Las actividades antidepresivas y de mejora cognitiva de la hierba china tradicional Cistanche Ⅰ
Jun 23, 2022
Resumen
Más del diez por ciento de las personas sufren al menos un episodio de depresión y trastornos mentales relacionados en su vida, y la depresión y los trastornos mentales relacionados son uno de los mayores problemas de salud pública del mundo. Una teoría de sistemas múltiples sostiene que la desregulación de los sistemas múltiples es la base de la patogenia de la depresión y los trastornos mentales relacionados, y se necesitan con urgencia nuevas terapias basadas en la teoría de la desregulación de sistemas múltiples. En este estudio, el efecto antidepresivo de la decocción de la hierbaCistanche deserticaYCMa yCistanche tubulosafue examinado. hierbaCistanchela decocción redujo significativamente el período de inmovilidad en la prueba de suspensión de cola de ratón. Los ratones tratados con la decocción de hierbas mostraron una capacidad mejorada de aprendizaje espacial y memoria en la prueba del laberinto acuático de Morris. Los grupos tratados con la decocción de hierbas mostraron una actividad de monoaminooxidasa (MAO) regulada a la baja; la concentración de dopamina (DA) en el cerebro aumentó, lo que indica que la hierbaCistanchela decocción mejoró la excitabilidad nerviosa; la concentración sérica de corticosterona (CORT) se reguló a la baja, lo que demuestra que los ratones se beneficiaron de un nivel de estrés reducido. Por lo tanto, la eficacia antidepresiva y el mecanismo dehierba tradicional chinaCistanchefueron explorados en este estudio. hierbaCistanchemostró un potencial para ser desarrollado como una terapia complementaria y alternativa para la depresión.
1. Introducción
La depresión y los trastornos del estado de ánimo relacionados, con una estimación del 12 al 17 por ciento de la población que experimenta al menos un episodio en la vida, se encuentran entre las principales causas de discapacidad mental y se consideran uno de los principales problemas de salud pública en todo el mundo. De particular relevancia, una proporción significativa de pacientes con depresión sufren pérdida de memoria, problemas de concentración, disminución de la energía o fatiga, pérdida de interés o placer en pasatiempos y actividades, y dificultad para dormir, despertarse temprano en la mañana o quedarse dormido. Aunque los sustratos neurales de la anomalía en la depresión y los síndromes relacionados no están claros, en general se acepta que el deterioro de la neuroplasticidad y la resiliencia celular da lugar a la fisiopatología de la depresión y el éxito del tratamiento puede depender de la intervención del nivel de neurotransmisores. El enfoque de la medicación para la depresión se basa básicamente en la hipótesis clásica del sistema de monoaminas, que afirma que la desregulación de las monoaminas, especialmente la serotonina (5-HT) y la norepinefrina (NE), contribuyen a la patogénesis de la depresión, y la intervención del sistema de neurotransmisores con dopamina los agonistas y los moduladores noradrenérgicos de la dopamina aliviarían los síntomas del trastorno depresivo mayor. Aunque se prescribe ampliamente, la eficacia curativa de los antidepresivos es cuestionable y el efecto secundario no puede ignorarse porque una proporción significativa de los pacientes no responde a la manipulación del sistema de monoaminas. Recientemente, nuevas teorías de la patogenia de la depresión indican que múltiples sistemas, incluidas las vías inflamatorias, la vía del estrés oxidativo, el eje hipotálamo-pituitario-suprarrenal (HPA), el sistema metabólico y bioenergético, las vías neurotróficas, el sistema del glutamato, el sistema opioide y el sistema colinérgico, están estrechamente asociados con la aparición de la depresión. Las evidencias muestran que la intervención de objetivos múltiples produjo una mayor eficacia que la intervención de un solo objetivo. Se necesitan con urgencia nuevas terapias basadas en la teoría de la desregulación de múltiples sistemas.
