Progreso de la investigación y aplicación de la tecnología de huellas dactilares en la materia médica china Ⅱ

1.2 Huella electroquímica

La electroquímica es un método analítico simple basado en las propiedades y principios electroquímicos de la sustancia a probar, que es de bajo costo, altamente sensible y requiere pocos consumibles [19]. Sin embargo, este método tiene ciertas limitaciones y actualmente es aplicable principalmente al análisis de medicinas chinas que contienen componentes químicos como terpenos (como Angelica sinensis), flavonoides (como Scutellaria baicalensis), alcaloides (como Aconite) y antraquinonas ( como el ruibarbo) que pueden sufrir reacciones electroquímicas.

Wu Di et al. [20] utilizaron una huella digital electroquímica para establecer el proceso de extracción óptimo de Scutellaria baicalensis Georgi, proporcionando un buen método para el uso racional de materiales medicinales chinos. Shi Huihui et al. [21] utilizaron la tecnología de oscilación química de la reacción Belousov-Chabotinsky (BZ) para investigar los efectos de la temperatura, la velocidad de rotación y la cantidad de materiales medicinales agregados a los resultados experimentales y establecieron condiciones experimentales razonables para obtener la huella electroquímica de Magnolia biondii Pamp. ., proporcionando un nuevo método para el control de calidad de Magnolia biondii. Zou Guihua et al. [22] establecieron la huella electroquímica no lineal de Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. Y Gentiana macrophylla Pall. Las huellas dactilares electroquímicas de los dos materiales medicinales son visualmente diferentes, lo que puede utilizarse como un método simple y eficaz para distinguir Codonopsis pilosula de Gentiana macrophylla. Dai Hongxia et al. [23] realizaron un análisis electroquímico en 20 lotes de Angelica sinensis (Oliv.) Diels con un período de crecimiento de 1, 2 y 3 años. Combinado con el análisis de componentes principales, se encontró que las huellas electroquímicas y los parámetros de oscilación (incluido el tiempo de inducción de la oscilación, el potencial máximo, la vida de la oscilación, la amplitud máxima, el potencial de parada y el número de ciclos) de Angelica sinensis en diferentes períodos de crecimiento eran significativamente diferentes. que puede utilizarse como base para identificar Angelica sinensis en varios períodos.

MATERIAL CHINO HIERBA MÉDICA CISTANCHE HPLC HUELLA DACTIL

1.3 Huella cromatográfica

1.3.1 Cromatografía en capa fina

La cromatografía en capa fina es un método cromatográfico que logra la separación basándose en las diferentes capacidades de adsorción del mismo adsorbente para diferentes componentes químicos. Es el método más comúnmente utilizado para identificar las medicinas tradicionales chinas, con las ventajas de una operación fácil, equipo simple, buena sensibilidad, alta comparabilidad, fuerte especificidad y fácil desarrollo del color. La autenticidad del material medicinal puede determinarse por la presencia o ausencia de manchas en la placa de capa fina. La profundidad y el tamaño del color de las manchas pueden reflejar hasta cierto punto la calidad del material medicinal[24]. Actualmente, la cromatografía en capa fina de alta resolución(HPTLC) se utiliza a menudo para reemplazar la cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) para identificar cualitativa y cuantitativamente productos de la medicina tradicional china debido a su simplicidad, precisión, bajo costo, alta eficiencia y rapidez. Las huellas dactilares HPTLC tienen mejor resolución y pueden estimar de manera razonable y precisa los ingredientes activos del fármaco en un tiempo más corto [25]. Sin embargo, debido a la gran cantidad de factores que influyen (humedad, temperatura, etc.), la reproducibilidad de los resultados es pobre en comparación con la HPLC. Loescher et al. [26] utilizaron HPLC y HPTLC para analizar el extracto de Calendula officinalis y descubrieron que la HPLC era más adecuada para el análisis cuantitativo que la HPTLC.

