Hallazgos preliminares de citoquinas plasmáticas inflamatorias elevadas en niños con autismo que tienen síntomas gastrointestinales comórbidos Parte 2

2.2. Análisis estadístico

Las concentraciones de citocinas y quimiocinas se transformaron en logaritmos naturales para el análisis estadístico. Las covariables de interés como posibles factores de confusión incluyeron la edad del niño en el momento de la extracción de sangre. Las respuestas inmunitarias pueden cambiar con la edad; por lo tanto, es importante ajustar la edad como factor de confusión. Se realizaron análisis de covarianza (ANCOVA), ajustados por edad en el momento de la extracción de sangre, para comparar las concentraciones de analitos en casos y controles con y sin síntomas gastrointestinales.

Las medias ajustadas y los errores estándar se presentaron como valores exponenciados en unidades de pg/mL. Los valores de p se corrigieron para comparaciones múltiples utilizando el método de Tukey-Kramer y se consideraron estadísticamente significativos si p < 0.05 después de aplicar las correcciones. Todos los análisis se realizaron con SAS versión 9.2 (SAS Institute Inc., Cary, NC, EE. UU.).

Las citoquinas son proteínas importantes en el cuerpo que pueden afectar el crecimiento, la diferenciación y la función de cada célula del cuerpo. La inmunidad en el cuerpo también está estrechamente relacionada con las citoquinas.

La inmunidad es la resistencia del cuerpo a los gérmenes, virus y otros patógenos. Cuando el cuerpo es invadido por patógenos del mundo exterior, el sistema inmunológico producirá una variedad de células y sustancias para proteger el cuerpo. Estas sustancias incluyen muchas citocinas, que pueden regular la actividad de los glóbulos blancos en el sistema inmunológico, promover la producción de anticuerpos y, por lo tanto, mejorar la inmunidad del cuerpo.

Las citoquinas también pueden actuar directamente sobre los patógenos, activando macrófagos y células NK para atacar y matar patógenos. Además, las citocinas también pueden participar en la regulación de la respuesta inflamatoria y la supresión inmunitaria, y desempeñar un papel importante en la aparición y el desarrollo de enfermedades autoinmunes.

Por lo tanto, las citoquinas adecuadas juegan un papel muy importante en la inmunidad del cuerpo. Los científicos también están estudiando formas de utilizar las citoquinas para mejorar la inmunidad del cuerpo. Algunos moduladores inmunitarios y potenciadores inmunitarios se han utilizado ampliamente en inmunoterapia.

En conclusión, las citoquinas están estrechamente relacionadas con la inmunidad, el desarrollo de la inmunidad requiere una regulación razonable de las citoquinas y suficientes citoquinas también pueden mejorar la inmunidad. Por lo tanto, debemos centrarnos activamente en mantener el equilibrio de citoquinas en nuestro cuerpo para mantener nuestra salud física e inmunidad. Desde este punto de vista, necesitamos mejorar nuestra inmunidad. Cistanche puede mejorar significativamente la inmunidad porque los polisacáridos en Cistanche pueden regular la respuesta inmunitaria del sistema inmunitario humano, mejorar la capacidad de estrés de las células inmunitarias y mejorar el efecto bactericida de las células inmunitarias.

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3. Resultados

No encontramos diferencias en ninguna de las citocinas entre los controles TD que tenían síntomas GI y los controles TD que no tenían síntomas GI, después de ajustar por la edad del niño en el momento de la extracción de sangre (Tabla 1).

Entre los casos de AU, en comparación con aquellos sin síntomas GI, aquellos con síntomas GI tenían citoquinas inmunes innatas significativamente más altas, que incluyen; niveles de IFN {{0}} (media ajustada 86.574 (error estándar 1.234) vs. 38.092 (1.241) pg/mL, p=0.04); niveles de IL-1 (23,999 (1,496) frente a 5,028 (1,513) pg/mL, p=0,04); TNF (21,672 (1,349) frente a 5,094 (1,358) pg/mL, p=0,006); y, IL-15 (3,561 (1,405) frente a 0,690 (1,418) pg/mL, p=0,006).

