Evaluación del efecto antifatiga de las preparaciones compuestas en base a la homología de medicamentos y alimentos

Resumen: Objetivo Con base en la homología de medicamento y alimento, se diseñaron tres preparaciones compuestas compatibles diferentes con astrágalo membranaceus, angelica sinensis, cistanche, ginseng y hueso de durazno como componentes principales, y susefectos antifatigafueron evaluados. Métodos:

(1) Experimento Ⅰ: Estudio comparativo sobreefectos antifatigade tres preparaciones compuestas. Cuarenta y ocho ratones machos BALB/c de 5-6 semanas de edad se dividieron aleatoriamente en grupo de control de ejercicio (grupo EC), grupo de preparación 1 (grupo F1), grupo de preparación 2 (grupo F2) y grupo de preparación 3 (grupo F3) , con 12 ratones en cada grupo. Los ratones del grupo EC fueron alimentados con agua purificada y los ratones de los grupos F1, F2 y F3 recibieron 20 ml/kg·PC de decocciones de diferentes preparaciones, una vez al día, durante 28 días. El experimento de natación exhaustiva con carga se llevó a cabo 30 minutos después de la última alimentación forzada y se compararon los efectos de diferentes preparaciones en el tiempo de natación exhaustiva.

(2) Experimento Ⅱ: un estudio sobre laanti fatigamecanismo de preparación de compuestos. Treinta ratones BALB/c machos de 5-6 semanas de edad se dividieron aleatoriamente en un grupo de control normal (grupo NC), un grupo de control de ejercicio (grupo EC) y un grupo tradicional.fórmula de la medicina chinagrupo (grupo FZ), con 10 ratones en cada grupo. El grupo NC y el grupo EC recibieron agua purificada por sonda, y el grupo FZ recibió 20 ml/kg·BW de la preparación funcional seleccionada en el Experimento Ⅰ por sonda, una vez al día, durante 28 días. A los 30 min después de la última alimentación forzada, el grupo NC se sacrificó inmediatamente, y el grupo EC y el grupo FZ se sacrificaron después de 60 min del experimento de natación sin carga. El contenido de ácido láctico en sangre (BLA), nitrógeno ureico (BUN) y la actividad de lactato deshidrogenasa (LDH), el contenido de glucógeno hepático, malondialdehído (MDA) y la actividad de superóxido dismutasa (SOD) en el tejido hepático, el contenido de glucógeno muscular, MDA y las actividades de Na más -K más -ATPasa y Ca2 más -Mg2 más -ATPasa en tejido muscular fueron detectadas por kits bioquímicos.

Resultados:

(1) En el estudio comparativo de losefectos antifatigade las tres preparaciones de compuestos, se observó que el tiempo de nado exhaustivo con carga de los ratones del grupo F2 fue significativamente mayor que el del grupo EC (P<>

(2) En el estudio de lamecanismo antifatigade la preparación del compuesto, se obtuvieron los siguientes resultados. ① En comparación con el grupo NC, los contenidos de BUN y BLA en el suero del grupo EC y el grupo FZ aumentaron significativamente (P<0.05), and="" the="" activity="" of="" ldh="" was="" significantly="" decreased=""><0.05). compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" contents="" of="" bun="" and="" bla="" in="" the="" serum="" of="" the="" fz="" group="" decreased="" significantly=""><0.05), and="" the="" activity="" of="" ldh="" increased="" significantly=""><>

② En comparación con el grupo NC, el contenido de glucógeno hepático en el grupo EC y el grupo FZ disminuyó significativamente (P<0.05), and="" the="" content="" of="" mda="" increased="" significantly=""><0.01;><0.05). compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" content="" of="" mda="" in="" the="" liver="" of="" the="" fz="" group="" decreased="" significantly=""><>

