El potencial de los polifenoles del perejil y su capacidad antioxidante para ayudar en el tratamiento de la depresión y la ansiedad: un estudio subagudo in vivo

Para más información. contactotina.xiang@wecistanche.com

Resumen: La depresión y la ansiedad son los principales problemas de salud mental en todas partes del mundo. Estas enfermedades están asociadas con una serie de factores de riesgo, incluido el estrés oxidativo. Los psicofármacos de naturaleza química han demostrado varios efectos secundarios que elevan el impacto de estas enfermedades. Ante esta situación, los productos naturales aparecen como una alternativa prometedora. El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos ansiolíticos y antidepresivos del Petroselinum sativumpolifenolesin vivo, así como su correlaciónantioxidante propiedades in vitro.ansiolíticola actividad del extracto (50 y 100 mg/kg) se evaluó mediante las pruebas de campo abierto y cámara de luz-oscuridad, mientras que la actividad antidepresiva se evaluó mediante la prueba de natación forzada. La actividad antioxidante del extracto se evaluó mediante la prueba de radicales libres 2,2-difenil-1-picrilhidrazilo (DPPH) y la prueba FRAP (capacidad de reducción de hierro). El extracto fenólico mostró efectos ansiolíticos y antidepresivos muy potentes, especialmente a dosis de 100 mg/kg, disminuyendo la conducta depresiva en ratones (disminución del tiempo de inmovilidad) y también la conducta ansiolítica (tendencia al descubrimiento en el centro y áreas iluminadas). )mejores incluso que los de paroxetina y bromazepam (fármacos clásicos) concomitantemente con esos resultados el extracto también mostró una importante capacidad antioxidante. Estos resultados preliminares sugieren que Petroselinum satioum exhibe potencial ansiolítico y antidepresivo para su uso como complemento o fitomedicamento independiente para tratar la depresión y la ansiedad.

Palabras clave: Petroselinum sativum; polifenol; ansiolítico; similar a un antidepresivo; antioxidante; farmacología; medicina herbaria; productos naturales

1. Introducción

Los trastornos de depresión y ansiedad se han considerado durante mucho tiempo problemas de salud mental y constituyen una pesada carga para cualquier sociedad en la que el estrés sea omnipresente. La Organización Mundial de la Salud (OMS) prevé que para 2030, la depresión, como enfermedad potencialmente mortal, será la segunda causa de discapacidad en todo el mundo [1]. Según las últimas estimaciones de la OMS, más de 300 millones de personas en todo el mundo sufren depresión, de las cuales más de 260 millones también tienen trastornos de ansiedad [2].

El Manual Diagnóstico y Estadístico de los Trastornos Mentales (DSM-V) definió el trastorno depresivo mayor no solo como una tristeza ocasional o un episodio de depresión, sino como un estado de ánimo deprimido o pérdida de interés o placer durante al menos dos semanas consecutivas, cuyos episodios son a menudo recurrente [3]. La OMS también define la depresión como “una variedad de síntomas psicológicos y biológicos, tales como un sentimiento general de tristeza, pérdida de placer e interés, sentimiento de culpa, trastornos del sueño (insomnio o somnolencia) y del apetito, sensación de fatiga (retraso psicomotor ), y falta de concentración”. En los casos más graves, la depresión puede llegar incluso al suicidio [4].

La ansiedad, tal y como la define la OMS, es “una sensación de peligro inminente indeterminado acompañada de un estado de malestar, agitación, impotencia o incluso aniquilamiento”. También se puede describir como un estado de miedo anticipatorio provocado por un peligro potencial e incierto, aunque su causa no es necesariamente consciente, a diferencia del miedo que surge ante un peligro real. Sin embargo, estas dos emociones se caracterizan por respuestas fisiológicas (aumento de la presión arterial, sudoración, taquicardia, etc.) y conductuales (aumento del estado de alerta y evitación) similares [5].

La depresión y la ansiedad generalmente se tratan con medicamentos psicotrópicos, incluidos antidepresivos yansiolíticos(tranquilizantes), a menudo de naturaleza química, como la paroxetina y las benzodiazepinas. Sin embargo, el uso de estos medicamentos presenta ciertos límites y pueden causar efectos secundarios no deseados. Bromazepam se prescribe para el tratamiento de la ansiedad. Sin embargo, su consumo conlleva una serie de efectos secundarios negativos, que incluyen somnolencia, sedación y pérdida de memoria [6]. La dificultad para dormir, la pérdida de apetito, la somnolencia y la disfunción sexual también son efectos secundarios típicos de la paroxetina, un antidepresivo de la familia de los inhibidores de la recaptación de serotonina (ISRS) que se usa para controlar los trastornos depresivos mayores [7]. Como resultado de esta eficacia limitada, la exploración de medios terapéuticos nuevos, más efectivos y no tóxicos es muy apreciada.

