Tecnología de preparación para gránulos de Wenyang Tongbian

Abstracto:

ObjetivoDeterminar y optimizar la tecnología de preparación de Wenyang Tongbiangranules.

MétodosSe extrajo la decocción del agua. Se utilizaron como índices el contenido de glucósido de equinácea en el fármaco monarca y el compuesto de rendimiento. Se utilizó la prueba ortogonal L9 (34) para optimizar la extracción de gránulos de Wenyang Tongbian. El mejor proceso de formación se optimizó en función de la dificultad de granulación, la formabilidad y el rendimiento de partículas. Resultados La extracción óptima incluyó la adición de 10 veces de agua y la extracción 3 veces, 1 h cada vez. El mejor proceso de formación: el tipo de material auxiliar fuedextrina, la proporción de excipientes fue 1∶0,9 y el mejor agente humectante fue etanol al 85%. Conclusión El proceso de extracción y moldeo es estable y razonable, simple y factible, con buena reproducibilidad, lo que puede proporcionar una base para la producción industrial de gránulos de Wenyang Tongbian.

Palabras clave: Granlue Wenyang Tongbian; prueba ortogonal; extracción; moldura

NUEVA FORMULACIÓN HERBARIA PARA EL RIÑÓNDEFICIENCIA DE YANG

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Estreñimiento por deficiencia de YangEs común en ancianos y mujeres. El método de tratamiento no debe ser una simple purga. El método Warming Yang puede lograr buenos resultados [1]. Los gránulos de Wenyang Tongbian son una preparación hospitalaria desarrollada en base a la experiencia clínica del profesor Lin Aizhen del Hospital Provincial de Medicina Tradicional China de Hubei en el tratamiento del estreñimiento funcional en personas mayores. Está compuesto por Cistanche deserticola, corteza de canela, astrágalo y Atractylodes macrocephala. En la fórmula, Cistanche deserticola tiene las funciones de tonificar el yang del riñón y beneficiar la esencia y la sangre, y es la principal medicina que calienta el yang; la corteza de canela tiene la función de calentar los meridianos y desbloquear los vasos sanguíneos, reponer el fuego y apoyar el yang; el astrágalo tiene las funciones de elevar el yang y reponer el qi, curar llagas y promover la regeneración de tejidos; y Atractylodes macrocephala tiene las funciones de fortalecer el bazo y reponer el qi, secar la humedad y promover la diuresis.

Los estudios han demostrado que los glucósidos de feniletanol son los principales ingredientes activos de Cistanche deserticola [2]. Entre ellos, el echinacósido y el verbascósido son los ingredientes característicos para el control de calidad de Cistanche deserticola como se especifica en la Farmacopea China. Liu Xianhong et al. [3] concluyó a través de ensayos en humanos in vivo que Cistanche deserticola es adecuada para el tratamiento clínico del estreñimiento y puede tratar tanto los síntomas como la causa raíz. Los principales componentes químicos de la corteza de canela incluyen aceites volátiles, polisacáridos, flavonoides, etc. Los estudios farmacológicos modernos han demostrado que la corteza de canela tiene efectos farmacológicos como vasodilatación, úlcera gástrica y efectos antibacterianos [4]. Los polisacáridos de astrágalo, los flavonoides y el astragalósido IV son los principales componentes químicos que ejercen efectos inmunomoduladores [5]. Atractylodes macrocephala tiene los efectos de fortalecer el bazo y regular los trastornos de la flora intestinal y puede usarse clínicamente para tratar la disfunción gastrointestinal [6]. La receta original se utiliza principalmente en decocciones de medicina china, pero tiene desventajas como inconvenientes en la decocción, grandes dosis e inconvenientes en su transporte. Para que esta prescripción de experiencia clínica se utilice ampliamente en la práctica clínica, se desarrolló en gránulos. Este experimento utilizó como indicadores el rendimiento de la pasta y el contenido de echinacósido, el principal ingrediente activo del medicamento principal, continuó utilizando el proceso tradicional de decocción de agua y utilizó el método de prueba ortogonal L9 (34) para optimizar la cantidad de agua añadida. , tiempo de decocción y tiempos de decocción en el proceso de extracción para obtener el mejor proceso de extracción. Al mismo tiempo, se investigó el proceso de moldeo de gránulos para determinar un proceso de moldeo estable y razonable, proporcionando una referencia para la producción piloto, el control de calidad y la aplicación clínica de la preparación [7-8].

1 Instrumentos y reactivos

1.1 Instrumentos

Alianza e2695cromatógrafo líquido de alta resolución, detector de matriz de diodos 2998 (Waters, EE. UU.), ES225SMDR 1/100, balanza analítica000 (Precisa, Suiza), máquina de agua ultrapura UPT-11-10T (Shenzhen UPT Technology Co., Ltd.), Limpiador ultrasónico CNC de doble frecuencia KQ-500VDE (Kunshan Sonic Instrument Co., Ltd.).