En respuesta a este efecto, Li Xiangjun et al. [27] hicieron una serie de soluciones correspondientes, incluida la realización del experimento de desarrollo en un refrigerador o un dispositivo sellado de temperatura controlada para reducir la influencia de la temperatura y la adición de diferentes proporciones de ácido sulfúrico en un extremo del cilindro de desarrollo para controlar la humedad.

ETIQUETA HPLC CISTANCHE DE HIERBA MÉDICA MATERIAL CHINO

Patil et al. [28] establecieron la huella digital HPTLC del extracto de éter de petróleo de Catsia tora Linn. Los resultados mostraron que las hojas, semillas y flores contenían 10, 7 y 11 tipos de ingredientes, respectivamente. Este método se puede utilizar para identificar la autenticidad de Catsia tora Linn. Xiao Honghua et al. [29] utilizaron cromatografía de capa fina combinada con espectrometría de masas para establecer una huella cromatográfica de capa fina de cromonas, ácidos orgánicos y saponinas triterpenoides en Cimicifuga foetida L., y realizaron análisis de similitud, análisis de conglomerados y análisis de componentes principales en 16 lotes de Muestras de Cimicifuga de cinco fuentes, lo que proporciona una base para el control de calidad de Cimicifuga.

Guzelmeric et al. [30] utilizaron acetato de etilo, ácido fórmico, ácido acético y agua (30:1,5:1,5:3) como disolvente de desarrollo para desarrollar la huella digital HPTLC de apigenina-7-glucósido, un marcador activo de Matricaria chamomilla L., que puede utilizarse como guía importante para la evaluación de la calidad de la manzanilla. Bazylko et al. [31] establecieron la huella digital HPTLC de cinco compuestos flavonoides, a saber, tagetoides, quercetina, flavonoides, ácido cafeico y ácido clorogénico, de Galinsoga parviflora Cav. Este método se puede utilizar para identificar Galinsoga parviflora. Etanol et al. [32] establecieron la huella digital del extracto de etanol de Acacia catechu (L. f.) Willd. Mediante HPTLC se realizó una evaluación cuantitativa simple y rápida de rutina y quercetina en el extracto. Agatonovic-Kustrin et al. [33] utilizaron HPTLC para analizar cuantitativamente apigenina, Matricaria y bisabolol en los extractos de hojas y flores de Pyrethrum parthenium (L.) Smith, Matricaria chamomilla L. y Calendula officinalis L., y lo combinaron con el método DPPH para comparar el antioxidante. capacidad de estos componentes. Este método es simple, rápido, confiable y económico, y también puede usarse para detectar la actividad antioxidante de extractos de plantas.

1.3.2 Método HPLC La HPLC es un método analítico universal para detectar diversos componentes químicos en la medicina tradicional china.

Se utiliza ampliamente en la detección de componentes químicos en la medicina tradicional china debido a sus ventajas de alta presión, alta sensibilidad, alta eficiencia y automatización [34]. El detector UV, el detector de matriz de diodos (DAD), el detector electroquímico, el detector de luz evaporativa, etc. que se pueden conectar a él, muestran su superioridad irremplazable.

Qiao y cols. [35] utilizaron cromatografía líquida bidimensional integral de fase reversa × fase reversa (RP × RP 2DLC) para separar los compuestos fenólicos obtenidos mediante la extracción con acetato de etilo del regaliz Glycyrrhiza uralensis Fisch.

