en comparación con el grupo modelo, respectivamente. Los niveles de eNOS aumentaron después de la inyección deapelín-13a las 3 y 8 semanas en comparación con el grupo modelo.

Apelín-13aliviadiabéticonefropatíamodulando la expresión de ATIR, eNOS nítrico endotelial y proteínas relacionadas con la fibrosis renal en la vía APJ. La expresión de APJ aumentó y la de TGBR disminuyó después de la inyección deapelín-13a las 3 y 8 semanas en comparación con el grupo modelo. Se detectaron los niveles de expresión de las proteínas relacionadas con la fibrosis, E-cadherina y -SMA, y los resultados revelaron que la expresión de E-cadherina aumentó y los niveles de a-SMA disminuyeron después de la inyección deapelín-13a las 3 y 8 semanas en comparación con el grupo modelo (Fig. 4B).

Apelín-13promueve la proliferación y la formación de tubos y modula la expresión de proteínas relacionadas con la fibrosis renal en la vía APJ en células endoteliales vasculares renales inducidas por niveles elevados de glucosa a corto plazo. Las células hRGEC se cultivaron en medio alto en glucosa durante 24, 48 y 72 h. A continuación, se realizó un ensayo CCK-8para detectar la viabilidad celular. Los resultados (Fig. 5A) revelaron que el tratamiento conapelín-13promovió la viabilidad celular. La aplicación deapelín-13también promovió la formación del lumen (Fig. 5B). A las 24h deapelín-13tratamiento, se reveló que los niveles de expresión de APJ, eNOS y E-cadherina aumentaron y los niveles de TGBR, ATIR y -SMA disminuyeron en comparación con el grupo modelo (Fig. 5C).

Apelín-13suprime la proliferación y la formación de tubos y modula la expresión de proteínas relacionadas con la fibrosis renal en la vía APJ en células endoteliales vasculares renales inducidas por niveles elevados de glucosa a largo plazo. Las células se trataron con un medio alto en glucosa durante 72 y 96 h, y la interferencia conapelín-13comenzó a partir de las 72 h. Después de 24 h, los resultados del ensayo CCK-8 revelaron que la aplicación deapelín-13viabilidad celular suprimida en comparación con el grupo modelo (Fig. 6A). La formación de lúmenes se inhibió después del tratamiento conapelín-13(Fig. 6B). Además. tratamiento conapelín-13también promovió la expresión de APJ, eNOS y E-cadherina en comparación con el grupo modelo. La aplicación deapelín-13también suprimió la expresión de TGBR, AT1R y a-SMA (Fig. 6C) en comparación con el grupo modelo de una manera dependiente de la dosis.

Figura 1. Apelin-13 alivia la resistencia a la insulina de las ratas.(A) El peso de los ratones se detectó semanalmente. (B) Los niveles de glucosa en sangre se detectaron semanalmente. "PAGS-<0.001 vs.the="" control="" group.=""><><0.01 and=""><0.001 vs.the="" model="" group.(c)levels="" of="" insulin="" were=""><0.05,"p-0.01><0.001 vs.the="" after="" intervention="" 3w="">

Figura 2. El tratamiento con apelina-13 alivia el daño renal inducido por la diabetes en ratas.(A) Se detectaron los niveles de nitrógeno ureico en sangre y creatinina sérica. (B) El contenido de proteína urinaria se detectó semanalmente. (C) La lesión de los tejidos renales se detectó con la tinción de hematoxilina y eosina (aumento.x200), P<0.01, and="" p-0.001="" ys.the="" after="" intervention="" 3w="" group.bun.blood="" urea="" nitrogen:="" scr,="" serum="">

Figura 3. Apelin-13 activa la expresión de APJ.(A) La expresión de APJ en los tejidos renales se detectó con los ensayos inmunohistoquímicos (aumento, x200). (B) La producción de NO se detectó con los kits comerciales. (C) Los niveles de Ang Il y ET-I se determinaron con kits comerciales". P<0.01><0.001 vs.="" the="" after="" intervention="" 3w="" group.apj,="" angiotensin="" domain="" type="" 1="" receptor-associated="" proteins;="" no,="" nitric="" oxide;="" ang="" i,="" angiotensin="" ii;="">

Figura 4. La aplicación de apelin-13 promueve la expresión de eNOS.(A) La expresión de ATIR y eNOS se detectó con la transferencia Western. (B) Los niveles de APJ, TGBR, E-cadherina y a-SMA en tejidos renales de ratas se detectaron con transferencia Western.'P<><0.01><0.001.enos, endothelial="" nitric="" oxide="" synthase;="" at1r,="" ang="" ii="" type="" i="" receptor;="" apj,="" angiotensin="" domain="" type="" 1="" receptor-associated="" proteins;="" tgbr,="" transforming="" growth="" factorβreceptor;="" α-sma,="" α-smooth="" muscle="">

Figura 5. Apelin-13 alivia la lesión inducida por glucosa superior de las células endoteliales de los vasos glomerulares.(A) La viabilidad celular se detectó con el ensayo Cell Counting Kit-8. (B) Se detectaron hRGEC con los experimentos de formación de lúmenes (ampliación, x4). (C) La expresión de AT1R.eNOS, APJ, TGBR, E-cadherina y a-SMA en estas células se determinó con transferencia Western, 'P-0.05". P<0.01><0.001. atir.="" ang,="" i="" type="" 1="" receptor:="" enos,="" endothelial="" nitric="" oxide="" synthase;="" apj,="" angiotensin="" domain="" type="" i="" receptor-associated="" proteins;="" tgbr,="" transforming="" growth="" factor="" βreceptor;a-sma,α-smooth="" muscle="">

