Particularidades Morfológicas Y Morfometría De Riñones De Ratas Bajo El Efecto De Lesión Cerebral Traumática Leve Experimental
Feb 27, 2022
INTRODUCCIÓN
El traumatismo craneoencefálico (TCE) es uno de los problemas más importantes de la medicina moderna, que juega un papel preponderante en la morbimortalidad de la población incluso en los países económicamente más desarrollados [3, 7, 8, 10, 11, 20, 23, 25, 26]. Este problema médico es multidisciplinario en el campo de la medicina y la biología práctica y experimental, que además de médica tiene una importante trascendencia social, dada la corta edad de los pacientes traumatizados y el importante costo de su tratamiento [9, 24]. El traumatismo craneoencefálico tiene un efecto global en el cuerpo, provocando una respuesta adaptativa general, que se manifiesta por un complejo de cambios fisiopatológicos y patomorfológicos no solo en el área del daño mecánico directo sino también en varios órganos y sistemas del cuerpo, en particular en elriñones[4, 5]. Actualmente, hay una pequeña cantidad de investigación experimental que revelaría el contenido de los trastornos morfológicos de los órganos internos de ratas pubescentes e inmaduras debido a TBI, especialmente en el período avanzado. En cuanto al TCE pediátrico, se sabe que una característica distintiva de la dinámica y el cuadro clínico del TCE en niños es el impacto de un factor traumático en el cerebro, cuyo crecimiento y desarrollo aún no se ha completado [6]. Además, la intensidad de los procesos metabólicos, la baja tolerancia a la pérdida de sangre, la hipoxia y la hipotensión, la prevalencia de reacciones generalizadas sobre las locales, las altas oportunidades compensatorias con una transición rápida a la descompensación, deben tenerse en cuenta en un caso de TCE en niños [22]. ]. Esta es la razón por la que las lesiones cerebrales traumáticas incluso leves causadas en la infancia no desaparecen sin dejar rastro. Se ha demostrado que en el TCE grave, especialmente en su periodo agudo, el hígado yinsuficiencia renal se encuentran entre los trastornos más comunes, así como trastornos individuales en los vasos coronarios y el miocardio [15]. Complicaciones extracraneales, incluidas las agudaslesión renal,son muy influyentes para determinar el resultado de un traumatismo craneoencefálico grave [2, 12, 13, 17, 19] y pueden contribuir a la morbilidad y la mortalidad. Sin embargo, no existe una comprensión clara de la patogenia de tales efectos ni trabajos experimentales que confirmen o refuten la suposición de cambios morfológicos en elriñón, como resultado de TBI, particularmente — TBI leve. El propósito de este estudio fue revelar el contenido de la morfología de los órganos internos, particularmente elriñones, en ratas afectadas por TBI de gravedad leve con un enfoque particular en ratas púberes. Por lo tanto, la primera etapa de este estudio fue investigar dichos cambios en ratas pubescentes inmediatamente después de la lesión y en el período más avanzado después de la lesión.
Palabras clave:lesión cerebral traumática, riñón, rata, nefrona, renal
LA CITANCHE MEJORARÁ LA INSUFICIENCIA RENAL/RENAL
MATERIALES Y MÉTODOS
El estudio se realizó en 70 ratas blancas adultas de 3 meses de edad con un peso corporal de 180–230 g. Todos los animales se dividieron en dos grupos: 1 — animales sanos (grupo de control, 10 animales), 2 — animales con TBI mecánica simulada de gravedad leve (60 animales). Los animales del grupo 2 se retiraron del experimento los días 1, 3, 5, 7, 14 y 21 después del modelo TBI (10 animales cada día). Las ratas se mantuvieron con una dieta de laboratorio estándar con acceso libre y sin restricciones al agua en el vivero de la Universidad Médica Nacional de Odessa. Todos los experimentos se llevaron a cabo de conformidad con las disposiciones del Convenio Europeo para la Protección de los Animales Vertebrados utilizados para la investigación y otros fines científicos (Estrasburgo, 18.03.1986), Directiva del Consejo de Europa 86/609/ CEE (1986), resoluciones del Primer Congreso Nacional sobre Bioética (Kyiv, 2001) y Orden Nº 690 del Ministerio de Salud de Ucrania (Kyiv, 23 de septiembre de 2009). Todas las etapas de los experimentos fueron aprobadas por la Comisión de Bioética de ONMEDU (Acta No. 109-A, 4.11.2016). Se infligió una LCT leve utilizando el modelo de aceleración de impacto, una caída