Se detectaron 311 compuestos en 40 minutos, y las estructuras de 21 compuestos desconocidos se caracterizaron preliminarmente mediante espectrometría de masas, y 8 de ellos se encontraron en regaliz por primera vez. Los resultados mostraron que el sistema RP×RP2DLC/MS tiene un buen efecto en la separación de extractos complejos de medicina tradicional china y el análisis cualitativo de productos naturales. Peng Liang et al. [36] analizaron los componentes flavonoides de 10 lotes de Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino estableció la huella digital mediante HPLC de Gynostemma pentaphyllum y calibró 11 picos característicos comunes. Los resultados del análisis de similitud mostraron que la similitud más alta de los 10 lotes de huellas dactilares de Gynostemma pentaphyllum en relación con el espectro de referencia fue 0,989, y la más baja fue 0,128, lo que indica que los componentes flavonoides de Gynostemma pentaphyllum de diferentes orígenes eran similares en tipo, pero tenían diferencias significativas en el contenido. Sol y cols. [37] utilizaron el método HPLC-DAD para analizar la similitud de los componentes químicos de Bupleurum chinense DC. y B. scorzonerifolium Willd. Por primera vez, descubrieron que los dos tenían 12 picos de flavonoides comunes y 4 picos de saponina, respectivamente, y al mismo tiempo, cada uno tenía 6 picos de flavonoides únicos y 5 picos de saponina, respectivamente. Los resultados mostraron que este método puede reflejar de manera razonable y efectiva la diferencia en los componentes químicos entre Bupleurum y Bupleurum chinense. La correlación entre los dos es pobre. Por tanto, Bupleurum chinense debe utilizarse con precaución en la práctica clínica. Él y otros. [38] analizaron cuantitativamente 10 tipos de ácido gálico bioactivo, ácido clorogénico, cafeína y catequinas contenidos en 10 lotes de té verde Ziyang. La huella digital HPLC desarrollada fue simple y confiable. Li y col. [39] establecieron la huella digital HPLC de la cáscara de granada. Seleccionaron 15 picos característicos y evaluaron la similitud de 10 lotes de cáscara de granada en 0,968. También separaron y analizaron cuantitativamente la punicalagina, el ácido gálico, la catequina, el ácido clorogénico, el ácido cafeico, la epicatequina, la rutina y el ácido elágico que contiene, proporcionando un método confiable y eficaz para identificar la autenticidad y el control de calidad de la cáscara de granada. Sumathy et al. [1] utilizaron HPLC combinada con HPTLC y cromatografía de gases-espectrometría de masas (GC-MS) para determinar la composición química del extracto metanólico de Ixora chinensis Lam. El análisis por HPLC mostró la presencia de bioquina A, miricetina, quercetina, rutina, daidzeína y formononetina; se encontró ácido ursólico en la huella digital HPTLC; Se encontraron 24 componentes fitoquímicos mediante GC-MS; Este método combinado cualitativo y cuantitativo puede evaluar fácilmente la calidad y estabilidad de Ixora chinensis Lam. Ge et al. [40] establecieron la huella digital UHPLC-DAD de Radix Angelicae Pubescentis, analizaron cuantitativamente las cumarinas y ácidos fenólicos contenidos en Radix Angelicae Pubescentis e identificaron cualitativamente sus ingredientes activos mediante espectrometría de masas de tiempo de vuelo de cuadrupolo (Q-TOF-MS). Encontraron 9 ácidos fenólicos, 30 cumarinas y 41 compuestos de mirra y adenosina. Combinaron el método de análisis discriminante para distinguir de forma eficaz y rápida 32 lotes de Radix Angelicae Pubescentis de diferentes provincias. Este método proporciona una nueva idea para el control de calidad de Radix Angelicae Pubescentis.