Las plantas medicinales pueden ser una fuente adecuada de terapias nuevas, seguras y efectivas, especialmente porque se sabe que muchas presentan menos efectos secundarios [8]. Se han probado múltiples plantas medicinales en los trastornos anteriores y arrojaron resultados muy agradables que alentaron a realizar más estudios para descubrir las propiedades antidepresivas y ansiolíticas de otras plantas [9].

Petroselinum satioum Hoffm., comúnmente conocido como “perejil” (“maadnous” en árabe), es miembro de la familia Apiaceae. Apium crispum Mill, Apium Petroselinum L., Petroselinum Hortense Hoffm y Petroselinum crispum (Mill) Fuss. también son sinónimos de Petroselinum sativum Hoffm.[10. El perejil, como hierba culinaria que se originó en la región mediterránea, se ha convertido en una hierba común en todo el mundo en los tiempos modernos [11]. P. sativum tiene una variedad de propiedades beneficiosas, que incluyenantioxidante, efectos analgésicos, espasmolíticos, antidiabéticos, inmunomoduladores y gastrointestinales [12]. Estos diversos beneficios pueden atribuirse a los componentes básicos de la planta, como los polifenoles (apigenina, quercetina, luteolina y kaempferol), vitaminas, carotenoides, cumarina y taninos [13]. La familia Apiaceae abarca múltiples plantas conocidas por sus actividades antidepresivas y ansiolíticas como Coriandrum satioum L.[14], Pimpinella anisum L.[15], Carum carvi L.[16] para una concentración que oscila entre 50 y 200 mg/kg.

En este estudio, las actividades ansiolíticas y antidepresivas potenciales del perejilpolifenolesfueron evaluados por primera vez, junto con suactividad antioxidante, para determinar si había una correlación.

2. Resultados

2.1. Evaluación de la Actividad Antioxidante

2.1.1.Prueba DPPH

La Figura 1 muestra el porcentaje de actividad antioxidante en función de diferentes niveles de PSPE y BHT. Los resultados obtenidos revelan que nuestro extracto y BHT presentan actividad antirradicalaria dependiente de la concentración. Es decir, el porcentaje de inhibición del radical DPPH aumenta con la concentración del extracto fenólico de P. sativum y BHT. BHIT mostró la mayor actividad en comparación con nuestro extracto. Para 0.5 ug/mL, BHT alcanzó un porcentaje máximo de inhibición del 90 por ciento, que se mantuvo constante para una concentración de 1 ug/mL. A la misma concentración, el extracto fenólico produjo una inhibición máxima del 58 por ciento

El antioxidante sintético BHT mostró una actividad antirradical muy potente, con un IC50 de alrededor de 0.024 ug/mL, superior al registrado para el extracto fenólico de P sativum (alrededor de 0.184 ug/mL) .

2.1.2.Prueba FRAP

La figura 2 muestra la variación de la densidad óptica (OD) en función de las diferentes concentraciones de PSPE y BHT (control positivo). Se puede observar que los porcentajes de reducción son proporcionales a la concentración tanto del extracto como del BHT. Este último mostró un mayor porcentaje de reducción en comparación con el extracto.

Para comparar la eficiencia de la fracción polifenólica de P.sativoum (PSPE) con la de BHT, determinamos la concentración que redujo el 50 por ciento del FRAP (IC50).

BHT (el antioxidante sintético BHT) mostró una actividad antioxidante muy potente con un IC50 de aproximadamente 0.09ug/mL, más alto que el registrado para el extracto fenólico de P. sativum (alrededor de 0.38 ug/mL) ）.

2.2. Evaluación de la prueba de natación forzada de actividad antidepresiva

La variación en el tiempo de inactividad en la prueba de nado forzado durante las tres semanas del experimento se muestra en la Figura 3. El tiempo de inmovilidad durante la prueba fue significativamente más corto en los ratones tratados con PSPE (PSPE 50 mg/kg (34 s±3.286), PSPE 100 mg/kg (33,8 s± 2,653)) comparado con controles (Paroxetina (100,8 s±6,837), Vehículo (176 s±6,550).

Estos resultados muestran que el efecto antidepresivo del extracto fenólico de P. sativum es mayor que el de la paroxetina.

2.3. Evaluación de la Actividad Ansiolítica

2.3.1. Comportamiento ansioso en campo abierto

La Figura 4 muestra la variación en el tiempo pasado en el centro de la prueba de campo abierto durante las tres semanas de tratamientos con extractos. Se puede observar que los ratones tratados con PSPE (50 y 100 mg/kg) permanecieron más tiempo en la zona central en comparación con los grupos control. Este aumento significativo es proporcional no solo a la duración del tratamiento sino también a la concentración del extracto. El valor óptimo se obtuvo con una concentración de 100 mg/kg (37,4 s± 1,778, frente a 33,4 s±1,208 sat una dosis de 50 mg/kg). Esto indica unansiolíticoefecto de esta planta.

