Potencial antioxidante, antiinflamatorio y antienvejecimiento de un extracto de Kalmia angustifolia e identificación de algunos compuestos principales Parte 2

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3. Resultados

3.1.Evaluación de viabilidad celular

La seguridad del extracto se evaluó mediante el ensayo MTT, que evalúa la actividad metabólica de la célula [27,28]. Por lo tanto, da una idea de la viabilidad de las células y, más precisamente, de la viabilidad de los queratinocitos humanos primarios en este estudio. Los resultados mostraron que después de tratamientos de 48 h, el extracto de K. angustifolia es seguro hasta en 200 ug/mL con una viabilidad celular de 88± 12 por ciento (Figura 1). K. angustifolia causó citotoxicidad a una concentración de 400 ug/mL, con una viabilidad celular de 51 ± 8 por ciento. En definitiva, el extracto de K.angustifolia conserva un alto nivel de viabilidad celular en concentraciones de 0 a 200 ug/mL.

Figura 1. La evaluación de la citotoxicidad del extracto de K. Angustifolia en queratinocitos humanos primarios se realizó midiendo la actividad metabólica con un ensayo MTT. Todos los experimentos se llevaron a cabo al menos por triplicado y los resultados presentados son representativos de al menos dos experimentos diferentes (N=2, n=3). Los datos se presentan como medios de los triplicados ± SD. La línea horizontal se establece en el 50 por ciento de viabilidad celular. La significación estadística se determinó utilizando un ANOVA de una vía seguido de una prueba post hoc de Dunnett (valor p<0.05 compared="" to=""><>

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3.2. Capacidad Antioxidante

El potencial antioxidante se evaluó con dos ensayos diferentes, el ensayo ORAC y un ensayo basado en células usando DCFH-DA. El primero midió la inhibición de radicales peroxilo por parte del extracto estudiado. Los resultados indican que el extracto de K.angustifolia tenía una fuerte capacidad antioxidante, con un valor ORAC de 16±3 μmol TE/mg (Tabla 1).agua de cistancheEste resultado es comparable a los controles positivos quercetina y catequina, conocidos como compuestos antioxidantes fuertes, que presentaron valores ORAC de 21±2 y 20±2 μmol TE/mg respectivamente, confirmando así la capacidad antioxidante del extracto estudiado.

Tabla 1. Actividad antioxidante medida por un ensayo ORAC del extracto de K.angustifolia. Los datos se presentan como medias de los triplicados ± SD. Todos los experimentos se realizaron por triplicado y los resultados presentados son representativos de al menos dos experimentos diferentes (N=2, n =3). Se usaron quercetina y catequina como controles positivos.

El potencial antioxidante de K.angustifolia se confirmó aún más utilizando el ensayo basado en células DCFH-DA en fibroblastos de piel humana WS1 (Figura 2). Los resultados mostraron que el extracto de K. Angustifolia era fuertemente antioxidante en concentraciones tan bajas como 3,13 ug/mL, con una inhibición del 83,7±0,8 por ciento de la oxidación de DCFH. Este resultado es comparable al control positivo quercetina a una concentración de 1,56 ug/mL, que presentó un porcentaje de inhibición de la oxidación de DCFH de 87,41±0.03 por ciento. Sin embargo, la determinación de la mitad de la concentración inhibitoria máxima (IC50) mostró que la quercetina es aproximadamente 2 veces más eficiente en comparación con el extracto de K. Angustifolia con valores respectivos de ICso de 0.168±{ {25}}.009 ug/mL y 0.37±0.02ug/mL.

