Estudio sobre la digestión in vitro y la actividad antioxidante del polvo de Lycium Ruthenicum y Cistanche Deserticola
May 08, 2025
Abstracto:
Objetivo: El efecto del polvo de Lycium ruthenicum yhierba cistanche que vive en el desiertopolvo liofilizado en elcomponentes químicos funcionalesyactividad antioxidantebajodigestión gastrointestinal simuladaSe estudiaron in vitro. 【Método】: Determinamos el contenido de polifenoles, polisacáridos, antocianinas y glucósidos de feniletanoides en estos polvos después de una digestión gastrointestinal simulada y medimos sus efectos eliminadores de los radicales libres DPPH y ABTS in vitro. 【Resultado】: El grupo de digestión gástrica simulada tuvo un mayor contenido de sustancias activas en comparación con el grupo de digestión intestinal simulada. Las tasas de eliminación de polifenoles, antocianinas y glucósidos feniletanoides con DPPH y ABTS fueron altamente lineales (p<0.05). 【Conclusion】:Gastric digestion improved the solubility of polyphenols, polysaccharides, anthocyanins, and phenylethanoid glycosides in Black fruit wolfberry powder and desertliving cistanche herb powder, thereby enhancing their scavenging rate of DPPH and ABTS free radicals. Intestinal digestion increased the solubility of polyphenols and phenylethanoid glycosides, decreased the content of polysaccharides and anthocyanins, and promoted the scavenging rate of ABTS free radicals. However, DPPH free radicals showed no promoting effect. These findings provide a novel direction for the development of new functional foods using Black fruit wolfberry and desertliving cistanche herb.
Palabras clave:Lycium rutenicum;Cistanche deserticola Ma; Digestión gastrointestinal; Antioxidación
EXTRACTO DE CISTANCHE DE ALTA CALIDAD EN VENTA
Antienvejecimiento y preservación de la salud: un estudio sobre las propiedades antioxidantes de Lycium ruthenicum y Cistanche deserticola
La lucha contra el envejecimiento y la preservación de la salud se han convertido en puntos focales de atención en varios sectores de la sociedad. En la actualidad, se cree ampliamente que el mecanismo del envejecimiento celular está estrechamente relacionado con el daño de los radicales libres. Los radicales libres en el cuerpo humano son la principal causa del envejecimiento y los cambios patológicos; una acumulación excesiva puede poner en grave peligro la salud humana. Por tanto, la prevención del envejecimiento comienza principalmente con la eliminación del exceso de radicales libres en el organismo. En cuanto a la composición de los productos para la salud antienvejecimiento, aparte de algunos suplementos vitamínicos y minerales, la mayoría se formulan principalmente con materiales medicinales tradicionales chinos [1].
licio rutenico, un arbusto perteneciente al géneroliciode la familia de las Solanáceas, es conocido por sus frutos, que actualmente son considerados una de las mejores fuentes naturales de antocianinas. Por lo tanto, es aclamado como el "Rey de las Antocianinas" y es una importante fuente de antioxidantes naturales [2,3]. Además, es rico en polisacáridos, flavonoides, ácidos fenólicos y diversos oligoelementos [4-6].
Cistanche deserticola, una planta del génerocistanchede la familia Orobanchaceae, es un tónico comúnmente utilizado en la medicina tradicional china para reponer la esencia de los riñones [7]. Contiene una amplia variedad de compuestos bioactivos, como glucósidos feniletanoides, echinacósidos, acteosidos y polisacáridos [1].
la combinación delicio rutenicoyCistanche deserticolaSe cree que armoniza el yin y el yang dentro de los riñones, suprime los radicales libres en la sangre, mejora la resistencia, retrasa el envejecimiento, previene la arteriosclerosis y aumenta la inmunidad [8]. Ambos son productos locales de doble propósito (medicinales y comestibles) del Corredor Hexi en la provincia de Gansu, China.
