Preparación y estabilidad de la emulsión de recolección cargada de resveratrol estabilizada por proteína de nogal/ cistanche deserticola polisacárido nanopartículas

Dec 05, 2024

Abstracto:

 

En este estudio, proteína de nogal/Cistanche deserticola polisacárido(WP/CDPS) se construyeron nanopartículas compuestas y empleadas como estabilizador para preparar una emulsión recolectada. Las nanopartículas y la emulsión de recolección se evaluaron en términos de tamaño de partícula, índice de polidispersidad y potencial zeta. Se investigó el efecto de la relación de masa WP/CDP en la tensión interfacial, la estabilidad del almacenamiento, la estabilidad térmica, la eficiencia de encapsulación, la microestructura y la estabilidad de la oxidación de la emulsión de recolección. Los resultados mostraron que con el aumento en la proporción de CDP, el potencial zeta de las nanopartículas WP/CDPS disminuyó gradualmente de -22 a -37 mV. La emulsión de recolección (C1W1R) con una relación de masa de WP a CDP de 1: 1 tenía el tamaño de partícula promedio más pequeño (5.927 μm), la tensión interfacial más baja (11.88 mn/m), buena estabilidad de almacenamiento y estabilidad térmica. Después de 480 h de almacenamiento, la proporción de la capa emulsionada fue del 95,6%. El tamaño de partícula de C1W1R tuvo el cambio más pequeño con la temperatura. Los resultados de la microscopía de escaneo láser confocal (CLSM) mostraron que la emulsión estabilizada por WP/CDPS podría encapsular efectivamente el resveratrol (RT) con una eficiencia de encapsulación de más del 85%, que fue más alta que la de la emulsión estabilizada con WP, y la eficiencia de encapsulación de la encapsulación alcanzó el 92.9% después de 35 días de almacenamiento. Las emulsiones de recolección estabilizadas por WP/CDP ofrecen un portador alternativo prometedor para la entrega de resveratrol en estado estacionario en la industria alimentaria funcional y otras industrias relacionadas.

Palabras clave:proteína de nogal;Cistanche deserticola polisacárido; resveratrol; Emulsión pickering; estabilidad