Figura 2. Actividad antioxidante de los extractos de K. Angustifolia en la línea celular WS1 de fibroblastos de piel humana tratada con hidroperóxido de tercbutilo (t-BuOOH), determinada mediante un ensayo basado en células usando DCFH-DA. Todos los experimentos se llevaron a cabo al menos por triplicado y los resultados presentados son representativos de al menos dos experimentos diferentes (N=2, n=3). Los datos se presentan como la media de los triplicados ± SD. La línea horizontal se establece en una inhibición del 50 por ciento. La significación estadística se determinó utilizando un ANOVA de una vía seguido de una prueba post hoc de Dunnett (valor p<0.05 compared="" to="" control="" of="" cells="" treated="" with="" only="" t-buooh（200μm）;*=""><0.05）or bonferroni's="" post="" hoc="" test=""><0.05 compared="" to="" positive="" control="" quercetin="" （1.56="" μg/ml）;#="" p-value=""><>

3.3. Potencial antiinflamatorio

La actividad antiinflamatoria del extracto de K.angustifolia se evaluó en función de su capacidad para disminuir la producción de nitritos en macrófagos activados con LPS (Figura 3).bioflavonoides cítricosLos resultados presentados en la Figura 3 mostraron que el extracto de K.angustifolia inhibió significativamente la sobreproducción de NO a una concentración tan baja como 20 ug/mL. Se observó una mayor inhibición a concentraciones de 40 y 80 ug/mL, con porcentajes de inhibición de la producción de NO de 25 ± 3 por ciento y 49 ± 2 por ciento respectivamente. Esto es comparable al control positivo L-NAME a una concentración de 250 uM (67 ug/mL), que inhibió la sobreproducción de NO en un 37 ± 2 por ciento.

3.4. Análisis histológicos

El potencial antienvejecimiento del extracto de K. Angustifolia se evaluó utilizando sustitutos de piel reconstruidos producidos según el método de autoensamblaje.beneficios del cinomorioLos análisis histológicos de las secciones teñidas con tricrómico de Masson (Figura 4A) confirmaron la integridad de los sustitutos de piel para cada condición, ya que cada sustituto de piel presentaba una capa dérmica y una epidermis diferenciada. A partir de estas secciones histológicas, se realizaron mediciones de espesor de la epidermis y la dermis vivas (Figura 4B). Para la epidermis viva, no se observó un aumento significativo con el extracto de K.angustifolia, con un cambio de 1.0(definido como la relación entre el grosor del sustituto tratado y el grosor del control sin tratamiento). En cuanto a la dermis, se observó un aumento significativo en el grosor dérmico (con un cambio de 1,36 veces) para el extracto de K.angustifolia a 25 ug/mL, lo que sugiere que el extracto tiene un efecto sobre la capa dérmica y más precisamente sobre los fibroblastos. e incluso podría promover la síntesis de componentes de la matriz extracelular.

Se probó un control de DMSO de {{0}}.2 por ciento (u/o) para cada experimento ya que el extracto se disolvió en 0.2 por ciento de DMSO, pero no se observó diferencia en comparación con el control sin tratamiento (datos no mostrado). Además, también se probaron concentraciones de 50 ug/mL y 100 ug/mL de K. angustifolia en sustitutos de la piel y se observó el mismo aumento en el grosor dérmico que para 25 ug/mL, con cambios de 1,3 y 1,2 veces respectivamente (datos no incluidos). mostrado). Por lo tanto, 25 ug/mL fue la concentración óptima y se llevaron a cabo más análisis con esta concentración.

Figura 4. Efecto del extracto de K. angustijolia sobre la histología de sustitutos de piel reconstruida. (A) Análisis histológicos de secciones sustitutas de piel teñidas con tricrómico de Masson. Estrato córneo en azul oscuro, epidermis viva en violeta y dermis en azul claro. Objetivo 10×, barra de escala: 100 um. (B) Cambio de pliegue en el grosor de la epidermis y la dermis vivas. El cambio de pliegue se define como la relación entre el valor del espesor de los sustitutos tratados y el valor del espesor del control (sin tratamiento). Se analizaron y confirmaron dos sustitutos para cada condición con tres poblaciones celulares diferentes (N =3, n =6). Los datos se presentan como medias de las tres poblaciones celulares diferentes ± SDLa significación estadística se determinó mediante una prueba t, ** valor p<>