Actualmente, se han realizado extensas investigaciones nacionales e internacionales basadas en las funciones farmacológicas y la extracción de compuestos activos delicio rutenicoyCistanche deserticola. Los estudios de Gao Yan [9], Guo Qiaoli [10] y Ailadan·Maimaiti Aili [11] han encontrado que los polisacáridos enCistanche deserticolaexhibe una alta actividad antioxidante y sus glucósidos feniletanoides poseen un cierto grado de capacidad antioxidante, un fuerte poder reductor y una capacidad eficaz de unión a objetivos. La investigación realizada por Yang Dailin [12] y Lou Shuting [13] revela que los compuestos polifenólicos enlicio rutenicoson complejos y abundantes, y muestran fuertes propiedades antioxidantes, con fenólicos totales y antocianinas altamente correlacionados con la actividad antioxidante.
Antocianinas y polifenoles enlicio rutenico, así como polisacáridos y glucósidos feniletanoides enCistanche deserticola, se ha confirmado que todos tienen efectos antienvejecimiento [14,15]. Sin embargo, no ha habido informes sobre el uso combinado de estos dos ingredientes enin vitroExperimentos simulados de digestión gastrointestinal y actividad antioxidante.
Por lo tanto, este estudio propone utilizarlicio rutenicoen polvo y liofilizadoCistanche deserticolaPolvo como principal materia prima para experimentos digestivos. Refiriéndose a laFarmacopea chinay basado en la demanda del cuerpo humano de los principales componentes activos delicio rutenicoyCistanche deserticola, se adoptarán tres proporciones diferentes (1:2, 1:1 y 2:1). Simuladoin vitroSe llevarán a cabo experimentos de digestión y absorción para medir los cambios en antocianinas, glucósidos feniletanoides, polifenoles y polisacáridos durante la digestión, así como su actividad antioxidante. El estudio tiene como objetivo evaluar los posibles beneficios para la salud y proporcionar nuevos conocimientos para el desarrollo de productos funcionales para la salud que combinenlicio rutenicoyCistanche deserticola.
1 Materiales y métodos
1.1 Materiales y Reactivos
Materiales:
licio rutenicoLos frutos se recolectaron en 2022 de bosques artificiales en la ciudad de Huahai, ciudad de Yumen.Cistanche deserticolase cosechó en mayo de 2022 a partir de inoculados artificialmentehaloxilónbosques en las tierras arenosas del condado de Gaotai.
Reactivos:
La pepsina (3000 U/g), la tripsina (250 U/mg), el ácido gálico, el reactivo de Folin-Ciocalteu, el DPPH y el ABTS se adquirieron de Shanghai Macklin Biochemical Technology Co., Ltd.
1.2 Instrumentos y equipos
DK-98-II baño de agua termostático digital (Tianjin Test Instrument Co., Ltd.)
Balanza analítica electrónica QUINTIX-224 (Sartorius Scientific Instruments Co., Ltd.)
GL-12B centrífuga refrigerada de alta velocidad de sobremesa (Hunan Hesi Instrument and Equipment Co., Ltd.)
Espectrofotómetro UV-visible DR6000 (Hach Company)
Agitador termostático de baño de agua SPH-110X12 110X24 (Shanghai Shiping Laboratory Equipment Co., Ltd.)
1.3 Métodos
1.3.1 Preparación de la muestra
licio rutenicolos frutos se secaron al aire de forma natural y se eliminaron los frutos y tallos rotos. Las muestras fueron molidas utilizando un molinillo y pasadas por un tamiz de malla 50 para su posterior uso. FrescoCistanche deserticolaSe lavó, cortó e inmediatamente se empapó en una solución protectora del color, luego se liofilizó, se molió y se pasó por un tamiz de malla 50 para su almacenamiento.
Para preparar polvos mixtos:licio rutenicopolvo yCistanche deserticolaEl polvo se mezcló en proporciones de grupo: Grupo A: 1:2, Grupo B: 1:1, Grupo C: 2:1. El peso total de la muestra fue de 0,75 g. La muestra mezclada se mezcló con agua desionizada en una proporción de sólido a líquido de 1:40 y se agitó a 37 grados para simular una digestión gastrointestinal. Después de enfriar, la mezcla se centrifugó durante 15 minutos a 6000 rpm y el sobrenadante se recogió para su posterior análisis.