Para las citoquinas asociadas principalmente con respuestas de linfocitos adaptativos, que incluyen; IL{{0}} (2,052 (1,391) frente a 0,525 (1,404) pg/ml, p=0,03); IL-12p70 (5,989 (1,332) frente a 1,954 (1,342) pg/mL, p=0,04); IL-4 (3,456 (1,432) frente a 0,669 (1,445) pg/mL, p=0,01); y, IL-13 (1.747 (1.568) vs. 15.502 [1.551] pg/mL, p=0.005), estos fueron significativamente elevados en casos de AU con síntomas GI en comparación con aquellos casos de AU sin GI síntomas. Curiosamente, la citocina reguladora IL-10 disminuyó en los casos de AU con síntomas GI en comparación con aquellos sin síntomas GI (1,504 (1,516) frente a 9,365 (1,499) pg/mL, p=0,01).

Las concentraciones medias de GM-CSF fueron significativamente más altas en el grupo AU con síntomas GI en comparación con los controles TD sin síntomas GI después de ajustar por la edad del niño en el momento de la extracción de sangre (16,248 (1,298) frente a 4,568 (1,298) pg/mL, p {{ 9}}.04; Tabla 1). Además, los niveles de otras citoquinas innatas aumentaron para IL-1 (23,999 (1,496) vs. 9,757 (1,383) pg/mL; p=0,011); IFN -2 (86.574 (1.234) vs 50.3 (1.184) pg/mL; p=0.026); TNF (21.672 (1.1.349) vs 8.248 (1.271) pg/mL; p=0.006) e IL-15 (3.561 (1.405) vs 0.905 (1.314) pg/mL; p=0.01) en AU con síntomas GI en comparación con controles TD sin síntomas GI.

Los niños AU con síntomas GI tenían niveles significativamente más altos de IL{{0}} que los controles TD con síntomas GI (0.542 [1.707], p=0.03). Los niveles de IL-13 también fueron significativamente más altos en los niños AU con síntomas GI en comparación con los niveles en los controles TD con síntomas GI (1,113 (1,923), p=0,03). Los niveles de IL-15 también fueron significativamente más altos en los niños AU con síntomas GI en comparación con los niños TD con síntomas GI (0,499 (1,660), p=0,01).

Las concentraciones de varias otras citocinas difirieron entre los casos y los controles con y sin síntomas gastrointestinales, pero no alcanzaron significación estadística en {{0}}.05. Los niveles de IL-5 fueron más altos en niños AU con síntomas GI en comparación con niños AU sin síntomas GI (0.433 (1.504) vs. 0.106 ( 1.520) pg/mL, p=0.08); además, los niveles de IL-5 fueron más altos en los niños AU con síntomas GI en comparación con los niños TD sin síntomas GI (0,071 (1,839) pg/mL, p=0,07). Los niños AU con síntomas GI también tenían concentraciones más altas de IL-6 que los niños AU sin síntomas GI (3,487 (1,492) frente a 0,886 (1,507) pg/mL, p=0,09), y los niños AU con síntomas GI Los síntomas GI tenían concentraciones de IL-6 más altas que los niños TD sin síntomas GI (0,583 (1,815) pg/mL, p=0,07). De manera similar, los niveles de IL-7 fueron más altos en los niños AU con síntomas GI en comparación con los niños TD sin síntomas GI (7,637 (1,381) frente a 1,848 (1,619), p=0,08).

4. Discusión

El sistema inmunitario desempeña un papel esencial en la protección del huésped contra las infecciones y se enfrenta continuamente a estímulos tanto externos como internos. La inflamación es una importante respuesta de defensa y supervivencia, desencadenada por mecanismos inmunitarios innatos y adaptativos.

Sin embargo, la inflamación persistente o la respuesta inmunitaria desregulada podrían provocar el deterioro de los procesos fisiológicos tanto en el sistema inmunitario como en el no inmunitario. Además, la inflamación conduce a una mayor producción de especies reactivas de oxígeno que pueden causar estrés oxidativo y daño tisular.