Buscando más detalles sobre los beneficios de Cistanche
Según los informes, los productos a base de hierbas consumían a más de la mitad de la población de EE. UU.; el interés y la demanda de hierbas o productos a base de hierbas como una forma complementaria de tratar la depresión están creciendo en todo el mundo. Se ha descubierto que varias plantas medicinales demuestran un efecto beneficioso para aliviar la depresión. Las hierbas que, según se informa, poseen el efecto de suprimir la depresión y mejorar la función cognitiva incluyen el espino amarillo,Ginkgo biloba,Piper negro,Hypericum perforatum,Griffonia simplicifolia. Una administración combinada de ácido ferúlico y piperina mostró un efecto similar a un antidepresivo sinérgico en ratones mediante la manipulación del sistema monoaminérgico. La albiflorina se caracterizó por una alta afinidad selectiva por los receptores y transportadores de neurotransmisores y aumentó significativamente las concentraciones extracelulares de 5-HT y NE en el hipotálamo de ratas que se mueven libremente. Una hierba medicinalToronjil officinalisL. alivió el comportamiento depresivo de los ratones ejerciendo la influencia sobre el nivel del neurotransmisor serotoninérgico. Estas hierbas o decocciones, desarrolladas como remedios alternativos para la depresión, ayudan a aliviar los síntomas de la depresión y proporcionan una nueva fuente para el desarrollo de fármacos antidepresivos. hierbaCistancheLas especies, distribuidas en tierras áridas y desiertos del norte de China, son hierbas de la medicina tradicional china y se han utilizado ampliamente para tratar diversas enfermedades durante más de 1,000 años en China. La eficacia múltiple de la hierbaCistanchela decocción oscila entre lo afrodisíaco [14], promotores de la inmunidad [15], antioxidante [16], y hepatoprotector [17] propiedades.C. deserticolalas decocciones inducen las enzimas esteroidogénicas testiculares [18], promover la respuesta eréctil del pene y acortar el período de latencia de la reacción eréctil en ratas castradas [19]. hierbaCistancheSe ha informado que inhibe las actividades de las neuronas dopaminérgicas al regular los genes inhibidores de la apoptosis y los factores neurotróficos.20].C. tubulosalas decocciones modificaron la disfunción cognitiva causada por A 1-42 bloqueando el depósito de amiloide y reactivando la función neuronal colinérgica y dopaminérgica del hipocampo [21]. La propiedad neuroprotectora de las hierbas.Cistancheimplica el potencial terapéutico en las enfermedades relacionadas con la cognición. La depresión es un modo mixto común de reacciones emocionales con olvido y deterioro cognitivo como síntomas comunes.22]. hierbaCistanchese usaba comúnmente como medicina tradicional china para tratar el olvido; además, un informe reciente muestra que una administración temprana de harina de maíz complementada conC. tubulosaes beneficioso para la promoción de la longevidad y el aprendizaje asociado con el olfato y la mejora de la memoria en los no vertebradosdrosófilamodelo [23]. Estos hechos indican la propiedad de mejora cognitiva de la hierbaCistanche; Aquí, en esta investigación, caracterizamos por primera vez la propiedad antidepresiva y su relación con las actividades de mejora cognitiva en el modelo de mamífero mediante la regulación del sistema de monoaminas y el eje HPA. Iluminando la propiedad antidepresiva y el mecanismo preliminar de la hierba.Cistanchepodría ampliar el espectro de aplicación de la hierbaCistanche, que podría desarrollarse como un remedio alternativo para la depresión.
