Cistanche protege el hígado de los daños causados ​​por el consumo excesivo de alcohol

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Efecto protector de los glucósidos totales de Cistanche sobre la lesión hepática alcohólica en ratones

Luo Huiying, Liu Yuan, Xi Guozhu, Du Jiande

Departamento de Farmacología, Facultad de Medicina Tradicional China de Gansu, Lanzhou 730000, Gansu

Sociedad Farmacológica China de Farmacología Clínica y Terapéutica China

Resumen

Objetivo: Estudiar laefecto protector de los glucósidos totales de Cistanche sobre daño hepático alcohólicoen ratones. Métodos: 40 ratones Kunming se dividieron aleatoriamente en grupo en blanco, grupo modelo,Cistanche Glucósidos Totalesgrupo de dosis baja (50 mg/kg) y grupo de dosis alta (100 mg/kg). Administración intragástrica continua durante 4 semanas,Cistanche Glucósidos Totales2 veces al día y alcohol 1 vez al día. Una vez que se alcanza el límite de tiempo, se pesan los ratones, se extrae sangre de la vena orbital (arteria) y se extrae suero para evaluar los índices de función hepática; se toma el hígado y se pesa para calcular el índice hepático; se corta una cantidad adecuada de hígado. Se preparó el homogeneizado y el kit detectó los indicadores bioquímicos pertinentes; el hígado restante se fijó con formaldehído al 10 por ciento para el examen patológico. Resultados: Despuésdaño hepático por alcoholen ratones, el índice hepático y el índice de función hepática aumentaron significativamente (P<0.05); the="" contents="" of="" tg,="" tc,="" malondialdehyde="" (mda),="" and="" lipid="" peroxide="" (lpo)="" in="" liver="" tissue="" were="" significantly="" higher="" than="" those="" of="" blank="" group="" (p=""><0.05); superoxide="" dismutase="" (sod),="" glutathione="" reductase="" (gsh-px),="" catalase="" (cat)="" activities="" were="" significantly="" reduced="" (p=""><0.05); pathological="" examination="" found="" liver="" tissue="" inflammatory="" infiltration="" and="" fatty="" vacuoles="" appear.="">Cistanche Glucósidos Totalespuede mejorar significativamente estos fenómenos, manifestados por la reducción del índice hepático y el índice de función hepática (P<0.05), reducing="" the="" content="" of="" tg,="" tc,="" mda,="" and="" lpo="" in="" liver="" tissue=""><0.05), and="" enhancing="" sod,="" gsh-px="" and="" cat="" activity="" (p=""><0.05), reduce="" the="" inflammatory="" infiltration="" of="" liver="" tissue="" and="" the="" production="" of="" fatty="" vacuoles.="" among="" them,="" the="" effect="" of="" high-dose="" cistanche="" total="" glycosides="" is="" more="" obvious.="" conclusion:="" cistanche="" total="" glycosides="" may="" reduce="" the="" generation="" of="" free="" radicals="" and="" enhance="" the="" ability="" to="" scavenge="" free="" radicals="" and="" their="" metabolites,="" thereby="" inhibiting="" lipid="" peroxidation="" and="" playing="" a="" protective="" role="" against="" alcoholic="" liver="">

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Palabras clave: Cistanche, Cistanche Total Glucósidos; lesión hepática alcohólica; Función del hígado; Peroxidación lipídica

Daño hepático alcohólicose refiere a las enfermedades hepáticas causadas por el consumo excesivo de alcohol durante mucho tiempo o por bebidas que contienen alcohol, incluida la enfermedad hepática alcohólica leve, el hígado graso alcohólico, la hepatitis alcohólica, la fibrosis hepática alcohólica y la cirrosis hepática alcohólica. En los últimos años, con la mejora del nivel de vida de las personas, el alcoholismo ha aumentado y el consumo mundial de alcohol ha aumentado rápidamente, acompañado de un aumento de diversas enfermedades relacionadas con el alcohol. La lesión hepática alcohólica es uno de los problemas importantes. Los estudios han demostrado queLos glucósidos de Cistanche pueden mejorar la función inmunológica del cuerpo, antienvejecimiento, antiradiación, antioxidación, antiperoxidación lipídica y efecto protector sobre el daño hepático alcohólico."4]. Las sustancias son las principales sustancias activas de la tierra de siena. Este experimento explorará preliminarmente el efecto protector de las sirenas en los alcohólicos experimentales.daño hepáticoen ratones.