1.3.2 Digestión simulada in vitro
El método de digestión in vitro se optimizó con base en la referencia [16] y constaba de dos etapas:
Etapa 1: Digestión Gástrica (GD), 2 horas
Una muestra de 0,75 g (licio rutenico, Cistanche deserticola, o polvo mezclado) se colocó en un tubo de centrífuga de 50 ml con una cantidad adecuada de agua desionizada y se mezcló. El pH se ajustó a 2,0 usando HCl 1 mol/l. Luego, se agregaron 4 ml de jugo gástrico simulado (3 g de pepsina disueltos en 50 ml de HCl de 0,01 mol/l). La mezcla se incubó en un baño de agua con agitación a 37 grados y 100 rpm para la digestión. Luego se inactivó la actividad enzimática en un baño de agua hirviendo durante 10 minutos. La mezcla se centrifugó a 4 grados durante 15 minutos (6000 rpm) y se recogió el sobrenadante para analizarlo.
Etapa 2: Digestión Intestinal (DI), 2 horas
El pH de la mezcla postdigestión gástrica se ajustó a 7,0 usando NaHCO₃ 1,0 mol/l. Luego se añadió una solución de tripsina (0,3 g de tripsina disuelta en 50 ml de Na₂CO₃ 0,01 mol/l) y se mezcló completamente. La digestión se llevó a cabo agitando a 100 rpm en un baño de agua a 37 grados. Después de la digestión, la actividad enzimática se inactivó en un baño de agua hirviendo durante 10 minutos. La mezcla se centrifugó a 4 grados durante 15 minutos (6000 rpm) y el sobrenadante se recogió para su análisis.
1.3.3 Determinación de componentes funcionales
Contenido total de polifenolesse determinó mediante el método de Folin-Ciocalteu [17].
Contenido de polisacáridose midió utilizando el método de fenol-ácido sulfúrico [18].
Contenido de antocianinasse determinó utilizando el método diferencial de pH [13].
Contenido de glucósidos feniletanoidesse midió mediante espectrofotometría UV-visible [19].
1.3.4 Determinación de la actividad antioxidante
1.3.4.1 Actividad de eliminación de radicales del DPPH
El ensayo DPPH se realizó según el método descrito en la referencia [20]. La tasa de eliminación de radicales DPPH se calculó utilizando la fórmula (1):
Tasa de eliminación de radicales DPPH (%)= (1−A1−A2A0)×100\\left(1 - \\frac{A_1 - A_2}{A_0} \\right) \\times 100(1−A0A1−A2)×100
(Fórmula 1)
Dónde:
A1A_1A1=absorbancia de la muestra + solución DPPH
A2A_2A2=absorbancia de la muestra + agua desionizada
A0A_0A0=absorbancia de la solución DPPH + agua desionizada
1.3.4.2 Actividad de eliminación de radicales ABTS
El ensayo ABTS se realizó según el método descrito en la referencia [21]. La tasa de eliminación de radicales ABTS se calculó utilizando la fórmula (2):
Tasa de eliminación de radicales ABTS (%)= (1−A1−A2A0)×100\\left(1 - \\frac{A_1 - A_2}{A_0} \\right) \\times 100(1−A0A1−A2)×100
(Fórmula 2)
Dónde:
A1A_1A1=absorbancia de la muestra + solución ABTS
A2A_2A2=absorbancia de la muestra + agua desionizada
A0A_0A0=absorbancia de solución ABTS + agua desionizada
1.4 Procesamiento de datos
Todos los experimentos se realizaron por triplicado. Los datos fueron analizados usandoSPSS 22.0software y los gráficos se crearon utilizandoOrigen de Microsoft 2018.
2 Resultados y Análisis
2.1 Efectos de la digestión gastrointestinal simulada sobre los componentes activos y la actividad antioxidante delicio rutenicoPolvo
2.1.1 Efectos de la digestión gastrointestinal sobre los componentes activos enlicio rutenicoPolvo
Como se muestra enFigura 1-a, el contenido de polifenoles en el grupo de digestión gastrointestinal simulada delicio rutenicoaumentó significativamente dentro de las primeras 1,5 horas (p< 0,05), seguido de una disminución. En general, los niveles de polifenoles mostraron un aumento durante las etapas de la digestión gastrointestinal.