3.5. Tinción de inmunofluorescencia

Se observaron cuatro proteínas cuyas cantidades generalmente disminuyen con el envejecimiento de la piel con la tinción de inmunofluorescencia: elastina, colágeno tipo I (colágeno-1), tipo todo colágeno （colágeno-3） y acuaporina-3 （ Figura 5). El extracto de K. Angustifolia a 25 ug/mL pareció aumentar la expresión de elastina (Figura 5E) en el compartimento dérmico en comparación con el control (Figura 5A). En la condición de control (sin tratamiento), la proteína elastina se expresó débilmente. Se realizó una semicuantificación de la intensidad de la fluorescencia en las secciones teñidas con inmunofluorescencia para obtener información sobre el aumento de la fluorescencia después de los tratamientos.jacinto del desiertoEl análisis de la intensidad de los píxeles confirmó los resultados que se muestran en la Figura 5. Los sustitutos de la piel tratados con el extracto de K. Angustifolia a 25 ug/mL mostraron un aumento en la intensidad de los píxeles para la elastina del 18 % en comparación con el control sin tratamiento. Con respecto al colágeno-1, el tratamiento con K. Angustifolia mejoró su expresión (Figura 5F), en comparación con el control (Figura 5B). De hecho, el tratamiento con el extracto a 25 ug/mL dio como resultado el mayor aumento en la intensidad de píxeles para el colágeno-1, con un aumento del 46 por ciento. Sin embargo, para el colágeno-3, la expresión permaneció similar (Figura 5G), en comparación con su contraparte (Figura 5C). Finalmente, la expresión de acuaporina-3, una proteína de membrana que se encuentra en los queratinocitos epidérmicos, también parecía ser similar después de los tratamientos a 25 ug/mL (Figura 5H) en comparación con el control (Figura 5D). No hubo un aumento significativo de la intensidad de píxeles para la expresión de colágeno-3 y acuaporina-3 después del tratamiento con el extracto de K. angustifolia a 25 ug/mL.

Figura 5. Los marcadores de envejecimiento se visualizan mediante tinción de inmunofluorescencia. Expresión de elastina (A, E), colágeno-1(B, F), colágeno-3(C, G) y acuaporina-3(D, H), que generalmente disminuye durante la piel. envejecimiento, se manifiesta en sustitutos de piel sana sin tratar (AD) y tratada con el extracto de K.angustifolia a 25 ug/mL(EH). Los núcleos se tiñeron con DAPI (azul). La línea punteada representa la separación entre la epidermis y la dermis. Se analizaron y confirmaron dos sustitutos para cada condición con tres poblaciones celulares diferentes (N= 3, n= 2; barra de escala: 100 um).

3.6.Aislamiento e identificación de algunos compuestos principales del extracto de K. angustifolia

La purificación del extracto se llevó a cabo en una columna abierta Diaion9 eluyendo con MeOH/HO con porcentajes crecientes de MeOH (0-100 por ciento). Esta primera purificación condujo a la obtención de cuatro fracciones (Fracciones AD). La fracción B se sometió a cromatografía en columna de gel de sílice, y esto condujo al aislamiento de catequina y epicatequina (fracción B1). La identidad de los compuestos se determinó por análisis de RMN y por comparación con estándares comerciales. La catequina y la epicatequina ya se han identificado en K. Angustifolia [9]. La fracción C también se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice y este proceso dio como resultado 7 fracciones separadas (C1 a C7). La purificación de la fracción C3 realizada en la columna de cromatografía de octadecilsilano condujo al aislamiento de un compuesto de color amarillo pálido. La fórmula molecular (C20Hj8O) de este compuesto se determinó a partir de su espectro HR-ESI-MS sobre la base de un pico de iones cuasimolecular en m/z 434,3511 [M más H]t. Basándose en los espectros de RMN 'H y 13C, el compuesto aislado se identificó como avicularia (fracción C3B). Hasta donde sabemos, este compuesto se informó por primera vez en K. angustifolia, pero es común a numerosas plantas [29]. La fracción C4 también se sometió a purificación en columna de cromatografía de octadecilsilano, y esto condujo al aislamiento de la proantocianidina A2 (dímero de epicatequina; fracción C4A) y otro dímero de epicatequina identificado como epicatequina-(2 -O-7, {{ 25}})-ent-epicatequina (proantocianidina Ax; fracción C4C). Estos dos compuestos se identificaron sobre la base de los datos de RMN [30,31]. Hasta donde sabemos, esta es la primera vez que se identifica la proantocianidina Ax en K. angustifolia, pero ya se ha identificado la proantocianidina A2 [9].método de extracción de flavonoides pdfLas sucesivas purificaciones de gel de sílice de la fracción Don dieron como resultado un compuesto en forma de cristales blancos (fracción D4). Los datos de RMN correspondieron en todos los aspectos a los datos informados para la biotina en la literatura [32]. La asotina se ha identificado en el género Kalmia [33].