③ En comparación con el grupo NC, el contenido de glucógeno muscular en el grupo EC y el grupo FZ disminuyó significativamente (P<0.05), the="" content="" of="" mda="" increased="" significantly=""><0.01), and="" the="" activities="" of="" na+-k+-atpase="" and="" ca2+-mg2+-atpase="" decreased="" significantly=""><0.05). compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" content="" of="" muscle="" glycogen="" in="" the="" fz="" group="" increased="" significantly="" (p=""><0.05), and="" the="" content="" of="" mda="" decreased="" significantly=""><0.05). conclusion="" the="" preparation="" containing="" radix="" astragali,="" angelica="" sinensis="" and="" fructus="" lycii="" has="" significant="" anti-fatigue="" action.="" the="" mechanism="" may="" involve="" increasing="" glycogen="" reserve="" and="" enhancing="" antioxidant="" capacity.="" [acta="" nutrimenta="" sinica,="" 2022,="">

Palabras clave:anti fatiga; preparaciones compuestas; homología de medicamentos y alimentos; ratones

fatiga deportivaes muy común en atletas, soldados y otros grupos. No solo afectará el estado atlético de los atletas y el rendimiento de los soldados, sino que también aumentará la posibilidad de lesiones deportivas, e incluso provocará lesiones irreversibles. Por lo tanto, la investigación sobre la prevención y eliminación de la inducida por el ejerciciofatigaes de gran importancia. En los últimos años, un gran número de estudios han demostrado que las plantas medicinales y comestibles, especialmente sus composiciones, muestran efectos multiobjetivo en el aliviofatiga inducida por el ejercicio[1]. El propósito de este estudio es seleccionar una variedad de hierbas medicinales chinas desde la perspectiva de la medicina y la homología alimentaria, vigorizar el qi y activar la sangre, la compatibilidad adecuada y seleccionar una preparación funcional con un mejor efecto antifatiga y su efecto antifatiga. investigación del efecto y su mecanismo preliminar. Los resultados de la investigación tienen cierto valor de referencia para la formulación de medidas de prevención de la fatiga inducida por el ejercicio y la investigación y desarrollo de preparados funcionales antifatiga.

1 Material y métodos

1.1 Materias primas y elaboración de preparados compuestos

astrágalo, angélica, cistanche, ginseng, semilla de durazno y otros materiales medicinales se compraron en la Farmacia Beijing Tongrentang (Tianjin Dagu South Road Store).

Pese con precisión la calidad del medicamento de acuerdo con la fórmula, lave las tapas, póngalas en una cacerola, agregue 3000 ml de agua purificada; hierva a fuego alto, cocine a fuego lento durante 20 minutos a fuego lento y tome el jugo; agregue 1000 ml de agua, hierva a fuego alto y cocine a fuego lento durante 15 minutos para tomar el jugo; Agregue 1000 ml de agua, hierva a fuego alto, cambie a fuego lento durante 10 minutos y extraiga el jugo; combinar los tres jugos y concentrar con un evaporador rotatorio para obtener 120ml de decocción.

1.2 Instrumentos y reactivos

Reactivos experimentales: actividades de lactato sérico (BLA), nitrógeno ureico (BUN), lactato deshidrogenasa (LDH), glucógeno hepático, malondialdehído (MDA) y superóxido dismutasa (SOD) en tejido hepático, tejido muscular Los kits de detección para las actividades de glucógeno muscular , MDA, Na más -K más -ATPasa y Ca2 más -Mg2 más -ATPasa se adquirieron de Beijing Soleibao Technology Co., Ltd.

Equipo experimental: evaporador rotatorio SY-2000, bomba de vacío (Shanghai Yarong); Olla de decocción JYH-B40Q1 (Guangdong Xiaoxiong Electric); Tanque de natación cuadrado de 200L; centrífuga de alta velocidad y baja temperatura 5810R (Eppendorf, Alemania); Tissuelyser-48L Triturador de tejidos de múltiples muestras (División de Shanghai Jingxin); Lector de microplacas multifunción SpectraMax M5 [Meiko Molecular Instruments (Shanghai)].

