Actividad antinociceptiva y antiinflamatoria causada por Cistanche deserticola en roedores

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Li-Wei Lin, et al

Abstracto

En el presente estudio, los rizomas deCistanchedeserticola(Orobanchaceae, abreviado como CD) se extrajeron con etanol al 50% y se aislaron ordenadamente por acetato de etilo, n-butanol y agua. El analgésico yanti-inflamatoriose evaluaron los efectos del extracto de CD y tres capas en varios modelos animales. CD(Cistanchedeserticola)los extractos inhibieron eficazmente la respuesta de retorcimiento inducida por el ácido acético al 1% y las respuestas de lamido bifásico causadas por el 1% de formalina, y también redujeron el edema inducido por el 1% de carragenina pero no por la cimona. Además, las capas butanoicas y acuosas de CD(Cistanchedeserticola)El extracto no solo redujo el dolor inducido por el ácido acético y la formalina, sino que también disminuyó el edema inducido por la carragenina. Efectos de la capa butanoica de la EC(Cistanchedeserticola)el extracto es mejor que el de la capa acuosa. Además, el efecto de la capa butanoica de la EC(Cistanchedeserticola)el extracto no fue abolido por la naloxona. Estos resultados revelaron que tiene analgésicos yanti-inflamatorioefectos, y las capas butanoicas y acuosas son principalmente constituyentes activos. Además, el analgésico yanti-inflamatorioefectos de la capa butanoica de la EC(Cistanchedeserticola)el extracto no se relacionó con los receptores opioides y el sistema inmunológico.

Palabras clave:Cistanche deserticola; Actividad analgésica; Actividad antiinflamatoria

1. Introducción

CistanchedeserticolaMamá. (Orobanchaceae, abreviado como CD), una hierba nativa en China es ampliamente utilizada en la medicina tradicional para diversos tratamientos terapéuticos que incluyen indicaciones sedantes, analgésicas y de mejora inmunológica (Lee, 1986). Los estudios farmacológicos modernos señalaron la EC(Cistanchedeserticola)El extracto poseía inmunomejorabilidad (Chin y Su, 1993), efecto de eliminación de radicales libres (Hsu et al., 1995) y el aumento de la actividad de SOD (Chang et al., 1995). En un estudio reciente, la reacción de los radicales libres jugó un papel importante en los procesos inflamatorios (Arrigoni-Martelli, 1985). Por lo tanto, el presente estudio se intentó investigar los supuestos efectos analgésicos de la EC(Cistanchedeserticola)extracto en ratones con prueba de retorcimiento inducida por ácido acético (Taber et al., 1969) y prueba de lamido inducida por formalina (Shibata et al., 1989). En segundo lugar, también estudiamos la posibilidad deanti-inflamatorioactividades de la Conferencia de Desarme(Cistanchedeserticola)extracto sobre el proceso inflamatorio clásico con prueba de edema inducida por carragenina (Winter et al., 1962) y proceso inflamatorio alternativo con prueba de edema inducido por zymosan (Tarayre et al., 1989). Finalmente, investigamos capas activas de extracto de CD separadas con diferentes disolventes. '

2. Materiales y métodos

2.1. Material vegetal y extractos

Rizomas de CD(Cistanchedeserticola)fueron comprados en el mercado de Taiwán y confirmados por el profesor M.T. Hsieh. Una muestra de cupón (no. CMC-ICPS-000626) se conservó en el herbario del Instituto de Ciencias Farmacéuticas Chinas, Colegio Médico de China para referencia futura. Extracción y aislamiento de CD(Cistanchedeserticola)fueron seguidos como los informes anteriores (Lu, 1998). CD(Cistanchedeserticola)extracto (el rendimiento en 34,2%) y tres capas*/capa de acetato de etilo, capa butanólica y capa acuosa (sus rendimientos en 3.4, 10.2, 30,6%) (abreviado como CDE, CDB y CDW, respectivamente)*/se utilizaron para la preparación de extractos.

2.2. Preparación de extractos y medicamentos

CD(Cistanchedeserticola)extracto (0,1, 0,3, 1 g/kg) y tres capas de CD(Cistanchedeserticola)los extractos (0,03, 0,1, 0,3 g/kg) se disolvieron en carboximetilcelulosa al 0,5% y se administraron por vía oral 60 minutos antes de la inyección de un inductor. El ácido acetilsalicílico (AAS) (100, 300 mg/kg) y la indometacina (INDOL) (10 mg/kg) se prepararon como una suspensión con carboximetilcelulosa al 0,5% y se administraron por vía intraperitoneal antes de la inyección de un inductor. La naloxona (1 mg/kg) se disolvió con solución salina normal.

