Primera parte|Estudio sobre la función neuroendocrina-inmune de los glucósidos feniletanoide de la hierba Cistanche que vive en el desierto en un modelo de rata perimenopáusica

Primera parte ¿Cómo mejora la inmunidad el ingrediente eficaz Phenylethanoid Glycosides of Cistanche?

Para más información:Ali.ma@wecistanche.com

Shuo Tiana, Ming-san Miaoa,b,*, Xiu-min Li c,d,*, Ming Baia, Yan-Yi Wua, Zhen-Zhen Wei

una. Departamento de Farmacología, Universidad de Medicina China de Henan, Zhengzhou, 450008, China b. Centro Internacional de MTCinmune-farmacología, Universidad de Medicina China de Henan, Zhengzhou, 450008, China. C. Alergia e Inmunología Pediátrica, Escuela de Medicina Icahn en Mount Sinai, Nueva York, NY 10029 d. Departamento de Microbiología yInmunología, New York Medical College, Valhalla, NY 10595. * autores correspondientes

Resumen:

Relevancia etnofarmacológica Vivir en el desiertohierba cistanchese registró por primera vez en "Shen Nong'Herbal Classic" y figura como la medicina herbaria de grado superior en él.Glucósidos feniletanoidesson componentes indicativos para la identificación y determinación del contenido deHierba Cistanche que vive en el desiertoen la farmacopea china, que también es uno de los principales componentes activos. En esta investigación, exploramos el mecanismo de los glucósidos feniletanoides deHierba Cistanche que vive en el desiertoa las ratas modelo perimenopáusicas.

Apuntar:El propósito de este estudio es investigar los efectos de los glucósidos feniletanoides deHierba Cistanche que vive en el desierto(PGC) en el neuroendocrino-inmunefunción del síndrome perimenopáusico en ratas modelo perimenopáusicas.

materiales y métodos

Se seleccionaron ratas hembra Wistar. Se extirparon los ovarios izquierdos de todas las ratas excepto en el grupo de control en blanco (BC), y los ovarios derechos se extirparon en el 80 por ciento. El frotis vaginal mostró cambios irregulares en el ciclo estral para las ratas modelo perimenopáusicas. Y a las ratas modelo perimenopáusicas se les administró por sonda Gengnian'an, glucósidos feniletanoideos deDesertliving Cistanche hierba alta, media, una suspensión baja que es de 450 mg/(kg día), 133,33 mg/(kg día), 66,67 mg/(kg día), 33,33 mg/(kg día); el grupo de BC y el grupo modelo (MC) recibieron agua destilada en el mismo volumen que el grupo de drogas durante 30 días consecutivos. Las puntuaciones de ejercicio horizontal-vertical se midieron a los 29 días de dosificación. Después de la última administración, se extrajo sangre de la aorta abdominal y se midieron los niveles de E2, LH, FSH, GnRH, BGP en suero y los niveles de -EP en plasma respectivamente. Se calcularon los índices de órganos del timo, el bazo y el útero. Se midió el contenido de receptores de estrógenos (RE) en los tejidos hipotalámico, pituitario y del útero y el contenido de receptores de andrógenos (AR) en el homogeneizado hipotalámico. Los cambios patológicos del timo, bazo, útero, ovario se observaron mediante tinción con HE.

Resultados

En comparación con MC, PGC aumenta la actividad, el índice de órganos (timo, bazo, útero), E2, T, nivel de BGP en suero, nivel de -EP en plasma, nivel de AR en el hipotálamo, nivel de ER en el hipotálamo, pituitaria, útero en ratas modelo perimenopáusicas. Y también redujo los niveles de FSH, LH, GnRH en suero y mejoró las lesiones uterinas y ováricas en ratas modelo perimenopáusicas.