1.3 Agrupamiento e intervención de animales

Los animales de experimentación fueron 78 ratones BALB/c macho sanos (grado SPF, Beijing Weitonglihua Laboratory Animal Technology Co., Ltd.; número de licencia SCXK (Beijing) 2016-006), de 5-6w, y la crianza temperatura (25±1 ) grado, luz normal, alimentación normal, libre acceso al agua y la dieta. Después de 1 semana de alimentación adaptativa, se llevaron a cabo los siguientes experimentos en dos lotes.

1.3.1 Estudio comparativo de laefecto antifatigade tres preparaciones compuestas: el primer lote de 48 ratones se dividió aleatoriamente en grupo de control de ejercicio (grupo EC), grupo de preparación 1 (grupo F1), grupo de preparación 2 (grupo F2) y grupo de preparación 3 (grupo F3), 12 ratones en cada grupo. A los ratones del grupo EC se les administró agua purificada por vía intragástrica, mientras que a los grupos F1, F2 y F3 se les administró por vía intragástrica 20ml/(kg·bw) de decocciones con diferentes prescripciones, una vez al día, durante 28 días. La ingesta de alimentos de los ratones se registró diariamente y se pesaron cada 3 d. 30 minutos después de la última alimentación forzada, los ratones de cada grupo se sometieron a un experimento de natación exhaustivo de gravedad negativa. Pasos principales: fije la base de la cola del ratón con un cable de plomo con un peso total del 3 por ciento del peso corporal del ratón. Los ratones se colocaron en un tanque de agua de plástico con una pared interior lisa, la profundidad del agua era de más de 55 cm y la temperatura del agua era de (30 ± 1) grados, y se registró el tiempo desde el comienzo de la natación hasta el agotamiento. Indicadores para la determinación del agotamiento.

1.3.2 Discusión sobre el mecanismo antifatiga de las preparaciones compuestas: el segundo lote de 30 ratones se dividió aleatoriamente en un grupo de control silencioso (grupo NC), un grupo de control de ejercicio (grupo EC) y un grupo de medicina tradicional china (FZ). grupo), con 10 ratones en cada grupo. ratón. Al grupo NC y al grupo EC se les administró agua purificada por vía intragástrica, y al grupo FZ se le administró por vía intragástrica 20 ml/(kg·bw) de las preparaciones funcionales evaluadas en el Experimento 1, una vez al día, durante 28 días de intervención. La ingesta de alimentos de los ratones se registró diariamente y se pesaron cada 3 d.

30 min después de la última alimentación forzada, el grupo NC se sacrificó inmediatamente para obtener los materiales, y el grupo EC y el grupo FZ se sacrificaron después de completar el experimento de natación 60-min sin carga de peso. BLA en suero, contenido de BUN y actividad de LDH; glucógeno hepático, contenido de MDA y actividad de SOD en tejido hepático; glucógeno muscular, contenido de MDA en el tejido muscular y Na más -K más -ATPasa y Ca2 más -Mg2 más -ATPasa activa.

1.4 Análisis estadístico

Se utilizó el software estadístico SPSS 22.0 para el procesamiento y análisis de datos, y los resultados se expresaron como x ± s. Se usó el análisis de varianza (ANOVA) unidireccional para probar la importancia de las diferencias, y se usó la prueba LSD-t para las comparaciones por pares. PAGS<0.05 was="" considered="" statistically="">

2 resultados

2.1 Estudio comparativo del efecto antifatiga de tres preparaciones compuestas

2.1.1 The effect of different compound preparation intervention on the general condition and average body weight of mice: During the experiment, the mice in each group had shiny coats, elastic skin, good growth and mental state; body weights all increased slightly and tended to increase Similarly, there was no significant difference in the average body weight of mice among the groups (P>0.05, Tabla 1).

2.1.2 El efecto de diferentes preparaciones de compuestos en el tiempo de natación exhaustiva de los ratones (Fig. 1) Debido a las grandes diferencias individuales en el tiempo de natación exhaustiva, se realizó una transformación logarítmica en los datos originales y el análisis de varianza se realizó después de la prueba. estaba en línea con la distribución normal. Los resultados mostraron que, en comparación con el grupo EC, los ratones del grupo F2 estaban exhaustos bajo peso negativo.