2. Materiales y métodos de función antidepresiva de Cistanche
2.1. Material Vegetal y Preparación de Decocción de Cistanche
C. deserticolaYCMa se obtuvo de la Región Autónoma de Nei Mongol, China;C. tubulosase obtuvo de la Región Autónoma de Xinjiang Uygur, China. Antes de la decocción, la hierba (C. deserticolaYCMa oC. tubulosa) se inspeccionó para detectar el contenido de echinacósido y verbascósido mediante HPLC (cromatografía líquida de alta resolución) (Milford, MA, Waters, EE. UU.), y el producto elegible (según la Farmacopea de la República Popular China) se utilizó para los experimentos con animales. . La decocción se adquirió en base al método de vaporización de agua desarrollado por el Centro de Investigación de Ingeniería de Alimentos y Salud del Ministerio de Educación del Estado, Universidad Sun Yat-sen. SecoCistanche deserticaSe machacó YCMa de 125 g y se tamizó con 120-malla y luego se disolvió el polvo en 3 L de agua ultrapura, se calentó a 100 grados durante 2 h, luego se enfrió a temperatura ambiente y se tamizó. ; el sobrenadante se recicló. Luego, el sedimento se disolvió en 2 L de agua ultrapura y luego se calentó durante 1,5 h y se enfrió como se mencionó anteriormente para reciclar el sobrenadante; el sedimento se usó luego para reciclar el sobrenadante. El contenido de todo el sobrenadante se enriqueció mediante evaporadores rotatorios al vacío a 60 grados; finalmente, la concentración de fármaco bruto se fijó en 0,5 g/ml y el producto se almacenó a -20 grados.
2.2. Ensayo de echinacósido y verbascósido por análisis HPLC
Se usó HPLC (cromatografía líquida de alta resolución) para medir el ensayo cualitativo y cuantitativo de echinacósido y verbascósido; verbascoside (pureza > 93 por ciento) y echinacoside (pureza > 93 por ciento) se adquirieron de los Institutos Nacionales para el Control de Alimentos y Medicamentos (Beijing, China) y se utilizaron como control estándar.
2.3. El Cuidado Animal y la Conducta Experimental sobre Cistanche
Los sujetos eran ratones Kunming macho SPF (libres de patógenos específicos) que pesaban 21~25 gramos, suministrados por el Centro Médico de Animales Experimentales de la provincia de Guangdong. Los animales se alojaron en jaulas de plástico (diez por jaula); las condiciones ambientales se establecieron de la siguiente manera: humedad del 40 al 70 por ciento, temperatura ambiente de 21 ± 1 grado y un período de luz-oscuridad de 12 h: 12 h. Todos los experimentos con animales fueron aprobados por el Comité de Ética Animal de la Universidad Sun Yat-sen.
2.4. Prueba de suspensión de cola en Cistanche
La prueba de suspensión de la cola se realizó de acuerdo con el protocolo descrito por Cryan et al. [24] con cambios modestos. Brevemente, el día 21, los ratones fueron suspendidos por la cola utilizando horcas metálicas atadas con un catéter de nailon, con la cabeza a una altura de 50 mm del suelo. Los ratones se colgaron del gancho con cintas adhesivas a 10~20 mm del extremo de su cola y se aislaron acústica y visualmente mediante tablillas. Se registraron los movimientos corporales del ratón y se ignoraron los movimientos respiratorios. Antes del día del experimento, los ratones se suspendieron durante 8 min para su adaptación.
