Efectos de los diferentes métodos de procesamiento sobre la calidad intrínseca y los caracteres de la cistanche

Objetivo: optimizar los métodos de procesamiento de Cistanche Cistanche y estudiar los efectos de diferentes métodos de procesamiento en la calidad intrínseca y las características de Cistanche Cistanche.

Métodos: Diferentes tratamientos previos al secado (sin rebanar y sin cocer al vapor, sin rebanar y cocer al vapor durante 20 min, rebanado fresco, cocido al vapor durante 5 min después de rebanar fresco) y métodos de secado (secado a 80, 70, 60, 50 grados, natural El contenido deechinacósido, verbascoside, cistanósido A, isovercuenca, 2′-acetilverbasósido, tuberosido Aypolisacáridoen la Cistanche se determinaron muestras que fueron secadas al sol, a la sombra y liofilizadas, y se utilizó la puntuación integral. El método de procesamiento deCistanchese optimizó por método, se determinó el sabor de las muestras mediante tecnología de lengua electrónica, se evaluó indirectamente la textura de las muestras mediante la tasa de rehidratación y el índice de dureza, y se estudió la correlación entre ellos y el contenido de los principales componentes químicos.

RESULTADOS: Se utilizó el método de puntuación integral para seleccionar el mejor método de procesamiento de Cistanche fresca, cocer al vapor durante 20 minutos y luego secar a 60 grados. El estudio de correlación encontró que el sabor, la textura y otros rasgos se correlacionaron con el contenido de algunos componentes en diversos grados. .

Conclusión: Para garantizar de manera efectiva la calidad deCistanche, es necesario seleccionar los métodos de procesamiento apropiados para el procesamiento en el origen, y la información del carácter, como el sabor y la textura, puede reflejar hasta cierto punto el contenido de ingrediente activo del material medicinal, lo que es conveniente para la identificación rápida de la calidad del material medicinal.

Palabras claveCistanche; procesamiento de origen; glucósidos de feniletanol (Phg); polisacáridos; lengua electrónica; caracteres

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LibreMuestra de polvo de extracto de cistanche 

Cistanchees el tallo seco y escamoso deCistanche DeserticaYC Ma oCistanche Tubulosa(Schenk) Wight, que tiene las funciones de vigorizar el yang del riñón,esencia nutritiva y sangre, humectante intestinal y laxante [1].

el procesamiento deCistanchese practica desde la antigüedad. En "Zhenglei Materia Medica", hay un registro de "recolección el 5 de mayo y secado a la sombra". Los métodos de procesamiento actuales incluyen el secado, la salazón y el almacenamiento en bodega. Debido al gran volumen deCistanche, alto contenido de azúcar y dificultad en el secado, el método anterior no solo es lento, laborioso y fácilmente afectado por las condiciones naturales, sino que también con el paso del tiempo y la hidratación secundaria, los ingredientes activos se pierden fácilmente, afectando la calidad de materiales medicinales [2].

Con el fin de garantizar la alta calidad y uniformidad de los materiales medicinales deCistanche, es necesario optimizar los métodos de procesamiento de su origen, para estandarizarlo y estandarizarlo. Con base en la experiencia de los granjeros medicinales en el área de producción y los informes de investigación de académicos relacionados sobre los métodos de procesamiento deCistancheen el área de producción en los últimos años [3-6], este experimento tomó como objeto de investigación el tallo carnoso de la Cistanche fresca para investigar el tratamiento previo al secado y los métodos de secado de la Cistanche, utilizando múltiples indicadores. Para evaluar la calidad deCistanchey optimizar el mejor método de procesamiento en el área de producción, tiene como objetivo proporcionar una base para la estandarización del procesamiento en el área de producción deCistanche, y proporcionar un nuevo método de referencia para la evaluación integral y el control general de la calidad del material medicinal deCistanche.