El tiempo de natación se prolongó significativamente y la diferencia fue estadísticamente significativa (P<>

2.2 Discusión sobre el mecanismo antifatiga de las preparaciones compuestas

2.2.1 The effect of compound preparation intervention on the average body weight of mice after swimming exercise: During the experiment, the body weight of mice in each group increased slightly and the growth trend was the same, and there was no statistically significant difference in the average body weight of mice between each group (P>0.05, tabla omitida).

2.2.2 El efecto de la intervención de preparación del compuesto en el BUN sérico, el contenido de BLA y la actividad de LDH de los ratones después del ejercicio de natación (Fig. 2): después de 60 minutos de natación sin carga de peso, en comparación con el grupo NC, el BUN sérico de EC ratones del grupo FZ y del grupo FZ En comparación con el grupo EC, el contenido de BUN en suero de los ratones del grupo FZ disminuyó significativamente (P<0.05). compared="" with="" the="" nc="" group,="" the="" blood="" lactate="" (bla)="" content="" of="" mice="" in="" the="" ec="" group="" and="" fz="" group="" was="" significantly="" increased="" (p="" <="" 0.01;="" p="" <="">

En comparación con el grupo EC, el contenido de BLA de los ratones del grupo FZ disminuyó significativamente (P<0.05). compared="" with="" the="" nc="" group,="" the="" serum="" ldh="" activity="" of="" the="" ec="" group="" and="" the="" fz="" group="" was="" significantly="" decreased=""><0.05); compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" serum="" ldh="" activity="" of="" the="" mice="" in="" the="" fz="" group="" was="" significantly="" increased=""><>

Los resultados sugieren que el experimento de natación de 60 minutos sin carga de peso puede aumentar significativamente el contenido sérico de BUN y BLA y reducir significativamente la actividad LDH de los ratones, mientras que la intervención de preparación funcional de 4 semanas puede reducir significativamente el contenido sérico de BUN y BLA de los ratones después nadar, y el contenido sérico de BUN y BLA de los ratones después de nadar puede reducirse significativamente. Aumenta la actividad de la LDH.

2.2.3 El efecto de la intervención de preparación del compuesto sobre el contenido de glucógeno hepático, actividad de MDA y SOD en el tejido hepático de ratones después del ejercicio de natación (Fig. 3): después de 60 min de natación sin carga de peso, en comparación con la NC grupo, el grupo EC y los ratones del grupo FZ El contenido de glucógeno hepático se redujo significativamente (P<0.05); compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" liver="" glycogen="" content="" of="" the="" mice="" in="" the="" fz="" group="" had="" a="" tendency="" to="">

En comparación con el grupo NC, el contenido de MDA en el tejido hepático de los ratones del grupo EC y del grupo FZ aumentó significativamente (P<{{0}}.01;>< 0.05);="" en="" comparación="" con="" el="" grupo="" ec,="" el="" contenido="" de="" mda="" en="" el="" hígado="" de="" los="" ratones="" del="" grupo="" fz="" disminuyó="" significativamente=""><0,05). 0,05).="" no="" hubo="" una="" diferencia="" significativa="" en="" la="" actividad="" de="" sod="" en="" el="" hígado="" de="" cada="" grupo="" de="" ratones,="" pero="" en="" comparación="" con="" el="" grupo="" ec,="" la="" actividad="" de="" sod="" en="" el="" hígado="" de="" los="" ratones="" del="" grupo="" fz="" tenía="" una="" tendencia="" a="" aumentar.="" los="" resultados="" mostraron="" que="" 60="" minutos="" de="" natación="" sin="" carga="" de="" peso="" redujeron="" el="" contenido="" de="" glucógeno="" hepático="" y="" aumentaron="" el="" contenido="" de="" mda,="" y="" 4="" semanas="" de="" intervención="" de="" preparación="" funcional="" podrían="" reducir="" el="" contenido="" de="" mda="" en="" el="" tejido="" hepático="" de="" los="" ratones="" después="" de="">

