Evaluación característica de varias formulaciones de crema antienvejecimiento a partir de extracto carotenoide de la cepa simbionte bacteriana Virgibacillus Salarius

Palabras clave:crema;Cistanche;antioxidantes; protector solar; simbionte bacteriano

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1. Introducción

Envejecimiento prematuroes una enfermedad degenerativa caracterizada por piel seca, arrugada y ásperay puntos negros [1]. Dos factores desencadenan el envejecimiento prematuro, a saber, factores internos comocomo el estrés, la resistencia, los cambios hormonales y la salud, así como factores externos que incluyenrayos ultravioleta y radicales libres. Los radicales libres son moléculas que contienen oxígeno cuyoLa disposición atómica es inestable y, por lo tanto, sufre reacciones en cadena que pueden ocurrir en elcuerpo y provocar daños continuos [2]. 

Los radicales libres son sustancias muy reactivas y peligrosas que provocan daños en eltejidos del cuerpo que pueden conducir al desarrollo de diversas enfermedades en la vejez [3]. Sin embargo, los radicales libres son posibles de superar mediante el uso de antioxidantes.4] que se detienenreacciones en cadena provocadas por los radicales libres al donar electrones a las moléculas inestables.Los ejemplos de compuestos antioxidantes incluyen cistanche, vitamina C y vitamina E.5].

cistanche son compuestos que han demostrado ser antioxidantes potenciales [6–10] como contienenun compuesto de isopreno de cadena larga con un doble enlace conjugado [5,7,11]. el conjugadoEl doble enlace elimina el oxígeno singulete y desactiva otros radicales libres que se producen a través deel proceso de transferencia de electrones [12,13]. Posteriormente, los compuestos que han conjugado dobleLos enlaces se pueden encontrar en organismos terrestres y marinos. Compuestos de marinolos organismos tienen características únicas y varios descubrimientos sobre nuevos compuestos bioactivospara antibióticos, anticancerígenos, productos farmacéuticos, cosméticos, enzimas y pigmentosse han obtenido de muchos ecosistemas coralinos, especialmente corales blandos.

No se debe utilizar la utilización masiva de corales blandos, ya que causará daños ael ecosistema El simbionte bacteriano asociado con el coral blando podría convertirse en un potencialalternativa potencial que produce cistanche como fuente de antioxidantes [14,15]. CosméticoSe requieren formulaciones que se puedan aplicar sin esfuerzo y cómodamente al usarcompuestos carotenoides. Por lo tanto, la formulación cosmética que se prefiere está en formade crema La crema es la preparación semisólida seleccionada que se extiende fácilmente de manera uniforme sobre la piel,no es pegajoso y es fácil de limpiar, por lo que es cómodo de usar para los consumidores. El uso debacterias simbiontes como fuente de materias primas cosméticas es el último avance quenecesita ser desarrollado.

2.1. Materiales y Herramientas

El simbionte bacterianoV salarioscepa 19.PP.Sc1.6 aislada deSinulariasp. origennated de Panjang Island, Jepara, Java Central, Indonesia; el punto específico está en las coordenadasde "6◦340 37.3500 S", "110◦370 52.0100 E". Los materiales requeridos incluyen metanol (analíticagrado) comprado a Merck (Darmstadt, Alemania);

2,2-difenil-1-picrilhidrazilo

(DPPH) de Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, EE. UU.). Otros ingredientes utilizados en las formulaciones de crematales como ácido esteárico, glicerina, tetraborato de Na, trietanolamina (TEA), lanolina,aceite de girasol, cera de abeja, alcohol cetílico, span 80, monoestearato de glicerol y Tween 80 fueroncomprado a Merck (Darmstadt, Alemania). Los instrumentos utilizados fueron un UV-visEspectrofotómetro Shimadzu 1240 (Kyoto, Japón), viscosímetro Brookfield LVDV-I Prime(Toronto, ON, Canadá), medidor de pH digital USB Phs 3c 3d Rohs, centrífuga IEC Centra MP4R(Thermo Electron, Waltham, MA, EE. UU.) y el agitador orbital Daihan SHO 2D ​​(Wonju, Corea).

2.2. Aislamiento de simbionte bacteriano de Sinularia sp.

Elsilunariasp. Los tejidos se colocaron en placas petri estériles que se llenaron parcialmente conagua de mar esterilizada. Se cortaron las superficies de los tejidos de coral blando, y sólo el interiorde la muestra se utilizó para el aislamiento microbiano. Para el aislamiento bacteriano, una serie de dilucionesse realizó para todas las muestras. De cada placa petri se recolectaron 10 mL de la muestra conuna pipeta estéril y se coloca en un matraz que contiene 90 mL de agua de mar esterilizada para obtener una10−1 dilución. Desde el 10−1 dilución, se pasó 1 ml a un tubo que contenía 9 ml de solución estérilagua de mar para obtener un 10−2 dilución. Este proceso de dilución se repitió hasta 10−5 diluciónfue obtenido. Se recolectó una muestra (1 ml) de cada serie de dilución y se colocó en un recipiente estéril.placa de Petri que contiene medio de agar Zobell 2216E (Himedia, Mumbai, India) para bacteriasaislamiento. Luego, las cajas de petri se incubaron a 30◦C durante 2 días. bacteriano de color amarilloLas colonias que crecen en la superficie de los medios de agar se separaron mediante un método de rayas paraobtener cepas bacterianas puras.