1 Instrumentos y materiales

1.1 Instrumentos

cromatógrafo de líquidos de alta resolución Agilent 1260 (Agilent Company, EE. UU.); espectrofotómetro UV UV6100S (Shanghai Meipuda Instrument Co., Ltd.); lengua electrónica ASTREE II (empresa France Alpha MOS); balanza analítica FA2004 (Shanghai Sunny Hengping) Scientific Instrument Co., Ltd.); Balanza analítica DV215CD (Ohaus Instrument Co., Ltd.); Probador de dureza digital GY-4 (Yueqing Aidelberg Instrument Co., Ltd.); Limpiador ultrasónico SB-3200DTN (Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., Ltd.).

1.2 Materiales

Echinacea (Lote: Y29M10H84490), Verbasin (Lote: Y21A9H59554), Cistanoside A (Lote: P14N9F74960), Isorrascoside (Lote: Y12D8H50507), 2′-Acetyl Verbasin (Lote: P27N6F6623), Tube Anthoside A (número de lote: P26N6F662) las sustancias se compraron a Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd., fracción de masa mayor o igual al 98 por ciento; sustancia de referencia de glucosa D-anhidra (número de lote: 110833-201707, Instituto Nacional de China para el Control de Alimentos y Medicamentos); acetonitrilo Es de grado cromatográfico; el resto de los reactivos son de grado analítico. El frescoCistanchepara el experimento se recolectó de lacultivo de cistanchebase de Hongkuisha Industrial Development Co., Ltd. de Inner Mongolia AlxaCistancheGrupo en octubre de 2019. Tallos suculentos con hojas escamosas. El cosechado frescoCistanchese mezcló uniformemente y se dividió aleatoriamente en grupos. Cada grupo de muestras se fijó para tener 3 repeticiones. Los métodos de tratamiento de muestras se muestran en la Tabla 1.

2 Métodos y resultados

2.1 Determinación de glucósidos de feniletanol

2.1.1 Condiciones cromatográficas: se utilizó la columna Agilent Eclipse XDB-C18 (250 mm×4,6 mm, 5 μm), la fase móvil fue 0solución de ácido fórmico al 1 % (A)-acetonitrilo (B), gradiente de elución (0 ~ 10 min, 9 por ciento ~ 15 por ciento B; 10 ~ 40 min, 15 por ciento ~ 26 por ciento B; 40 ~ 45 min, 26 por ciento ~ 9 por ciento B;

El caudal fue de 1.0 ml/min; la longitud de onda de detección fue de 330 nm; la temperatura de la columna era de 30 grados; el volumen de inyección fue de 10 μL y el cromatograma se muestra en la Figura 1.

2.1.2 Preparación de la solución de la sustancia de referencia: pesar con precisión una cantidad adecuada de equinacósido, verbacósido,cistanósido A, isoverbasin, 2′-acetylverbasin y tuberoside A, y colóquelo en 5 mL En un matraz volumétrico marrón, disuelva con 50 por ciento de metanol y diluya al volumen para preparar una solución de referencia con concentraciones de {{6} }.809, {{10}}.932, 0.185, 0.272, 0.582 y 0.068 mg/mL, respectivamente.

2.1.3 Preparación de la solución de prueba: Tomar 0.5 g deCistanche Tubulosamuestra de polvo (pasado a través de un tamiz No. 4), péselo con precisión, colóquelo en un matraz volumétrico marrón, agregue con precisión 25 ml de metanol al 50 por ciento, séllelo herméticamente y péselo. Después de 30 min de inmersión, ultrasonicación (150 W, 40 kHz) durante 40 min, dejar enfriar y luego completar el peso, agitar bien, dejar reposar, tomar el sobrenadante y filtrarlo con una membrana microporosa de 0,45 μm.

2.2 Determinación de polisacáridos

2.2.1 Preparación de la solución de la sustancia de referencia: tomar 10,03 mg de la sustancia de referencia D-anhidroglucosa, pesar con precisión, disolver en agua y diluir a 100 mL para obtener una solución de la sustancia de referencia con una concentración de 100,3 ug/mL.

2.2.2 Preparación de la solución de prueba: tomar 0.5 g de polvo de muestra de Cistanche Tubulosa (pasar por un tamiz No. 4), pesarlo con precisión, colocarlo en un matraz cónico tapado, agregar 25 mL de 80 por ciento de etanol y sonicar a 80 grados. (150 W, 40 kHz) durante 30 min, filtrado en caliente y extracción repetida una vez. Después de que el residuo del filtro se evaporara a sequedad, se añadieron 25 ml de agua y se sonicó durante 30 min. , Extraiga con precisión 1 mL de solución y dilúyala a 10 mL.