2.2.4 El efecto de la intervención de preparación del compuesto sobre el glucógeno muscular, el contenido de MDA y la actividad ATPasa en el tejido muscular de ratones después del ejercicio de natación (Fig. 4) Después de nadar durante 60 minutos sin carga de peso, en comparación con el grupo NC, el grupo EC y los ratones del grupo FZ tenían niveles más altos de glucógeno muscular, contenido de MDA y actividad de ATPasa (Fig. 4). El contenido de glucógeno muscular se redujo significativamente (P<0.05); compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" content="" of="" muscle="" glycogen="" in="" the="" fz="" group="" was="" significantly="" increased=""><0.05). compared="" with="" the="" nc="" group,="" the="" mda="" content="" in="" the="" muscle="" tissue="" of="" the="" ec="" group="" and="" fz="" group="" was="" significantly="" increased=""><0.01;><0.05); compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" mda="" content="" in="" the="" muscle="" tissue="" of="" the="" fz="" group="" was="" significantly="" decreased=""><0.01;><0.05). p="" <="" 0.05).="" compared="" with="" the="" nc="" group,="" the="" atpase="" activity="" in="" the="" muscle="" tissue="" of="" the="" ec="" group="" and="" the="" fz="" group="" was="" significantly="" decreased=""><0.05); there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" the="" atpase="" activity="" in="" the="" muscle="" tissue="" of="" the="" ec="" group="" and="" the="" fz="" group.="" the="" results="" showed="" that="" the="" non-weight-bearing="" 60min="" swimming="" experiment="" significantly="" reduced="" the="" muscle="" glycogen="" content="" and="" atpase="" activity="" in="" the="" muscle="" tissue="" of="" the="" mice,="" and="" the="" mda="" content="" significantly="" increased,="" while="" the="" 4w="" functional="" preparation="" intervention="" could="" significantly="" reduce="" the="" mda="">

El contenido de glucógeno muscular aumentó significativamente y el contenido de MDA disminuyó significativamente.

3 Discusión

La prueba de natación con carga de peso es un método clásico para juzgar la fatiga, que puede reflejar la resistencia de los ratones a través del tiempo de natación con carga de peso. Los resultados de este experimento mostraron que, en comparación con el grupo de control de ejercicio, el tiempo de natación con carga de peso de los ratones en el grupo de preparación compuesta 2 se prolongó significativamente, mientras que la intervención en los grupos de preparación compuesta 1 y 3 no tuvo un efecto significativo. Se sugiere que la preparación del compuesto con astrágalo, angélica y cistanche tiene un efecto antifatiga significativo en ratones experimentales.

Cuando el cuerpo realiza ejercicio de alta intensidad a largo plazo, la descomposición del glucógeno produce una gran cantidad de glucosa, que proporciona energía al cuerpo. El glucógeno muscular es glucógeno que se puede utilizar en cualquier momento. Primero se descompone en el cuerpo para el suministro,

Su reserva se correlaciona positivamente con la resistencia al ejercicio [2]. Con la prolongación del tiempo de ejercicio, la homeostasis de glucosa en sangre del cuerpo se rompe nuevamente. En este momento, cuando la descomposición del glucógeno muscular no es suficiente para mantener el azúcar en la sangre, el cuerpo comienza a descomponer el glucógeno hepático para suministrar energía al cuerpo para mantener la estabilidad del azúcar en la sangre [3].