3.7.Actividades biológicas de los compuestos identificados del extracto de K.angustifolia

Se realizó una investigación de los compuestos activos de K.angustifolia evaluando los potenciales antioxidantes y antiinflamatorios de cada compuesto identificado (Tabla 2). Para la actividad antioxidante, se realizaron un ensayo ORAC y un ensayo basado en células usando DCFH-DA. De acuerdo con estas pruebas, la catequina, la avicularia, la proantocianidina A2 y la proantocianidina Ax presentaron fuertes actividades antioxidantes, mientras que la epicatequina presentó una actividad antioxidante moderada. Los valores ORAC fueron respectivamente 6.7±0.3, 4.1±0.3, 4.5±0.8, 5.3±0.6, y 4.6±{{ 23}}.6 μmolTE/μmol, mientras que los IC0 para el ensayo basado en células fueron respectivamente 0.8±0.3, 0.4{{ 33}} ± 0.03,0.30 ± 0.03,0.24 ±0.02 y 1.22± 0.06 uM Los controles positivos, quercetina y Trolox, presentaron valores ORAC de 7.6 ±0.7 y 0.91±0.11 mol TE/mol respectivamente, y una ICso de 0,21±0,024±0,002μM.

Tabla 2. Actividades antioxidantes y antiinflamatorias de los compuestos identificados de K. Angustifolia. Los datos se presentan como medias de los triplicados ±S.ID.Todos los experimentos se realizaron por triplicado y los resultados presentados son representativos de al menos dos experimentos diferentes (N=2,n=3). Se utilizaron quercetina y Trolox como controles positivos.

En cuanto al potencial antiinflamatorio, evaluado por la inhibición de la sobreproducción de NO en macrófagos RAW 264.7 estimulados con LPS, ninguno de los compuestos aislados presentó un potencial antiinflamatorio que pudiera ser responsable de la actividad antiinflamatoria de K.anqustifolia.

4. Discusión

Pocos principios activos naturales han demostrado eficacia en la reducción del envejecimiento de la piel con estudios de eficacia exhaustivos, lo que limita el desarrollo basado en evidencia científica de productos para el cuidado de la piel que pueden reducir significativamente el envejecimiento de la piel. Los modelos in vitro son excelentes herramientas para establecer la seguridad y eficacia de los productos en el campo cosmético, lo que permite evitar el uso de modelos animales, que son muy controvertidos e incluso prohibidos o restringidos en ciertos países o estados como la Unión Europea, Canadá, India , Brasil (siete estados), Nueva Zelanda, Australia y Estados Unidos (California, Nevada, Illinois)[34-37]. El objetivo de este estudio fue evaluar la seguridad y eficacia de un extracto de K.angustifolia utilizando sustitutos de piel reconstruida para establecer el uso potencial de K.angustifolia en cosmética. Este estudio destaca el potencial antienvejecimiento de un extracto de K. Angustifolia.