2.2.3 Condiciones de detección: tomar 2 mL de la solución de prueba deCistanche, agregue 1 mL de reactivo de fenol al 6 por ciento, agite bien, agregue rápidamente 5 mL de ácido sulfúrico concentrado, agite por 5 minutos, caliente en un baño de agua hirviendo por 15 minutos, enfríe y coloque a 482 grados. La absorbancia se midió a nm. Use agua en lugar de la solución de prueba como control en blanco.

2.3 Examen de la relación lineal Diluya la solución de referencia de acuerdo con una cierta proporción para preparar una solución de referencia mixta de una serie de concentraciones y mida de acuerdo con el método anterior. Tome la concentración de la solución de referencia como abscisa y el área del pico o absorbancia como ordenada. Regresión lineal, los resultados se muestran en la Tabla 2.

2.4 Investigación metodológica

2.4.1 Prueba de precisión:

Dibuje con precisión cada solución de referencia y mídala continuamente 6 veces de acuerdo con los métodos descritos en "2.1.1" y "2.2.3", y calcule para obtener echinacósido, verbascósido,cistanósido A, isaveraside, 2′ Las RSD de las áreas de pico de -Acetyl Verbasoside y Tuberoside A y la absorbancia de glucosa fueron 0.76 por ciento, 0.53 por ciento, 0.81 por ciento, 0.25 por ciento, {{10}}.44 por ciento, 0.62 por ciento, 0. . 49 por ciento, lo que indica que la precisión del instrumento es buena.

2.4.2 Prueba de repetibilidad:

Tome 6 copias del mismo lote deCistanchepara probar el polvo, pese con precisión, prepare la solución de prueba de acuerdo con los métodos descritos en "2.1.3" "2.2.2" y presione "2.1.1" "2.2". 2,3", las RSD calculadas de echinacósido, verbascósido, cistanosido A, isoverbasin, 2'-acetilverbasoside, tuberoside A y polisacárido fueron 0,82 %, respectivamente, 1,47 %, 0,88 % , 1,53 por ciento, 0,55 por ciento, 0,44 por ciento, 1,13 por ciento, lo que indica que el método tiene una buena repetibilidad.

2.4.3 Prueba de estabilidad:

Dibuje con precisión la solución de prueba deCistancheen el ítem "2.1.3", e inyectar muestras a las 0, 2, 4, 8, 12 y 24 h según las condiciones cromatográficas del ítem "2.1.1", y calcular las piñas. Las RSD de las áreas de los picos de glucósido de crisantemo, verbascósido, cistanosido A, isoverascosido, 2′-acetilverbasósido y tuberosido A fueron 0. 47 por ciento, 1. 12 por ciento, 0. 42 por ciento, {{20}}. 65, respectivamente. por ciento, 0.57 por ciento, 0,47 por ciento, lo que indica que la solución de prueba tiene buena estabilidad dentro de las 24 h; absorber con precisión la solución de prueba deCistancheen "2.2.2", presione "2.2.3" Las condiciones de detección bajo el elemento se midieron a 0, 15, 30, 60, 120 y 240 min respectivamente, y la RSD de la absorbancia del polisacárido se calculó en 1,24 por ciento, lo que indica que la solución de prueba era estable en 240 min.

2.4.4 Prueba de recuperación de muestras:

Tomar 6 partes deCistanchepara probar polvo con contenido de componente conocido, cada parte es 0.25 g, pesado con precisión, agregue

Agregar la solución de referencia con el contenido de cada componente en la muestra, preparar la solución de prueba de acuerdo con los métodos de "2.1.3" "2.2.2", y de acuerdo con "2.1.1" "2.2. Medido por el método de el ítem 3", y calculado para obtener Echinacea

24 por ciento, 1{{20}}2. 69 por ciento, 101. 13 por ciento , 101. 13 por ciento , 101. 13 por ciento , 101. 13 por ciento , 101. 102. 38 por ciento , 101. 27 por ciento , 99. 94 por ciento , 99. 23 por ciento , RSD fueron 0. 98 por ciento , 2. 18 percent , 0. 86 percent , 1. 26 percent , 1. 13 percent , 0. 94 percent , 2. 34 percent , lo que indica que los dos métodos son precisos y confiables.