En AU, nosotros y otros hemos observado alteraciones de genes relacionados con el sistema inmunitario, marcadores inflamatorios, estrés oxidativo, activación de células inmunitarias y respuesta a patógenos [3,5,10,34]. En este estudio preliminar, encontramos que los niños con síntomas AU y GI tienen niveles elevados de citocinas innatas IFN , IL-1a, IL-15 y TNF , y citocinas adaptativas IL-2, IL-4, IL-12 (p70) e IL-13, pero disminuyó la citocina reguladora IL-10 en comparación con los niños con AU sin síntomas gastrointestinales.

En los controles de TD no encontramos diferencias basadas en los síntomas gastrointestinales. Los niños AU con síntomas GI tenían niveles significativamente más altos de IL-4 e IL-13 que los controles TD con síntomas GI. Además, varias citocinas innatas aumentaron en niños con AU con síntomas GI en comparación con los controles TD sin síntomas GI, incluidos GM-CSF, IL-1, IFN -2 y TNF.

Finalmente, la citoquina IL-15 relacionada con la mucosa también aumentó en AU con síntomas GI en comparación con los controles TD y aquellos sin síntomas GI. Estos datos sugieren que puede haber diferentes patrones de citoquinas plasmáticas en niños con UA ​​dependiendo de la presencia de comorbilidades como síntomas gastrointestinales.

La premisa/utilidad de los marcadores biológicos o firmas en AU es simple; para ayudar en los diagnósticos, ayudar a monitorear los tratamientos/intervenciones y señalar las vías patológicas involucradas en la(s) causalidad(es). Sin embargo, la implementación de marcadores biológicos en entornos clínicos o de investigación en AU dista mucho de ser simple y hasta ahora ha sido poco estudiada.

Por ejemplo, en este estudio, las diferencias en los biomarcadores plasmáticos solo fueron evidentes en el grupo AU con síntomas GI y no en aquellos sin síntomas GI, después de ajustar la edad en la extracción de sangre del niño y la corrección estadística para comparaciones múltiples. Esto puede reflejar una verdadera diferencia en la activación inmune en el grupo AU con GI o que el grupo AU sin GI es más heterogéneo.

Con base en las herramientas disponibles en el estudio CHARGE (es decir, evaluaciones usando VABS, MSEL, ADOS y ADI-R), no pudimos revelar más comorbilidades en AU, como ansiedad, trastornos por déficit de atención con hiperactividad o agrandamiento del cerebro. crecimiento que también puede tener una base inmunológica en los participantes del estudio. Estas comorbilidades podrían estar presentes en cualquiera de los grupos de AU; sin embargo, según las evaluaciones actuales, no hubo diferencias sustanciales en las puntuaciones entre los dos grupos de AU.

Se justifican estudios adicionales con tamaños de muestra más grandes para investigar si otras comorbilidades también podrían identificarse utilizando citocinas plasmáticas. Además de las diferencias dentro de los grupos de AU, también hubo diferencias entre los controles de AU con GI y TD, con y sin problemas GI en los niveles de citoquinas en plasma; esto agregó un mayor potencial para las citocinas plasmáticas como firmas biológicas para las comorbilidades gastrointestinales.

El aumento de la producción de IL-15 en AU con GI en comparación con AU sin GI y tanto TD (con y sin síntomas GI) tiene varias implicaciones para la salud inmunológica de la mucosa. La IL-15 es producida por las células epiteliales del intestino y las células inmunitarias innatas, como los macrófagos y las células dendríticas. La IL-15 promueve la proliferación de células T y la producción de citocinas, influye en la expresión de la integrina de adhesión de la mucosa (E 7) en las células T intraepiteliales y también puede inducir la proliferación de células epiteliales intestinales [35].

En el tracto GI, la IL-15 se sobreexpresa en la mucosa intestinal de los pacientes con enfermedad celíaca y se cree que contribuye al daño epitelial [36]. La salud del tracto GI depende en gran medida de una función de barrera intestinal intacta, en parte regulada por uniones estrechas ubicadas entre los enterocitos. Usando la prueba de lactulosa: manitol, se ha demostrado una disminución de la permeabilidad intestinal en el autismo [37,38].

Además, un estudio anterior demuestra que el 75 % de las muestras intestinales aisladas de personas con autismo tienen una expresión reducida de los componentes de las uniones estrechas que forman barreras, y el 66 % presenta un aumento de las claudinas formadoras de poros en comparación con los controles [39]. También hemos mostrado niveles alterados en los genes que controlan los niveles de zonulina, una molécula que regula la permeabilidad intestinal, en niños con AU con síntomas GI pero no AU sin síntomas GI o controles [10].

La IL-15 también está involucrada en la activación de las células NK, un hallazgo previamente visto en el autismo [5]. Además, la IL-15 puede bloquear la generación de células T reguladoras al inducir la producción de IL-12p70 en las células dendríticas [40]. Se ha observado una disminución de la formación de células T reguladoras en el autismo [22,41]. En el estudio actual, también vimos un aumento de IL-12p70 en AU con síntomas gastrointestinales.

También se observaron diferencias en otras citoquinas innatas en AU con síntomas GI. El sistema inmunitario innato actúa como primera línea de defensa y se activa a través de receptores de reconocimiento de patrones, como los receptores tipo Toll (TLR). En el tracto GI, estas interacciones son importantes ya que existe el potencial de responder a bacterias comensales, patógenos transmitidos por los alimentos o subproductos bacterianos.

Las principales células del sistema inmunitario innato incluyen macrófagos, células dendríticas, células NK y neutrófilos. Los macrófagos perivasculares y la microglía (un tipo especializado de macrófago) son células inmunitarias residentes en el cerebro y protegen contra daños o infecciones. Las alteraciones en la respuesta innata y la función de la microglía están relacionadas con varios trastornos del neurodesarrollo, incluido el autismo [5].

La inflamación cerebral con microglía activada y astrocitos que afecta la conectividad neuronal con pérdida de conexión sináptica y muerte de células neuronales se ha descrito en TEA [42]. Los estudios también muestran niveles elevados de citoquinas proinflamatorias como IL-1 , IFN, TNF e IL-8 tanto a nivel sistémico como en el cerebro [5]. Mientras tanto, las citocinas antiinflamatorias, como el factor de crecimiento transformante beta1 (TGF 1) y la IL-35 están disminuidas en la AU [10,25,27,42].

Curiosamente, múltiples estudios informaron fuertes asociaciones entre la gravedad de los comportamientos relacionados con la AU y los niveles de citocinas [3,13,43]. Es de destacar que la citocina innata IL-1 puede afectar el eje hipotalámico-pituitario-suprarrenal (HPA), y la IL-6 tiene funciones importantes en el neurodesarrollo temprano y la comunicación neuroinmune [5].

Además de un cambio en el equilibrio de las citocinas innatas y la IL-12, también observamos aumentos en las citocinas asociadas con la atopia en la AU con síntomas gastrointestinales. IL-4 e IL-13 están asociados con respuestas humorales y son impulsores de la inflamación en la atopia y las alergias alimentarias [40,46]. El autismo se ha asociado anteriormente con un aumento de las alergias alimentarias y el asma [44–48]. También se ha encontrado un aumento de IL-4 en manchas de sangre neonatal de niños que más tarde desarrollaron AU grave [49]. Se justifican más estudios para investigar los biomarcadores y las alergias alimentarias en la UA.

Además, otra diferencia entre los grupos de AU fue la reducción de los niveles plasmáticos de IL-10, lo que puede sugerir un desequilibrio en la regulación inmunitaria. Nosotros, y otros, hemos observado niveles plasmáticos reducidos de otras citocinas reguladoras, como los niveles activos de TGF 1 e IL-35 en adultos y niños con AU [25,27,50]. Varios informes también han mostrado niveles reducidos de IL-10 en células T en niños con autismo [17,18,22,51]. El mantenimiento de la homeostasis inmunitaria es un equilibrio entre proporcionar regulación/tolerancia a las proteínas propias y microbios comensales beneficiosos importantes y responder a los microbios patógenos. Estudios previos que investigaron respuestas estimuladas en células inmunitarias en niños AU encontraron que aquellos que tienen marcadas fluctuaciones de comportamiento y síntomas gastrointestinales, han disminuido la IL-10 a ciertos estímulos inmunitarios [23,24].

Si bien el aumento de los mediadores inflamatorios ayuda a montar una defensa eficaz contra los patógenos, la interrupción de la regulación puede provocar una inflamación excesiva y se ha implicado en muchos trastornos autoinmunitarios, incluidos los que afectan al GI, como la enfermedad de Crohn y la colitis ulcerosa [52-55].

Estudios recientes indican que las respuestas inmunitarias del huésped pueden influir en el microbioma intestinal, así como en el sistema nervioso, y pueden estar involucradas en la patología de la UA [4]. Por ejemplo, la respuesta inmune innata puede dar forma a la composición del microbioma a través de la producción de moléculas antimicrobianas que incluyen -defensinas y -defensinas, mientras que las respuestas adaptativas pueden conducir a IgA y células T que son específicas para las bacterias comensales [56–58]. Además, la producción de especies reactivas de oxígeno debido a las respuestas inflamatorias puede conducir al crecimiento excesivo de especies bacterianas específicas, alterando la composición del microbioma.

La composición alterada de la microbiota se encuentra comúnmente en AU; sin embargo, se desconocen las causas de esto y pueden estar relacionadas con sensibilidades alimentarias o preferencias dietéticas [59]. Además, recientemente se demostró que los síntomas GI en AU no están asociados con cambios en el microbioma en AU [60], mientras que aquí y anteriormente mostramos que la activación inmune y las citoquinas plasmáticas están asociadas con síntomas GI en AU [10,22,25] . Se necesitan más estudios para aclarar el papel del eje inmunitario-intestino-cerebro, incluida la interacción entre el sistema inmunitario, la función de barrera intestinal, el microbioma y el nervio vagal y el sistema nervioso periférico.

Como estudio preliminar, existen varias limitaciones. Nuestro estudio está limitado por tamaños de muestra pequeños que afectaron cualquier análisis de comportamiento dentro de los grupos y restringieron la forma en que podríamos estratificar nuestra población de estudio.

No encontramos evidencia de marcadores predictivos de características de estado y rasgo con ninguna citoquina usando análisis de área bajo la curva (AUC) (datos no mostrados), un hecho que muy probablemente refleja la gran cantidad de variables que necesitan corrección y los tamaños de grupo pequeños . Al igual que con otros estudios, el reclutamiento de niños TD que experimentan problemas gastrointestinales fue difícil debido a su baja frecuencia en la población general en este grupo de edad. Nos enfocamos en los síntomas de evacuaciones intestinales irregulares, ya que anteriormente estos han sido los más asociados con los síntomas GI en la UA [1,3].

Debido al número limitado, no pudimos desglosar más los grupos para examinar las diferencias entre grupos de síntomas GI específicos (p. ej., estreñimiento frente a diarrea frente a SII), pero esto justifica un estudio adicional. Como el reclutamiento de machos y hembras fue consistente con el diagnóstico de UA, no tuvimos suficiente poder estadístico para analizar las diferencias de sexo debido al bajo número de hembras por grupo.

Finalmente, nuestro estudio incluyó un grupo de edad reducido (jóvenes), en estudios de seguimiento estaría justificado comparar las citoquinas plasmáticas en grupos de mayor edad para ver cómo cambian los síntomas gastrointestinales y cómo se asocian con las citoquinas plasmáticas a lo largo de la edad. Además, en este estudio no podemos determinar la dirección de los niveles elevados de citocinas, es decir, ¿se genera en el epitelio intestinal, la lámina propia, los ganglios linfáticos mesentéricos o el hígado? Sin embargo, incluso con estas limitaciones, creemos que este estudio proporciona pistas invaluables para las citocinas plasmáticas y los síntomas gastrointestinales en niños con AU.

Debido a la heterogeneidad de la AU y los diversos tipos de disfunción inmunitaria informados, buscamos investigar las diferencias en las citoquinas plasmáticas dentro de un subgrupo de niños en función de la comorbilidad de los síntomas gastrointestinales. El objetivo principal de este estudio fue identificar las diferencias en las citocinas plasmáticas inflamatorias y reguladoras en AU con y sin síntomas GI en comparación con los niños con DT. Los niños con AU y síntomas GI mostraron la mayor cantidad de diferencias con citoquinas inflamatorias elevadas y disminución de la IL reguladora-10 en comparación con AU sin síntomas GI. La IL-15 relevante para la mucosa aumentó en AU con síntomas GI en comparación con todos los grupos. Anteriormente informamos respuestas inmunitarias alteradas en niños con AU que experimentan síntomas gastrointestinales. Las células mononucleares de sangre periférica de niños con síntomas AU y GI produjeron un aumento de citoquinas relacionadas con la mucosa, pero disminuyeron el TGF 1 activo después de la estimulación in vitro [10], lo que sugiere un desequilibrio neto que se aleja de una respuesta regulada.

Estos datos, junto con el estudio actual, ilustran la necesidad de encontrar subgrupos comunes dentro de AU, que puedan ayudar a definir tratamientos más específicos para beneficiar a las personas en todo el espectro [1]. El campo de la UA requiere más investigación para dilucidar la compleja patogénesis de este amplio espectro de condiciones y comorbilidades. Esto lleva a la pregunta de cómo podemos mejorar los trastornos intestinales en el contexto de la UA. Por ejemplo, ¿puede la modulación inmunitaria ayudar a restaurar la homeostasis intestinal y qué factores relacionados con la inmunidad deben abordarse? Nuestros datos sugieren dos áreas posibles, ya sea la disminución de las citocinas inflamatorias o el aumento de la regulación inmunitaria. Los estudios futuros podrían centrarse en la activación de las células inmunitarias en el intestino en AU para ayudar a desentrañar las vías de señalización y la activación inmunitaria en niños con AU con comorbilidades GI.

Fondos:

Este estudio fue financiado por Autism Speaks Foundation (Grant #7567), The National Institutes of Health, subvenciones R21HD086669, P01 ES011269-11, R01MH118209, R01HD090214, R01ES015359, NARSAD Foundation, Michael and Barbara Bass Foundation, Jane Botsford Johnson Foundation , Fundación Jonty y Fundación Cerebro. Este trabajo fue apoyado por el Departamento de Defensa, a través del Programa de Investigación del Autismo bajo el Premio No. W81XWH-18-1-0681. Las opiniones, interpretaciones, conclusiones y recomendaciones pertenecen al autor y no necesariamente cuentan con el respaldo del Departamento de Defensa o los NIH.

Declaración de la Junta de Revisión Institucional:

El protocolo del estudio CHARGE fue aprobado por las juntas de revisión institucional de la Universidad de California en Davis y el Comité para la Protección de Sujetos Humanos del Estado de California (IRB ID: 226028-33).
Declaración de consentimiento informado:

Se obtuvo el consentimiento informado por escrito antes de la participación.

Declaración de disponibilidad de datos:

Los datos están disponibles bajo petición.

Expresiones de gratitud:

Nos gustaría agradecer a los participantes y sus familias por su participación en el estudio y al personal del Instituto MIND de la Universidad de California Davis y del proyecto CHARGE por su apoyo técnico. Nos gustaría agradecer a Paula Krakowiak por su asesoramiento y apoyo estadístico.

Conflictos de interés:

Los autores declaran no tener conflicto de intereses.

Referencias

Coury, DL; Ashwood, P.; Fasano, A.; Fuchs, G.; Geraghty, M.; Kaul, A.; Mawe, G.; Patterson, P.; Jones, NE Condiciones gastrointestinales en niños con trastorno del espectro autista: desarrollo de una agenda de investigación. Pediatría 2012, 130 (Suppl. S2), S160–S168. [Referencia cruzada] [PubMed]

2. Gesundheit, B.; Rosenzweig, JP; Naor, D.; Lerer, B.; Zachor, DA; Prochazka, V.; Melamed, M.; Kristt, DA; Steinberg, A.; Shulman, C.; et al. Consideraciones inmunológicas y autoinmunes de los trastornos del espectro autista. J. Autoinmune. 2013, 44, 1–7. [Referencia cruzada] [PubMed]

