¿Las saunas son beneficiosas o perjudiciales para la enfermedad renal poliquística autosómica dominante? Examen con modelo de ratón Ⅱ

III Resultados

1. Cambios en los parámetros generales debido a la sauna repetida.

La Tabla 1 resume los datos fisiológicos obtenidos al final del experimento. Se encontró que el peso corporal del grupo SW era significativamente mayor que el del grupo TS (p < 0.05). La ingesta de alimentos y de agua del grifo de todos los grupos fue similar (NS). La ingesta de agua que contenía sacarosa al 4% no afectó los niveles de glucosa en sangre en los grupos TS y SW (NS versus control). La osmolalidad de la orina de los grupos TS y SW parecía ser menor que la del grupo control.

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2. Efecto de la sauna repetida sobre la función renal y el agrandamiento de los quistes

La tabla 2 resume los parámetros de la función renal. Los niveles de creatinina plasmática o nitrógeno ureico en sangre (BUN) en el grupo TS fueron ligeramente más altos que los del grupo control. Por el contrario, el agrandamiento del quiste en el grupo TS se inhibió ligeramente en comparación con el del grupo control. Hubo un agrandamiento quístico similar de los túbulos en todos los grupos al final del experimento. En la figura 2 se muestra una expansión quística representativa de los túbulos.

3. Expresión y fosforilación de Hsps en el riñón mediante sauna repetida.

Realizamos un análisis de transferencia Western de Hsps para determinar la carga de calor en el riñón (Fig. 3A). Como informamos anteriormente13), el grupo TS mostró un aumento de aproximadamente 3,08-veces en la expresión de Hsp27 y aproximadamente 1,95-veces de aumento en la expresión de Hsp27 fosforilada, en comparación con el grupo de control. No se observó tal aumento en el grupo SW, en comparación con el grupo de control (Fig. 3A, D, E). Sin embargo, la expresión de Hsp9{{10}} en los grupos TS y SW disminuyó aproximadamente 0,61-veces y 0,51-veces, respectivamente, en comparación con el grupo de control (Fig. .3A, C). La Hsp90 fosforilada se expresó de manera similar en todos los grupos (Fig. 3A, B).

Fig. 2 A: Microfotografías representativas (× 2,5) de una sección de riñón teñida con HE. Barra de escala: 300 μm. B: Se observó la cuantificación de la expansión quística de los túbulos en todos los grupos. Los datos se muestran como media ± SEM. n=3 para cada grupo.

4. Expresión del crecimiento celular y proteínas relacionadas con el tamaño en el riñón.

Anteriormente se informó que Hsp90, que participa en la formación de quistes y el crecimiento de la PQRAD, estaba sobreexpresada en quistes renales asociados a PKD humanos y murinos. Tras la confirmación de una expresión reducida de Hsp90 en los riñones en los grupos TS y WS, confirmamos la expresión del crecimiento celular y las proteínas relacionadas con el tamaño16). La sobreactivación de la red PI3K/Akt/mTOR es un evento patogénico bien conocido que conduce a la hiperproliferación. En la poliquistosis renal, la cascada mTOR promueve el crecimiento de quistes al aumentar la proliferación, el tamaño y el metabolismo de las células epiteliales de los túbulos renales15), 17). La expresión de Erk1/2, que participa en la vía de señalización de la proliferación de células epiteliales del quiste18), se redujo en los grupos TS y SW en comparación con la del grupo control (P <0,05, TS vs. control; Fig. 4A, D , mi). Sin embargo, no hubo cambios en la expresión de Akt y mTOR (Fig. 4A, B, C, F, G).

5. Efecto de la sauna o del agua con sacarosa al 4% sobre la vía de la apoptosis

Las caspasas se expresan como precursores inactivos dentro de las células y se activan en respuesta a una variedad de estímulos de muerte celular. La activación implica la dimerización y, a menudo, la oligomerización de las procaspasas, seguida de la escisión en una subunidad pequeña y una subunidad grande19). Las caspasas activadas escinden sustratos diana específicos y provocan la muerte celular. Hay dos métodos para detectar la activación de caspasa, uno es un método que utiliza un anticuerpo y el otro es un método que utiliza un sustrato de caspasa. En el método que utiliza un anticuerpo, puede detectarse por la cantidad de un precursor no escindido y/o una caspasa escindida. La caspasa3, que es una de las caspasas efectoras, es un regulador clave de la apoptosis. La caspasa activada-3 puede escindir múltiples proteínas estructurales y reguladoras, que son fundamentales para la supervivencia y el mantenimiento de las células. Para evaluar si la sauna afectó la apoptosis, medimos la cantidad de pro-caspasa3 y la expresión de caspasa3 escindida mediante transferencia Western estándar. La Figura 5 muestra que hubo un pequeño aumento en la actividad de caspasa3 en los grupos TS y SW, en comparación con el grupo de control.

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