2.3. Animales

Se utilizaron ratas macho Sprague-Dawley (200-250 g) para el estudio deanti-inflamatorioActividades. Se utilizaron ratones machos ICR (20-25 g) para probar los efectos analgésicos. Todos los animales fueron utilizados en los experimentos de acuerdo con los Principios Rectores con el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio. Se alojaron durante al menos 1 semana antes de comenzar el experimento en un ambiente regulado por temperatura 239/1 8C y humedad del 60% con acceso gratuito a alimentos estándar en pellets (suministrados y diseñados por Fwusow Industry Co. LTD., Taiwán) y agua del grifo, en el que se mantuvo un ciclo de luz / oscuridad de 12-12 h (fase de luz: 08:00-20:00 h). Luego, se administraron medicamentos y el analgésico yanti-inflamatoriolos ensayos fueron operados por el método doble ciego. Después de la medición del comportamiento, todos los animales fueron asesinados por dióxido de carbono.

2.4. Estudio antinociceptivo

2.4.1. Respuesta de retorcimiento abdominal inducida por ácido acético en ratones

Los ratones se dividieron aleatoriamente en varios grupos. A cada ratón se le administró por vía intraperitoneal una solución de ácido acético al 1% (10 ml/kg de peso corporal). Los ratones fueron colocados en las cajas de observación individuales. Los síntomas del retorcimiento abdominal inducido por el ácido acético fueron similares a los descritos por Taber et al. (1969). Los animales de control recibieron soluciones de vehículos en los mismos experimentos. Cinco minutos después de la inyección de ácido acético, el número de respuestas de retorcimiento por ratón se contó durante 10 minutos durante el retorcimiento abdominal inducido por ácido acético. Finalmente, el número de respuestas retorcidas nos permitió expresar el porcentaje de protección utilizando la siguiente relación: (media de control tratada)/100/ media de control.

2.4.2. Respuesta de lamido inducida por formalina en ratones

Este método representó una modificación de la descrita por Shibata et al. (1989). Cada ratón se colocó en la cámara de observación en un piso de placa transparente acrílica durante 5 minutos antes de la inyección de formalina. Debajo del piso, un gran espejo estaba inclinado en un ángulo de 458 para permitir una observación clara de las patas del animal. A los animales se les administraron 25 ml de formalina al 1% en el subplantar derecho. Luego, cada animal fue devuelto a la cámara y se observaron los dos períodos distintos de la respuesta de lamido intensivo. El primer período (fase temprana) se registró 0/5 min después de la inyección de formalina y el segundo período (fase tardía) se registró 10/35 min después de la inyección. El tiempo (s) dedicado a lamer las respuestas de la pata inyectada se midió como un indicador de la respuesta al dolor.

2.5. Estudio antiinflamatorio en ratas

Elanti-inflamatoriola actividad se determinó en ratas midiendo el aumento medio en el volumen de la pata trasera después de la inyección sub plantar de agentes inflamatorios como la carragenina (Winter et al., 1962) o la zymosan (Tarayre et al., 1989). A los animales se les inyectó 0,1 ml de carragenina al 1% o zymosan al 2% en el pie trasero derecho debajo de la aponeurosis plantar. La inflamación se cuantificó en términos de mililitros utilizando un pletismometro (7150 Ugo Basile), que registró pequeñas diferencias en el nivel de agua causadas por el desplazamiento del volumen. Antes de cualquier tratamiento, se determinó el volumen promedio de las patas traseras de cada animal (Vo) con tres mediciones que no diferían de más del 4% (precisión del aparato). Luego, 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 min después de la inyección de los agentes inflamatorios, se determinó el volumen promedio de las patas traseras de cada animal (Vt) con tres mediciones que no difirieron de más del 4%.

Los porcentajes de edema en cada registro se calcularon comparando el volumen promedio de las patas traseras de cada animal (Vt) después de la inyección de los agentes inflamatorios con el volumen promedio de las patas traseras de cada animal (Vo) antes de cualquier tratamiento (Palanichamy y Nagarajan, 1990). Se obtuvieron porcentajes de inhibición para cada grupo utilizando la siguiente relación: [(Vt-Vo)control/(Vt-Vo)tratado]-100/ (Vt-Vo)control.

2.6. Análisis estadístico

Todos los datos obtenidos durante el analgésico yanti-inflamatoriola actividad se expresó en términos de errores medios y estándar y se analizó más a fondo mediante el uso del análisis unidireccional de varianza ANOVA, seguido de la prueba de Scheff. Cuando la probabilidad (P) fue inferior a 0,05, la diferencia se consideró significativa.