La variación en el número de mosaicos cruzados durante el experimento de tres semanas se muestra en la Figura 5. El análisis mostró un aumento notable en el número de mosaicos atravesados ​​por ratones tratados con PSPE (50 mg/kg (161,2±5,490), 100 mg/ kg (173±10,104)) en comparación con los grupos tratados con 1 mg/kg de bromazepam (115,8±1,393) y vehículo (147,4±1,568). Estos resultados indican un mayor efecto ansiolítico del FPPS incluso que el del bromazepam a 1 mg/kg.

2.3.2. Comportamiento ansioso en la habitación luz-oscuridad

La figura 6 presenta los resultados de la variación del tiempo de permanencia en la cámara iluminada durante el período de estudio. Los resultados muestran un aumento progresivo del tiempo pasado en la cámara iluminada a lo largo del tiempo para los ratones tratados con PSPE. Este aumento es especialmente notable el día 21. En esta prueba, los ratones tratados con bromazepam y PSPE pasaron mucho más tiempo en el compartimento iluminado (bromazepam 1 mg/kg (146,8 s ± 1,068), PSPE 50 mg/kg (199,6 s± 6.838), PSPE 100 mg/kg (213,6 s ± 9,331) en comparación con ratones de control (vehículo (75,8 s ± 4,352)). Esto se interpretó como evidencia de un efecto ansiolítico del extracto polifenólico de P. sativum.

La Figura 7 muestra la variación en el número de transiciones entre las cámaras de luz y oscuridad durante esta prueba. Se encontró una diferencia notable durante los 21 días entre los ratones tratados con PSPE (50 mg/kg (16±{{10}}.548), 100 mg/ kg (12,4±0,510)) y ratones de control (vehículo (10±0,837), bromazepam 1 mg/kg (12±0,949). Estos resultados son consistentes con los resultados del tiempo pasado en la cámara iluminada, ya que estos dos parámetros son inversamente proporcional al nivel de ansiedad que mostraban los ratones.

3. Discusión

En este estudio demostramos que el extracto fenólico de P. satioum presenta actividad antioxidante in vitro y ansiolítica y antidepresiva in vivo.

Se ha encontrado que el ácido ferúlico y el ácido cinámico tienen efectos antidepresivos en algunos estudios [17,18], mientras que la quercetina y el hidroxitirosol demostraron un efecto ansiolítico aprobado [19,20]. Esos compuestos podrían estar detrás del efecto observado.

La eficacia de un antioxidante puede ejercerse de diferentes formas, como la eliminación de radicales libres, la descomposición de radicales libres y también la quelación de iones metálicos [17]. Esta actividad puede evaluarse mediante ensayos FRAP y DPPH, el último de los cuales, debido a su rapidez, se usa a menudo para detectar moléculas presentes en extractos de plantas [18]. Nuestros resultados mostraron actividad antioxidante en el extracto fenólico de perejil. Trabajos previos de Hinneburg et al.[21]mostraron que el extracto acuoso de perejil ejercía una débil actividad inhibidora del radical DPPH, con un IC50 del orden de 12.0±{{8} },10 mg/mL (frente al extracto polifenólico de nuestro estudio, 0,184 ug/mL). Por el contrario, el efecto quelante de este extracto fue más efectivo en comparación con otros extractos utilizados en el mismo estudio.

Estudios recientes también encontraron un vínculo entre los trastornos del estado de ánimo y el estrés oxidativo [22,23] y el estrés psicológico [24,25], lo que abre nuevas vías para prevenir y/o controlar la ansiedad y la depresión con respecto a la posible aplicación de antioxidantes. Desrumaux et al. [26] notó que el déficit de vitamina E en el cerebro de los ratones elevaba los niveles de signos clave de estrés oxidativo y comportamientos que provocan ansiedad. Del mismo modo, los ratones que recibieron vitamina C han revelado recientemente que este compuesto tiene un papel antidepresivo según los resultados de la prueba de suspensión de la cola [27]. Los polifenoles, incluidos los flavonoides y los ácidos fenólicos, son bien conocidos por sus potentes efectos antioxidantes [28,29]. El uso de estos metabolitos fitoquímicos secundarios como una forma de evitar y controlar la ansiedad y la depresión puede ser una estrategia prometedora [9]. Un estudio realizado por Akinci et al. [30] demostraron que el perejil es exitoso en minimizar el daño gástrico inducido por el estrés cuando se toma por vía oral al apoyar el sistema de defensa antioxidante de las células, lo que se refleja en un aumento en los niveles medios de glutatión tisular (53,31 ± 9,50) y las actividades de la superóxido dismutasa ( 15,18±1,05) y catalasa (16,68±2,29).

