Estudio sobre el estándar de calidad de Cistanche Deserticola Gouqi Jujuepian
Apr 07, 2023
PU Hongli, ZHOU Bo, WEI Shuchang (Facultad de Farmacia, Universidad de Medicina China de Gansu, Lanzhou, Gansu, 730000, China)
Abstracto:Objetivo Establecer los métodos de control de calidad de Ｒoucongrong Gouqi Jujuepian．Métodos Se usó TLC para identificar Ｒoucongrong (Cistanches Herba) y Gouqizi(Lycii Fructus) ．Se usó HPLC para determinar el contenido de echinacósido y verbascósido. una columna Hypersil BDS C18( 250．0 mm×4．6 mm,5 μm) a 25 grados. Se utilizó una elución isocrática con metanol y 0．1 por ciento de ácido fórmico a una velocidad de flujo de 1 mL/min. Se inyectó una alícuota de 20 μL de solución de muestra en la columna y la longitud de onda de detección fue de 330 nm. Ｒresultados Las características de los puntos de TLC de Ｒoucongrong (Cistanches Herba) y Gouqizi( Lycii Fruc tus) fueron claras con una fuerte especificidad. Los rangos lineales de echinacósido y verbacósido fueron de 41．8 a 418．0 ug / mL ( r=0． { {17}}) y 40 a 400 ug/mL ( r=0． 999 9) ． Las recuperaciones de muestra promedio fueron 99． 58 por ciento (ＲSD=0．85 por ciento) y 99．31 por ciento (ＲSD= 1．13 por ciento) ．Conclusión Los métodos informados en este documento se pueden usar de manera científica y efectiva para evaluar la calidad de Ｒoucongrong Gouqi jujuepiano．
Palabras clave: cistanche deserticola Gouqi Jujuepian; HPLC; CCF; equinacósido; verbascósido; calidad estandar
Cistanche deserticola y bayas de goji
Cistanchedeserticolay las tabletas masticables de goji están compuestas de Cistanche y bayas de goji, que tienen funciones para la salud como retrasar la fatiga y acelerar la eliminación de la fatiga. Ayudan a regular las funciones del cuerpo, mejoran la inmunidad y eliminan las condiciones de sub-salud.En la actualidad, debido a las largas horas de trabajo y la alta presión laboral, hay muchas personas en algunas industrias en China que están fatigadas y con problemas de salud [1-3]. Estos grupos industriales son la principal población apta para este alimento saludable. Lo hemos desarrollado como una tableta masticable que se puede administrar a tiempo incluso en ausencia de agua. Después de masticar la tableta, es fácil de tragar y puede acelerar la disolución del fármaco, mejorando el efecto terapéutico [4]. Este artículo estudia los estándares de calidad de las tabletas masticables, y los métodos de análisis cualitativos y cuantitativos obtenidos pueden reflejar objetivamente la calidad interna de las tabletas masticables y servir como estándares de control de calidad para la formulación.
Materiales medicinales chinos como la cistanche deserticola
1. Instrumento y fármaco de prueba.
1.1 Instrumentos
Cromatógrafo de líquidos de alta resolución Agilent 1260 (Agilent, EE. UU.), espectrofotómetro ultravioleta-visible UV Bluestar B (Beijing Laibetai Technology Co., Ltd.), analizador ultravioleta de tres vías WFH-203 (ZF-1) ( Shanghai Jingke Industry Co., Ltd.), balanza electrónica BT125D 1/100000 (Sartorius Scientific Instrument Co., Ltd.), horno de secado al vacío DZF-6090 (Shanghai New Scientific Instrument Co., Ltd.), SY{ {10}}T máquina de limpieza ultrasónica (Shanghai Shengyuan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.), película de poliamida (Zhejiang Taizhou Luqiao Sijia Biochemical Plastic Factory).
1.2 Medicamentos y reactivos:
Equinacetinasustancia de referencia (número de lote 111670-201505), sustancia de referencia junto a la piscina (número de lote 111530-201411), sustancia de referencia Cistanche deserticola (número de lote 121101-200402) y sustancia de referencia Lycium barbarum (número de lote {{3 }}) fueron comprados al Instituto de China para el Control de Alimentos y Medicamentos. Las tabletas masticables de Cistanche deserticola ma y Lycium barbarum fueron fabricadas por el Laboratorio de Medicina China de la Facultad de Farmacia de la Universidad de Medicina Tradicional China de Gansu, y el metanol era cromatográficamente puro. Todos los demás reactivos son analíticos puros.
Equinósido, principal componente químico de Cistanche deserticola
2 Métodos y Resultados
2.1 Identificación por cromatografía de capa fina (TLC)
2.1.1 Identificación TLC de Cistanche deserticola
Tome una cantidad apropiada de Cistanche deserticola y tabletas masticables de bayas de goji y tritúrelas hasta convertirlas en polvo. Tome 1,5 g de polvo fino y colóquelo en un matraz cónico. Agregar 20 mL de metanol y tratar con ultrasonido (potencia 250 W, frecuencia 40 kHz) por 15 minutos. Enfriar y filtrar. Concentrar el filtrado hasta que esté casi seco y disolver el residuo en 5 mL de metanol como solución de prueba. Tome 1 g de la hierba medicinal de referencia Cistanche deserticola y prepare una solución de la hierba medicinal de referencia utilizando el mismo método. Tome 0,5 g de una muestra negativa sin Cistanche deserticola y prepare una solución de control negativo utilizando el mismo método que la solución de prueba. Tome 0,5 de cada uno de la solución de prueba, la solución de control negativo y la solución medicinal de referencia μ L. Coloque las muestras en la misma película de poliamida, revele con agua de ácido acético glacial metanol (2:1:7) como agente revelador, retire, seque al aire , y examinado bajo luz ultravioleta (365 nm). En el cromatograma de la muestra de prueba, hay 4 puntos con el mismo color en las posiciones correspondientes del cromatograma de material medicinal de referencia, y el control negativo no tiene interferencia. Consulte la Figura 1 para obtener más detalles.
Principales componentes químicos de Cistanche deserticola
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2.1.2 Identificación TLC de bayas de goji
Tome una cantidad apropiada de tabletas masticables de Cistanche deserticola y bayas de goji, tritúrelas hasta convertirlas en polvo, pese 2,5 g de polvo fino en un tubo de centrífuga, disuélvalas en 35 ml de agua, centrifugue y extraiga el sobrenadante con 15 ml de acetato de etilo. Tomar una capa de acetato de etilo y concentrarla a 1 ml como solución de prueba. Tomar 0.5 g de bayas de goji como material de referencia, cortarlo en trozos pequeños, agregar 35 mL de agua, calentar y hervir por 15 minutos, dejar enfriar, centrifugar y extraer el sobrenadante con 15 mL de acetato de etilo. Tomar una capa de acetato de etilo y concentrarla a 1 ml como solución de material de referencia. Tome 2 g de muestras negativas sin bayas de goji y prepare una solución de control negativo mediante el método de preparación de la solución de prueba. Tome 2 muestras de la solución de prueba, 2 muestras de la solución de control negativo y 2 muestras de la solución medicinal de referencia μ L. Coloque las muestras en la misma película de poliamida, revele con acetato de etilo cloroformo ácido fórmico (3: 2: 1) como el agente de revelado, se retira, se seca al aire y se examina bajo luz ultravioleta (365 nm). En el cromatograma de la muestra de prueba, hay un punto con el mismo color en la posición correspondiente con el material medicinal de referencia, y el control negativo no tiene interferencia. Consulte la Figura 2 para obtener más detalles.
1. Materiales medicinales de referencia; 2, 3, muestra de prueba; 4. Control negativo.
Figura 1 Diagrama TLC de Cistanche deserticola
1. Materiales medicinales de referencia; 2. Control negativo; 3. Muestra de prueba.
Figura 2 Diagrama TLC de bayas de goji
2.2 Análisis cuantitativo de glucósidos de Fructus Moringa y Echinacetin
2.2.1 Preparación de la solución de referencia Pese con precisión las cantidades apropiadas de equinácea y proporcione las sustancias de referencia, colóquelas en un matraz volumétrico marrón y agregue 50 por ciento de metanol para preparar una solución de referencia mixta que contenga 0.836 mg de equinácea y 0,799 mg de poolside por mililitro y obtener [5].