2.3. Cultivo de simbiontes bacterianos

las bacteriassalariuscepa 19.PP.Sc1.6 [16] fue inoculado transfiriendo 1 mL deel aislado en 2 L de caldo marino Zobell estéril 2216 (Himedia, Mumbai, India). Fueluego se coloca en el agitador a 100 rpm a 27◦C hasta que el color del soporte se vuelva amarillo (±7 días).Posteriormente, las bacterias simbióticas que habían producido la cistanche fueron aisladas ycentrifugado durante 15 min a 6000 rpm, después de lo cual los gránulos se separaron y luego se filtraronusando papel de filtro Whatman No 1 (Maidstone, Reino Unido).

2.4. Extracción de carotenoides

Extracción de la cistanche por el método de maceración rápida realizada en cámara oscurahabitación. El metanol (grado analítico) comprado a Merck (Darmstadt, Alemania) sese agregó al cultivo de pellets y luego se centrifugó durante 10 min a 6000 rpm. Posteriormente, unse obtuvo un filtrado que contenía cistanche y pellets en forma de masa bacteriana,se filtró con un papel de filtro Wahtman No 1, se evaporó y se secó con gas N [14,15].

2.5. Formulaciones de crema

La fórmula empleó tres formulaciones con diferentes tipos de crema, a saber, vs.ay, y ay [16–18]. La fórmula utilizada es la que se muestra en la Tabla1.

Tabla 1.Fórmulas en crema de extracto de carotenoidesV salarioscepa 19.PP.Sc1.6.

2.5.1. Fórmula 1: Crema vs

Derretimos el ácido esteárico y la glicerina en un bol. El tetraborato de Na y el TEA fuerondisuelto en un poco de agua, luego poner en una solución de ácido esteárico y glicerina. Luego, revolvimosy homogenizamos, y añadimos un poco de agua para que los resultados sean buenos. El último paso fuepara agregar el extracto de carotenoide y revuelva hasta que se distribuya uniformemente.2.5.2. Fórmula 2: Crema owPrimero, el monoestearato de glicerol y el alcohol cetílico se derritieron en la taza 1. Girasol ySe mezcló Tween 80 en la taza 2. Después de eso, colocamos la mezcla de la taza 2 en la taza 1. EstoSe agitó hasta homogeneidad con un poco de agua caliente. Finalmente, añadimos el carotenoideextracto y se agita hasta homogeneidad.

2.5.3. Fórmula 3: Crema wo

2.6. Evaluación de la crema

Se evaluaron las características de tres formulaciones de crema; la evaluación inicialse realizó una prueba organoléptica. En las pruebas organolépticas, las observaciones incluyen cambios encolor, olor (rancidez) y tacto. En la prueba organoléptica se utilizaron como encuestados 25 personas,compuesto por 15 personas capacitadas y 10 no capacitadas. La siguiente prueba fue la homogeneidad,que se logra aplicando la crema a placas de vidrio y observando la uniformidad deel color, sea uniforme o no. Posteriormente, en la prueba de pH, la crema se depositóen un vaso de precipitados de vidrio, y luego se hizo la medición del pH utilizando un medidor de pH que teníapreviamente calibrado con un estándar Dappar (pH de 4 y pH 7). El poder de dispersiónLa prueba se llevó a cabo en vidrio transparente colocado sobre papel cuadriculado y 0.5 g de crema se

se coloca sobre el vaso y luego se cubre con otro vaso transparente y se deja±5 s aobtener el diámetro del área formada. Luego, diferentes pesos de 50, 100, 150, 200, 250, 300,Se colocaron 350, 400 y 450 g sobre el vidrio transparente y el diámetro del área formadafue observado. Las especificaciones indican que la crema debe extenderse fácil y uniformemente.

Mientras tanto, la prueba de viscosidad de la crema se determinó utilizando un Brookfield LVDV-I PrimeViscosímetro Se realizó una prueba de adhesión con un objeto de vidrio marcado como4 × 2,5cm, luego se colocaron 0.25 g de crema en el punto medio del área y se cubrió conotros objetos de vidrio. Por lo tanto, se colocó una carga de 1 kg durante 5 min, luego los dos objetos de vidrioque se habían fijado se montaron en el equipo de prueba al que se le dio una carga de 80gramo. Después de esto, se anotó el tiempo necesario para separar los dos objetos de vidrio. Observaciones paratodas las pruebas se realizaron semanalmente durante 5 semanas.

2.7. Medición de la actividad antioxidante

Las cremas disueltas en metanol se prepararon en una serie de concentraciones. Por lo tanto, untotal de 3 ml de la muestra se diluyó con 1 ml de solución de 0.1 mM DPPH y se dejópara reposar durante 30 min. Al decantar, la solución se homogeneizó y su absorción fuemedido usando un espectrofotómetro a una longitud de onda de 517 nm. La absorbancia de laTambién se leyó la solución de control, es decir, DPPH sin solución de prueba. Además, elLa cantidad de actividad antioxidante se midió usando la siguiente ecuación [19]: 

2.8. Medición del Factor de Protección Solar (SPF)

Se realizó la medición del valor del Factor de Protección Solar (SPF)in vitro. El FPSSe realizó una prueba para determinar la actividad de protección solar de la crema usando un UV-Visespectrofotómetro. Cada crema, con un peso de 0,1 g, se disolvió en 100 mL de metanol en unmatraz volumétrico y se filtró con Whatman No. 1. Se puso un total de 3 mL de la soluciónen una cubeta para medir su absorbancia utilizando un espectrofotómetro UV-Vis. Posteriormente, elLa determinación del valor SPF utilizando el espectrofotómetro UV-Vis se conocía a partir de lacaracterísticas de absorción de la crema a longitudes de onda de 290 a 320 nm con intervalos de 5 nm.El cálculo del valor SPF utiliza la siguiente ecuación [20,21]: 

abs=Absorbancia de la muestra.

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