El experimento de campo abierto se utiliza para evaluar la condición emocional de un animal. Los animales que han sido separados de su jaula y colocados en un entorno diferente a menudo muestran angustia y ansiedad al presentar cambios en todos o algunos de los parámetros, como una disminución en la actividad ambulatoria, la exploración y la inmovilización, pero un aumento en el acicalamiento. comportamiento [31]. El extracto de P. sativum a la dosis de 100 mg/kg produjo un efecto ansiolítico muy importante, como lo demuestra el aumento significativo del tiempo de permanencia en el centro del campo y de la actividad ambulatoria total. Este aumento fue mayor que el observado en ratones tratados con bromazepam a 1 mg/kg.

El experimento de la habitación clara y oscura también es útil para predecir el efecto ansiolítico de los medicamentos. Para medir el grado de ansiedad en ratones durante esta prueba, se observan dos parámetros: (1) El menor porcentaje de tiempo que el animal pasó en la cámara oscura está relacionado con su nivel de ansiedad. En otras palabras, cuando el porcentaje de tiempo pasado en el compartimento iluminado es mínimo, la ansiedad se considera alta y (2) el número de transiciones, es decir, el número de pasos entre los dos compartimentos, está inversamente relacionado con el nivel de ansiedad. (menor número de transiciones significa alto nivel de ansiedad)[32]. Los hallazgos de este estudio revelaron que el extracto polifenólico de P. sativum a 100 mg/kg mostró un efecto ansiolítico óptimo basado en el mayor tiempo que el animal pasó en la cámara iluminada y el número de transiciones en comparación con los controles durante el período de estudio.

El experimento de natación forzada se desarrolló en la década de 1970. También es conocido por el nombre de su inventor como test de Porsolt [33]. Nuestro hallazgo indica que el tiempo de inmovilidad de los ratones tratados fue más corto que el de los ratones control, lo que indica un efecto antidepresivo del extracto fenólico de P. sativum. Sin embargo, esta disminución en el tiempo de inmovilidad puede haber sido a favor de un aumento en el tiempo de natación o de escalada. Esta diferencia es muy importante desde el punto de vista neurofarmacológico ya que teóricamente, durante la natación forzada, los antidepresivos que producen un aumento predominantemente noradrenérgico o dopaminérgico reducen la inmovilidad aumentando el tiempo de escalada [34], mientras que los que activan la 5HT reducen la inmovilidad aumentando el tiempo de natación. [35]. En términos de la función del SNC, la mayoría de los polifenoles interactúan directamente con los sistemas de neurotransmisores [36]. Estudios realizados con perejil muestran un predominio de flavonoides 37]. Se informa que la amplia variedad de flavonoides que se encuentran en los extractos medicinales tradicionales convencionales tienen efectos sedantes/ansiolíticos al unirse directamente a los receptores GABA A [38].

Un estudio realizado por Priprem et al. [39] indica que el polifenol quercetina demuestra actividad ansiolítica después de una semana de administración repetida a la dosis de 300 mg/kg, que no es tan eficaz como el diazepam, que presenta su efecto una hora después de la administración a dosis más bajas. Pereira et al. [40] demostraron que el ácido rosmarínico exhibe un efecto ansiolítico a dosis muy bajas (2 a 4 mg/kg). Otro ejemplo es la apigenina, que demuestra una afinidad selectiva y baja por los receptores de benzodiacepinas produciendo una actividad ansiolítica casi sin efectos secundarios[41]. Los flavonoides también juegan un papel en la depresión a través de la inhibición de la monoaminooxidasa y el aumento resultante en los niveles de 5-HT, DA y norepinefrina en ciertas áreas del cerebro [42].

Los aminoácidos excitadores, como el aspartato, el glutamato, la homocisteína y la cisteína, estimulan las células postsinápticas, mientras que los aminoácidos inhibidores, como la alanina, la glicina, el GABA y la taurina, suprimen el desarrollo de las células postsinápticas 43]. Una enzima llamada L-aminoácido aromático descarboxilasa, también llamada DOPA descarboxilasa, triptófano descarboxilasa, 5-hidroxitriptófano descarboxilasa o AAAD, que cataliza la respectiva descarboxilación de L-dopa e 5-hidroxitriptófano en dopamina y {{ 7}}hidroxitriptamina también puede desempeñar un papel. El perejil puede causar una sobreexpresión de esta enzima, lo que contribuye a su efecto antidepresivo. Un estudio realizado en Centella Asiatica, planta perteneciente a la misma familia Apiaceae, demostró que el efecto antidepresivo de los triterpenos totales se debía a la mejora de la función del eje hipotálamo-pituitario-adrenocortical y al aumento del contenido de neurotransmisores monoamínicos. [44]. Estos estudios sugieren la presencia de actividad ansiolítica y antidepresiva por parte del extracto fenólico de P. sativum.