Conclusión

Cada dosis de PCG podría contrarrestar el trastorno de la hormona sexual en ratas modelo perimenopáusicas, corregir el desequilibrio de los niveles de ER y AR, mejorar y restaurar el efecto del útero y las células nerviosas del hipotálamo y mejorar la función inmunológica.

Haga clic en el producto Cistanche y los efectos secundarios de la cistanche 

Abreviatura

PGC, glucósidos feniletanoides de la hierba Desertliving Cistanche; GC, grupo Gengnian'an; PGC-HD, glucósidos feniletanoides del grupo de dosis alta de la hierba Cistanche de Desertliving; PGC-MD, glucósidos feniletanoide del grupo de dosis media de la hierba Cistanche de Desertliving; PGC-LD, glucósidos feniletanoide del grupo de dosis baja de la hierba Cistanche de Desertliving; eje HPO, eje hipotálamo-hipófisis-ovario; E2, estradiol; T, testosterona; FSH, hormona foliculoestimulante; LH, hormona luteinizante; GnRH, hormona liberadora de gonadotropina; -EP, Beta-endorfina; RE, Receptor de Estrógenos; AR, Receptor de Andrógenos; TRH, Terapia de Reemplazo Hormonal; BGP, proteínas óseas que contienen ácido gamma-carboxiglutámico.

Palabra clave:glucósidos de feniletanoidede la vida en el desiertohierba cistanche; ratas modelo perimenopáusicas;función neuroendocrino-inmune

Para obtener más información, comuníquese con:ali.ma@wecistanche.com

1. Introducción

Con el envejecimiento de la población, la incidencia del síndrome perimenopáusico va en aumento. Algunos estudios han encontrado que la edad de aparición del síndrome perimenopáusico ha ido descendiendo a nivel internacional y ha disminuido de los 65 a los 35 años. La medicina moderna cree que el síndrome perimenopáusico se refiere a los síntomas causados ​​por la disminución de la función ovárica (Miao et al., 2017). El nivel de estrógeno es bajo, lo que provoca funciones anormales como las funciones endocrinas, nerviosas e inmunitarias. Las principales manifestaciones clínicas son los sofocos, la sudoración, las palpitaciones, el insomnio, la irritabilidad, la menstruación irregular, la osteoporosis y la incidencia de enfermedades cardiovasculares (Lobo et al., 2014; Alvarado-García, et al., 2015), que afectan gravemente al vida de las mujeres perimenopáusicas. La terapia de reemplazo hormonal (TRH) es el método principal para el tratamiento de este síndrome, pero la terapia de reemplazo de estrógenos a largo plazo puede causar efectos adversos como coprofagia, dolor distendido en el seno, carcinoma de endometrio, cáncer de mama y mayor incidencia de enfermedades cardiovasculares y cerebrovasculares, y es susceptible de recurrencia (Perrone et al., 2013). Estos síntomas limitan su aplicación clínica, por lo que las personas están prestando cada vez más atención a los problemas de esta etapa especial de la menopausia.

Las características de síndromes como "vísceras", "coagulación de sangre vieja", "enfermedad del lirio", "síndrome de depresión" y "no desobediencia" registradas en la medicina tradicional china son similares a las del síndrome menopáusico médico moderno. Pertenecen a la categoría de varios síntomas antes y después de la menopausia. "Suwen: Shanggu Tianzhen Lun", dijo: "El canal Ren es débil cuando la gente tenía 49 años, y el buque de paso se reducirá, la esencia estimulante del sexo se agota y otros fenómenos, por lo tanto, una mujer pierde la función de un feto." Y la esencia estimulante del sexo se transforma en esencia renal, por lo que la medicina tradicional china (MTC) cree que el principal patógeno de la enfermedad es una deficiencia renal (Peng, 2014). Los estudios también han demostrado que la disminución de la función ovárica es la causa del síndrome de astenia renal en la terminología de la MTC. La reducción de los niveles de E2, LH, FSH, es una expresión de la astenia renal (Liu et al., 2010), y el estudio encontró que la mayoría de los medicamentos de reposición del yang renal tienen un mejor efecto de tratamiento sobre el síndrome perimenopáusico (Zhang y Miao, 2011; Cao et al., 2016; Wang et al., 2016; Tian et al., 2017;), por lo que debemos comprender firmemente el papel de la "deficiencia renal" en la terminología de la MTC como la principal patogénesis en el tratamiento clínico. , y enfatizando el objetivo principal de reponer el riñón. Estudios han demostrado que al reponer el riñón la medicina china puede regular la disfunción del eje HPO, retrasar el envejecimiento ovárico, regular el sistema nervioso-endocrino-inmune, mejorar la inmunidad y prevenir la osteoporosis (Shi, et al., 2007), entre otros efectos.

