Contacto: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Correo electrónico:audrey.hu@wecistanche.com

YANG Jian-hua1' 2 , HU Jun-ping2, RENA • Kasimu2 ,〔DU Nian-sheng

(1. Hospital Tumoral Afiliado, Universidad Médica de Xinjiang, Urumqi 830011, China; 2. Facultad de Farmacia, Universidad Médica de Xinjiang, Urumqi 830054, China)

Resumen:Objetivo: Estudiar las relaciones estructura-actividad de los glicósidos feniletanoides en plantas de Cistanche salsa sobre la actividad antioxidante. Métodos: Por los sistemas de ensayo de DPPH •, la actividad antioxidante de seis glucósidos feniletanoides de plantas deCistanchesalsa se determinó para investigar la relación entre las actividades antioxidantes y las características estructurales de los glucósidos feniletanoides. Resultados: La actividad antioxidante de los glicósidos feniletanoides fue variable con un efecto dependiente de la dosis. Se demostró que la secuencia de la fuerza de la actividad antioxidante de los seis componentes es2 ^Acetilacteoside > Acteoside Tubuloside BN Isoacteoside > Echinacoside > Cistanoside A. Conclusión: la actividad antioxidante de los glucósidos de feniletanoide está relacionada con el número de hidroxilos fenólicos, el impedimento estérico, 2-acetilo en la glucopiranosa media y la ubicación del hidroxilo fenólico. Además, puede estar relacionado con la j3-cetona insaturada del fenol-2-propenilo.

Palabras clave: Salsa Cistanche ( CA Mey. ) G, Beck; glucósidos feniletanoides; actividad antioxidante; Estructura-actividad; DPPH

equinacósido

La medicina tradicional chinaCistanchees Cistanche salsa (CA Mey.) G. Beck, un tallo carnoso seco con escamas y hojas. Fue publicado por primera vez en "Shen Nong's Materia Medica". La frecuencia de ocurrencia es la más alta, solo superada por el ginseng en las recetas de medicina china antienvejecimiento y antienvejecimiento, y tiene la reputación de "ginseng del desierto". Los glucósidos de feniletanoil son componentes característicos deCistancheplantas del genero. En la actualidad, se han aislado más de 30 de estos compuestos de este género. Los estudios farmacológicos básicamente han dejado claro que estos compuestos son la principal base material paraCistanchepara ejercer actividades farmacológicas).

El radical dibenzopicril (DPPH •) es un radical libre relativamente estable con un electrón libre en su N. La solución de DPPH en metanol es de color púrpura con un pico de absorción máximo a 517 nm. Cuando hay un captador de radicales libres, su absorción desaparece gradualmente debido a su apareamiento de un electrón. Su grado de decoloración está cuantitativamente relacionado con el número de electrones que acepta. Por lo tanto, el uso de espectrofotometría para detectar el cambio en la absorbancia de DPPH después de la reacción con la solución de muestra se puede usar para probar la capacidad de la muestra para eliminar los radicales libres y resistir la oxidación (3). En la actualidad, ha habido informes sobre la investigación antioxidante de los glucósidos de alcohol fenetílico en el puré de berenjena en la eliminación de radicales libres, pero no hay un análisis de la relación estructura-actividad entre sus propiedades antioxidantes y las sustancias activas. En este documento, el método de análisis de radicales libres DPPH • se utiliza por primera vez para probar la actividad antioxidante de 6 monómeros de glicósido de alcohol fenetílico en Rouhuanrong. Sobre la base de las características estructurales y los resultados de la determinación de la actividad de estos compuestos, se infieren preliminarmente los componentes glucósidos del alcohol fenetílico. Relación estructura-actividad de la actividad antioxidante.

1 Aparatos y materiales

equinacósido, glucósido A de cistanche,verbascoside, glucósido de isoverbasin, 2,-acetil verbascósido, sustancia de referencia de antocianina B en tubo (aislada y preparada a partir de salsa Cistanche, UV, IR, EI-ms/h -nmrJ3c-nmr datos concuerdan con el valor de la literatura, el contenido se determina por área de HPLC método de normalización, la pureza es superior al 95 por ciento, la fórmula estructural se muestra en la Figura 1 y la Tabla 1); El radical difenil picrilo (DPPH •) se adquirió de Sigma; otros reactivos Todos ellos son domésticos puros.

Detector de actividad biológica de longitud de onda completa multifuncional SpectraMax M5 (Anthos Co. Austria), 96-placa de cultivo de pocillos (Costar), balanza electrónica AB104-N]Mettler-Toledo Instr. (Shang Hai) Ltd.]

Figura 1 Las fórmulas estructurales de seis glucósidos de fenetanoil en Cistanche

Tabla 1 Sustituyentes en 6 compuestos glucósidos de fenetanol en Cistanche

Nota: Ac es acetilo, Cf es trans-cafeoilo, Glc * pD-gluviolanosa y Rha es aL-ramnosa

2 Preparación de la solución de prueba

DPPH • Prepare una solución madre con una concentración de 1. 3 x 10'2mol/L con etanol, guárdela en el refrigerador, diluya la solución madre con etanol a 1-3 xl{{7} }^mol/L inmediatamente antes de su uso; 6 tipos de glucósidos de alcohol fenetílico La sustancia de referencia y la vitamina C se formulan en una solución con una concentración de 0,05-50,0 ptg/mL con etanol.