4. Materiales y Métodos

4.1. Material vegetal

Petroselinum sativum Hoffm. las partes aéreas se recolectaron durante la fase de prefloración (primavera de 2018) de la región de Tanounate en el norte de Marruecos (34 grados 32'9"N 4 grados 38'24"O). La clasificación, identificación y nombre botánico de esta planta fueron verificados por un botánico calificado, el Pr. Bari Amina. La muestra de la planta está depositada en el herbario de la Facultad de Ciencias Dhar El Mahrez Fez (espécimen comprobante: 18TA5001).

4.2. Extracción

La extracción se llevó a cabo como se describe por Slighoua et al. [11]. Brevemente, 10 g de las partes aéreas secas del polvo fino de P. sativum se mezclaron con metanol (100 ml) y se maceraron durante 3 horas a una temperatura de 50 grados. Posteriormente, el filtrado se concentró usando un evaporador rotatorio hasta sequedad para asegurar la evaporación completa del solvente. El extracto resultante se volvió a disolver en agua destilada (200 mL) y se lavó con tres hexanos y cloroformo (200 mL tres veces) para eliminar los pigmentos y otras impurezas. La fase acuosa final se extrajo con acetato de etilo (200 mL tres veces). La fase orgánica (acetato de etilo) se concentró para obtener el extracto de polifenoles. El rendimiento de la extracción es del 10,52 por ciento.

Anteriormente publicamos un trabajo sobre el mismo extracto que demostró mediante el uso de análisis HPLC-DAD que está compuesto de los siguientes polifenoles: (1) ácido ferúlico, (2) ácido cinámico, (3) ácido gálico, (4) quercetina, (5) Myricetin, (6) Naringenin, (7) Hydrox-tyrosol [11].

4.3. animales de estudio

En este estudio, los ratones (albinos suizos) fueron proporcionados por el Animal House de la facultad de ciencias Dhar el Mahraz Fez. Antes de ser incluidos en los experimentos, se colocaron en grupos de seis en jaulas convencionales y se les permitió un período de adaptación de dos semanas con libre acceso a comida y agua y una temperatura controlada de 22±2 grados y bajo un ciclo de luz/oscuridad de 12h/12h.

Los experimentos se realizaron de conformidad con los estándares internacionales para el tratamiento y uso de animales de experimentación [16] y el Comité Interno de Ética Animal (#09-12/2019/LBEAS).

4.4. Evaluación de la Actividad Antioxidante

4.4.1.2,2-Prueba de difenil-1-picrilhidrazilo (DPPH)

El DPPH es uno de los compuestos químicos más utilizados para evaluar la actividad antioxidante de los compuestos fenólicos |45. DPPH posee un electrón desapareado en un átomo puente de nitrógeno. El principio de esta prueba se resume en la capacidad del extracto para reducir el radical libre púrpura oscuro DPPH en una reducción de color amarillento medible por espectrofotometría [28]. Se prepararon una serie de concentraciones de extracto en metanol, 100 μL de cada una de las cuales se agregaron a 750 μL de una solución metanólica de DPPH (0.004 por ciento). Después de un período de incubación de 30 min a 25 grados, se midió la absorbancia a 517 nm. Para el control negativo, la muestra se reemplazó con metanol. El porcentaje de DPPH se determinó mediante la siguiente ecuación:

(1)I=[(Muestra en blanco)/En blanco]×100

En el porcentaje de actividad antirradical, Muestra es la absorbancia de la muestra y Blanco es la absorbancia del control negativo.

4.4.2. Prueba de poder reductor ferroso (FRAP)

El poder reductor del hierro (Fe3 plus ) en el extracto estudiado se determinó según el método descrito por Mechchate et al. 【28】. Brevemente, 100 μL del extracto a diferentes concentraciones se mezcló con 500μL de una solución tamponada con fosfato (PBS, 0,2 M, pH 6,6) ）y 500 μL de una solución al 1 por ciento de ferricianuro de potasio K, Fe（CN）. Estos se incubaron en un baño de agua a 50 grados durante 20 min. Luego, se agregaron a la mezcla de reacción 500 μL de una solución acuosa al 10 por ciento de ácido tricloroacético (TCA), 100 μL de una solución al 0,1 por ciento de cloruro férrico FeCl3 y 0,5 mL de agua destilada. La lectura de absorbancia de esta mezcla se tomó a 700 nm frente a un blanco que contenía todos los reactivos del medio excepto el extracto vegetal. Los resultados se expresan como concentración efectiva al 50 por ciento (EC50), que representa la concentración de antioxidantes necesaria para obtener una absorbancia de 0,5. Un aumento de la absorbancia corresponde a un aumento del poder reductor del extracto ensayado.