libre de peso sobre el área parieto-occipital según Meretskyi [16]. Para la reproducción de TBI se utilizó un tubo guía de metal trípode montado verticalmente con un diámetro interior de 1 mm y una altura de 65 cm. El tubo servía de guía para un peso que se movía libremente en el interior. Este último representaba una varilla circular de metal, a la que se le pegaba en el extremo inferior una tira de caucho macizo de 3 mm de espesor y 0,5 cm 2 de área. El soporte del trípode también se pegó con una junta de goma resistente. Mediante anestesia ligera con éter, los animales se colocaron debajo del tubo de modo que la cabeza quedara claramente debajo de la abertura y el experimentador la fijó. Acto seguido el tractor realizó una caída libre con posterior golpe en el cráneo del animal. Por lo tanto, el centro del impacto estaba claramente en la línea sagital hacia adelante, 3-5 mm desde la línea intrauricular. Para la reproducción del TCE de severidad leve en ratas maduras, se utilizó un tractor de 34,5 g, que produjo una energía de impacto de 0,220 J. Los animales fueron retirados del experimento mediante una sobredosis de anestesia con éter, luego de lo cual seriñónse prepararon y obtuvieron muestras para un examen histológico adicional. Los portaobjetos histológicos se tiñeron con hematoxilina y eosina y tricrómico de Mallory, se examinaron y fotografiaron con el microscopio Leica-DMLS mientras que todas las mediciones se realizaron con el software ImageJ (ver.1.51j8).
análisis estadísticoLos resultados obtenidos se probaron para la normalidad de la distribución con la prueba de Shapiro-Wilk. Todos los datos se presentaron como M ± DE, donde "M" representa el promedio y "DE" la desviación estándar. Las diferencias entre los grupos se analizaron mediante análisis de varianza (ANOVA) con la prueba post-hoc de Tukey. Las diferencias resultaron ser estadísticamente significativas con el valor de p < 0.05.="" todo="" el="" cálculo="" estadístico="" se="" realizó="" con="" el="" software="" rstudio="" (ver.="">
RESULTADOS
Después del modelo TBI, no se registraron muertes, cambios de comportamiento o dietéticos en los animales. El primer día después de la lesión experimental infligida, se observó hiperemia de los capilares tubulares con estasis de eritrocitos en su luz en todos los especímenes histológicos examinados. El diámetro medio aumentó hasta 6,75 ± 1,98 µm (índice del grupo control 4,60 ± 1,72 µm, p < 0,001;="" fig.="" 1)="" mientras="" que="" el="" diámetro="" de="" las="" arteriolas="" aferentes="" dilatadas="" estaba="" en="" el="" rango="" de="" 10–15="" µm.="" algunas="" venas="" estaban="" dilatadas="" con="" estasis="" de="" eritrocitos="" en="" su="" luz="" con="" 40-60="" µm="" de="" diámetro.="" también="" se="" observó="" estasis="" eritrocitaria="" en="" la="" luz="" de="" las="" arterias="" de="" mediano="" calibre.="" los="" glomérulos="" de="" nefrona="" estaban="" fragmentados="" y="" su="" diámetro="" permanece="" en="" el="" rango="" del="" valor="" del="" grupo="" de="" control,="" así="" como="" el="" diámetro="" de="" la="" cápsula="" (tablas="" 1,="" 2).="" los="" capilares="" de="" los="" glomérulos="" se="" estrecharon="" a="" 2,44="" µm="" y="" se="" dilataron,="" con="" un="" valor="" máximo="" de="" hasta="" 9,91="" µm="" en="" comparación="" con="" el="" grupo="" de="" control,="" donde="" el="" valor="" máximo="" se="" mantuvo="" en="" 7,80="" µm.="" el="" valor="" medio="" fue="" de="" 5,25="" ±="" 1,51="" µm="" (fig.="" 2),="" significativamente="" superior="" al="" del="" grupo="" control="" (p="">< 0,05).="" al="" 3er="" día="" del="" experimento,="" en="" todas="" las="" muestras="" persistía="" la="" dilatación="" de="" los="" capilares="" tubulares="" con="" estasis="" eritrocítica="" en="" su="" lumen.="" su="" diámetro="" en="" ciertas="" áreas="" fue="" de="" hasta="" 12,12="" µm="" con="" un="" valor="" medio="" de="" 6,43="" ±="" 1,98="" µm,="" el="" diámetro="" de="" los="" capilares="" glomerulares="" también="" aumentó="" (cuadro="" 3).="" se="" observó="" estasis="" eritrocítica="" en="" las="" venas="" de="" todos="" los="" calibres="" con="" dilatación="" de="" las="" mismas="" en="" áreas="" separadas="" alcanzando="" hasta="" 40-50="" µm.="" este="" fue="" especialmente="" el="" caso="" del="" área="" entre="" la="" capa="" cortical="" y="" el="" área="" medular.="" también="" se="" observó="" dilatación="" de="" vasa="" recta="" con="" diámetro="" que="" alcanzaba="" hasta="" 12-15="" µm="" con="" estasis="" eritrocitaria="" en="" su="" luz.="" en="" los="" días="" 5="" y="" 7="" del="">renalSe observaron corpúsculos de varios tamaños en la mayoría de los especímenes examinados. El diámetro del glomérulo el día 5 fue de 76,85 ± 15,19 µm y el día 7 de 77,78 ± ± 15,31 µm. El diámetro de la cap-sule de larenalEl corpúsculo también había alcanzado su valor máximo: 93,07 ± 14,76 µm el quinto día y 94,06 ± 14,82 µm el séptimo día. el diametro de