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El resveratrol (RT) es un compuesto orgánico de polifenol natural no flavonoide extraído de plantas. Se usa ampliamente para sus diversas actividades farmacológicas, como antiinflamatorios, antioxidantes, antitumorales, neuroprotección y mejora del daño isquémico. preocupación generalizada [1-2]. En los últimos años, RT se ha utilizado ampliamente en alimentos, farmacéuticos, cosméticos y otras industrias. Entre varios factores funcionales, la estructura del isómero trans de RT contiene grupos funcionales como anillos aromáticos, grupos hidroxilo fenólicos y dobles enlaces, que tienen una mayor actividad biológica [3-4]. Sin embargo, se informa que el fenómeno de isomerización y la mala solubilidad del agua de RT limitan su desarrollo y utilización en el procesamiento de alimentos, la preparación de medicamentos y la preparación activa de la membrana. La encapsulación en los sistemas de suministro, como las nanopartículas y las emulsiones, puede mejorar significativamente su estabilidad y solubilidad en el agua, y puede controlar de manera efectiva la liberación lenta y sostenida de RT en un entorno específico del tracto gastrointestinal, mejorando así la bioavilidad de RT [5-6}].
La proteína vegetal tiene una buena biocompatibilidad y actividad superficial y se usa en el campo de alimentos [7]. Actualmente, cada vez más estudios han encontrado que las nanopartículas de proteínas insolubles en agua son excelentes materiales portadores para preparar emulsiones de recolección [8]. La proteína de nogal (WP) se puede convertir en nanopartículas de proteína de nuez (WPN) a través del autoensamblaje. WPN tiene una buena biocompatibilidad y bioadhesión y es un material portador ideal [9]. Sin embargo, debido a la mala solubilidad en el agua de WPN, las emulsiones de recolección estabilizadas por WPN a menudo son inestables. Las nanopartículas compuestas se preparan a través de la combinación de proteínas-polisacáridos para ajustar la solubilidad de agua de WPN, como la stevia, la nanocelulosa, el quitosano, etc., junto con el acoplamiento de proteínas, se ha demostrado que es un método efectivo para mejorar las propiedades interfaciales de las emulsiones de recolección [{7}}]. En vista de la alta estabilidad y las altas características de seguridad de la emulsión de recolección estabilizada de partículas sólidas de grado alimenticio preparado a partir de proteínas vegetales, se puede utilizar para proteger y administrar RT, ampliando el alcance de la aplicación de RT en el campo de alimentos.
Cistanche Deserticola polisacárido (CDP) es el componente principal de la desértica de Cistanche. Es un heteropolisacárido ácido compuesto de glucosa, galactosa, ramnosa, arabinosa, fructosa y otros monosacáridos. Tiene las funciones de proteger los nervios y mejorar la función intestinal. Flora del tracto, regulando la inmunidad
Tiene funciones como prevenir epidemias y mejorar la memoria, y puede usarse como materias primas para productos de salud o medicamentos [13]. ˆ
La combinación de CDP y proteoglicano le da una cierta estabilidad de la emulsificación y puede usarse en el procesamiento de alimentos en lugar de algunos emulsionantes. Por lo tanto, aprovechando la fuerte carga negativa, una mayor hidrofilia y una mejor dispersión de los CDP, uno puede tratar de preparar partículas compuestas agravando con WP cargada positivamente para estabilizar las emulsiones de Icking. Sin embargo, pocos estudios han intentado preparar nanopartículas compuestas de WP/CDPS con diferentes relaciones de masa de WP y CDP para estabilizar las emulsiones de recolección.
En base a esto, este estudio preparó nanopartículas compuestas de WP/CDPS cambiando la relación de masa de WP y CDP y las usó para estabilizar la RT. Estudie las propiedades físicas de las diferentes nanopartículas compuestas de WP/CDPS y estudie los efectos de las diferentes nanopartículas compuestas de WP/CDPS sobre el rendimiento de la emulsión de recolección, para proporcionar una base teórica para mejorar el rendimiento de la emulsificación y la estabilidad de la emulsión de las partículas WP/CDP, y para la utilización de WP/WP/CDPS proporciona una referencia como material nuclear para la protección y la entrega de RT.

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1 Materiales y métodos


1.1 Materiales y reactivos


WP Powder (Purity 90%) Peptide Love Biotechnology (Xi'an) Co., Ltd.; NaOH, HCI, etanol anhidro, RT (pureza 99%), cloruro de sodio (grado analítico) Xinjiang Hongdao Instrument Co., Ltd.; RT estándar (HPLC mayor o igual al 98%, peso molecular 228.24 DA) Chengdu Dester Biotechnology Co., Ltd.; CDPS (polvo después de 80-120 tamiz de malla, pureza 98%, componentes principales: feniletilglicósidos, equinacósido, verbascósido, glucósidos de eugenol, Cistancheside A, etc., peso molecular 488.44 da) Shanghai Yuanye biotechnology Co., Ltd.; Nilo Red Dye Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co., Ltd.; Fluoresceína Isotiocianato Ester (FITC) Beijing Solebow Technology Co., Ltd.; Kit de ácidos grasos no esterificados Suzhou Keming Biotechnology Co., Ltd.; metanol, n-hexano, diclorometano (grado cromatográfico) Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.

 

1.2 instrumentos y equipos


Cientz -30 nd secador de congelamiento, jy 92- iine ultrasonic cell trither ningbo xinzhi biotechnology Co., ltd.; DF -101 S Magnetic Stirrer Shanghai Lichen Bangxi Instrument Technology Co., Ltd.; PHS -3 CE Accidity Meder Shanghai Yidian Scientific Instrument Co., Ltd.; Winner2005E Analizador de tamaño de partícula láser Jinan Micro-Nano Particle Instrument Co., Ltd.; JS94H Zeta potencial medidor Shanghai Zhongchen Digital Technology Equipment Co., Ltd.; AXRP Microscopía de escaneo láser confocal (CLSM) Nikon Corporation, Japón.