Por lo tanto, el glucógeno muscular es la forma de utilización de energía del cuerpo y el glucógeno hepático es la forma de reserva de energía [4]

Cuanto más abundantes sean las reservas de glucógeno muscular y de glucógeno hepático en el organismo, más energía se necesitará para proporcionar ejercicio y más retrasada la aparición de la fatiga [5]. Cuando el cuerpo se ejercita vigorosamente durante mucho tiempo, el glucógeno del cuerpo se consume y se descompone en exceso. Cuando el contenido de glucógeno es bajo, la glucosa producida por la descomposición no es suficiente para mantener el cuerpo para continuar con el ejercicio, y el estado de agotamiento y fatiga se manifiesta en este momento. Por lo tanto, aumentar la reserva de glucógeno muscular es una forma importante de retrasar la fatiga [6]. En este estudio, se observó que un ejercicio de natación de 60 minutos sin carga de peso resultó en una disminución en los contenidos de glucógeno muscular y glucógeno hepático, mientras que la intervención de la preparación compuesta para tonificar el qi y promover la circulación sanguínea podría aumentar significativamente el contenido. de glucógeno muscular en ratones.

Muestra que la intervención de la preparación compuesta conastrágalo, angélica, ycistanchepuedenmejorar la capacidad de metabolismo de la glucosa del cuerpo, mejorar la reserva de glucógeno muscular, yasegurar la energía oxidativa del cuerposuministro durante el ejercicio. Esta puede ser la razón por la cual la preparación puede mejorar la capacidad antifatiga de los ratones. uno de los mecanismos.

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Después de un ejercicio prolongado y de alta intensidad, el azúcar en la sangre del cuerpo y el glucógeno muscular descienden. Como resultado, se mejora el catabolismo de aminoácidos y aumenta el metabolito BUN. La LDH es una enzima importante en el proceso de glucólisis, que cataliza la reacción redox entre el piruvato y el lactato [8].

Después de un breve período de ejercicio extenuante de alta intensidad, el cuerpo consumirá una gran cantidad de ATP. En este momento, el suministro de energía se completa principalmente por el sistema de glucólisis. La glucólisis anaeróbica produce ATP de manera ineficiente y la demanda instantánea de ATP es grande. La energía se somete a una gran cantidad de glucólisis anaeróbica, que produce una gran cantidad de ácidos lácticos. El contenido de lactato en sangre se puede utilizar como un índice de evaluación bioquímica de uso común en la fatiga del ejercicio o el ejercicio exhaustivo. Los resultados de este experimento muestran que la intervención de preparaciones compuestas puede reducir significativamente el contenido de BUN y ácido láctico en el suero de ratones después de nadar y aumentar la actividad de LDH, lo que indica que las preparaciones funcionales combinadas con astrágalo, angélica ycistancheNo solo puede aliviar significativamente los dos niveles de BUN y ácido láctico. Puede reducir la acumulación de varios metabolitos en la sangre y puede acelerar el metabolismo del ácido láctico y reducir la acumulación de ácido láctico, lo que retrasa efectivamente la aparición defatiga por ejercicio.

Durante el ejercicio de alta intensidad, se mejora el metabolismo oxidativo del cuerpo, aumenta el consumo de oxígeno del tejido corporal y los radicales libres aumentan significativamente, causandoPeroxidación lipídica[9]. Los resultados de este estudio mostraron que después de 60 minutos de natación sin carga de peso, el contenido de MDA en el tejido hepático y muscular de los ratones en el grupo de intervención de preparación compuesta fue significativamente menor que en el grupo de control de ejercicio. Se sugiere que la preparación funcional tiene un cierto efecto antagonista sobre el daño oxidativo inducido por ratones de ejercicio, lo que también puede ser una de las formas de su efecto antifatiga. En este estudio, se observaron los cambios en las actividades de dos ATPasas (Na más -K más -ATPasa y Ca2 más -Mg2 más -ATPasa) en tejido muscular de ratón.

Estas dos enzimas son transportadores transmembrana en la membrana celular y la membrana de los orgánulos, que afectan directamente el metabolismo energético del cuerpo, la homeostasis y el mantenimiento de la integridad de los orgánulos. Este experimento comparó el grupo de control tranquilo, el grupo de músculos del grupo de control de ejercicio y el grupo de intervención de medicina tradicional china.

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