Células dendríticas (DC) tipo 1 en enfermedades renales

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Células Dendríticas Tipo 1 Convencionales (cDC1) en Enfermedades Renales Humanas: Correlaciones Clínico-Patológicas

Titi Chen, Qi Cao y otros.

RESUMEN

Fondo: Células dendríticas tipo 1(cDC1) es un subconjunto de las DC convencionales, cuya función más reconocida es la presentación cruzada a las células T CD8 plus. Realizamos este estudio para investigar el número y la ubicación deCélulas dendríticas tipo 1(cDC1s) en varios humanosenfermedades renalesasí como su correlación con características clinicopatológicas y células T CD8.

Métodos: Se analizaron 135riñónmuestras de biopsias.Enfermedades renalesincluyeron: necrosis tubular aguda (ATN), nefritis intersticial aguda (AIN), glomerulonefritis proliferativa (GN) (nefropatía por IgA, nefritis lúpica, GN pauciinmune, enfermedad anti-GBM), GN no proliferativa (enfermedad de cambios mínimos, nefropatía membranosa ), y nefropatía diabética. Se usó tinción de inmunofluorescencia indirecta para cuantificar cDC1s (Células dendríticas tipo 1), DC CD1ct y células T CD8 plus.

Resultados:Células dendríticas tipo 1(cDC1s) rara vez estaban presentes en condiciones normalesriñones. Su número aumentó significativamente en ATN y GN proliferativa, proporcionalmente mucho más que CD1ct DC. cDC1s (Células dendríticas tipo 1)se encontraron principalmente en el intersticio, excepto en la nefritis lúpica, la GN pauciinmune y la enfermedad anti-GBM, donde fueron prominentes en los glomérulos y las regiones periglomerulares. El número de cDC1 (Células dendríticas tipo 1)se correlacionó con la gravedad de la enfermedad en la NTA, el número de semilunas en la GN pauciinmune, la fibrosis intersticial en la nefropatía por IgA y la nefritis lúpica, así como el pronóstico en la nefropatía por IgA. El número de células T CD8 plus también aumentó significativamente en estas condiciones y el cDC1 (Células dendríticas tipo 1)el número se correlacionó con el número de células CD8 más T en la nefritis lúpica y la GN pauciinmune, con muchos de ellos estrechamente co-localizados. Conclusiones: cDC1 (Células dendríticas tipo 1)el número se correlacionó con diversas características clinicopatológicas y el pronóstico, lo que refleja un posible papel en estas condiciones. Su asociación con las células T CD8 plus sugiere un mecanismo combinado acorde con los resultados en modelos animales.

INTRODUCCIÓN

Células dendríticas(DC) son los orquestadores centrales de la inmunidad efectiva. Estas células son heterogéneas y se pueden dividir en distintos subconjuntos según su fenotipo y función. Las células dendríticas se pueden clasificar en términos generales en DC plasmocitoides (Células dendríticas)(pDC) y DC convencionales (Células dendríticas)(cDC).cDC consta de dos subconjuntos principales: cDC1 (Células dendríticas tipo 1)(CD141* DC (Células dendríticas) en humanos y CD103t o CD8ot DC en roedores) y cDC2 (CD1c DC en humanos y CD1 lbt DC en roedores) (1).cDC1 (Células dendríticas tipo 1)se descubrieron primero en ratones y luego en humanos y se caracterizan por su capacidad superior para fagocitar células necróticas a través del receptor Clec9A del patrón molecular asociado al daño (DAMP) y para presentar de forma cruzada a las células T CD8 plus. Por el contrario, los cDC2 son activadores efectivos de células T CD4* pero inferiores en la activación de células T CD8t (2).