3. Resultados y discusión

Los animales pretratamiento con dosis orales de EC(Cistanchedeserticola)el extracto (0,1-1 g/kg) dio lugar a una inhibición significativa y dependiente de la dosis de la respuesta de retorcimiento inducida por el ácido acético (Tabla 1) y de las fases bifásicas de las respuestas de lamido inducidas por formalina en ratones (Fig. 1(A)). La inhibición causada por la EC(Cistanchedeserticola)el extracto a 1 g/kg en la respuesta de retorcemiento inducida por el ácido acético y las respuestas de lamido inducidas por la formalina fueron de aproximadamente el 54 y el 45%, respectivamente. El control positivo de ácido acetilsalicílico a 0,1-0,3 g/kg también disminuyó la respuesta de retorcimiento inducida por ácido acético con la inhibición del 45-64% (Tabla 1). Sin embargo, la otra indometacina de control positiva a 10 mg/kg solo inhibió la fase tardía pero no temprana de la respuesta de lamido inducida por formalina en ratones con la inhibición máxima del 32% (Fig. 1(A)). Además, solo las capas butanólicas y acuosas entre las tres capas de CD(Cistanchedeserticola)el extracto a 0,1-0,3 g/kg también produjo una antinocicepción significativa, y estos efectos analgésicos de la capa butanólica fueron mejores que los de la capa acuosa (Tabla 1 y Fig. 1(B)). En segundo lugar, evaluamos elanti-inflamatorioactividad de CD(Cistanchedeserticola)extracto y tres capas contra la formación de edema clásico (inducido por carragenina) y alternativo (inducido por zymosan). Encontramos que CD(Cistanchedeserticola)el extracto a 0,1-1 g/kg también inhibió significativamente la formación de edema inducido por carragenina de una manera relacionada con la dosis y la indometacina a 10 mg/kg también inhibió eficazmente la formación de edema inducido por carragenina en ratas (Fig. 2). Sin embargo, la formación de edema inducida por zymosan no fue inhibida por la EC(Cistanchedeserticola)extracto a 0,1-1 g/kg en ratas (datos no mostrados). Además, solo la capa butanólica entre tres capas de CD(Cistanchedeserticola)el extracto a 0,1-0,3 g/kg también inhibió significativamente la formación de edema inducido por carragenina en ratas (Fig. 2). Según informes fitoquímicos, acteoside y ácido succínico, pertenecientes a ingredientes de la capa butanólica de CD(Cistanchedeserticola)extracto (Hsu et al., 1994, 1995), poseía elanti-inflamatorioactividad en la formación de edema inducido por productos químicos (Murai et al., 1995; Kabachnyi et al., 1987). A partir de nuestros datos actuales y otros informes anteriores, sugerimos rizomas de EC(Cistanchedeserticola)poseía analgésicos yanti-inflamatorioactividad en roedores, y los constituyentes activos salen principalmente en la capa butanólica de la EC(Cistanchedeserticola)extraer. Si el acteoside y el ácido succínico son ingredientes activos de la EC(Cistanchedeserticola), aislaremos y evaluaremos su analgésico yanti-inflamatorioactividad en el futuro.

Figura 1. Efecto de la EC(Cistanchedeserticola)extracto (0,1, 0,3 y 1 g/kg), acetato de etilo, butanólico y capas acuosas de CD(Cistanchedeserticola)extracto (CDE, CDB y CDW) (0,03, 0,1 y 0,3 g/kg) e indometacina (INDOL, 10 mg/kg) en la fase temprana (0/5 min) y tardía (10 /35 min) de la respuesta de lamido inducida por formalina en ratones. Cada valor se representa como media9/S.E. (N/7). *P B/0,05, *** P B/0,001, en comparación con el grupo de HVE.

Figura 2. Efecto de la EC(Cistanchedeserticola)extracto (0,1, 0,3 y 1 g/kg), acetato de etilo, butanólico y capas acuosas de CD(Cistanchedeserticola)extracto (CDE, CDB y CDW) (0,03, 0,1 y 0,3 g/kg) e indometacina (INDOL, 10 mg/kg) en el edema de la pata inducido por carragenina en ratas. Cada valor se representa como media9/S.E. (N/6). *P B/0,05, ** P B/0,01, en comparación con el grupo veH

Además, Shibata et al. (1989) sugieren que la fase temprana de la respuesta de lamido inducida por formalina se relacionó con la bradiquinina y la sustancia P, y la fase tardía se relacionó con la bradiquinina, la autocrina y la prostaglandina. Nuestros datos actuales señalaron que la naloxona no abolió elanti-inflamatorioactividad de la capa de butanol de la EC(Cistanchedeserticola)extracto en ambas fases de la respuesta de lamido inducida por formalina (Fig. 3) y el efecto analgésico sobre la respuesta de retorcimiento inducida por ácido acético (Tabla 1). Por lo tanto, el analgésico yanti-inflamatoriolos efectos de la capa de butanol del extracto de CD podrían no estar relacionados con los receptores opioides. Además, CD(Cistanchedeserticola)El extracto y su capa butanólica solo inhibieron la formación de edema inducido por carragenina en ratas. El edema inducido por carragenina a través de la infiltración de leucocitos polimorfonucleares y el sistema de quinina activado, especialmente la bradiquinina, es diferente del edema inducido por cimonia a través de la afluencia de monocitos y el sistema inmunológico activado (Damas et al., 1990; Dawson et al., 1991). El ácido succínico, un ingrediente de la capa butanólica de extracto de CD, inhibió la función leucocitaria polimorfonuclear (Rotstein et al., 1985). Estos resultados revelaron que el analgésico yanti-inflamatorioefectos de la capa de butanol de la EC(Cistanchedeserticola)El extracto podría estar relacionado con el sistema de quinina, pero no con los receptores opioides y el sistema inmunitario, aunque la EC(Cistanchedeserticola)poseía el efecto inmunopotenciador (Chin y Su, 1993). Para detallar el mecanismo de analgésico yanti-inflamatorioactividad, investigaremos más a fondo con capas activas o ingredientes de extracto de CD.

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Referencias

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