La hierba Cistanche que vive en el desierto es un tallo seco, escamoso y carnoso deCistanche deserticoLa YCmamá oCistanche tubulosa(Schenk) Wight, es una planta medicinal parásita perenne. Tiene el efecto de reponer el riñón, reponer la esencia y la sangre, aflojar el intestino para aliviar el estreñimiento y otros efectos. vida en el desiertohierba cistanchese usa comúnmente en la medicina tradicional china para vigorizar el riñón y fortalecer el yang, que se llama "ginseng del desierto". La investigación moderna ha demostrado que tiene efectos antienvejecimiento, mejora la inmunidad del cuerpo, mejora la capacidad de aprendizaje y memoria, efectos antiinflamatorios y antifatiga, entre otros (Li, et al., 2010). La composición química de la hierba Desertliving Cistanche es compleja y el contenido de glucósidos feniletanoides es el más alto de los materiales medicinales originales. También es uno de los principales componentes activos del Desertlivinghierba cistanchepara ejercer un efecto similar al de los andrógenos y propiedades inmunomoduladoras (Zhao y Pan, 2013). Y PGC podría mejorar el trastorno de la hormona sexual (E2, T, FSH, LH) en ratones perimenopáusicos, y tiene un buen efecto terapéutico en ratones perimenopáusicos, consulte el estudio relacionado (Tian et al., 2017)

En la actualidad, la investigación sobre el síndrome perimenopáusico se centra en el sistema endocrino, el sistema nervioso, la función inmune, etc., pero el trastorno de la regulación endocrino-inmune es la principal causa del síndrome perimenopáusico (Wang et al., 1999; Zhang y Wang, 2001). Este estudio examinó el efecto de PGC en las ratas modelo perimenopáusicas desde la perspectiva de la función endocrina-inmune.

2. Materiales y métodos

2.1 Animales de experimentación

Se compraron ratas Wistar hembra (210 ~ 230 g) de Shandong Lukang Pharmaceutical Co., Ltd., Número de permiso de animales: 0017216, certificado de laboratorio No. SYXK (Henan) 2010-001. Todas las ratas se mantuvieron con libre acceso a comida y agua en jaulas de plástico a 22±2 grados, humedad relativa del 50 por ciento -60 por ciento. Y los animales se alojaron durante una semana antes de los experimentos.

2.2 Materiales y reactivos

MANUSCRITO Carboximetilcelulosa sódica, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Manufacturing Co., Ltd., número de lote: 20120418; Bencilpenicilina potásica para inyección, Huabei China Pharmaceutical Co., Ltd., Especificación: 4 millones de unidades, Número de lote de producción: c1206807; Solución de formaldehído (puro analítico), Yantai Shuangshuang Chemical Co., Ltd., lote de producción n.°: 20130902; hidrato de cloral, Instituto de Investigación Química Fina de Tianjin Guangfu, número de lote 20120827; rata E2, T, FSH, LH, GnRH, AR, ER, BGP, -EP Caja de reactivos de detección ELISA, I+D, número de lote: 20140101A.