LISTA DE ESPECIFICACIONES DE CISTANCHE

Yang et al. [41] utilizaron un detector DAD de cromatografía líquida de rendimiento ultra alto (UPLC) y tecnología ESI-MS para obtener la huella digital de HPLC y la huella digital de espectrometría de masas de las tabletas Xiaoyanlidan, respectivamente. Analizaron 113 muestras de tabletas Xiaoyanlidan y obtuvieron 39 picos, de los cuales 26 eran de Quassia, 9 de Andrographis paniculata y 4 de Rhizoma Cynoglossi. Utilizando los métodos quimiométricos de similitud y PCA, determinaron que los cinco componentes importantes eran 4-metoxi-5-hidroxiferrocefalostomona, andrographolide, deshidroandrographolide, neoandrographolide y ácido rosmarínico. Establecieron una huella digital sistemática y completa para mejorar y evaluar la calidad de las tabletas Xiaoyanlidan. Fan et al. [42] establecieron huellas dactilares por HPLC y UPLC de glucósidos flavonoides en Lophatherum gracile Brongn., y aislaron un nuevo flavonoide C-glucósido luteolina 6-C- -D-ácido glucurónico-(1→2){{19 }}D-piranoglucósido por primera vez. También descubrieron por primera vez los isómeros ópticos de dos compuestos, el flavonoide flavonoide y el flavonoide hidroxiflavonoide. Utilizaron resonancia magnética nuclear unidimensional y bidimensional y espectrometría de masas para distinguir y determinar sus estructuras, proporcionando un nuevo método para el control de calidad de Lophatherum gracile Brongn. Tshibangu et al. [43] utilizaron HPLC-DAD combinado con cromatografía en capa fina, resonancia magnética nuclear y espectrometría de masas para separar eficazmente los principales compuestos biflavonoides GB1, GB2, GB-1a y flavonoides de Garcinia kola Linn., y confirmaron sus estructuras. , que puede utilizarse como método de análisis de rutina para preparaciones farmacéuticas. Zhao y cols. [44] establecieron la huella digital HPLC-UV-MS de Andrographis paniculata (Burm. f.) Nees, determinaron cuantitativamente la andrographolide y la deshidroandrographolide contenidas en Andrographis paniculata y evaluaron las diferencias de 10 lotes de Andrographis paniculata combinando análisis de similitud y PCA. Este método proporciona una base para el control de calidad de Andrographis paniculata.

Ahmed y cols. [45] utilizaron HPLC para obtener la huella digital de la resina Bhandari de Commiphora wightii (Arn.) y analizaron cuantitativamente la trans y cis-esterolona que contenía. Al mismo tiempo, este método puede distinguir eficazmente 22 lotes de resina de Commiphora wightii y 9 lotes de resina adulterada, lo que puede usarse como método para identificar la autenticidad de la resina de Commiphora wightii.

2 huellas biológicas

Las huellas dactilares biológicas son el uso de métodos de análisis de secuencias genéticas a nivel molecular para distinguir y clasificar la distribución geográfica y los cambios en los materiales medicinales chinos, incluidas las huellas dactilares genómicas, las huellas proteómicas[60] y las huellas dactilares de ADN[61]. En la actualidad, hay menos estudios sobre las huellas biológicas de las medicinas chinas que sobre las huellas químicas. Los métodos más utilizados son la electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE), la tecnología de marcadores moleculares de ADN polimórfico amplificado aleatorio (RAPD) y la reacción en cadena de la polimerasa.

(PCR) y otros métodos.

Liu Li y otros[62] utilizaron marcadores RAPD, combinados con PCR y análisis de conglomerados, para identificar eficazmente Panax notoginseng (Burk.) f. H. Chen, Panax ginseng CA Mey. y ginseng americano Panaxquinquefolium L. Fan Wei et al. [63] establecieron por primera vez la huella digital de la proteína SDS-PAGE de Eupolyphaga sinensis Walker, Bombyx mori Linnaeus y Scolopendra mutilans L. Koch, proporcionando un método confiable y eficaz para la identificación de estos tres materiales medicinales. Wei Yicong et al. [64] diseñaron cebadores específicos de sitio dual y construyeron una PCR múltiple La identificación rápida de dos materiales medicinales, Houttuynia cordata Thunb. Y Gymnotheca chinensis Decne., puede identificar simultáneamente ambas especies positivamente y determinar si están mezcladas. Wang Fu et al. [65] utilizaron la secuencia ITS2 (espaciador interno transcrito 2) como código de barras de ADN para identificar con precisión la medicina china, Zanthoxylumbungeanum Maxim. Y su especia Zanthoxylumbungeanum Maxim., proporcionando una base para la identificación de la medicina china Zanthoxylumbungeanum y su especia Zanthoxylumbungeanum.