De acuerdo aFigura 1-b, en el grupo de digestión gástrica simulada, el contenido de polisacáridos delicio rutenicoaumentó significativamente en 2 horas (p< 0,05), mientras que en el grupo de digestión intestinal simulada, el contenido de polisacáridos mostró una tendencia a la baja significativa (p< 0,05).
Como se muestra enFigura 1-c, el contenido de antocianinas en el grupo de digestión gástrica simulada aumentó significativamente en 1,5 horas (p< 0,05). Por el contrario, el contenido de antocianinas en el grupo de digestión intestinal simulada disminuyó ligeramente dentro de las primeras 1,5 horas, pero después de 1 hora, la diferencia no fue estadísticamente significativa (p> 0,05). El ambiente alcalino se identifica como la causa principal de la degradación de antocianinas [22].
2.1.2 Correlación entre los componentes activos y la actividad antioxidante delicio rutenicoPolvo después de digestión in vitro simulada
Como se muestra enFigura 2-a, la tasa de eliminación de radicales DPPH en el grupo de digestión gástrica simulada delicio rutenicogeneralmente aumentó durante el período de 2 horas, aunque hubo una disminución a las 0,5 horas seguida de un aumento. En comparación con el grupo de digestión intestinal, la disminución en el grupo gástrico fue más pronunciada y estadísticamente significativa (p< 0,05).
De acuerdo aFigura 2-b, la tasa de eliminación de radicales ABTS en el grupo de digestión gástrica simulada delicio rutenicomostró un aumento significativo en 2 horas, mientras que en el grupo intestinal simulado, la tasa de eliminación de ABTS disminuyó significativamente (p< 0,05).
Tabla 1revela que en el grupo de digestión gástrica simulada, los polifenoles enlicio rutenicotuvo una fuerte correlación con la actividad eliminadora de DPPH (p<0,05), mientras que las antocianinas no mostraron una correlación significativa con la actividad de DPPH en condiciones gástricas. En comparación con DPPH, ABTS mostró una correlación lineal más fuerte tanto con polifenoles como con antocianinas (p< 0,01), probablemente debido al alto contenido de antocianinas enlicio rutenico, que es un compuesto antioxidante clave.
Los polisacáridos mostraron una correlación positiva muy fuerte con DPPH (p< 0,01), pero una fuerte correlación negativa con ABTS (p< 0,01). En el grupo de digestión intestinal simulada, tanto los polisacáridos como las antocianinas estaban altamente correlacionados con las actividades de eliminación de DPPH y ABTS (p< 0,05). En particular, la correlación lineal entre los polisacáridos y la capacidad antioxidante fue más fuerte que la de las antocianinas.
Por el contrario, los polifenoles mostraron una fuerte correlación negativa tanto con DPPH como con ABTS (p< 0,01), lo que sugiere que a medida que aumenta el tiempo de digestión, los compuestos fenólicos pueden no utilizarse completamente y pueden sufrir degradación, lo que lleva a una pérdida del potencial antioxidante [14].
Tabla 1
Correlación entre el contenido de polifenoles, polisacáridos y antocianinas enlicio rutenicoy diferentes actividades antioxidantes
| Índice / 指标 | Grupo de jugo gástrico simulado. | Grupo de fluido intestinal simulado. | ||
|---|---|---|---|---|
| DPPH | ABTS | DPPH | ABTS | |
| Polifenol / 多酚 | 0.585* | 0.910** | -0.706** | -0.688** |
| Polisacárido / 多糖 | 0.841** | -0.980** | 0.744** | 0.770* |
| Antocianina / 花色苷 | 0.463 | 0.835** | 0.553* | 0.610* |
Nota:
** indica correlación significativa (P<0,05)
*** indica una correlación extremadamente significativa (P<0,01)