1.2 Medicamentos de prueba

Rodajas de vino Cistanche(número de lote: 2322050113, producido en Mongolia Interior), rodajas de canela (número de lote: 2323020103, producido en Guangxi), rodajas de astrágalo (número de lote: 2323020105, producido en Gansu), rodajas de Atractylodes macrocephala (número de lote: 2322080101, producido en Zhejiang ) (Hubei Chenmei Chinese Medicine Co., Ltd., todas las rebanadas son identificadas como auténticas por Chen Shuhe, farmacéutico jefe del Instituto deMedicina Tradicional Chinadel Hospital Provincial de Medicina Tradicional China de Hubei, y están calificados según la edición 2020 delChino FarmacopeaParte I). Sustancia de referencia equinacósido(número de lote: 111670-201907, pureza: 91,8 %, China Food and Drug Inspection Research).

Dextrina (número de lote: 230102), almidón de maíz (número de lote: 221008) (Henan Zhenghong Pharmaceutical Excipients Co., Ltd.), sacarosa (número de lote: TF28221205), celulosa microcristalina (número de lote: TF471211001), lactosa (número de lote: TF463Y230101) (Hunan Jiudian Hongyang Pharmaceutical Co., Ltd.).

2 métodos y resultados

2.1 Determinación del contenido de equinacósido

2.1.1 Condiciones cromatográficas: Se utilizó Agilent 5 TC-C18 (250 nm x 4,6 mm, 5 μm) como columna cromatográfica; se usó metanol como fase móvil A, se usó una solución de ácido fórmico al 0,1 % como fase móvil B, elución en gradiente (0-17 min, 26,5 % A; 17-20 min, 26,5 % → 29,5 % A; 20-54 minutos,

29,5%A, 54-55 min, 29,5% → 26,5%A; 55-60mín, 26,5%A); caudal 1,0 ml·min-1; temperatura de la columna 30 grados; detector de matriz de diodos, longitud de onda de detección de 330 nm; volumen de inyección 10 μl; El número de placas teórico calculado en función del pico de equinacósido no debe ser inferior a 3000[9].

2.1.2 Preparación de la solución de referencia.

Tome una cantidad adecuada de echinacósido, pese con precisión 9,65 mg, colóquelo en un matraz aforado de 25 mL, agregue 50%

metanol para disolver y diluir hasta la marca como solución madre de referencia. Pipetee con precisión 1 ml de solución madre de equinacósido en un matraz volumétrico de 25 ml, agregue metanol al 50 % para diluir hasta la marca, agite bien y prepare una solución de referencia que contenga 14,17 ug por 1 ml [9].

2.1.3 Preparación de la solución de prueba.

Tome aproximadamente 0.5 g de pasta seca en polvo, tritúrelo hasta convertirlo en polvo, péselo con precisión, póngalo en una botella cónica con tapón marrón, agregue con precisión 50 ml de metanol al 50%, tápelo bien, agítelo bien, pesarlo, tratarlo ultrasónicamente durante 40 min (potencia 250 W, frecuencia 45 kHz), dejarlo enfriar, pesarlo nuevamente, agregar 50% de metanol para recuperar el peso perdido, agitarlo bien, dejarlo reposar, tomar el sobrenadante, filtrarlo y tomar el filtrado.

2.1.4 Preparación de la solución de muestra negativa

Tome aproximadamente 0.5 g de la pasta seca en polvo de la fórmula sin materiales medicinales de vino Cistanche y prepare la solución de muestra negativa de acuerdo con el método descrito en "2.1.3".

2.1.5 Prueba de especificidad

Pipetee con precisión la solución de prueba, la solución de referencia y la solución de muestra negativa respectivamente, y mida de acuerdo con las condiciones cromatográficas descritas en "2.1.1". Registre el cromatograma. Los resultados se muestran en la Figura 1. No hay interferencia con la muestra negativa. Los resultados muestran que el método tiene buena especificidad.

Fig. 1 Cromatograma específico de gránulos de Wenyang Tongbian

2.1.6 Investigación de relaciones lineales

Tome una cantidad adecuada de equinacósido, péselo con precisión hasta 10,11 mg, colóquelo en un matraz volumétrico de 25 ml, agregue metanol al 50 % para diluirlo en una serie de concentraciones de solución de referencia e inyéctelo de acuerdo con las condiciones cromatográficas descritas en "2.1 0,1" para determinar el valor del área máxima del equinacósido. Dibuje una curva estándar, con la cantidad de inyección de referencia de equinacósido como eje horizontal (ug, X) y el valor integral del área del pico como eje vertical (Y), y realice una regresión lineal.

La ecuación de regresión es Y=1.294×104X - 4.931×104, r=0.9997. Los resultados muestran que el valor integral del área máxima de la cantidad de inyección de equinacósido se encuentra en una buena relación lineal entre 1,4850 y 371,2392 ug.