2.2.2 Preparación de la solución de prueba
Tome una cantidad adecuada de Cistanche deserticola níspero tableta masticable, tritúrela hasta convertirla en polvo (pásela por un tamiz de malla 60), pese 1,4 g con precisión, colóquela en un matraz aforado marrón de 50 ml, agregue 50 por ciento de metanol a la balanza , agítelo, péselo, déjelo en remojo durante 30 min, trátelo con ultrasonido (potencia 250 W, frecuencia 40 kHz) durante 40 min, enfríelo, péselo, use metanol al 50 por ciento para compensar la reducción de pérdidas, agite levántese, deténgase, tome el sobrenadante, use un filtro de 0,45 μ con una membrana microporosa y tome el filtrado continuo para obtener [6].
Principales componentes químicos de Cistanche deserticola
2.2.3 Preparación de la solución de control negativo
Tomar una cantidad adecuada de muestra negativa sin Cistanche deserticola, triturarla hasta convertirla en polvo (tamizar con un tamiz de malla 60), pesar con precisión 1,4 g y preparar una solución de control negativo según el método descrito en "2.2.2".
2.2.4 Condiciones cromatográficas
La columna cromatográfica es Hypersil BDS C18 (250.0 mm × 4．6 mm,5 μ m) La longitud de onda de detección es de 330 nm, con metanol como fase móvil A y 0,1 por ciento de ácido fórmico como fase móvil B. La elución en gradiente se realiza de acuerdo con la Tabla 1; Caudal 1 ml/min; La temperatura de la columna es de 25 grados. Bajo las condiciones cromatográficas anteriores, extraiga el 20 por ciento de la solución de referencia, el 20 por ciento de la solución de prueba y el 20 por ciento de la solución de control negativo, respectivamente μ Inyecte la muestra L y registre el cromatograma, como se muestra en la Figura 3. Los resultados mostró que otros componentes no interfirieron con la determinación de la piscina y la equinácea, y la separación de la piscina y la equinácea fue buena.
Tabla 1 Condiciones de elución de gradiente para metanol (A) -0.1 por ciento de ácido fórmico (B) fase móvil
2.2.5 Inspección de relación lineal
Mide con precisión {{0}}.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0 y 5.{ {31}} mL de solución mixta de referencia de equinácea y poolside, colóquelos respectivamente en matraces volumétricos marrones de 10 mL, dilúyalos con metanol al 50 por ciento hasta la escala y determine el área del pico de acuerdo con las condiciones cromatográficas en "2.2.4" . La regresión lineal se realizó utilizando el valor integral del área del pico como ordenada (Y) y el volumen de inyección como abscisa (X). Las ecuaciones de regresión para echinacoside y poolside se calcularon como Y=1493.8X-8.0748 (r=0.999 9) y Y=1895.8X{{ 25}}.486 (r=0.999 9), respectivamente. Los resultados mostraron que las antocianinas de Echinacea y Moringa estaban entre 41.8-418.0 y 40-400, respectivamente μ Hay una buena relación lineal dentro del rango de g/mL.
2.2.6 Prueba de precisión
Mida con precisión la solución de referencia mixta de glucósido de equinácea y junto a la piscina 20 μ L. Inyecte 5 muestras consecutivas y registre el área del pico. Los resultados mostraron que las RSD de pineal y poolside fueron 0.62 por ciento y 0.51 por ciento, respectivamente, lo que indica una buena precisión del instrumento.
2.2.7 Prueba de estabilidad
Tome el mismo lote de la solución de prueba e inyéctelo a las 0, 4, 8, 16 y 32 horas respectivamente, registrando el área del pico. Los resultados mostraron que la RSD de pineal y poolside fue de 1,30 por ciento y 1,35 por ciento, respectivamente, lo que indica que la solución de prueba se mantuvo estable en 32 horas.