2.5 Efectos de diferentes métodos de procesamiento sobre el contenido de componentes activos en Cistanche La suma de los contenidos de echinacósido y verbacósido en elCistanchemuestras fue superior al 0.30 por ciento, lo cual estaba en línea con la edición 2020 de la Farmacopea China [1].

El estudio encontró que la cantidad total de los componentes del índice en los materiales medicinales secos enteros fue mayor que la de las rebanadas frescas, y la cantidad total de los componentes del índice en la muestra al vapor RZ3 antes del secado fue la más alta. por ciento, que es más de 14 veces el nivel especificado en la Farmacopea. Se puede ver que el contenido de ingredientes activos después de la cocción al vapor y el procesamiento de los materiales medicinales en el origen es mayor. Al comparar los efectos del secado al sol, el secado a la sombra, el secado con aire comprimido y la liofilización sobre el contenido de ingredientes activos en Cistanche Cistanche sin rebanar y cocido al vapor, se encontró que el contenido de equinacósido en la muestra RZ2 era el más alto; Los contenidos de '-acetylverbasin y tuberoside A fueron los más altos, el contenido deCistancheA en la muestra RZ6 fue el más alto, y el contenido de polisacárido en la muestra RZ5 fue el más alto, lo que indica que los diferentes métodos de secado tuvieron diferentes efectos sobre el contenido de componentes activos en CistancheCistanche. Es necesario utilizar múltiples indicadores para evaluar integralmente su calidad.

Se utilizó el método AHP para determinar el coeficiente de peso del índice de evaluación de la calidad deCistanche, y se calcularon los coeficientes de peso de los siete indicadores de echinacósido, verbascósido, cistanosido A, glucósido de isoverbasina, glucósido 2'-acetilverbásico, piplosido A y polisacárido, respectivamente. 0.2668, 0.2668, 0.1626, 0.{{10}}958, 0.0958, 0,0561, 0,0561.

Según la importancia de los componentes medidos enCistanche, the 7 indicators were divided into 4 levels, and the priority order of each indicator was determined: echinacoside=verbasicose glycosides>cistanoside A>isoverbasin glycosides=2′-acetyl group Verbasin>tuberosina A{{0}}polisacárido, construyendo así el momento de prioridad de juicio para la comparación por pares. La relación de consistencia aleatoria CR es un índice para medir si el coeficiente de ponderación obtenido es razonable. En este experimento, CR= 0. 0066 < 0.="" 10,="" lo="" que="" indica="" que="" la="" matriz="" de="" prioridad="" de="" juicio="" para="" la="" comparación="" por="" pares="" de="" indicadores="" se="" ajusta="" a="" la="" prueba="" de="">

El coeficiente es razonable y eficaz, y se puede utilizar para la puntuación completa de los métodos de procesamiento en el área de producción óptima deCistanche [7].

Para que los datos sean uniformes, los indicadores de evaluación deben normalizarse, la fórmula es yi=xi-xmin*xmax-xmin, donde yi es el valor normalizado del indicador, xi es el valor real del indicador, y xmax y xmin son los indicadores respectivamente. Los valores máximo y mínimo del grupo, y la puntuación global ponderada se calcula según la fórmula K=y1×l1 más y2×l2 más …y6×l6 más y7×l7, donde K es el valor de la puntuación global , y1, y2…y6, y7 respectivamente es el resultado de la normalización de los contenidos de echinacósido, verbascósido, cistanosido A, isoverascosido, glucósido 2′-acetilverbásico, tuberosido A y polisacárido. pesos Los resultados de la puntuación integral mostraron que la calidad general de la muestra RZ3 fue la mejor, es decir, todo el frescoCistanchese coció al vapor durante 20 minutos y luego se secó a 60 grados como el mejor método de procesamiento en el origen. Los resultados se muestran en la Tabla 3.