DC (Células dendríticas)han sido estudiados en humanosenfermedad del riñony se encontró que su número aumentaba en la glomerulonefritis (GN) (3, 4). Después del descubrimiento de cDCl, la acumulación de estudios en animales ha demostrado que juegan un papel fundamental enenfermedades renales, como en la nefropatía por adriamicina y la GN semilunar, a través de la interacción con las células T (5-8). Sin embargo, tales estudios faltan en humanos.enfermedad del riñon, con solo un estudio que demuestra un mayor número de CDC (ConvencionalCélulas dendríticas)en GN (9). Realizamos este estudio para proporcionar un análisis de los subconjuntos clave de cDC, cDC1 (Células dendríticas tipo 1), y cDC2, en una amplia gama de humanosenfermedades renalesincluyendo enfermedades no glomerulares [necrosis tubular aguda (ATN), nefritis intersticial aguda (AIN)], GN proliferativa (nefropatía por IgA, nefritis lúpica, GN pauciinmune, enfermedad anti-GBM), GN no proliferativa (enfermedad de cambios mínimos ( MCD), nefropatía membranosa) y nefropatía diabética. Descubrimos que las cDC se correlacionan significativamente con características patológicas que incluyen la gravedad de la ATN, la formación de medias lunas en la GN pauciinmune y la fibrosis intersticial en la GN inmunomediada. Además, de acuerdo con su capacidad especializada para activar las células T CD8 más en animales modelos, también demostramos su correlación con las células T CD8t en estas muestras. Estos hallazgos brindan un impulso para explorar nuevos objetivos terapéuticos que manipulan estas células para el tratamiento deriñónenfermedades.

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MATERIAL Y MÉTODOS

Pacientes y muestras de tejido

El estudio se realizó de acuerdo con los principios de la Declaración de Helsinki y fue aprobado por el Comité de Ética de Investigación Humana del Distrito de Salud Local de Western Sydney. Se obtuvo el consentimiento informado del paciente. Analizamos 176 diagnósticos congeladosriñónbiopsy samples taken from non-pregnant adult patients(>18 años) entre el 18 de junio de 2016 y el 30* de junio de 2017 en el Westmead Hospital, Sydney, Australia.Riñónlos tejidos se congelaron instantáneamente en compuesto OCT (Tissue-Tek Sakura, EE. UU.) y se almacenaron a -80 grados. Cuarenta y una (41) muestras tenían tejido de mala calidad y fueron excluidas del estudio. En el momento deriñónbiopsy.eGFR se calculó utilizando la fórmula CKD-EPI. El diagnóstico fue realizado por un patólogo renal, con base en la microscopía óptica, de inmunofluorescencia (IF) y electrónica, así como en la historia clínica.

Se analizó una variedad de enfermedades que incluyen enfermedades no glomerulares (ATN, AIN), GN proliferativa (nefropatía por IgA, nefritis lúpica, GN pauciinmune, enfermedad anti-GBM), GN no proliferativa (MCD, nefropatía membranosa) y diabetes. nefropatía Para la NTA, solo incluimos los casos no sépticos, ya que la NTA séptica tiene una fisiopatología diferente. ATN se clasificó además en enfermedad leve a moderada (definida como<50%cortical tubules="" showing="" injury)and="" severe="" disease="" (="">=50 por ciento de túbulos corticales que muestran lesión). La nefropatía IgA se clasificó según el puntaje MEST de Oxford (M hipercelularidad mesangial, E hipercelularidad endocapilar, S glomeruloesclerosis segmentaria, T atrofia tubular/fibrosis intersticial). También analizamos la correlación entre cDC1 (Células dendríticas tipo 1) number and prognosis (defined a priori as >20% reduction in eGFR on or before 31t December 2019)in IgA nephropathy by dividing patients into 2 groups according to cDC number with a cut-off point at the upper quartile(>=15). La nefritis lúpica se clasificó además en 2 grupos según el nivel de fibrosis intersticial (<25%,>=25 por ciento de afectación intersticial cortical). La GN pauciinmune se clasificó en 2 grupos según el porcentaje de glomérulos con semilunas(<40%,>=40 por ciento).

Como normalriñóncontroles, utilizamos 5 cortezas renales normales de muestras de nefrectomía, así como 2 donantesriñonesno apto para trasplante. Para las nefrectomías tumorales, las muestras se tomaron del polo opuesto al tumor y al menos a 5 cm del margen tumoral. Estos tejidos tenían un aspecto macroscópico normal. Microscópicamente, ninguno de estosriñónlas muestras tenían evidencia de inflamación o lesión glomerular o tubulointersticial significativa. Utilizamos tejido esplénico de un donante adulto normal como control positivo para la prueba de anticuerpos.

Tinción de inmunofluorescencia

Se cortaron secciones de criostato en serie a 5 μm y se colocaron en portaobjetos de vidrio Superfrost Ultra Plus (Thermo Scientific, EE. UU.). Los portaobjetos se almacenaron a -80 grados. Las secciones de tejido se fijaron con metanol al 100 por ciento a -20 grados durante 10 minutos y luego se secaron al aire. La tinción de inmunofluorescencia indirecta se realizó usando el siguiente método: las secciones de tejido se lavaron en DPBS (Lonza, EE. UU.) y se bloquearon con albúmina de suero bovino al 2 por ciento (Sigma-Aldrich, EE. UU.) durante 15 minutos; luego se tiñeron con anticuerpo primario a 4 grados durante la noche seguido de anticuerpos secundarios durante 40 minutos a temperatura ambiente. La Tabla 1 es una lista de anticuerpos primarios y secundarios utilizados y sus diluciones. Los núcleos se tiñeron con DAPI (1:250, 000, ThermoFisher, EE. UU.) antes de que las muestras se montaran en cubreobjetos con medio de montaje de fluorescencia (Dako, EE. UU.). Se comprobaron y excluyeron la tinción no específica y la reactividad cruzada entre diferentes anticuerpos primarios y secundarios.

CUADRO 1|Anticuerpos primarios y secundarios utilizados en el estudio

Los cDCl se identificaron mediante tinción para el marcador Clec9A. En humanos, la expresión de Clec9A está altamente restringida a cDCl en sangre y tejidos (10, 11). Para confirmar esto en elriñones, realizamos tinción doble de Clec9A y HLA-DRB1, así como de Clec9A y CD1lc en condiciones normales y enfermas seleccionadas. La mayoría, si no todos, Clec9A se superpusieron con HLA-DRB1 (Figura 1 complementaria) y CD1lc (Figura 2 complementaria).

FIGURA 1|Riñón normal cDC1 (Células dendríticas tipo 1), cDC2 y CD8 más células T.

DC (Células dendríticas)rara vez estaban presentes en condiciones normalesriñonesy los números de cDC2 fueron aproximadamente 7 veces el número de cDC1 (Células dendríticas tipo 1). (Barra=100 mm).

RESULTADOS

Características basales del paciente.Las características iniciales de los pacientes en las cohortes de control y enfermedad se resumen en la Tabla 2. Se incluyeron un total de 135 pacientes en el estudio. Una amplia gama deriñónenfermedadesse analizaron incluyendo enfermedades no glomerulares [ATN (22), AIN (10)], GN proliferativa [nefropatía gA (44), nefritis lúpica (12), GN pauciinmune (12), enfermedad anti-GBM (4)] , GN no proliferativa [MCD (5), nefropatía membranosa (5)] y nefropatía diabética (21). Había más mujeres en el grupo de nefritis lúpica y su edad tendía a ser más joven en comparación con otrosriñónenfermedades, lo que es consistente con la literatura(12). Los pacientes con GN pauciinmune y enfermedad anti-GBM tenían la TFGe más baja. El nivel de proteinuria fue el más alto en MCD y nefropatía membranosa.

CUADRO 2|Características de línea base.

Número y ubicación de los centros de distribución (Células dendríticas)en Control y Enfermedad.Los cDCl rara vez estaban presentes en condiciones normales.riñones(Figura 1) y los números de cDC2 fueron aproximadamente 7 veces el número de cDC1 (Células dendríticas tipo 1).El número de cDC1 (Células dendríticas tipo 1)aumentó significativamente en ATN y GN proliferativa (Figura 2A), mientras que su número permaneció sin cambios en comparación con el control en AIN, nefropatía membranosa, MCD y nefropatía diabética (Figura 3 complementaria). El número de cDC2 también aumentó significativamente en ATN y GN proliferativa (Figura 2B). Hubo una reducción en el cDC2 (Células dendríticas tipo 2)/cDC1 (Células dendríticas tipo 1)relación que indica cDCl (Células dendríticas tipo 1)aumentó proporcionalmente más que cDC2 (Figura 2C).

FIGURA 2|Número de cDC1 (Células dendríticas tipo 1)y cDC2, relación cDC2/cDC1 y CD8 más linfocitos T en enfermedades de control y seleccionadas.

El valor P se calcula para cada enfermedad frente al control. Ambos cDC1 (Células dendríticas tipo 1)y cDC2 aumentó significativamente en ATN, IgA, nefritis lúpica, GN pauciinmune y enfermedad anti-GBM (A, B)

con cDC1 (Células dendríticas tipo 1)aumentó proporcionalmente más que cDC2 en ATN, nefritis lúpica, GN pauciinmune y enfermedad anti-GBM (C).

Las células T CD8 plus aumentaron significativamente en ATN, IgA, nefritis lúpica, GN pauciinmune y enfermedad anti-GBM (D).

La mayoría de los cDCl se ubicaron en el intersticio, excepto en la nefritis lúpica, la GN pauciinmune y la enfermedad anti-GBM, donde también se encontraron en regiones periglomerulares e intraglomerulares (Figura 3A). cantidad de células T CD8t en regiones periglomerulares e intraglomerulares (Figura 3A), y muchas de ellas co-localizadas con cDCls (Figura 3B). Por otro lado, rara vez se encontraron cDC2s en regiones intraglomerulares y hubo colocalización mínima con células T CD8 plus.

FIGURA 3|(A) cDC1 (Células dendríticas tipo 1)y células T CD8 plus en regiones intraglomerulares. (B) colocalización de cDC1 con células T CD8 plus. (Barra=100 mm). * P < 0.05,="" **="" p=""><>

Asociación entre cDC1 (Células dendríticas tipo 1)Con Características Clínico-Patológicas y Células T CD8 plus Analizamos la correlación entre cDCl (Células dendríticas tipo 1)y características clinicopatológicas, así como células T CD8 plus. Hubo 22 casos de NTA (enfermedad moderada leve n=12, enfermedad grave n=10). La enfermedad más grave se asoció con un mayor número de cDC1 (Células dendríticas tipo 1)(p=0.032), pero no cDC2 (Figura 4A).cDC1 (Células dendríticas tipo 1)aumentó proporcionalmente más que cDC2 (proporción cDC2/cDC1 2.5, p=0.019). El número de células T CD8 plus también aumentó significativamente en ATN (p=0.005) (Tabla 3, Figura 2D). El número de cDC1 (Células dendríticas tipo 1)no se correlacionó con el número de células T CD8* en ATN.

CUADRO 3|CD8 más número de células T y coeficiente de correlación entre cDC1 (Células dendríticas tipo 1)y CD8 más el número de células T en riñones enfermos y de control.

Se analizaron 44 casos de nefropatía por IgA. Utilizando la puntuación MEST de la clasificación de Oxford (M hipercelularidad mesangial, E hipercelularidad endocapilar, S glomeruloesclerosis segmentaria, T atrofia tubular/fibrosis intersticial), un mayor número de cDC1 (Células dendríticas tipo 1)se asoció con una puntuación T más alta (p=0.008), pero no con puntuaciones MES (Figura 4B). Hubo 7 casos con semilunas y el número de cCD1 no se asoció con el número de semilunas. El número deriñónLas células T CD8* fueron significativamente más altas en la nefropatía por IgA que en el control (p<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d).="" there="" was="" no="" correlation="" between=""> (Células dendríticas tipo 1) and CD8+ T cell numbers. Thirty-five(35)patients had follow-up data on or before 31sf December 2019, of whom9experienced>Reducción del 20 por ciento en eGFR. División de los pacientes en 2 grupos según cDCl (Células dendríticas tipo 1) number with a cut-off point at the upper quartile(>=15), cuanto mayor sea el cDC1 (Células dendríticas tipo 1)el grupo numérico se asoció con peores resultados (Figura 4E).

FIGURA 4|Correlación entre cDC1 (Células dendríticas tipo 1), cDC2 y CD8 más el número de células T y la gravedad de la enfermedad (A–D).

Curva de Kaplan Meier de supervivencia de nefropatía IgA (E). La puntuación T 0 se refiere al porcentaje del área que muestra atrofia tubular/fibrosis intersticial <=25 por="">

La puntuación T 1 se refiere al porcentaje del área que muestra atrofia tubular/fibrosis intersticial 26 - 50 por ciento, la puntuación T 2 se refiere al porcentaje del área que muestra atrofia tubular/fibrosis intersticial > 50 por ciento.

La supervivencia se definió como una reducción > 20 % en la eGFR el 31 de diciembre de 2019 o antes. NS, no significativo.

Hubo 12 casos de nefritis lúpica. Al igual que en la nefropatía por IgA, un mayor número de cDCl se asoció con una fibrosis más grave (p=00,020) (Figura 4C). Además, el número de células CD8 más T también aumentó significativamente (P<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d)="" and="" this="" correlated="" with="" the="" number="" of="" cdcl="" cells="" (r="0.614," p="0.034)" (table="" 3).a="" significant="" number="" of=""> (Células dendríticas tipo 1)y se encontraron células T CD8t tanto en periglomerular como intraglomerular, lo que indica que pueden desempeñar un papel en esta afección. En segundo lugar, en la enfermedad inmunomediada asociada a la fibrosis intersticial (nefropatía por IgA y nefritis lúpica), encontramos que cDC1 (Células dendríticas tipo 1)el número se correlacionó con la gravedad de la fibrosis, así como con el pronóstico en la nefropatía por IgA, mientras que no se encontró tal correlación en la enfermedad fibrótica no mediada por el sistema inmunitario (nefropatía diabética). En tercer lugar, hubo una fuerte correlación entre el número de cDCl y la formación de medias lunas en la GN pauciinmune, y los cDCl estaban presentes en grandes cantidades en las regiones periglomerulares e intraglomerulares, lo que indica su posible papel en la formación de una media luna. Cuarto, el número de cDC1 se correlacionó con el número de células T CD8 más en la nefritis lúpica y la GN pauciinmune, con numerosos cDCl co-localizados con células T CD8 más lo que sugiere su posible interacción. Esto está de acuerdo con nuestros hallazgos en modelos animales deriñónenfermedadque muestran homólogos murinos de cDC1 (Células dendríticas tipo 1)las células activan preferentemente las células T CD8t. Tomados en conjunto, estos hallazgos sugieren que el cDCl juega un papel importante en una variedad deriñónenfermedadesincluyendo ATN, fibrosis intersticial en enfermedades inmunomediadas y formación de medias lunas y que pueden actuar potencialmente a través de la activación de células T CD8t.

cDC1 (Células dendríticas tipo 1)Número correlacionado con la gravedad de la enfermedad en ATN. En ATN no séptico, por primera vez, mostramos un número significativamente mayor de CD (Células dendríticas), especialmente cDCls en comparación con cDC2s. Es importante destacar que el cDC1 (Células dendríticas tipo 1)número correlacionado con la gravedad de la enfermedad. Además, también aumentó el número de células T CD8 plus. La ATN generalmente es causada por lesión por isquemia-reperfusión (IRI), nefrotoxinas o sepsis. Tradicionalmente, el IRI y las toxinas causan una inflamación estéril, y se consideró que la inmunidad innata, en la que las CD y las células T son menos importantes, desempeña un papel dominante. Sin embargo, la creciente evidencia de estudios en animales ha demostrado que tanto las células T cDCl como las CD8 más son jugadores importantes. Estudios previos en animales IRI y nefrotoxicidad por cisplatino encontraron que el número total de células DC y T aumentó (13-17). Nuestros estudios anteriores mostraron que en la nefropatía por adriamicina, los números de cDCl aumentaron significativamente (5). En IRI, un subconjunto de células dendríticas activadas demuestra una mayor capacidad para presentar el antígeno de forma cruzada a las células T CD8t (18). En la nefropatía por adriamicina, también encontramos que los cDCl provocaron una respuesta de células T CD8 más que condujo a una lesión (5). La falta de correlación entre cDC1 (Células dendríticas tipo 1)y las células T CD8* en ATN humana, en contraste con los hallazgos en modelos animales, pueden reflejar diferentes vías no inmunológicas de lesión en ATN humana en comparación con el IRI en modelos de ratón donde los cDCl desempeñan un papel importante a través de las células T CD8*. Además, se ha demostrado en roedores que el cDCl es reclutado en el tejido por el quimioatrayente XCL1 producido por las células asesinas naturales (19). Por lo tanto, puede valer la pena estudiar esto más a fondo enriñónenfermedad.

cDC1 (Células dendríticas tipo 1)Número correlacionado con fibrosis intersticial inmunomediada. El segundo hallazgo importante en este estudio es que el número de cDCl se correlacionó con la gravedad de la fibrosis intersticial asociada con la enfermedad mediada por el sistema inmunitario (nefropatía por IgA y nefritis lúpica), pero no con la enfermedad fibrótica no mediada por el sistema inmunitario (nefropatía diabética), según mostró el estudio anterior. aumento del número de cDCl y cDC2 en la fibrosis intersticial (9). Nosotros, por primera vez, demostramos que esto solo es cierto en enfermedades inmunomediadas y cDC1 (Células dendríticas tipo 1)número aumentó proporcionalmente más que cDC2s. Además, también demostramos cDC1 (Células dendríticas tipo 1)el número se correlacionó con el pronóstico y el número de células T CD8* también aumentó significativamente en la nefropatía por IgA. Esto está respaldado por estudios en animales que muestran DC (Células dendríticas)contribuyen directamente a la fibrosis. Por ejemplo, la anfirregulina derivada de DC promovió la fibrosis(20). También es posible que los cDCl contribuyeran a la fibrosis a través de las células T CD8 plus, que se sabe que contribuyen a la fibrosis en otros órganos (21-23). Dado que la fibrosis intersticial está relacionada con la progresión de la enfermedad crónicariñónenfermedad, no es de extrañar que encontramos el cDC1 (Células dendríticas tipo 1)número para ser un buen marcador pronóstico en la nefropatía por IgA. Otros estudios han demostrado que las células T CD8t se correlacionan con el pronóstico de nefropatía por IgA (24), que puede ser el resultado de una presentación cruzada de cDCl. En la nefritis lúpica, demostramos una correlación entre cDC1 (Células dendríticas tipo 1)número y fibrosis intersticial, así como el número de células T CD8t. Estudios previos también han mostrado un aumentoriñóncDC1 (Células dendríticas tipo 1)en la nefritis lúpica(25), especialmente en la nefritis lúpica de clase III y VI, con la correspondiente reducción de su número circulante (26). Ampliamos estos hallazgos mostrando que también se correlacionaron con cambios crónicos. Está bien establecido que la inflamación intersticial, que se compone de células T, células B, células dendríticas y macrófagos, tiene un papel dominante en la progresión de la nefritis lúpica (27). Los cDCl pueden contribuir a la progresión de la nefritis lúpica en una variedad de maneras. Primero, la activación del interferón juega un papel clave en la patogenia de la nefritis lúpica (28-30) y los cDCl son un productor destacado de IFN-入. (31) Segundo, cDC1 (Células dendríticas tipo 1)puede contribuir a la progresión de la nefritis lúpica a través de las células T CD8t (32-37) y nuestro hallazgo de una correlación entre las cDCl y las CD8 más T respalda aún más su posible interacción. El papel de las células T CD8 plus en la nefritis lúpica se ha demostrado previamente. Las células T CD8 plus controlan la inmunidad autorreactiva mediante la liberación de moléculas citotóxicas. Se descubrió que las células T CD8 plus en la nefritis lúpica tienen una función citotóxica amortiguada, lo que puede desencadenar la autoinmunidad (38). Además, estas células también pueden generar autoantígenos de lupus(39). Ha habido abundante evidencia de que las células T CD8* en ambosriñón(32,33) y la orina (34-36) se correlacionan con la actividad de la enfermedad y la lesión histológica en la nefritis lúpica. Además, se demostró que el agotamiento de las células T CD8* predice un pronóstico favorable(37).

cDC1 (Células dendríticas tipo 1)Número correlacionado con el número de medias lunas en GN pauci-inmune. En la GN pauciinmune, encontramos cDCl agregados en las regiones periglomerulares e intraglomerulares, y su número se correlacionó con el número de medias lunas y células T CD8 plus. Estudios previos mostraron que los países en desarrollo (Células dendríticas)rara vez están presentes dentro del glomérulo(3,4,9) o solo en cantidades muy pequeñas(40). Por otro lado, las células T eran prominentes en las regiones intersticio, periglomerular e intraglomerular({{6} }). Descubrimos que tanto las células T cDCl como las CD8 * son prominentes en las regiones periglomerulares e intraglomerulares, muchas de ellas co-localizadas. Además, el cDC1 (Células dendríticas tipo 1)número correlacionado con la media luna y CD8 más los números de células T. Todos estos hallazgos sugieren un papel para cDCl en la formación de medias lunas a través de la interacción con las células T CD8*. El papel patógeno de las células T CD8t en la GN pauciinmune y la formación de medias lunas ya se ha demostrado en modelos animales (45,46). De acuerdo con nuestros hallazgos en humanos, en GN de ​​media luna animal, cDC1 (Células dendríticas tipo 1)y las células T CD8* se encontraron especialmente en la región periglomerular(47,48). Se ha demostrado que la cápsula de Bowman proporciona un nicho inmunológico protegido al impedir el acceso de las CD y las células T CD8 plus citotóxicas al espacio de Bowman y, por lo tanto, a los podocitos (45,47). Sin embargo, cuando se rompió la cápsula de Bowman, estas células inflamatorias accedieron y destruyeron los podocitos, lo que resultó en una GN rápidamente progresiva (47).

Una limitación de este estudio es que la técnica de tinción IF permite el uso de solo un número limitado de marcadores. Sería beneficioso ampliar nuestros hallazgos utilizando tecnología como la citometría de flujo, que puede combinar múltiples marcadores para analizar más a fondo el fenotipo de estas CD. (Células dendríticas)y sus perfiles relevantes de citocinas y quimiocinas. Sin embargo, la información de ubicación se perderá. Otras técnicas, como la inmunohistoquímica multiplex y Nanostring, también se pueden considerar en estudios futuros para examinar más a fondo estas células enriñónenfermedad. Además, al teñir cDC2 con CD1c, HLA-DRB1 y CD1lc, puede haber un pequeño porcentaje de células B que también expresen estos marcadores, lo que no se ha descartado.

CONCLUSIONES

Aunque cDC1 (Células dendríticas tipo 1)comprende un subconjunto menor de DC (Células dendríticas)bajo condiciones homeostáticas, este estudio demuestra una correlación significativa entre esta población celular y las características clinicopatológicas en humanosriñónenfermedad. Esto refleja su probable importancia en procesos patológicos como la ATN, la formación de medias lunas en la GN proliferativa y la fibrosis intersticial en la GN inmunomediada. Además, su colocalización y correlación con las células T CD8t puede proporcionar una explicación de su mecanismo de acción, corroborando datos de modelos animales. Estos hallazgos brindan un impulso para explorar nuevos objetivos terapéuticos que manipulan estas células para el tratamiento deriñónenfermedades, como lo hemos hecho en estudios con animales(6), e investigar su uso como marcador pronóstico. Se necesitan más estudios tanto en humanos como en animales para cuestionar el papel de los cDC1. (Células dendríticas tipo 1), su mecanismo de acción y la mejor manera de abordarlos terapéuticamente.

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Nota:lo anterior no es una lista completa de referencias