1 Material y métodos

1.1 Fármacos y reactivosGlucósidos totales deCistanche, polvo marrón oscuro, obtenido por la Escuela de Farmacia de la Universidad de Lanzhou según el método de la literatura japonesa [Publicación de Patente Pública (A) Zhao 63-198627], extraído de la carne del desierto, que contiene 88,6 por ciento de alcohol fenetílico total. Disolver en agua bidestilada y diluir a la concentración requerida; NS, 50 por ciento de alcohol, proporcionado por el Centro Experimental de la Facultad de Medicina Tradicional China de Gansu; Los kits de prueba relacionados se compraron del Nanjing Jiancheng Institute of Bioengineering, los números de lote son: malondialdehído (MDA, 20091724), peróxido de lípidos (LPO, 20090132), superóxido dismutasa (SOD, 20096021), glutatión reductasa (GSH-Px, 20097712) , catalasa (CAT, 20092130) o

1.2 Animales e instrumentos principales 40 ratones Kunming, mitad macho y mitad macho, con un peso de 18 ~ 22 g, proporcionados por el Centro de Animales de la Facultad de Medicina de la Universidad de Lanzhou, certificado de animales: 21-223O Los principales instrumentos son SFY{{6 }} detector bioquímico automático (Tianjin Jinbeier Technology Co., Ltd.), espectrofotómetro de luz visible 721 (Shanghai Tingzheng Instrument Technology Co., Ltd.), etc.

1.3 Agrupación de animales y administración Los ratones se dividieron aleatoriamente en 4 grupos, a saber: grupo en blanco (NS equivalente más NS igual), grupo modelo (NS equivalente más alcohol al 50 por ciento 10 mUkg), grupo de dosis baja (Cistanche Glucósido50 mg/kg más 50 por ciento de alcohol 10 mUkg), grupo de dosis alta (100 mg/kg 50 por ciento de alcohol 10 mUkg), administración intragástrica,Cistanche glucósidosdos veces al día, alcohol una vez al día, 4 semanas consecutivas.

1.4 Toma de muestra de tejido A las 4 horas de la última administración, se extrajo sangre del plexo venoso orbitario, se separó el suero por centrifugación y se detectó el índice de función hepática mediante un analizador bioquímico automático; se extrajo el hígado, se pesó y se calculó el índice hepático; corte una cantidad adecuada de hígado y colóquelo en fisiológico Prepare el homogeneizado en solución salina, centrifugue a 800 r/min durante 5 min, tome el sobrenadante y detecte el contenido de MDA, LPO y la actividad de SOD.GSH-Px. CAT por colorimetría; el hígado restante se fija con formaldehído al 10 por ciento para el examen patológico.

1.5 Procesamiento estadístico Los datos experimentales se procesaron con el software SPSS 10.0. Se expresa como media ± desviación estándar (G±s), y la comparación entre grupos se realiza mediante la prueba t. PAGS<0.05 indicates="" that="" the="" difference="" is="" statistically="">

2 resultados

2.1 El efecto de los glucósidos totales de Cistanche en el índice hepático y los índices de función hepática de ratones con lesión hepática inducida por alcohol Después de la lesión por alcohol, el índice hepático, ALT, AST y la fosfatasa alcalina (ALP) de los ratones aumentaron significativamente (P<0.05), suggesting="" hepatocytes="" damaged,="" the="" related="" indexes="" of="" the="" cistanche="" glycosides="" administration="" group="" were="" significantly="" reduced,="" and="" the="" effect="" of="" the="" high-dose="" group="" was="" more="" obvious,="" see="" table="">

Tabla 1 El efecto de los glucósidos totales de Cistanche sobre el índice hepático y los índices de función hepática de ratones con lesión hepática por alcohol (x±s, »= 10)

2.2 Los efectos de los glucósidos totales de Cistanche sobre TG y TC en los tejidos hepáticos de ratones con lesión hepática alcohólica fueron significativamente menores que los del grupo modelo (P<0.05), among="" which="" the="" major="" effect="" of="" tg="" and="" tc="" content="" is="" more="" obvious="" in="" the="" liver="" tg="" dose="" group="" after="" alcohol="" injury="" in="" mice=""><>

Tabla 2 El efecto de Cistanche Total Glycosides sobre TG y TC en tejido hepático de ratones con daño hepático por alcohol (x±s, «= 10)

2.3 El efecto de los glucósidos totales de Cistanche sobre los contenidos de MDA y LPO y las actividades de SOD, GSH-Px y CAT en los tejidos hepáticos de ratones con daño hepático alcohólico. ); La actividad de SOD.GSH-Px.CAT se redujo significativamente<0.05); sod.="" gsh-px="" and="" cat="" activities="" were="" enhanced="" in="" all="" administration="" groups="" (f=""><>

Tabla 3 Efecto de los glucósidos totales de Cistanche sobre el contenido de MDA.LPO y las actividades de SOD, GSH-Px y CAT en los tejidos hepáticos de ratones con lesión hepática alcohólica (Ran ± s, n=10)

2.4 El efecto de los glucósidos totales de Cistanche en los cambios patológicos hepáticos en ratones con daño hepático alcohólico.

Efectos químicos Como puede verse en la Figura 1, el tejido hepático de ratón normal tiene límites claros de hepatocitos, morfología celular completa y ordenada (A). La degeneración grasa puede verse por el alcohol, pero la infiltración inflamatoria sigue siendo evidente (C). Todos estos cambios patológicos mejoraron básicamente en el grupo de dosis alta.

Después de la lesión de los espermatozoides, las células del hígado ya no están completas y tienen un tamaño desigual y las células

Se manifiesta como infiltración inflamatoria reducida y límites celulares claros.

3 Discusión

Desde el estudio en profundidad de la patogénesis de la enfermedad hepática alcohólica (ALD) en la década de 1980, se ha confirmado que el etanol tiene hepatotoxicidad directa. Los metabolitos tóxicos producidos por el metabolismo del etanol en las células hepáticas y los trastornos metabólicos provocados son las principales causas dedaño hepático alcohólico. Además, el efecto dañino de los radicales libres, el mecanismo de apoptosis, los mediadores inflamatorios y el papel de las citocinas, así como la desnutrición, la deficiencia de colina, etc. se consideran la causa principal de ALD (6).

ALT, AST y ALP existen principalmente en el citoplasma de las células hepáticas. Cuando el hígado está sustancialmente dañado, la transaminasa intracelular ingresa a la sangre y aumenta la actividad sérica [7-8'131, por lo que la transaminasa es un signo sensible del daño de las células hepáticas. En este experimento, el índice hepático y los índices de función hepática (ALT, AST, ALP) de los ratones aumentaron después de la lesión por alcohol y se produjeron diferentes grados de cambios patológicos al mismo tiempo.Cistanche Glucósidos Totalespuede reducir el índice hepático y los índices de función hepática, el daño patológico hepático causado por él tiene un mejor efecto de alivio, lo que sugiere el efecto protector del extracto total de las extremidades de carne en experimentosdaño hepático alcohólico.

El daño del etanol al hígado proviene principalmente de dos partes. Uno es el impacto directo del etanol en el hígado: el etanol daña directamente los tejidos y las células, y el etanol puede convertir 2 moléculas de coenzimas oxidadas de NADU en NADH durante el metabolismo hepático. Trabajo reducido de coenzimas), obviamente cambia la proporción de NADH/DAD, cambia el estado redox de las células y tiene una amplia gama de efectos sobre la síntesis de glucosa, el metabolismo de los lípidos y la secreción de proteínas. El segundo es la toxicidad del metabolito de etanol acetaldehído para el hígado: reduce la capacidad del hígado para oxidar ácidos grasos; dañar las mitocondrias e inhibir el ciclo ácido; afectando el sistema de microtúbulos del hígado y el páncreas, reduciendo la secreción de microproteínas, causando lípidos y proteínas en el hígado Deposición en la célula; combinado con la membrana celular, cambiando su permeabilidad y fluidez, lo que resulta en daño a las células hepáticas. Además, el alcohol pasa a través del citocromo P450HE (KCYP2EI) en las células hepáticas y se oxida con la participación de iones de hierro, produciendo un exceso de productos de estrés de oxígeno, como OH"'02-, H2O2 y otros radicales libres. Estos radicales libres Los radicales pueden dañar directamente. Las células del hígado pueden activar la fosfolipasa y la peroxidación de lípidos, reducir el contenido de fosfolípidos de la membrana, cambiar su permeabilidad y fluidez, cambiando así el microambiente de las enzimas unidas a la membrana, los receptores y los canales iónicos hasta que afecte sus funciones: {{7 }}Tian. En los últimos años, los estudios han encontrado que el acetaldehído puede movilizar los ácidos grasos subcutáneos para transferirlos al hígado, lo que da como resultado un aumento en el contenido de TG en el hígado y la formación gradual de hígado graso; la LPO puede reflejar la velocidad y la intensidad de peroxidación lipídica en el cuerpo. MDA es peroxidación lipídica. Metabolitos oxidados, por lo que la determinación del contenido de MDA, TG, TC a menudo puede reflejar el grado de peroxidación lipídica i n el cuerpo. GSH-Px.SOD y CAT son enzimas importantes para que el cuerpo elimine los radicales libres y también son la clave para el sistema de defensa biológico. Las enzimas juegan un papel importante en lalucha contra alcohólico daño hepático. ⑻ En este experimento, el contenido de MDA, LPO, TG, TC en el tejido hepático de ratones en el grupo modelo, el grupo de dosis alta y el grupo de dosis baja aumentó después de la lesión por alcohol Explica los diferentes grados de radicales libres en el daño hepático, especialmente el grupo modelo;Cistanche Glucósidos Totalespuede reducir el contenido de TG, TC, MDA y LPO en el tejido hepático de los ratones; mejorar la actividad de SOD, GSH-Px.CAT y reducir eficazmente los radicales libres La producción de alcohol puede reducir el daño por peroxidación de lípidos, a fin de lograr el efecto protector del daño del alcohol en el tejido hepático.

Referencias

[1]Quanbo X, Shigetoshi K, Tadao T, et al. Efectos antioxidantes de los feniletanoides deCistanche desertica[J]. Biol Phann Bull, 1996, 19(12):1580-1585.

[2]liwei L, Mingtsuen H, Fanhsiu T, et al. Actividad antinociceptiva y antiinflamatoria causada porCistanchedeserticola en roedores[j]. J Ethnopharmacol, 2002, 83(3): 177 -182.

[3]Quanbo X, Yasuhiro T, Takuji K, et al. Inhibición del óxido nítrico por feniletanoides en macrófagos activados [j]. Eur J Pharmacol, 2000, 400(1): 137-144.

[4] Adam M. Cultivo in vitro de plantas para la producción de antioxidantes [j]. Avances biotecnológicos, 2008, 26(6): 548-560.

[5]Paula LH, Takeshi Y, Boris T, et al. Modelos transgénicos y genéticos "Knockout" en la investigación del alcohol]j]. Alcoholismo: Clin Exp Res, 2006, 25(1):60-66.

[6]Yongke L, Arthur IC. CYP2E1 y oxidativodaño hepáticopor alcohol[j]. Free Radical Bio Med, 2008, 44(5): 723-738.