2.3 Medicamentos experimentales

Se ha publicado el método de preparación específico y la detección de contenido de PGC. Ver la literatura y el contenido es 66,47 por ciento (Tian et al., 2017). Cápsula Gengnian, ingredientes: Rehmannia, Rehmannia glutinosa, Alisma, Ophiopogon japonicas, Scrophulariaceae, Cortex Moutan, Poria, Mother of Pearl, Curculigo, Schisandra, Magnet, Shouwu Vine, Uncaria, Floating Wheat, Polygonum multiflorum. Indicaciones: nutrir el yin y el yang, deshacerse del problema y calmar la mente, y se usa para la menopausia con sofocos, sudoración, vértigo, tinnitus, irritabilidad e insomnio. Especificaciones: 0,3 g por cápsula. Modo de empleo y dosificación: Oral, 3 cápsulas a la vez, 3 veces al día. Empresa de producción: Shanxi Tianxing Pharmaceutical Co., Ltd. Número de lote de producción: 121104. Número de aprobación: Medicina Nacional Zhunzi Z14021848.

2.4 Instrumento experimental

Cámara de prueba de actividad de apertura, Chengdu Taimeng Software Co., Ltd., modelo OFT-100; microscopio motorizado, empresa japonesa OLYMPUS, modelo: BX61; lector de microplacas, empresa estadounidense BIO-RAD, modelo: 680; Centrífuga refrigerada de alta velocidad X3R, EE. UU. Mercury Technology Co., Ltd.

2.5 Preparación y agrupación de modelos animales

Se tomaron ochenta ratas que pesaban {{0}} g y se seleccionaron aleatoriamente 12 ratas como grupo BC, y las ratas restantes se usaron para modelos animales perimenopáusicos. El método de preparación de ratas modelo perimenopáusicas, método de literatura de referencia (Miao et al., 2015), eliminó completamente el ovario izquierdo, se eliminó el 80 por ciento del ovario del lado derecho. Cuidadosamente criados después de la operación, y para la prevención de la infección a la inyección de penicilina 20U/kg (0,1 ml) por vía intramuscular, durante 3 días consecutivos, una vez al día. Después de 5 días de la cirugía, se realizó el examen de frotis vaginales de las ratas uno a uno, una vez al día y consecutivos durante 5 días. Las ratas con reacciones de celo fueron descartadas. Sesenta ratas ovariectomizadas se dividieron al azar y por igual en 5 grupos para uso experimental. Eran el grupo modelo (MC), el grupo Gengnian'an (GC), los glucósidos feniletanoideos de la hierba Cistanche de Desertliving alta (PGC-HD), media (PGC-MD), grupo de dosis baja (PGC-LD).

2.6 Método de configuración de medicamentos

(1) Las dosis de PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD son 133,33 mg/kg, 66,67 mg/kg y 33,33 mg/kg (volumen de administración 1 ml/100 g) respectivamente. Método de configuración: pesar PGC 1333,3 mg, 666,7 mg, 333,3 mg, primero disuelto con una pequeña cantidad de agua destilada, luego se agrega agua destilada a 100 ml y se mezcla bien, ese es el PGC-HD, PGC-MD, PGC- Suspensión LD. (2) La dosis de GC es de 450 mg/kg, y el volumen de administración es el mismo que el anterior, lo que equivale a 10 veces la dosis clínica. Método de configuración: tome 15 cápsulas de Gengnian Capsule, disuélvalas primero con una pequeña cantidad de agua destilada, luego ajústelas a 100 ml y mézclelas. Esta es la suspensión de GC deseada.

2.7 Forma de administración

A cada grupo de animales se le suministró el fármaco correspondiente al décimo día después de la operación. Al grupo GC se le administró 450 mg/kg de suspensión en cápsula Gengnian, y PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD se administró respectivamente con suspensión PGC-HD, PGC-MD, PGC-LD que es 133,33 mg/kg, 66,67 mg /kg, 33,33 mg/kg. Al grupo BC y MC se les administró respectivamente el mismo volumen de agua destilada, una vez al día durante 30 días.