los capilares tubulares y los capilares de los glomérulos de la nefrona habían alcanzado su máximo a lo largo del experimento en el día 7 (Figs. 1, 2, Tablas 3, 4). Esto se debió predominantemente a la dilatación de los capilares corticales que estaban cerca delrenalcápsula mientras que el diámetro de algunos capilares era de 15,46 µm. En algunos lugares,renallos corpúsculos estaban parcialmente destruidos y había una dilatación del espacio entre los glomérulos y la cápsula. Las pequeñas arterias estaban congestionadas, principalmente, con eritrocitos agregados (lodo). El espacio perivascular mostraba impregnación de las células sanguíneas e infiltrados linfocíticos masivos con hemorragia perivascular en algunas zonas (fig. 3). La médula renal mostró las áreas con signos derenalinfarto y destrucción de los túbulos proximal y distal. Uno de los rasgos característicos de este período fue la dilatación de las venas arciformes con estasis de sangre en su luz, cuyo diámetro alcanzaba los 50-80 µm.
En los días 14 a 21 después del TCE, los cambios escleróticos delrenalfocalmente se observaron corpúsculos (Fig. 4) así como los infiltrados perivasculares masivos y signos iniciales de esclerosamiento de espacios perivasculares en larenalmédula (Fig. 5). Se observaron infiltrados en todos los especímenes, mientras que se detectaron signos de esclerosis en 6 animales. losrenallos corpúsculos estaban fragmentados focalmente con infiltrados en su lugar y los signos de formación del tejido conectivo (Figs. 4, 6). La luz de los vasos, especialmente las venas, estaba llena de glóbulos rojos que ocasionalmente se pegaban a su íntima. El diámetro de los capilares y el tamaño de los glomérulos tendieron a disminuir, aunque todos sus valores permanecieron significativamente mayores que los del grupo control. La dilatación venosa y la agregación de células sanguíneas se manifestaron especialmente en el área entre larenalcorteza y la médula de manera similar a los períodos anteriores.
DISCUSIÓN
Según la literatura de investigación, los trastornos disfuncionales causados por una lesión craneoencefálica grave se manifiestan en forma derenalinsuficiencia que se desarrolla como resultado del síndrome diencefálico-catabólico [4, 5]. En el tratamiento clínico de pacientes con TCE grave se describen cambios funcionales discirculatorios en forma de espasmo de las arterias, arteriolas, plétora venosa y hemorragias diapedéticas. En el futuro, esto conduce a cambios metabólicos, distróficos y necróticos. El primer signo clínico de esto es la aparición de glóbulos rojos, proteínas y cilindros en la orina.
El mecanismo desencadenante podría ser, muy probablemente, un subidón masivo de adrenalina en el torrente sanguíneo con un espasmo subsiguiente del lecho microcirculatorio que conduce a la hepatopatía aguda.renalinsuficiencia. Pero tales complicaciones se explican no solo por el estrés, sino también por la activación del sistema de citoquinas en respuesta al daño cerebral que conduce a una respuesta inflamatoria sistémica [14, 18]. Debido a un espasmo prolongado y a la influencia de las catecolaminas, comenzaron a desarrollarse signos de daño hipóxico del endotelio vascular junto con la formación de lodos y trombos, aumento de la permeabilidad endotelial y expresión de moléculas de adhesión endotelial [18] que en los períodos más prolongados de el experimento condujo al infarto delrenalparénquima, destrucción delrenalcorpúsculos, formación de cambios escleróticos y desarrollo de enfermedades crónicas.renalinsuficiencia. Los mecanismos de desregulación central después de una lesión cerebral podrían contribuir al desarrollo y la progresión de la disfunción de órganos extracerebrales al promover la inflamación sistémica que puede causar complicaciones médicas.