Acteósido

3 métodos y resultados

3. 1 Método Primero agregue 10 |xL de muestra a los pozos de muestra, agregue 10|jlL de etanol a los pozos en blanco y luego agregue 190 jiL de DPPH • con una concentración de 1.3 x10^mol/L, y colóquelos en la oscuridad a temperatura ambiente durante 30 minutos. Utilice el detector de actividad biológica de longitud de onda completa multifunción SpectraMax M5 para medir la absorbancia (A) a 517 nm. Cada absorbancia se midió 3 veces en paralelo y se tomó el valor promedio. La tasa de eliminación se calcula de la siguiente manera: tasa de eliminación (porcentaje)=(Un blanco-A muestra)/Un blanco x 100 por ciento

3.2 Resultados Los resultados de la determinación se muestran en la Tabla 2. Se puede ver en la Tabla 2 que los seis glucósidos de alcohol fenetílico en diferentes concentraciones tienen diferentes grados de efectos de eliminación de DPPH, y su capacidad de eliminación de radicales libres tiene una dosis significativa. relación del efecto con la concentración. Glucósido en DP PH • El tamaño del efecto depurador aumenta con el aumento de la concentración.

Tabla 2 Tasa de aclaramiento de muestras con diferentes concentraciones en DPPH • («=3)

Nota: El control positivo es ácido ascórbico (Vitamina C), el número de muestra es 7

According to the IC5 of each sample. According to the value, the scavenging ability of 6 kinds of phenylethanoid glycosides on DPPH • is in order: 2'-acetyl verbascoside> verbascoside BN isophorbasin glycoside> echinacoside>glucósido A de cistanche. Los efectos de los seis glucósidos de alcohol fenetílico a la misma concentración que la vitamina C del control positivo son ligeramente inferiores a los de la vitamina C.

verbascoside

4. Discusión

Los resultados de este estudio confirmaron además que los glucósidos de alcohol fenetílico generalmente tienen actividad antioxidante. Al analizar y comparar sus estructuras químicas, el verbascósido, el glucósido de isoverbasina, el glucósido de 2'-acetil verbasina y la anortosita B del tubo son todos glucósidos, mientras que el equinacósido ycistancheA son triglicéridos, con gran impedimento estérico. El aumento del efecto de impedimento estérico hace que el echinacósido y el solanacósido A sean difíciles de abordar por los radicales libres, por lo que su capacidad antioxidante es relativamente débil; la diferencia estructural entre echinacoside y striata: echinacoside A es solo El R5 del primero es un grupo hidroxilo fenólico y el segundo es un grupo metoxi. El grupo hidroxilo o-fenólico se considera un grupo funcional importante para la actividad antioxidante. El grupo hidroxilo del difenol desaparece y el efecto antioxidante se reduce significativamente. Al analizar la estructura del compuesto y combinar los resultados de las mediciones, se infiere que la actividad antioxidante de los glucósidos de fenetilo en la pasta de berenjena está relacionada con el número de agliconas y grupos hidroxilo fenólicos en el grupo fenilacriloilo, la posición de conexión del fenólico grupo hidroxilo, el tamaño del impedimento estérico del compuesto y la glucosa central 2 Existe cierta relación entre la sustitución del grupo acetilo en la posición, que también puede estar relacionada con el fragmento de estructura de cetona insaturada a,/3 en el grupo estireno acilo, pero tiene poca relación con la posición de sustitución del grupo fenilacriloílo.

DPPH • es un radical libre relativamente estable centrado en N, con fuerte absorción a 517nm. Después de agregar la sustancia de prueba, al detectar el cambio en la absorbancia a 517 nm después de que los radicales DPPH • reaccionen con la solución de muestra, se puede verificar la capacidad de la muestra para eliminar los radicales libres y la antioxidación. Los experimentos muestran que el uso de DPPH • para establecer un modelo de daño por radicales libres in vitro no requiere equipos complicados ni reactivos costosos. Es simple y fácil de usar, sensible, confiable y reproducible. Es un buen método para la detección de barredores de radicales libres.

La vitamina C es reconocida actualmente como un antioxidante altamente activo y ampliamente utilizado. Por lo tanto, este experimento eligió la vitamina C como un control positivo para la capacidad antioxidante de los glucósidos de alcohol fenetílico en la eliminación de radicales libres.

referencias

[1] Lei Li, Song Zhihong, Tu Pengfei. Investigación sobre los constituyentes químicos de Cistanche Progreso de la investigación[J].Chinese Herbal Medicine, 2003,34(5):473476.

[2] Song Zhihong, Lei Li, Tu Pengfei. Avances en la investigación sobre las actividades farmacológicas de las plantas Cistanche[J]. Medicina herbaria china, 2003, 34(9): Adjunto 16-18.

[3] Xu Shenhong, Hang Hu. Un método simple para detectar captadores de radicales libres [J]. Medicina herbaria china, 2000, 31(2): 96-97.

[4] Fu Rong, Zhu Jiuwei. Determinación de la actividad antioxidante de Chuanling, Rhodiola Rosea y Huang Zhi mediante espectrofotometría de radicales de piratería de difenilo [J]. Diario de la Universidad de Industria Ligera de Dalian, 2004, 23 (2) ): 114-117.