4.5. Prueba de natación forzada de actividad antidepresiva (FST)

El modelo de Porsolt, o prueba de natación forzada, es una prueba predictiva de la actividad de tipo antidepresivo. Los ratones se obligan individualmente a nadar en un recipiente cilíndrico lleno de agua hasta una altura de 12 cm. La prueba dura 6min, pero solo se analizan los últimos 4min de la prueba. El animal se considera inmóvil cuando flota en posición erguida y realiza pocos movimientos para mantener el equilibrio en el agua (tiempo de inmovilidad).

Para esta prueba se utilizaron un total de cuatro lotes de cinco ratones cada uno. Todos los extractos de plantas se administraron por sonda durante 21 días y la prueba se realizó 1 h después de la administración de los extractos en 21 días. El grupo A, el control negativo, recibió una solución fisiológica como vehículo. El grupo B, el grupo de control positivo, recibió paroxetina a 11 mg/kg. Los grupos C y D recibieron PSPE a 50 y 100 mg/kg, respectivamente.

Una hora después de la administración del extracto vegetal, se contó el tiempo de inmovilidad durante 6 min. Los primeros dos minutos permitieron que el ratón se adaptara al estrés y luego, el ratón se cansó e inmovilizó con el tiempo. El tiempo de inmovilidad se contó en segundos y luego se comparó con el tiempo de inmovilidad de los ratones en el grupo de control positivo (paroxetina) como referencia [33].

4.6. Actividad an.siolítica

4.6.1.Campo abierto

La prueba de campo abierto (OF) se usa para predecir la actividad ansiolítica, ya que los animales muestran un alto grado de evitación de un área central en relación con la periferia. También se utiliza como prueba de exploración y locomoción. El área constaba de cuatro paredes de madera de 40 cm de altura dispuestas en un área de 50×50 cm, divididas en 25 losetas de igual tamaño marcadas con líneas negras.

Para esta prueba se utilizaron un total de cuatro lotes de cinco ratones cada uno. Todos los extractos de plantas se administraron por sonda durante 21 días. A continuación, la prueba se realizó 1 h después de la administración del extracto vegetal en los días 1, 7 y 14, y el Grupo A, el control negativo, recibió una solución fisiológica como vehículo. El Grupo B, el control positivo, recibió bromazepam a 1 mg/kg. . Los grupos C y D recibieron PSPE a 50 y 100 mg/kg, respectivamente.

Después de 60 min, la prueba se realizó colocando cada ratón en el cuadrado central para explorar la arena para medir la actividad ambulatoria total de los ratones (el número total de mosaicos cruzados por los ratones, es decir, el número de mosaicos periféricos y el número de losetas centrales atravesadas por los ratones con las cuatro patas) y el tiempo de permanencia en el centro del campo abierto [3146].

4.6.2. Prueba de cuarto claro-oscuro

La prueba del cuarto claro-oscuro también se utiliza para predecir la actividad ansiolítica, ya que permite una fácil evaluación de los comportamientos animales relacionados con la ansiedad mediante el análisis de los movimientos del animal entre dos compartimentos de diferentes colores e iluminación. Los animales más ansiosos tienden a pasar menos tiempo en la habitación iluminada. La caja de madera claro-oscuro de dimensiones 44 × 21 × 21 cm constaba de dos compartimentos en blanco y negro, conectados por un pasaje (un agujero de 7 × 7 cm en el centro, que separa los dos compartimentos y permite el acceso a uno u otro de los compartimentos). El compartimiento iluminado estaba iluminado por una lámpara.

Para esta prueba se utilizaron un total de cuatro lotes de cinco ratones cada uno. Todos los extractos de plantas se administraron por sonda durante 21 días. La prueba se realizó 1 h después de la administración del extracto vegetal en los días 1, 7, 14 y 21. El grupo A, el control negativo, recibió una solución fisiológica como vehículo. El grupo B, el control positivo, recibió bromazepam a 1 mg/kg. Los grupos C y D recibieron PSPE a 50 y 100 mg/kg, respectivamente.

Después de 60 minutos, se realizó la prueba de cinco minutos colocando cada ratón frente a la abertura que unía el compartimento oscuro [47]. Después de cada prueba, la caja se limpió con alcohol. Los parámetros medidos fueron el tiempo pasado en la cámara iluminada y el número de transiciones de cámara [48].

5. Conclusiones

El perejil, una hierba culinaria de uso diario en todo el mundo, presenta enormes beneficios para la salud y, a través de este estudio, se ha demostrado que tiene una notable actividad antidepresiva y ansiolítica, incluso mejor que las drogas clásicas, especialmente con la dosis de 100 mg/kg. En la búsqueda de un medicamento eficaz con pocos o casi ningún efecto secundario, esta planta podría ser una alternativa bien situada. Este trabajo fomenta su consumo diario así como su desarrollo hacia un fitomedicamento bien establecido.