Para ser utilizados en productos para el cuidado de la piel, primero se debe demostrar que los ingredientes son seguros para la piel y, por lo tanto, para las células de la piel. La evaluación de la toxicidad de cada ingrediente cosmético de una formulación es la base para evaluar la seguridad de los productos cosméticos. En este estudio, se demostró que el extracto es seguro para su uso en queratinocitos a una concentración de hasta 200 ug/mL. La seguridad del extracto de K.angustifolia a 25 ug/mL también fue respaldada por análisis histológicos de los sustitutos de piel reconstruidos. Estos análisis mostraron que la integridad de todas las capas de la piel reconstruida (epidermis y dermis) se conservó a una concentración de 25 ug/mL. Incluso cuando se trató con el extracto, el grosor de la epidermis viva fue comparable a los sustitutos de la piel no tratados (controles) y se mejoró el grosor dérmico. Los sustitutos de la piel se trataron tres veces durante una semana, lo que sugiere la seguridad del extracto de K.angustifolia con tratamientos repetidos. Así, K Angustifolia podría utilizarse en dermocosmética ya que parece preservar la viabilidad celular. También se deben realizar otros experimentos, como la absorción percutánea, para confirmar la utilización de este extracto siguiendo las pautas de instancia adecuadas [38].

Otro parámetro importante en el desarrollo de productos para el cuidado de la piel es, sin duda, la eficacia de los ingredientes activos respaldada por evidencia científica. Se pueden realizar múltiples experimentos y análisis para evaluar este aspecto. Con extractos de plantas, la evaluación de su potencial antioxidante se lleva a cabo comúnmente para establecer su eficacia39-41]. El envejecimiento de la piel es un fenómeno complejo que involucra diferentes mecanismos, y se han propuesto varias teorías para explicar la base molecular[1]. Una de estas explicaciones es el estrés oxidativo. Varios factores ambientales que conducen al envejecimiento de la piel, como la radiación solar, la contaminación del aire y el humo del cigarrillo, generan especies reactivas de oxígeno (ROS) que se agregan a las ROS producidas naturalmente dentro de las células [42-44]. Este aumento en los niveles de ROS provoca un desequilibrio entre los radicales libres y los antioxidantes naturales, lo que provoca estrés oxidativo y daño tisular, de ahí la importancia de los compuestos antioxidantes en los productos antienvejecimiento de la piel [45]. Los antioxidantes en los productos para el cuidado de la piel ayudan a reforzar la capacidad antioxidante de la piel para contrarrestar los efectos nocivos del estrés oxidativo. La evaluación de la actividad antioxidante del extracto de K. Angustifolia, evaluada con el ensayo ORAC, mostró que el extracto tenía un potencial antioxidante similar al de la quercetina y la catequina de los controles positivos, dos compuestos antioxidantes fuertes, lo que sugiere una excelente capacidad antioxidante. Los resultados obtenidos para los controles positivos están de acuerdo con un estudio previo de Ou et al., que muestra que la prueba es confiable [24]. Otra planta de la familia Ericaceae que también se encuentra en el bosque boreal y se utiliza por su potencial antioxidante es Rhododendron groenlandicum. La capacidad antioxidante de R. groenlandicum se evaluó en un estudio previo informado por Dufour et al. y los extractos estudiados presentaron una capacidad antioxidante en comparación con el valor ORAC del extracto de K. angustifolia, lo que confirma una vez más el gran potencial antioxidante de este extracto y el interés de utilizar este extracto vegetal en cosmética [39]. La actividad antioxidante del extracto de K. Angustifolia medida con el ensayo ORAC se confirmó con el ensayo DCFH-DA, que es más representativo del entorno biológico. Los resultados del ensayo basado en células usando DCFH-DA para determinar la actividad antioxidante celular coincidieron con los resultados de ORAC. A la luz de estos resultados, el extracto de K. Angustifolia debería ser un gran ingrediente activo en cosmética como compuesto antioxidante. Se debe utilizar a una concentración de al menos 3,13 ug/mL si se busca un potencial antioxidante respetando el nivel de seguridad del extracto.

La actividad antioxidante del extracto de K.angustifolia podría deberse a los compuestos fenólicos que se encuentran en sus componentes, como( más )-catequina,(-)-epicatequina y proantocianidina A2, que han sido aislados del extracto, y p-cumárica ácido, quercetina 3-O-galactósido (peróxido), quercetina 3-O-ramnósido (quercitrina) y miricetina, que se han identificado en otros estudios, pero se necesitaría más investigación para confirmar esta hipótesis [9 ,10,39, A6]. En este estudio se identificaron por primera vez dos compuestos en K.angustifolia que también podrían ser responsables de la actividad antioxidante del extracto. La avicularia, un flavonoide, y la proantocianidina Ax, una proantocianidina de tipo A, ambas encontradas en el extracto de K. angustifolia, presentaron potenciales antioxidantes interesantes en función de su valor ORAC y el ensayo basado en células.