2.1.7 Prueba de precisión

Aspire con precisión 10 μL de la solución de referencia (concentración de masa de 37,12 ug·mL－ 1) en "2.1.6", inyecte 6 veces, registre el valor del área máxima de echinacósido respectivamente y calcule que el valor RSD sea 1,1%, lo que indica que el instrumento tenga buena precisión.

2.1.8 Prueba de repetibilidad

Tome la misma pasta seca, muélala hasta convertirla en polvo, pese con precisión 6 porciones, cada una de las cuales pesa aproximadamente 0.5 g, y colóquelas en una botella cónica con tapón marrón. Extraiga según el método descrito en "2.1.3", determine el contenido y calcule. Los resultados muestran que el contenido promedio de equinacósido en la muestra es 1,46 mg·g－ 1 y el valor RSD es 2,7%, lo que indica que la repetibilidad de este método es buena.

2.1.9 Prueba de estabilidad

Tome la misma solución de muestra, extraiga con precisión 10 μL e inyéctela dentro de 0, 2, 4, 8, 12, 18 y 24 horas respectivamente. El valor RSD del área del pico es 0,71 %, lo que indica que la solución de muestra tiene buena estabilidad dentro de las 24 horas.

2.1.10 Prueba de recuperación de muestras

Pese con precisión 6 porciones del mismo lote de muestras de prueba, 0.24 g cada una, y colóquelas en una botella cónica con tapón marrón. De acuerdo con la proporción de masa de 1:1 de los componentes de la muestra de prueba, agregue con precisión 0.9 ml de la sustancia de referencia equinacósido (la concentración de masa es 371,24 ug·mL－ 1) en "2.1.6", preparar la solución de prueba según el método indicado en "2.1.3", determinar el área del pico cromatográfico de equinacósido y calcular el contenido. Los resultados muestran que la tasa de recuperación promedio de echinacósido es del 101,09% y el valor de RSD es del 1,6%.

2.2 Plan experimental e indicadores de evaluación.

La cantidad de agua añadida (A), el tiempo de extracción (B) y el número de extracciones (D) se seleccionaron como factores a investigar. Se establecieron tres niveles de factor de acuerdo con los resultados de la investigación previa de un solo factor, ver Tabla 1. En el experimento se usó la tabla de prueba ortogonal L9 (34), ver Tabla 2. La prueba usó el rendimiento de pasta y el contenido de echinacósido. como indicadores de evaluación para investigar el proceso óptimo de extracción de agua.

Pestaña 1 Factor y nivel de la prueba ortogonal

2.2.1 Prueba ortogonal

Según la proporción de prescripción, pesar 18 porciones de cada sabor medicinal, 55 g cada una, y realizar la extracción por decocción en agua según el esquema de diseño ortogonal en la Tabla 2. Cada grupo tiene 2 porciones paralelas. La decocción se filtra a través de una malla 80-, el filtrado se combina, se enfría, se mide el volumen de la decocción, se pipetean con precisión 50 ml en un plato de evaporación que se ha pesado de forma constante y se evapora hasta sequedad. y se secó a presión reducida a 60 grados para obtener la pasta seca de muestra experimental ortogonal. Calcule el rendimiento de la pasta (rendimiento de la pasta=(peso de la pasta seca × volumen del líquido medicinal) / (50 × peso de la pieza de decocción) × 100%). Según las condiciones cromatográficas descritas en "2.1.1" y el método descrito en "2.1.3", se determinó respectivamente la cantidad de extracción de equinacósido en los 9 grupos de extractos de prueba ortogonales. Cantidad de extracción de echinacósido=peso de pasta seca × contenido de echinacósido / vino Peso de la pieza de decocción de Cistanche. Puntuación integral=contenido de equinacósido ÷ contenido máximo × 0,5 × 100 % + rendimiento de pasta ÷ rendimiento máximo de pasta × 0,5 × 100 % [10]. Los resultados se muestran en la Tabla 2.

Como se muestra en la Tabla 3, tomando el rendimiento de la pasta y la puntuación integral del contenido de equinacósido como indicadores de evaluación, el valor del rango R en la tabla muestra que los efectos primarios y secundarios de cada factor son D > B > A; los resultados del análisis de varianza muestran que el factor D (tiempos de decocción) es estadísticamente significativo (P < 0.05), y se selecciona el nivel D3; el factor A (adición de agua) y el factor B (tiempo de decocción) no son estadísticamente significativos (P > 0.05). Considerando que la tasa de absorción de agua de los materiales medicinales en esta preparación es relativamente alta (155%), y combinada con factores como las necesidades reales de producción, las condiciones de extracción óptimas se seleccionan como A2B1D3, es decir, agregar 10 veces de agua, decocción 3 veces, cada vez durante 1 hora.