Figura 6. Apelin-13 alivia la lesión de las células endoteliales de los vasos glomerulares al suprimir la fibrosis.(A) La viabilidad celular de las células endoteliales de los vasos glomerulares se determinó con el ensayo CellCounting Kit-8. (B) Las hRGEC se detectaron con los experimentos de formación del lumen (aumento, x4). (C) Los niveles de AT1R, eNOS, APJ, TGBR.E.-cadherina y a-SMA en estas células se determinaron con transferencia Western. "P-<><0.01><0.001.stir. ang="" iitype="" 1receptor;enos,="" endothelial="" nitric="" oxide="" synthase;="" apjangiotensin="" domain="" type="" 1="" receptor-associated="" proteins;="" tgbr,="" transforming="" growth="" factorβreceptor;α-sma,a-smooth="" muscle="">

Discusión

La diabetes es una enfermedad metabólica y el trastorno del metabolismo de la glucosa es su principal manifestación clínica. En los últimos años, la incidencia de esta enfermedad ha ido en constante aumento(22). La diabetes conduce al daño y la disfunción de varios órganos. El daño renal inducido por la diabetes es una de las causas más importantes de mortalidad en pacientes con diabetes(23). Las principales manifestaciones clínicas dediabéticonefropatíase ha revelado que es proteinuria y disminución persistente de la función renal (24). Además, la aparición y el desarrollo dediabéticonefropatíahan sido revelados para promover el desarrollo de enfermedades cardiovasculares (25). Por lo tanto, la necesidad de desarrollar una nueva terapia para suprimir el daño causado pordiabéticonefropatíaen los pacientes es urgente.

Apelin es un factor graso en los tejidos adiposos. Un estudio reciente informó que la apelina podría aliviar las manifestaciones clínicas de los pacientes con diabetes al regular los niveles de glucosa en sangre (26). Otro estudio reciente informó que la apelina-36 podría inhibir la secreción de insulina inducida por glucosa de alta concentración (16,7 mmol/), pero no tuvo ningún efecto sobre la secreción de insulina inducida por glucosa de baja concentración (2,8 mmol/)(27). En los cuerpos de ratones obesos y resistentes a la insulina, la apelina podría aliviar la resistencia a la insulina y restaurar el uso de la glucosa en el cuerpo (28). Sin embargo, en el campo dediabéticonefropatía, un estudio reciente informó que los niveles de apelina y su receptor APJ en el suero de pacientes condiabéticonefropatíaaumentaron, y los niveles más altos de apelina y APJ promovieron la formación de vasos sanguíneos e indujeron la proliferación de capilares glomerulares, promoviendo así la aparición y el desarrollo dediabéticonefropatía(29). Sin embargo, otro estudio también indicó queapelín-13podría inhibir la transformación de las células epiteliales tubulares renales en un ambiente con alto contenido de glucosa, lo que inhibiría la aparición y el desarrollo del proceso EMT en las células glomerulares y, en última instancia, retrasaría la aparición dediabéticonefropatía(30). En el presente estudio se demostró que el uso deapelín-13disminuyó los niveles de glucosa en sangre y alivió la resistencia a la insulina en estas ratas. así como también redujo el contenido de proteína urinaria.Apelín-13el tratamiento también alivió el considerable daño inducido por la glucosa en las células endoteliales de los vasos glomerulares. En conjunto, estos resultados indicaron que el uso deapelín-13alivia las manifestaciones dediabéticonefropatía.

Un estudio anterior reveló que la apelina podría reducir el contenido de glucosa en sangre al regular la expresión de eNOS y activar la vía Akt (31). La expresión de apelina también podría producir NO al activar APJ, aliviando así las manifestaciones clínicas dediabéticonefropatía(32). APJ es el receptor deapelín-13, yapelín-13podría ejercer sus efectos biológicos al unirse a la APJ (33). En el presente estudio, también se detectó la producción de NO y la expresión de eNOS y APJ. Se reveló que los niveles de expresión de eNOS y APJ aumentaron en los tejidos renales y las células endoteliales de los vasos glomerulares después del tratamiento conapelín-13. La producción de NO también aumentó en los tejidos renales de ratas después del tratamiento conapelín-13. Estos resultados indicaron queapelín-13promovió la expresión de eNOS mediante la activación de APJ. Por lo tanto, los niveles más altos de eNOS aumentaron la producción de NO y, en última instancia, promovieron la permeabilidad vascular y la filtración renal.

Estudios recientes han indicado que la fibrosis renal es una característica dediabéticonefropatía(34,35). Los resultados del presente estudio revelaron que la expresión de E-cadherina mejoró en las células y los tejidos renales después del tratamiento conapelín-13, mientras que el de a-SMA se redujo.Apelín-13también se reveló un tratamiento para aliviardiabéticonefropatíaal suprimir la fibrosis de los tejidos renales y las células endoteliales de los vasos glomerulares.

En conclusión, el presente estudio reportó los efectos deapelín-13sobre el desarrollo dediabéticonefropatía. Los resultados del presente estudio revelaron queapelín-13aliviadodiabéticonefropatíapromoviendo la producción de NO y aliviando la fibrosis en los tejidos renales. Sin embargo, el presente estudio también tiene una limitación. El estrés oxidativo y la inflamación juegan un papel importante en el desarrollo dediabéticonefropatía(36-40). Ya seaapelín-13mejoradonefropatía diabéticaal reducir la inflamación y el estrés oxidativo justifica la investigación en nuestro estudio futuro.

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Nota:lo anterior no es una lista completa de referencias