Otra explicación para el proceso de envejecimiento es la inflamación crónica. La evidencia acumulada del estudio del proceso de envejecimiento de la piel ha llevado a la hipótesis de una inflamación molecular con el envejecimiento. Una explicación es que el daño a las células, causado por ejemplo por un exceso de ROS, es reconocido por el sistema inmunitario, provocando la infiltración y activación de células inmunitarias como los macrófagos [1]. En general, con el envejecimiento de la piel se observa un aumento de las citocinas proinflamatorias, como IL-1, IL-6y TNF- . Por lo tanto, un potencial antiinflamatorio es una característica interesante para un ingrediente activo antienvejecimiento. La actividad antiinflamatoria evaluada por el nivel de producción de NO reveló un buen potencial antiinflamatorio del extracto de K.angustifolia a concentraciones de 40 y 80 ug/mL, en comparación con la menor concentración del control positivo, L-NAME. Dado que las concentraciones más altas del extracto son comparables a 250 μM de L-NAME, sugiere que K. angustifolia también podría usarse en cosméticos como ingrediente antiinflamatorio. Logró inhibir una parte de la producción, mostrando así una actividad antiinflamatoria. Ninguno de los compuestos identificados en el extracto de K. Angustifolia exhibió una actividad antiinflamatoria que pudiera explicar la del extracto. Sería necesaria una mayor investigación de la composición del extracto para evaluar los compuestos antiinflamatorios.

Los compuestos antioxidantes presentan características interesantes para los productos dermocosméticos. De hecho, se sabe que las especies reactivas de oxígeno (ROS), generadas por varios factores ambientales que causan el envejecimiento de la piel, pueden provocar la degradación de componentes importantes de la matriz extracelular dérmica, como el colágeno y la elastina [47-49]. La disminución en su cantidad generalmente es causada por un aumento en las metaloproteinasas de matriz (MMP) y una disminución en su síntesis [48,50]. Un buen equilibrio entre la producción endógena de antioxidantes y oxidantes permite el mantenimiento de la homeostasis de la piel. Sin embargo, con el envejecimiento de la piel se produce un desequilibrio y entonces cobra relevancia el uso de antioxidantes exógenos. Así, el potencial antioxidante del extracto de K. Angustifolia condujo al estudio de su potencial antienvejecimiento.

Con el envejecimiento de la piel, a menudo se puede observar una disminución en el grosor de la epidermis y la dermis vivas. El primero se debe a una disminución en la proliferación de queratinocitos, mientras que el segundo se debe a la degradación de la matriz extracelular y una disminución en su síntesis [4751-53]. Así, se busca un aumento de sus respectivos espesores con productos antiedad. No se observó un aumento significativo en el espesor epidérmico vivo con el extracto de K, Angustifolia a 25 ug/mL. Sin embargo, un aumento significativo (valor p<0.05） in="" the="" dermal="" thickness="" was="" observed.="" an="" increase="" could="" suggest="" matrix="" reorganization,="" or="" even="" an="" increase="" in="" the="" synthesis="" of="" dermal="" extracellular="" matrix="" components,="" such="" as="" elastin="" or="" collagens,="" which="" is="" an="" interesting="" property="" for="" an="" anti-aging="" extract.="" the="" immunofluorescence="" staining="" of="" several="" proteins="" was="" performed="" to="" further="" investigate="" the="" effect="" of="" the="" extract="" on="" the="" extracellular="">