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1.3 Métodos


1.3.1 Preparación de WPN


WPN se preparó por método de precipitación antisolvente [14]. Se disolvió 2 g de WP en 1 0 0 ml 0. 5 mol/L de solución de NaCl y se agitó a 75 grados y 300 r/min durante 12 a 24 h hasta que se disolvió por completo. Luego se centrifuge en 3 000 r/min durante 10 minutos para eliminar partículas grandes y otras sustancias insolubles. Finalmente, el valor de pH del sobrenadante obtenido se ajustó a 12.0 con 0.1 mol/l de solución de HCl o NaOH, y la dispersión fue prefrezen en un refrigerador a -80 durante 12 h, y luego se secó al vacío en -50 durante 72 h para obtener WPN.

 

1.3.2 Preparación de nanopartículas compuestas de WP/CDPS


1. 0 G CDP ​​y WP se dispersaron en 100 ml de agua destilada para preparar la suspensión del 1% de CDP y la suspensión de WP. Luego, la suspensión WP se agregó a la suspensión CDP a diferentes relaciones de masa de CDP a WP (4: 1, 3: 2, 1: 1, 2: 3 y 1: 4), y se obtuvo una mezcla de WP y CDP bajo agitación. El exceso de agua se evaporó por evaporación rotativa bajo vacío (-0. 1 MPa) a 40 grados. La dispersión de nanopartículas fue prefrezen en un refrigerador en -80} durante 12 h, y luego se congeló al vacío en -50 durante 72 h para obtener nanopartículas compuestas WP/CDPS. Las nanopartículas compuestas de WP/CDPS con una relación de masa CDPS a WP de 4: 1, 3: 2, 1: 1, 2: 3 y 1: 4 se llamaron C4W1, C3W2, C1W1, C2W3 y C1W4, respectivamente.

 

1.3.3 Tamaño de partícula, índice de polidispersidad (tamaño de partícula, PDI) y determinación potencial zeta

 

Según la literatura [15] con ligeras modificaciones, el tamaño de partícula de las nanopartículas compuestas WPN y WP/CDPS se midió utilizando un método húmedo del analizador de partículas láser. PDI se determinó utilizando un instrumento de dispersión de luz dinámica. El potencial zeta de la emulsión de recolección se midió utilizando un analizador de potencial ZETA. Antes del análisis, la muestra se diluyó 100 veces con agua ultrapura para evitar múltiples efectos de dispersión.

 

1.3.4 Preparación de emulsiones de Pickering


Se prepararon suspensiones de 100 ml de WPN y diferentes nanopartículas compuestas de WP/CDP (fracción de masa al 1%). La RT (fracción de volumen 10%) se mezcló con cada suspensión. La interrupción de las células ultrasónicas se realizó a 250 W durante 4 minutos. Según las diferentes nanopartículas compuestas de WP/CDPS, las emulsiones de recolección se llamaron C4W1R, C3W2R, C1W1R, C2W3R y C1W4R. El mismo método se utilizó para preparar la emulsión de recolección estabilizada por WPN y llamado WPR.

 

1.3.5 Determinación de la tensión interfacial de las emulsiones de recolección


La tensión interfacial de las emulsiones de recolección estabilizadas por las nanopartículas compuestas WP/CDPS se determinó de acuerdo con el método de referencia [16] con algunas modificaciones.
Se añadieron 20 μl de emulsión de recolección a la jeringa y la tensión interfacial dinámica se midió a 25 grados. La tensión interfacial de cada muestra se midió 3 veces.

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1.3.6 Determinación de la tasa de incrustación de RT


La tasa de incrustación de RT se determinó por espectrofotometría ultravioleta utilizando el método de Mei Yuqi et al. [17]. La emulsión diluida (fracción de volumen 1%) se centrifugó a 9, 000 r/min durante 10 minutos a 25 grados. Se recogió el sobrenadante y la absorbancia se midió a 306 nm. Después de que RT se disolvió completamente, se diluyó adecuadamente y el contenido de RT se calculó de acuerdo con su curva estándar (y=0. 124 2 x + 0. 035 4, R 2=0. 997 7). La tasa de incrustación se calculó usando la fórmula (1):

 

 

 

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