Se necesita más investigación para completar este trabajo, incluida la realización de otras pruebas de comportamiento con el mismo extracto para confirmar su eficacia. Por lo tanto, se planea un fraccionamiento bioguiado del extracto fenólico de P. satioum para identificar el componente clave responsable de las actividades ansiolíticas y antidepresivas observadas y determinar su mecanismo de acción preciso.

Referencias
1. Friedrich, MJ La depresión es la principal causa de discapacidad en todo el mundo. JAMA 2017, 317, 1517. [CrossRef] [PubMed]
2. Lim, GY; Tam, WW; Lu, Y.; Ho, CS; Zhang, MW; Ho, RC Prevalencia de la depresión en la comunidad de 30 países entre 1994 y 2014. Sci. Rep. 2018, 8, 2861. [Referencia cruzada]
3. Asociación Americana de Psiquiatría. Manual Diagnóstico y Estadístico de los Trastornos Mentales (DSM-5®); Asociación Estadounidense de Psiquiatría: Washington, DC, EE. UU., 2013; ISBN 0-89042-557-4.

4. Dinga, R.; Marquand, AF; Veltman, DJ; Beekman, AT; Schoevers, RA; van Hemert, AM; Penninx, BW; Schmaal, L. Predicción del curso naturalista de la depresión a partir de una amplia gama de datos clínicos, psicológicos y biológicos: un enfoque de aprendizaje automático. Traducir Psiquiatría 2018, 8, 1–11. [Referencia cruzada]
5. Daviú, N.; Bruchas, MR; Moghaddam, B.; Sandi, C.; Beyeler, A. Vínculos neurobiológicos entre el estrés y la ansiedad. Neurobiol. Estrés 2019, 11, 100191. [Referencia cruzada]
6. Sanabria, E.; Cuenca, RE; Esteso, M.Á.; Maldonado, M. Benzodiazepinas: su uso como medicamentos esenciales o como sustancias tóxicas. Tóxicos 2021, 9, 25. [CrossRef] [PubMed]
7. Kanekar, S.; Shet, CS; Ombach, HJ; Olson, PR; Bogdanova, OV; Petersen, M.; Renshaw, CE; Sung, Y.-H.; D'Anci, KE; Renshaw, PF La exposición a hipoxia hipobárica en ratas altera diferencialmente la eficacia antidepresiva de los inhibidores selectivos de la recaptación de serotonina fluoxetina, paroxetina, escitalopram y sertralina. Farmacol. Bioquímica Comportamiento 2018, 170, 25–35. [Referencia cruzada]
8. Es-Safifi, I.; Mechate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Bari, A.; Cerruti, P.; Avella, M.; Andriy, A.; Andriy, D. Plantas medicinales utilizadas para tratar problemas agudos del sistema digestivo en la región de Fez-Meknes en Marruecos: un estudio etnofarmacológico. Etnobotánica. Res. aplicación 2020, 20. [Referencia cruzada]
9. Amaghnouje, A.; Mechate, H.; Es-Safifi, I.; Boukhira, S.; Aliqahtani, AS; Nadie, OM; Nasr, FA; Conté, R.; Calarco, A.; Bousta, D. Evaluación subaguda de la toxicidad y los efectos similares a los antidepresivos de los polifenoles de Origanum Majorana L. en ratones albinos suizos. Moléculas 2020, 25, 5653. [Referencia cruzada]
10. Agyare, C.; Apiah, T.; Booye, YD; Apenteng, JA Petroselinum crispum: una revisión. Medicina. Especias Vegetales. Afr. 2017, 527–547. [Referencia cruzada]
11. Slighoua, M.; Mahdi, I.; Di Cristo, F.; Amaghnouje, A.; Grafov, A.; Boucetta, N.; Bari, A.; Bousta, D. Evaluación de las actividades estrogénicas y antiinflamatorias in vivo del extracto hidroetanólico y la fracción polifenólica de perejil (Petroselinum sativum Hoffm.). J. Etnofarmaco. 2020, 265, 113290. [CrossRef] [PubMed] 12. Farzaei, MH; Abbasabadi, Z.; Ardekani, MRS; Rahimi, R.; Farzaei, F. Parsley: Una revisión de etnofarmacología, fitoquímica y actividades biológicas. J. Tradición. Barbilla. Medicina. 2013, 33, 815–826. [Referencia cruzada]
13. Chaves, DS; Frattini, FS; Assafifin, M.; de Almeida, AP; Zingalí, RB; Costa, SS Composición química fenólica del extracto de Petroselinum Crispum y su efecto sobre la hemostasia. Nat. Pinchar. común 2011, 6, 1934578X1100600709. [Referencia cruzada]