1. Sustancia de referencia mixta; 2. Muestra de prueba; 3. Control negativo;
A. Equinacetina; Glicósido de la flor de B. Maorui.
Figura 3 Diagrama de HPLC de echinacetina y glucósido de Fructus Moringae
2.2.8 Prueba de repetibilidad
Tome 5 muestras del mismo lote y prepárelas y mídalas en secuencia de acuerdo con el método de preparación de la solución de prueba. Los resultados mostraron que la RSD de pineal y poolside fue 0.82 por ciento y 0.75 por ciento, respectivamente, lo que indica una buena repetibilidad de este método.
2.2.9 Prueba de recuperación de muestras
Tome 5 muestras con contenido conocido de antocianina y antocianina, agréguelas a las muestras de control de antocianina y antocianina, prepare la solución de prueba de acuerdo con el método en "2.2.2" y determine la tasa de recuperación de acuerdo con las condiciones cromatográficas en "2.2 .4". Los resultados mostraron que las recuperaciones promedio de glucósido de equinácea y poolside fueron 99.58 por ciento y 99.31 por ciento, respectivamente, con RSD de 0.85 por ciento y 1.13 por ciento. Consulte las tablas 2 y 3 para obtener más detalles.
2.2.10 Determinación del contenido de la muestra
Utilice el método de determinación anterior para determinar el contenido de echinacósido y poolside en tres lotes de muestras. Los resultados se muestran en la Tabla 4.
Tabla 2 Resultados de la prueba de tasa de recuperación para la adición de glucósidos de equinácea
Tabla 3 Resultados de la prueba de tasa de recuperación para la adición de glucósidos florales de Maorui
Tabla 4 Resultados de la determinación del contenido de tres lotes de muestras
3 Discusión
Debido a que Cistanche deserticola es el fármaco dominante en la prescripción de tabletas masticables de Cistanche deserticola y Lycium barbarum, representa una gran proporción de la formulación. Por lo tanto, se realizó un análisis cualitativo y cuantitativo en Cistanche deserticola, y un análisis cualitativo en semillas de Lycium barbarum. El método utilizado es simple, sensible y tiene una gran especificidad, lo que puede desempeñar un buen papel en el control de calidad.
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En el análisis cuantitativo, para lograr una mejor disolución del echinacósido y del lado de la piscina, la muestra de polvo se sumergió primero en metanol al 50 % durante 30 minutos y luego se sometió a un tratamiento ultrasónico. Para determinar con precisión el contenido de echinacósido y poolside en tabletas masticables, se investigó el tiempo de extracción ultrasónica. En comparación con las muestras extraídas durante 30, 40 y 50 minutos, se encontró que el echinacósido y el poolside se pueden extraer por completo después de 40 minutos.. El método establecido en este artículo puede controlar efectivamente la calidad de las tabletas masticables.
referencia:
[1] Gao Mingyou. Investigación sobre subsalud y actividades deportivas de empleados de bancos agrícolas en áreas urbanas de la ciudad de Yulin [J]. Revista de la Universidad de Yulin, 2015 (4): 60-64
[2] Li Huishang, Chen Minghai, Dong Xiaoxia y otros. Análisis del estado de salud y factores que influyen en los taxistas [J]. Revista de alimentación y nutrición de China, 2009 (11): 62-64
[3] Ruan Huili, Ruan Ying, Li Yonghong. Investigación y análisis del estado de fatiga de las enfermeras de urgencias [J]. Revista contemporánea de enfermeras, 2015 (4): 98-100
[4] Shi Xinlei, Huang Shengwu. Progreso de la investigación sobre comprimidos masticables [J]. China Farmacéutica, 2008, 17 (14): 17-19
[5] Comisión Nacional de Farmacopea. Farmacopea de la República Popular China (Parte 1) [M]. Beijing: Prensa de ciencia y tecnología médica de China, 2015: 135
[6] Zhang Siju, Liu Li, Zhang Shuyun, et al. Estudio sobre los estándares de calidad de los materiales medicinales Cistanche deserticola [J]. Revista china de medicina tradicional china, 2000, 25 (6): 359