CITANCHE MEJORARÁ LA FUNCIÓN RENAL/RENAL
Estudios microscópicos de lariñonesen la primera hora después del TCE fuerte mostró cambios discirculatorios absolutos manifestados por el espasmo de los vasos, congestión y áreas de la diapédesis hemorragias en el límite entre elriñóncorteza y la médula [1, 15]. Al tercer día después de la lesión, los procesos patomorfológicos se complican por los procesos distróficos y necróticos con manifestación de necrosis isquémica del epitelio tubular y edema intersticial con desorganización del tejido conectivo [1, 15]. En el caso del TCE severo, se observaron cambios discirculatorios en el hígado, miocardio yriñonesSe acompañaban de isquemia, congestión, infiltrado macrófago y linfocitario con dilatación de vasos de diversos calibres, que en el periodo más prolongado tras el TCE (día 5) se complicaban por los procesos patomorfológicos en forma de cambios distróficos y necróticos en todos los órganos [15, 21].
En el curso de este estudio, el siguiente patrón en el desarrollo de cambios patológicos en las ratasriñones rSe constató el resultado del TCE leve: en los días 1 a 3, se observó el desarrollo de cambios en su mayoría discirculatorios manifestados por el espasmo de las arteriolas, dilatación de los capilares y del lecho venoso; en los días 5 a 7, los cambios discirculatorios aumentan y se acompañan de las áreas de destrucción de los túbulos contorneados yrenalcorpúsculos. Tales cambios junto con la congestión y las áreas de diapédesis y hemorragias perivasculares se manifiestan mejor entre la corteza y la médula y en las áreas cercanas a larenalcápsula. Estos cambios patológicos pueden explicar los trastornos de los procesos de filtración y reabsorción de orina y son propios de la etapa de la fase aguda.insuficiencia renal; en los días 14 a 21, la intensidad de los cambios discirculatorios y destructivos disminuye, aunque hay indicios de esclerosis perivascular focal, infiltrados perivasculares e indicios de esclerosis de algunosrenalcorpúsculos. En el contexto de la aplicación clínica de los resultados de los estudios experimentales de los efectos de TBI en ratas, cabe señalar que lariñónestructural y funcionalmente tiene similitudes con el ser humanoriñón. Las diferencias menores se dan principalmente a nivel macroestructural; La ratariñón,a diferencia de los humanos, contiene una pirámide. La estructura de la red vascular también difiere. Pero la estructura de la nefrona, la jerarquía deriñóncapas, y su funcionamiento es similar a los que se encuentran en los humanos. Esta similitud nos permite hacer suposiciones sobre la similitud de los cambios patológicos causados por TBI. La limitación de las conclusiones completas de los resultados de este trabajo es su carácter exclusivamente morfológico. Para una conclusión completa y voluminosa, los aspectos fisiológicos de estos cambios también deben investigarse para evaluar una posible estrategia para el tratamiento y la prevención de las complicaciones del tracto urinario por TBI. Sin embargo, la conclusión segura para los médicos puede ser que se necesita atención no solo para los pacientes con TBI grave, sino también para aquellos con lesiones leves en la cabeza. En particular, si el traumatismo craneoencefálico leve es parte del politraumatismo, o si dichos pacientes tienenrenalpatología.
LA CITANCHE MEJORARÁ LA ENFERMEDAD RENAL/RENAL
CONCLUSIONES
Resumiendo los datos de estos experimentos y considerando los informes relevantes contenidos en la literatura de investigación, es razonable concluir que existe una clara dependencia de la dinámica del desarrollo y un grado notable de cambios patológicos enriñonessobre la gravedad del TCE. En caso de una lesión cerebral traumática leve, los mayores cambios en las ratasriñonesaparecen en los días 5 a 7 después de la lesión, que tienen una tendencia constante a disminuir después de eso. Sin embargo, cambios morfológicos en forma de esclerosis perivascular y cambios focales en elrenalcorpúsculos muestran los signos de un posible desarrollo de una crónicainsuficiencia renalincluso después de una lesión cerebral traumática leve.