2.8 Prueba de campo abierto

Las ratas de cada grupo se sometieron a prueba para las puntuaciones de ejercicio horizontal-vertical a los 29 días de la administración. El dispositivo experimental es una caja abierta cúbica con una altura de 40 cm y una longitud de 80 cm y un ancho de 80 cm. La pared periférica y la superficie inferior son negras, y la superficie inferior está compuesta por 25 bloques de igual área, que están divididos por líneas blancas. Durante el experimento, las ratas se colocaron en el cuadrado de la caja abierta y se observaron las puntuaciones de actividad horizontal de las ratas que pasaban por la superficie inferior en 5 minutos (los cuadrados en los que entraron las cuatro garras), y la puntuación de actividad vertical del número de patas traseras estaba erigida (dos patas delanteras estaban desocupadas o trepando por la pared). Las heces deben eliminarse por completo después de cada experimento y medirse una vez después de 2 horas de administración. Este experimento se llevó a cabo en una habitación tranquila.

2.9 Determinación del nivel de E2, T, LH, FSH, GnRH, BGP en suero y niveles de -EP en plasma

Ratas en cada grupo después de la última administración de 2 horas (ayuno durante 12 horas), anestesia abdominal, se extrajo sangre de la aorta abdominal, se separaron el suero y el plasma (4 grados, 3500 rpm, 10 min), se almacenaron en un refrigerador. en -80 grado. El uso de un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas midió el nivel de E2, T, LH, FSH, GnRH, BGP en suero y el nivel de -EP en plasma. El método específico de operación se realizó de acuerdo con las instrucciones.

2.10 Determinación de ER y AR en homogeneizados de hipotálamo, hipófisis y tejido uterino

Después de extraer sangre de la aorta abdominal, se sacrificaron las ratas. Se extrajeron del cuerpo el hipotálamo, la hipófisis y el útero. Se homogeneizaron el hipotálamo, la hipófisis y la mitad del útero. El método de homogeneización fue el siguiente: el bloque de tejido se enjuagó en 0 cloruro de sodio enfriado con hielo, se extrajo la sangre y se usó el papel de filtro para secar el tejido, se pesó el tejido y se cortó en tubos de homogeneizado de vidrio y se homogeneizaron añadiendo 0,9 por ciento de cloruro de sodio preenfriado (la proporción de tejido y 0,9 por ciento de cloruro de sodio es 1:9). El tubo de homogeneización manual izquierdo se inserta en el recipiente que contiene la mezcla de hielo y agua. La mano derecha se inserta en la carcasa verticalmente y se gira hacia arriba y hacia abajo varias veces (6 ~ 8 minutos), tritura completamente, homogeneiza el tejido, centrifuga (4 grados, 3500 rpm, 10 min) y almacena en -80 grado C en el refrigerador. El contenido de ER en homogeneizados de hipotálamo, hipófisis y tejidos uterinos, y el contenido de AR en homogeneizados de hipotálamo se determinaron mediante ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) de acuerdo con las instrucciones.

2.11 Cálculo del índice de órganos

Las ratas de cada grupo después de la última administración de 2 horas (en ayunas durante 12 horas), se sacrificaron las ratas y se extirparon el timo, el bazo, el útero y el 20 por ciento restante del tejido ovárico, se pesaron los pesos húmedos y se Se calculó el índice de órganos de timo, bazo y útero. La fórmula es la siguiente:

: Índice de órganos=Peso de órganos húmedos (mg)/ Masa corporal de rata (g)

2.12 Observación de la morfología del útero, ovario, timo, bazo y medición del grosor de la corteza tímica y los nódulos del bazo

El timo, el bazo, el útero y el ovario se fijaron en una solución de formaldehído al 10 por ciento, se incluyeron en parafina, se seccionaron, se tiñeron con HE y se observaron los cambios histomorfológicos bajo un microscopio óptico. Usando el micrómetro, se midió el grosor de la corteza del timo en los puntos más gruesos y más estrechos de cada rata en cada grupo experimental. El promedio es el grosor de la corteza del timo. La línea base del micrómetro se colocó en los nódulos del bazo hacia el centro. Determinación del grosor del bazo en ambos lados con la arteria central como centro, y el promedio es el grosor del bazo.