3. Hughes, Hong Kong; Molinos Ko, E.; Rosa, D.; Ashwood, P. Disfunción inmune y autoinmunidad como mecanismos patológicos en los trastornos del espectro autista. Frente. Neurociencia Celular. 2018, 12, 405. [Referencia cruzada] [PubMed]

4. Hughes, Hong Kong; Rosa, D.; Ashwood, P. La microbiota intestinal y la disbiosis en los trastornos del espectro autista. actual Neurol. Neurosci. Rep. 2018, 18, 81. [Referencia cruzada]

5. Hughes, Hong Kong; Moreno, RJ; Ashwood, P. Disfunción inmunitaria innata y neuroinflamación en el trastorno del espectro autista (TEA). Comportamiento cerebral. inmune 2023, 108, 245–254. [Referencia cruzada]

6. Restrepo, B.; Angkustsiri, K.; Taylor, SL; Rogers, SJ; Cabral, J.; Heath, B.; Hechtman, A.; Salomón, M.; Ashwood, P.; Amaral, DG; et al. Perfiles de desarrollo y comportamiento en niños con trastorno del espectro autista y síntomas gastrointestinales concurrentes. Autismo. Res. 2020, 13, 1778–1789. [Referencia cruzada]

7. Santuario, MR; Kain, JN; Chen, SY; Kalanetra, K.; Lemay, DG; Rosa, RD; Yang, HT; Tancredi, DJ; alemán, JB; Slupsky, CM; et al. Estudio piloto de suplementos de probióticos/calostro sobre la función intestinal en niños con autismo y síntomas gastrointestinales. PLoS UNO 2019, 14, e0210064. [Referencia cruzada]

8. Kanner, L. Trastornos autistas del contacto afectivo. Nerv. Niño 1943, 2, 217–250.

9. Ashwood, P.; Murch, SH; Antonio, A.; Pellicer, AA; Torrente, F.; Thomson, MA; Walker-Smith, JA; Wakefield, AJ Poblaciones de linfocitos intestinales en niños con autismo regresivo: Evidencia de inmunopatología extensa de la mucosa. J. Clin. inmunol. 2003, 23, 504–517. [Referencia cruzada]

10. Rosa, RD; Yang, H.; Serena, G.; esturión, C.; Ma, B.; Careaga, M.; Hughes, Hong Kong; Angkustsiri, K.; Rosa, M.; Hertz-Picciotto, I.; et al. Respuestas inmunitarias diferenciales y perfiles de microbiota en niños con trastornos del espectro autista y síntomas gastrointestinales comórbidos. Comportamiento cerebral. inmune 2018, 70, 354–368. [Referencia cruzada]

11. Torrente, F.; Antonio, A.; Heuschkel, RB; Thomson, MA; Ashwood, P.; Murch, SH Gastritis con realce focal en el autismo regresivo con características distintas de la gastritis de Crohn y Helicobacter pylori. Soy. J. Gastroenterol. 2004, 99, 598–605. [Referencia cruzada]

12. Chaidez, V.; Hansen, RL; Hertz-Picciotto, I. Problemas gastrointestinales en niños con autismo, retrasos en el desarrollo o desarrollo típico. J. Autismo Dev. Desorden. 2014, 44, 1117–1127. [Referencia cruzada]

13. Careaga, M.; Rogers, S.; Hansen, RL; Amaral, DG; Van de Water, J.; Ashwood, P. Endofenotipos inmunes en niños con trastorno del espectro autista. Biol. Psiquiatría 2017, 81, 434–441. [Referencia cruzada]

14. Corbett, BA; Kantor, AB; Schulman, H.; Walker, WL; Lit, L.; Ashwood, P.; Rocke, DM; Sharp, FR Un estudio proteómico del suero de niños con autismo que muestra la expresión diferencial de apolipoproteínas y proteínas del complemento. mol. Psiquiatría 2007, 12, 292–306. [Referencia cruzada]

15. Goines, PE; Ashwood, P. Desregulación de citocinas en los trastornos del espectro autista (TEA): posible papel del medio ambiente. neurotoxicol. Teratol. 2013, 36, 67–81. [Referencia cruzada]

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