14. Mahendra, P.; Bisht, S. Actividad contra la ansiedad de Coriandrum Sativum evaluada utilizando diferentes modelos experimentales de ansiedad. Indian J. Pharmacol. 2011, 43, 574. [Referencia cruzada]
15. Shahamat, Z.; Abbasi-Maleki, S.; Mohammadi Motamed, S. Evaluación de los efectos similares a los antidepresivos de los extractos acuosos y etanólicos de la fruta Pimpinella Anisum en ratones. Avicena J. Phytomed. 2016, 6, 322–328. [PubMed]
16. Es-Safi, I.; Mechate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Al Kamaly, OM; Imtara, H.; Grafov, A.; Bari, A.; Bousta, D. Una visión de las propiedades ansiolíticas y antidepresivas de Carum carvi L. y su asociación con su actividad antioxidante. Life 2021, 11, 207. [Referencia cruzada]
17. Zheng, X.; Cheng, Y.; Chen, Y.; Yue, Y.; Li, Y.; Xia, S.; Li, Y.; Deng, H.; Zhang, J.; Cao, Y. El ácido ferúlico mejora el comportamiento depresivo en ratas de descendencia con estrés prenatal a través de la actividad antiinflamatoria y el eje HPA. En t. J. Mol. ciencia 2019, 20, 493. [Referencia cruzada]
18. Diniz, LRL; de Souza, MTS; Barboza, JN; de Almeida, RN; de Sousa, DP Potencial antidepresivo de los ácidos cinámicos: mecanismos de acción y perspectivas en el desarrollo de fármacos. Moléculas 2019, 24, 4469. [Referencia cruzada]
19. Lee, B.; Yeom, M.; Cuña, I.; Lee, H.; Hahm, D.-H. Efectos protectores de la quercetina sobre los síntomas similares a la ansiedad y la neuroinflamación inducida por lipopolisacárido en ratas. evidente Complemento basado. Alterno Medicina. 2020, 2020, 4892415. [Referencia cruzada]
20. Karkovi´c Markovic, A.; Tori's, J.; Bárbaro, M.; Jakobuši´c Brala, C. Hidroxitirosol, Tirosol y Derivados y sus Efectos Potenciales en la Salud Humana. Moléculas 2019, 24, 2001. [Referencia cruzada]
21. Hinneburg, I.; Dorman, HD; Hiltunen, R. Actividades antioxidantes de extractos de hierbas y especias culinarias seleccionadas. Química alimentaria 2006, 97, 122–129. [Referencia cruzada]
22. Nunes, CS; Maes, M.; Roomruangwong, C.; Moraes, JB; Bonifacio, KL; Vargas, HO; Barbosa, DS; Anderson, G.; de Melo, LGP; Drozdstoj, S. La calidad de vida reducida en los trastornos del estado de ánimo se asocia con un aumento del estrés neurooxidativo y los niveles basales de hormonas estimulantes de la tiroides y el uso de estabilizadores del estado de ánimo anticonvulsivos. J.Eval. clin. Practica 2018, 24, 869–878. [Referencia cruzada] [PubMed]
23. Bonifácio, KL; Barbosa, DS; Moreira, EG; Coneglian, CF; Vargas, HO; Nunes, SOV; Moraes, JB; Maes, M. Aumento de la toxicidad por estrés nitro-oxidativo como un determinante principal del aumento de la presión arterial en los trastornos del estado de ánimo. J. Afecto. Desorden. 2021, 278, 226–238. [Referencia cruzada] [PubMed]
24. Eick, SM; Barret, ES; van 't Erve, TJ; Nguyen, RH; Bush, NR; Milne, G.; Cisne, SH; Ferguson, KK Asociación entre estrés psicológico prenatal y estrés oxidativo durante el embarazo. pediatra perinato Epidemiol. 2018, 32, 318–326. [Referencia cruzada]
25. McAllister, MJ; Basham, SA; Waldman, SA; Smith, JW; Mettler, JA; Butawan, MB; Bloomer, RJ Efectos del estrés psicológico durante el ejercicio sobre los marcadores de estrés oxidativo en hombres jóvenes sanos y entrenados. Fisiol. Comportamiento 2019, 198, 90–95. [Referencia cruzada] [PubMed]
26. Desrumaux, C.; Risold, P.-Y.; Schroeder, H.; Deckert, V.; Masson, D.; Athías, A.; Laplanche, H.; Le Guern, N.; Blache, D.; Jiang, X.-C. La deficiencia de proteína de transferencia de fosfolípidos (PLTP) reduce el contenido de vitamina E en el cerebro y aumenta la ansiedad en ratones. FASEB J. 2005, 19, 1–16. [Referencia cruzada]