2.13 Análisis estadístico

El análisis de datos utiliza el paquete estadístico médico SPSS21.0 para realizar el procesamiento estadístico de los datos, y los datos metrológicos se expresan como media ± desviación estándar (x±s), la comparación entre los grupos utiliza un análisis de varianza de factor único . Se utilizó el método LSD para la prueba de varianza de homogeneidad, el método de Games-Howell para la prueba de varianza desigual y la prueba de Ridit para los datos de grado.

3. Resultados experimentales

3.1 Efectos del comportamiento en ratas modelo perimenopáusicas

De la figura 1 (A, B). Se puede ver que, en comparación con BC, las puntuaciones de movimiento horizontal y vertical de las ratas del grupo MC se redujeron significativamente (P<0.01), which="" reflected="" the="" curiosity="" of="" the="" rats="" about="" the="" unfamiliar="" environment.="" compared="" with="" mc,="" each="" group="" could="" increase="" the="" horizontal="" exercise="" score="" of="" rats=""><0.01), and="" the="" pgc-hd,="" pgc-md,="" pgc-ld="" significantly="" increased="" the="" vertical="" movement="" score="" of="" rats=""><0.05). the="" pgc-ld="" group="" had="" the="" tendency="" to="" increase="" the="" vertical="" motion="" integral="" of="">

<0.01);" alt=" Effect of behavior on perimenopausal model rats. In A and B, which " a"="" represents="" that="" there="" is="" a="" significant="" difference="" between="" the="" mc="" group="" and="" the="" bc="" group="" (p=""><0.01);" width="795" height="537" border="0" vspace="0" style="width: 795px; height: 537px;">

3.2 Efecto del índice de órganos relacionados en ratas modelo perimenopáusicas

En la Fig. 2 (A, B, C), pudimos ver que, en comparación con BG, el índice de órganos del timo, el bazo y el útero en las ratas del grupo MC disminuyó significativamente (P<0.01), which="" indicates="" that="" the="" thymus,="" spleen,="" and="" uterus="" appeared="" to="" shrink="" in="" perimenopausal="" model="" rats="" caused="" by="" incomplete="" removal="" of="" the="" ovary.="" compared="" with="" mc,="" the="" organ="" index="" of="" the="" thymus="" and="" spleen="" of="" the="" perimenopausal="" model="" rats="" were="" increased="" significantly="" in="" each="" drug="" group=""><0.01). the="" pgc-hd,="" pgc-md,="" and="" gc="" groups="" increased="" the="" uterine="" index="" of="" the="" perimenopause="" model="" rats=""><0.01). pgc-md="" increased="" the="">índice de útero de ratas modelo perimenopáusicas significativamente (P<0.05).>