2.5. La prueba del laberinto de agua de Morris en Cistanche
La prueba del laberinto de agua se realizó de acuerdo con la descripción de Vorhees et al. [25–27] utilizando el dispositivo desarrollado por la Academia China de Ciencias Médicas. Se utilizó una piscina circular (150 cm de diámetro) llena de agua (26 ± 1 grado; altura del borde (distancia de la superficie del agua al borde de la pared): 10 cm), plataforma de rescate circular (diámetro: 11 cm; distancia entre el punto central de la plataforma y la piscina). pared: 27 cm) se sumergió de 1 a 1,5 cm por debajo de la superficie del agua, y el área de prueba se iluminó con iluminación indirecta (50 ± 10 lux) para evitar reflejos. Se utilizaron cuatro ubicaciones de inicio, N, S, E y W. Para la prueba de aprendizaje espacial, los animales se entrenaron diariamente los días 9 a 11 en la ubicación de inicio fija. El período de latencia de escape se mide para mostrar la memoria espacial y la capacidad de aprendizaje de los ratones. Si los ratones no podían encontrar o trepar a la plataforma, los ratones serían conducidos a la plataforma y permanecerían durante 10 s. Después de descansar durante 60 s, se iniciaría la siguiente sesión de entrenamiento. Los datos obtenidos de la última prueba de aprendizaje espacial se utilizaron como valor base para el moldeado. En los días 23 a 28, se realizaron la prueba de navegación del lugar y la sonda espacial. La prueba de navegación del lugar duró 6 días y se realizó a la 1:00 p. m., los animales se colocaron en el agua con la cabeza hacia la pared de la piscina en el sentido de las agujas del reloj y se registró el período de latencia (dentro de 2 min). Después de que se realizó la prueba de navegación del lugar, se retiró la plataforma. Los ratones se colocaron en el agua con la cabeza mirando hacia la pared de la piscina en una ubicación aleatoria, y se registraron el rastro de movimiento y la frecuencia con la que los ratones nadaban en el lugar donde estaba la plataforma en 2 min. El rastro de movimiento fue registrado por una grabadora autónoma multifunción de movimiento de ratones (YLS-1A, Yiyan Technology, Jinan, China).
2.6. Detección de la Actividad MAO
La actividad de MAO se midió utilizando el kit de detección de MAO (A034, Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, China) y la detección se realizó de acuerdo con el protocolo del fabricante. Se obtuvo homogeneizado de tejido cerebral; 500μme mezclaron con 300μl de Agente 1 y 300μl de Agente 2, incubado durante 3 horas a 37 grados y luego agregado sucesivamente con 300μl, de Agente 3, 3 ml de Agente 4, y vortex durante 2 min. La mezcla de reacción se centrifugó a 3,000 rpm durante 10 min y la densidad óptica del sobrenadante se determinó mediante espectrofotómetro de espectro visible y ultravioleta (Lambda 25, PerkinElmer, EE. UU.) utilizando luz de excitación de 242 nm.
2.7. Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas de neurotransmisores y ACTH y CORT
El kit de detección de ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) para dopamina (DA), norepinefrina (NE) y 5-hidroxitriptamina (5-HT) se compró a BLUE GENE, Shanghái. Los kits de detección ELISA se compraron a Qiyun Biotech, Guangzhou.
Los procedimientos son los siguientes: el experimento se realizó a temperatura ambiente. Recubra los pozos de una placa de microtitulación de PVC con el anticuerpo de captura en 1–10μConcentración g/ml en tampón carbonato/bicarbonato (pH 9,6). Selle la placa e incube durante la noche a 4 grados; lave la placa con PBS/tween 3 veces y los sitios de unión no específicos se bloquean con Block Solution; luego lave la placa con PBS/tween 3 veces. Los estándares y las muestras se diluyen en solución de bloqueo y 100μSe añade l en el pocillo de la placa, y la placa se sella y se incuba a 37 grados durante 1 h. Añadir 100μl anticuerpo de detección diluido e incubar la placa a 37 grados durante 1 hora; lavar la placa con PBS/Tween 3 veces. Añadir 50μl solución de revelado de color y mantenga la placa alejada de la luz e incúbela a temperatura ambiente durante 15 min; 50μSe añade tampón de parada para detener la reacción. Mida la densidad óptica (OD) de cada pocillo con un lector de microplacas ajustado a 405 nm en 30 min.
2.8. Análisis estadístico
Todos los datos se representaron como media ± SEM (error estándar de la media), la diferencia significativa se analizó mediante t-test o ANOVA unidireccional seguido de la prueba de rangos múltiples de Duncan usando SPSS 16.0, y diferencias entre grupos conP< 0.05 se consideraron estadísticamente significativos.