Los niveles de elastina, colágeno-1 y colágeno-3 suelen disminuir con el envejecimiento de la piel, lo que provoca, entre otros efectos, la formación de arrugas, la pérdida de resistencia a la tracción, el aumento de la fragilidad y la cicatrización deficiente de las heridas [ 54]. La disminución de los componentes de la matriz extracelular dérmica se debe a un aumento en la degradación de estas proteínas y una disminución en su expresión génica, y por lo tanto en su síntesis [1,53-55]. Su degradación es causada principalmente por elastasas (como la elastasa de neutrófilos humanos y la neprilisina) y MMP (como MMP-1 y MMP-3). La inducción de MMP ocurre en el envejecimiento de la piel a través de la activación de varias vías de transducción. [46,56]. En el proceso de envejecimiento de la piel, varios productos, como las ROS y el factor de necrosis tumoral (TNF-), pueden conducir a la activación de la vía del factor nuclear kappa B (NF-kB) o de la proteína quinasa activada por mitógenos (MAP). vías, incluidas las quinasas reguladas por señales extracelulares (ERK), las proteínas quinasas activadas por mitógenos p38 (p38) y las quinasas N-terminales c-Jun (JNK) [57,58]. Esta activación luego conducirá a la expresión del factor de transcripción NF-kB o la proteína activadora del factor de transcripción 1 (AP-1), que desempeña un papel en la transcripción de las MMP. La activación de NF-kB o AP-1 aumenta la expresión de MMP y, por lo tanto, aumenta la degradación de los componentes dérmicos. En el presente estudio, el aumento en la expresión de elastina y colágeno-1 con el tratamiento muestra que K.angustifolia podría contrarrestar de manera eficiente algunas de las principales características del envejecimiento de la piel. Los niveles mejorados de elastina registrados después del tratamiento con K. angustifolia son particularmente convincentes ya que está relativamente bien documentado que esta proteína generalmente se sintetiza débilmente o incluso no se sintetiza en la dermis reconstruida usando condiciones de cultivo suplementadas con ácido ascórbico, como es el caso en nuestro modelo de piel. (como se muestra con el control sin tratamiento, Figura 5A). De hecho, aunque el ascorbato promueve la producción de matriz extracelular, especialmente la síntesis de colágeno por parte de los fibroblastos dérmicos, algunos estudios han demostrado que también tiene un efecto inhibidor sobre el proceso de blastogénesis, lo que resulta en una disminución de la acumulación de elastina [59,60]. Por lo tanto, si 25 ug/mL del extracto son suficientes y lo suficientemente potentes para superar el efecto del ascorbato en nuestro modelo de piel, K. Angustifolia debería ser un gran candidato potencial en productos para el cuidado de la piel para contrarrestar el envejecimiento de la piel a esta concentración. Podría ayudar a la piel a recuperar fuerza, firmeza y elasticidad, y así reducir la aparición de arrugas, pero se deben realizar más estudios clínicos para confirmar estas suposiciones.

5. Conclusiones

En este estudio hemos demostrado que el modelo de sustitución de piel desarrollado en nuestro centro de investigación es una herramienta útil para evaluar la eficacia antienvejecimiento en el campo de la dermocosmética. Hemos demostrado no solo que el extracto de K.angustifolia parece ser seguro para su uso en cosmética, sino que también tiene una fuerte capacidad antioxidante y una buena actividad antiinflamatoria. Este estudio sugiere que el extracto de K.angustifolia a 25 ug/mL podría tener un efecto antienvejecimiento potencial en el compartimento dérmico, ya que el extracto aumentó el grosor dérmico y mejoró la expresión de elastina y colágeno-1. Sería de interés realizar más estudios sobre los mecanismos implicados en el potencial antienvejecimiento del extracto. El aislamiento y caracterización de varios compuestos en el extracto de K.angustifolia nos permitió establecer que la eficacia antienvejecimiento podría provenir en parte del potencial antioxidante de estos compuestos. Sin embargo, la composición de K.angustifolia se ha estudiado muy poco y debe investigarse más a fondo para comprender el alcance de su actividad biológica e identificar los compuestos activos. Por lo tanto, este estudio sugiere que K.angustifolia sería un ingrediente activo natural interesante para la dermocosmética. K. Angustifolia tiene efectos antioxidantes y antienvejecimiento prometedores, especialmente en la matriz extracelular dérmica.

Este artículo está extraído de Antioxidantes 2021, 10, 1373. https://doi.org/10.3390/antiox10091373 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants