Estudio comparativo de la prueba de límite microbiano y los criterios de las piezas de decocción de TCM entre la farmacopea de los Estados Unidos, la farmacopea europea, la farmacopea japonesa y la farmacopea china

ABSTRACTO

OBJETIVO:Para comparar la diferencia de prueba de límite microbiológico y criterios deDecocción TCMPiezas entre 43 edición de los Estados Unidos Pharmacopeia (USP43), 1 0. 0 edición de la farmacopea europea (ep1 0. 0), 17 edición de la farmacopeia japonesa (jp17) y 2 {}}} 2}}}}}}}}}}}} Pharmacopeia (CHP2020), y para proporcionar una referencia para la revisión y mejora de los estándares microbiológicos para piezas de decocción TCM en China. Métodos: Las diferencias en el método de las pruebas de enumeración microbiana (incluido el muestreo y la preparación de la muestra, la selección de bacterias y el medio de cultivo, el recuento de microorganismos y las bacterias resistentes al calor, etc.), las pruebas para microorganismos especificados (incluidos el pretratamiento de muestras, enriquecimiento, separación e identificación, etc.) y los criterios limitados microbianos se comparan entre los criterios usp173. y CHP2020. Resultados y conclusiones: en términos de examen microbiológico de piezas de decocción TCM, USP43, EP10.0, JP17 tenía sus propias disposiciones independientes. CHP2020 agregó "Regla general 1108". En términos de elementos de inspección, además del recuento total de bacterias aeróbicas y el recuento total de levaduras y moldes combinados, CHP2020 y EP10.0 proporcionaron tres métodos para la inspección de bacterias de control (bacterias gramnegativas resistentes a la biliar, Escherichia coli, Salmonella). Sobre la base, JP17 complementó la prueba de Staphylococcus aureus; sin embargo, USP43 agregó el método de prueba de Clostridium y presentó el concepto de evaluación de riesgos de microorganismos objetables; CHP2020 también agregó un nuevo método para contar las bacterias resistentes al calor. En términos de criterios de límite microbiano, USP43 fue el más detallado en la clasificación de piezas de decocción TCM, que fue más estricta que EP10.0 y JP17; CHP2020 no había establecido un límite unificado para la inspección de las bacterias de control de las piezas de decocción TCM. CHP2020 revisó el "Estándar del límite microbiano para extractos TCM y piezas de decocción TCM", pero no fue perfecto en comparación con la farmacopea de los Estados Unidos, Europa y Japón. Se sugiere que, de acuerdo con la situación actual de contaminación microbiana y el control de las piezas de decocción de TCM, la prueba de límite microbiano y los criterios de los productos relacionados con TCM en la farmacopeo deben mejorarse gradualmente, y el nivel límite microbiano de los productos correspondientes debe refinarse razonablemente.

Palabras clavePieza de decocción TCM;Farmacopea; Prueba de límite microbiano; criterios límite; estudio comparativo

Medicamentos a base de hierbas chinasson productos que se pueden usar directamente en la práctica clínica TCM después del procesamiento de medicamentos herbales chinos. La mayoría de ellos se derivan de plantas naturales, animales o minerales y generalmente llevan una gran cantidad de microorganismos [1-2]. El proceso de procesamiento de la mayoría de los medicamentos herbales chinos es simple (como la limpieza, freír, etc.), y la esterilización es incompleta, lo que conduce a los microorganismos patógenos residuales [3-4]. Además, durante el transporte y el almacenamiento, el contacto con operadores y entornos externos no claros también aumenta la posibilidad de que los medicamentos herbales chinos estén contaminados por microorganismos patógenos, afectando así su seguridad [5]. La contaminación microbiana de los medicamentos herbales chinos no ha recibido suficiente atención, y hay una falta de investigación sobre los cambios en las poblaciones microbianas durante su procesamiento, lo que ha llevado a la falta de evaluación de seguridad microbiana de los medicamentos herbales chinos. Muchos microorganismos patógenos potenciales (como bacterias resistentes al calor y toxinas bacterianas) no han sido controlados de manera efectiva, lo que aumenta el riesgo de pacientes inmunocomprometidos que usan medicamentos herbales chinos [6]. Aunque la edición 2015 de la farmacopea china (Volumen 1) incluye una variedad de métodos de identificación e inspección para el análisis de las propiedades físicas y químicas de los medicamentos herbales chinos, los métodos de inspección específicos y los estándares limitados para microorganismos relacionados han faltado durante mucho tiempo. Al mismo tiempo, en las reglas generales de la edición de 2015 de la farmacopea china (volumen 4), a excepción de los medicamentos herbales chinos que se importan directamente, no se especifican artículos de inspección microbiana para otras formas de medicamentos herbales chinos [7].

COA de una medicina china de la compañía de biotecnología de China

Haga clic en la imagen de arriba para obtener más detalles

Medicina chinase llamamedicina herbalEn Europa, la medicina cruda en Japón y los suplementos nutricionales en los Estados Unidos.

Aunque su concepto no es exactamente el mismo que el de los medicamentos herbales chinos en mi país [{{0}}]], la farmacopea europea 1 0. 0 (ep10.0) [10], la farmacopea japonesa 17 (JP17) [11] y los Estados Unidos Pharmacopoe 43 (USP43), USP43 (12. Incluya métodos de inspección microbiana y estándares limitados para productos relacionados (medicamentos herbales, medicamentos crudos o suplementos nutricionales). La edición 2020 de la farmacopea china (CHP2020) (Volumen 4) [13] agregó el "Método de prueba de límite microbiano para piezas de medicina herbal china" (regla general 1108), pero los estándares de límite microbiano relevantes aún están incompletas, y no existe una regulación unificada y clara en los estándares de límites microbianos para las piezas de medicina herbal china tipo decocción. Este documento compara las diferencias entre USP43, EP10.0, JP17 y CHP2020 en términos de métodos de prueba microbiana y estándares límite para piezas de medicina herbal china, comprende la dirección de revisión de los estándares microbianos para las piezas de medicina herbal china, y discute la necesidad de establecer limitaciones microbianas para los controles de la medicina herbal china de acuerdo con sus niveles de riesgo, en el fin de proporcionar una referencia para la revisión y la mejora de los estados relevantes de los controles microbianos de las piezas de los microbianos de la herbal. piezas de medicina.

1 conteos microbianos de medicamentos herbales chinos

Después de comparar los métodos de prueba microbianos relacionados con los medicamentos herbales chinos en EP1 0. 0, JP17, USP43 y CHP2020, el autor descubrió que, aunque las tres primeras farmacopeías han estado internacionalmente coordinadas e integradas en las pruebas microbianas de los productos no estériles, los tres tienen sus tres capítulos independientes en la inspección de la Inspección de la Inspección de la Inspección de la Inspección de la Inspección de la Inspección de la Inspección de la Inspección de la Inspección de la Inspección de la Inspección de la Inspección de Microor Medicamentos, como EP10.0 "2.6.12" y "2.6.31", JP17 "5.02", USP43 "2021" y "2022", mientras que CHP2020 ha agregado "Principio general 1108" para la detección de microorganismos en medicamentos herbales chinos. En términos de elementos de prueba, las cuatro farmacopeías especifican los métodos de inspección para el recuento microbiano aeróbico total (TAMC) y el recuento total de levaduras y moldes combinados (TYMC). Las principales diferencias se reflejan en el muestreo y el muestreo, las especies bacterianas y el medio de cultivo, y los métodos de conteo microbiano. Consulte la Tabla 1 para más detalles.

1.1 Muestreo y muestreo

Los medicamentos herbales chinos son de varios tipos, con diferentes formas, texturas y tamaños. Además, la contaminación microbiana es desigual, por lo que la representatividad del muestreo e inspección es crucial [14]. Las cuatro farmacopeo tienen diferencias obvias en las disposiciones de "muestreo y muestreo". Entre ellos, Ep1 0. 0 "2.6.12" [10] y USP43 "2021" [12] tienen los mismos requisitos para el muestreo de medicamentos herbales chinos que los medicamentos químicos, con un volumen de muestreo de 10 g o 10 ml. JP17 "5.02" [11] estipula cuatro métodos de muestreo para medicamentos herbales chinos: (1) para muestras de volumen pequeño o en polvo, tome 50-250 g de muestra y mezcle; (2) Para muestras de gran volumen, tome 250-500 g de muestra y mezclelo y píjalo; (3) Para muestras individuales de no menos de 100 g, tome al menos 5 o 500 g, píjalo y mezcle; (4) Para muestras en forma de soluciones o preparaciones, mezclelas y tome muestras directamente. Tome 10 g o 10 ml de la muestra mixta como la muestra para la inspección. ChP2020 "General Rule 1108" [13] states that "unless otherwise specified, test samples shall be drawn in accordance with the method for sampling medicinal materials and decoction pieces ('General Rule 0211'). For large-packaged decoction pieces, 100 to 500 g of samples shall be drawn from each batch and mixed; for independent small-packaged decoction pieces, 100 to 500 g of samples shall be drawn from each package according to the El volumen de envasado;

Huella digital de una medicina china de la compañía de biotecnología de China

1.2 Selección de cepas y medios de cultivo

In terms of strain selection, USP43 lists five microorganisms including Staphylococcus aureus ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 8739, Bacillus subtilis ATCC 6633, Candida albicans ATCC 10231 and Aspergillus brasiliensis ATCC16404 for culture media suitability and method suitability testing [12]. EP10.0 y JP17 reemplazaron a Escherichia coli con Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, y dieron las cepas mencionadas anteriormente los números de tensión equivalentes de las colecciones nacionales de bacterias industriales, alimentarias y marinas (NCIMB), la colección de la colección de Pasteur del Instituto (CIP) y el Centro de Recursos Biológicos de Nite (NBRC). Esta disposición es consistente con la propuesta de coordinación del Consejo Internacional para la Armonización (ICH) [10-11].
Las cepas de CHP2 0 20 son las mismas que las de EP10.0 y JP17, pero solo se permiten cepas CMCC [13].
En términos de la selección de medios culturales, además de utilizar los medios de comunicación de cultivo de TSA y los medios de cultivo SDA como medios de cultivo de conteo convencionales, teniendo en cuenta que los medicamentos herbales chinos a menudo contienen una gran cantidad de sustancias insolubles y una alta probabilidad de contaminación bacteriana y hongal, los factores anteriores pueden afectar los resultados de contabilidad de TAMC y TYMC. JP17 también estipula que se puede agregar una cierta concentración de TTC a los medios de cultivo de TSA para distinguir colonias bacterianas y otras impurezas; Si el crecimiento fúngico afecta los resultados de contabilidad de TAMC de la muestra, se puede agregar anfotericina B a los medios de cultivo TSA para inhibir el crecimiento de los hongos; Si los hongos se propagan y crecen en los medios de cultivo SDA que contienen antibióticos, se puede agregar Rose Bengal para inhibir la propagación del fenómeno [11]. CHP2020 estipula que cuando el recuento de TYMC se ve afectado por el crecimiento bacteriano, se pueden usar medios de cultivo SDA que contienen antibióticos (como cloranfenicol, gentamicina) u otros medios de cultivo selectivos (como el medio de agar Bengala Rose Bengal) [13].
Sin embargo, ni USP43 ni EP1 0. 0 menciona explícitamente los requisitos relevantes.

1.3 Método de conteo microbiano

En términos de métodos de conteo microbiano, EP1 0. 0 y JP17 especifican cuatro métodos de conteo, a saber, el método de filtración de membrana, el método de conteo de placas (vertido, recubrimiento) y el método MPN [10-11]; USP43 no especifica el método de conteo de placas (vertido) [13], mientras que CHP2020 solo especifica el método de conteo de placas (vertido) [13]. Dado que el método MPN tiene baja precisión y es extremadamente poco confiable para el conteo de hongos, el método MPN solo es adecuado para situaciones en las que otros métodos de conteo no son aplicables, y solo se puede usar para el recuento de TAMC. En términos de aplicabilidad del método, se debe realizar una investigación de aplicabilidad del método antes de la prueba. USP43 requiere que la tasa de recuperación del recuento de bacterias aplicables sea superior al 70%[12], y las otras tres farmacopeías adoptan el requisito de un factor de recuperación de 2 [10-11, 13].
Los requisitos para la temperatura de cultivo del conteo TAMC y el conteo de TYMC son consistentes en cada farmacopea, pero las regulaciones sobre el tiempo de cultivo y el rango apropiado de conteo de colonias son ligeramente diferentes.

1.4 recuento de bacterias resistentes al calor

Los medicamentos herbales chinos generalmente se calientan antes del consumo. Aunque el calentamiento puede reducir la biológica de la muestra y reducir el riesgo de patogenicidad, el calentamiento no puede matar las bacterias resistentes al calor en las medicinas herbales chinas. También puede conducir fácilmente al deterioro del producto y la acumulación de biotoxinas. Por lo tanto, CHP2020 ha agregado un elemento de conteo de bacterias resistente al calor, que se define como "el término general para los microorganismos detectados por el método de conteo aeróbico total después de colocarse en un baño de agua (98-100} grado) durante 30 minutos" [13]. Este método está dirigido a medicamentos herbales chinos de tipo decocción y evalúa los microorganismos residuales en tales medicamentos herbales chinos después del tratamiento con calefacción; Las otras tres farmacopeo no incluyen métodos relevantes.