3.3 Efecto de indicadores bioquímicos en ratas modelo perimenopáusicas

Como se muestra en la Fig. 3. (A, B, C, D), en comparación con el grupo BC, los niveles de E2 y T en suero en el grupo MC disminuyeron significativamente (P<0.01), and="" the="" levels="" of="" lh="" and="" fsh="" were="" significantly="" increased=""><0.01), which="" indicating="" that="" incomplete="" removal="" of="" the="" ovary="" into="" perimenopausal="" model="" rats="" leads="" to="" the="" sex="" hormone="" disorder,="" the="" perimenopausal="" model="" rats="" was="" successfully="" replicated.="" compared="" with="" the="" mc="" group,="" each="" drug="" group="" could="" significantly="" increase="" levels="" of="" e2,="" t="" in="" serum="" and="" reduce="" levels="" of=""><0.01); pgc-md,="" gc="" group="" could="" significantly="" reduce="" the="" elevated="" of="" lh="" levels=""><0.01), pgc-hd="" could="" significantly="" reduce="" the="" level="" of="" lh=""><0.05); pgc-ld="" could="" reduce="" the="" level="" of="" lh.="" from="" fig.="" 3="" (e,="" f),="" compared="" with="" the="" bc="" group,="" the="" level="" of="" gnrh="" of="" the="" mc="" group="" in="" serum="" was="" significantly="" increased,="" and="" the="" level="" of="" β-ep="" in="" plasma="" was="" significantly="" decreased=""><0.01), it="" is="" indicated="" that="" incomplete="" ovarian="" ablation="" leads="" to="" a="" sex="" hormone="" disorder="" in="" the="" perimenopausal="" model="" rats,="" and="" the="" related="" hormones="" secreted="" by="" the="" hypothalamus="" were="" also="" disordered="" due="" to="" negative="" feedback="" regulation.="" compared="" with="" the="" mc="" group,="" the="" level="" of="" gnrh="" in="" each="" drug="" group="" was="" significantly="" reduced=""><0.01); the="" level="" of="" β-ep="" was="" significantly="" increased="" in="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc=""><0.01), the="" level="" of="" β-ep="" in="" plasma="" were="" significantly="" elevated="" in=""><>

<0.01);" alt="Effect of biochemical indicators in perimenopausal model rats. In A, B, C, D, E, and F, which " a"="" represents="" that="" there="" is="" a="" significant="" difference="" between="" the="" mc="" group="" and="" the="" bc="" group="" (p=""><0.01);" width="690" height="744" border="0" vspace="0" style="width: 690px; height: 744px;">

3.4 Efecto de los niveles de BGP en suero en ratas modelo perimenopáusicas

Se puede ver en la Fig. 4 que el nivel de BGP en suero en el grupo MC fue significativamente más bajo que el grupo BC (P<0.01), indicating="" that="" the="" level="" of="" bgp="" in="" perimenopausal="" model="" rats="" with="" incomplete="" ovaries="" was="" reduced.="" compared="" with="" the="" mc="" group,="" the="" bgp="" levels="" in="" the="" pgc-hd,="" pgc-md,="" pgc-ld,="" gc="" group="" was="" increased="" significantly=""><>

<0.01)" alt=" Effect of BGP levels in serum in perimenopausal model rats. In Fig.4, which " a"="" represents="" that="" there="" is="" a="" significant="" difference="" between="" the="" mc="" group="" and="" the="" bc="" group="" (p=""><0.01)" width="700" height="455" border="0" vspace="0" style="width: 700px; height: 455px;">

3.5 Efecto de ER, AR en ratas modelo perimenopáusicas

Se puede ver en la Fig. 5 que, en comparación con el grupo BC, los niveles de ER y AR en las ratas modelo perimenopáusicas disminuyeron significativamente (P<0.01), it="" indicated="" that="" the="" hormone="" receptors="" in="" the="" body-related="" tissues="" of="" the="" perimenopausal="" model="" rats="" caused="" by="" incomplete="" ovariectomy="" were="" reduced,="" which="" reduced="" the="" biological="" effects="" of="" estrogen="" and="" androgen.="" as="" shown="" in="" fig.="" 5="" (a,="" b,="" c),="" compared="" with="" the="" mc="" group,="" each="" drug="" group="" could="" significantly="" increase="" the="" level="" of="" er="" in="" the="" hypothalamus,="" pituitary,="" and=""><0.01); from="" fig.="" 5(d),="" the="" levels="" of="" ar="" in="" the="" hypothalamic="" in="" the="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc="" group="" were="" significantly="" increased=""><>

3.6 Efecto de la morfología patológica del útero en ratas modelo perimenopáusicas

De acuerdo con los cambios en el endometrio, las glándulas y las capas musculares de las ratas de cada grupo, se utilizaron criterios semicuantitativos para clasificar la histopatología en cuatro niveles de "-, plus, plus plus, plus plus plus". A partir de la prueba de Ridit, se puede ver en la Fig. 6 y en la Tabla 1 que, en comparación con BC, el útero de MC mostró cambios patológicos significativos (P<0.01). compared="" with="" mc,="" each="" drug="" group="" could="" significantly="" improve="" the="" pathological="" tissue="" lesions="" of="" the="" uterus(p=""><>

3.7 Efecto de la morfología patológica en el tejido ovárico en ratas modelo perimenopáusicas

Con base en los cambios de los folículos ováricos, el cuerpo lúteo, las células de la granulosa y los vasos sanguíneos a diferentes niveles en los grupos experimentales, y se adoptaron criterios semicuantitativos para clasificar la morfología del tejido patológico en cuatro niveles: "-, plus, plus plus , más más más ". Según la prueba de Ridit, se puede ver en la Fig. 7 y en la Tabla 2 que, en comparación con el grupo BC, el ovario del grupo MC mostró lesiones patológicas significativas (P<0.01). compared="" with="" the="" mc="" group,="" each="" drug="" group="" could="" significantly="" improve="" the="" pathological="" changes="" of="" ovarian=""><>

<0.01). compared="" with="" the="" mc="" group,="" each="" drug="" group="" could="" significantly="" improved="" the="" pathological="" changes="" of="" ovarian=""><0.01). fig.="" 7.="" effect="" of="" pathological="" morphology="" of="" ovary="" tissue="" in="" perimenopausal="" model="" rats.="" (a):="" histopathology="" of="" the="" ovary="" (he="" ×="" 100);"="" alt="ACCEPTED ACCEPTED MANUSCRIPT criteria were adopted to classify the pathological tissue morphology into four levels: " -,="" +,="" ++,="" +++".="" based="" on="" the="" ridit="" test,="" it="" can="" be="" seen="" from="" fig.="" 7="" and="" tab.2="" that="" compared="" with="" the="" bc="" group,="" the="" ovary="" of="" the="" mc="" group="" showed="" significant="" pathological="" lesions=""><0.01). compared="" with="" the="" mc="" group,="" each="" drug="" group="" could="" significantly="" improved="" the="" pathological="" changes="" of="" ovarian=""><0.01). fig.="" 7.="" effect="" of="" pathological="" morphology="" of="" ovary="" tissue="" in="" perimenopausal="" model="" rats.="" (a):="" histopathology="" of="" the="" ovary="" (he="" ×="" 100);"="" width="544" height="571" border="0" vspace="0" style="width: 544px; height: 571px;">

3.8 Efecto de la morfología del tejido del timo en ratas modelo perimenopáusicas

Se puede ver en la Fig. 8 que el grosor de la corteza del timo en el grupo MC se redujo significativamente en comparación con el grupo BC (P<0.01), which="" indicating="" that="" the="" thymus="" atrophy="" was="" observed="" in="" the="" perimenopausal="" model="" rats.="" compared="" with="" the="" mc="" group,="" all="" groups="" could="" significantly="" increase="" the="" thymus="" cortical=""><>

3.9 Efectos de la morfología del tejido del bazo en ratas modelo perimenopáusicas

Se puede ver en la Fig. 9 que, en comparación con BC, el volumen del nódulo del bazo del grupo MC se redujo significativamente (P<0.01), which="" indicates="" that="" the="" spleen="" atrophy="" was="" observed="" in="" the="" perimenopausal="" model="" rats.="" compared="" with="" mc,="" the="" level="" of="" splenic="" nodules="" volume="" was="" significantly="" increased="" in="" pgc-hd,="" pgc-md,="" gc=""><>