Exploración de los efectos de los glucósidos feniletanoides de Cistanche sobre la enfermedad del hígado graso no alcohólico según la farmacología en red y experimentos celulares
Oct 29, 2025
Abstracto
Objetivo: Investigar los efectos de mejora de los glucósidos feniletanoides de Cistanche sobre la enfermedad del hígado graso no alcohólico (NAFLD).
Métodos: Se utilizó la farmacología en red para predecir los mecanismos potenciales de los glucósidos feniletanoides de Cistanche contra la NAFLD. Se estableció un modelo de NAFLD in vitro induciendo células HepG2 con ácidos grasos libres (FFA). La viabilidad celular se evaluó mediante el ensayo CCK-8; Se utilizó la tinción Oil Red O para observar la acumulación de lípidos; los niveles de triglicéridos (TG) y colesterol total (CT) se midieron utilizando kits de ensayo; Se utilizó tinción JC-1 para evaluar el potencial de membrana mitocondrial; los niveles de ROS intracelulares se evaluaron con una sonda fluorescente DCFH-DA; la apoptosis se detectó mediante tinción Hoechst 33342; y la expresión de las proteínas TNF-, PI3K, Akt y Bax se midió mediante transferencia Western.
Resultados: Se identificaron diez compuestos activos y 77 objetivos potenciales relacionados con los efectos anti-NAFLD, cuyos objetivos principales incluyen TNF, NFKB1 y TLR4. Los compuestos mostraron una buena afinidad de unión con los objetivos, especialmente con el TNF. En comparación con el grupo modelo, los glucósidos feniletanoides de Cistanche redujeron significativamente la acumulación de lípidos inducida por FFA en células HepG2 (P <0,01), disminuyeron los niveles intracelulares de TG, TC y ROS (P <0,01), restauraron el potencial de membrana mitocondrial, alivieron el daño mitocondrial, redujeron la apoptosis, redujeron la expresión de la proteína Bax (P <0,05) y regularon negativamente TNF-, PI3K y Akt. expresión de proteínas (P <0,05, P <0,01).
Conclusión: Los glucósidos feniletanoides de Cistanche ejercen efectos anti-NAFLD al mejorar la acumulación de lípidos inducida por FFA, la disfunción mitocondrial, el estrés oxidativo y la apoptosis en las células HepG2. Estos efectos pueden estar asociados con la vía de señalización TNF/PI3K/Akt.
Palabras clave: Cistanche glucósidos feniletanoides; enfermedad del hígado graso no alcohólico (NAFLD); metabolismo de los lípidos; estrés oxidativo;apoptosis; TNF/PI3K/vía de señalización Akt; farmacología en red; experimento celular
Cistanche glucósidos feniletanoides
Extracto de Cistanche de alto contenido a la venta.
1. Introducción
La enfermedad del hígado graso no alcohólico (NAFLD) es una enfermedad hepática crónica caracterizada por esteatosis hepática sin consumo excesivo de alcohol. La prevalencia en China ha alcanzado el 32,9%. Su patogénesis implica múltiples mecanismos, incluida la resistencia a la insulina, el estrés oxidativo y el desequilibrio de la microbiota intestinal. Los síntomas clínicos incluyen fatiga, malestar en la zona del hígado y dolor abdominal y, en casos graves, puede progresar a esteatohepatitis no alcohólica (EHNA).
Actualmente, las intervenciones en el estilo de vida son el tratamiento principal para la NAFLD. Aunque la FDA aprobó el primer medicamento para la NAFLD, Resmetirom (Rezdiffra), en 2024, tiene posibles efectos adversos como lesión hepática y riesgos cardiovasculares. Por tanto, existe una necesidad urgente de encontrar tratamientos seguros y eficaces para la NAFLD.
La medicina tradicional china (MTC), con sus características de múltiples componentes, múltiples objetivos y múltiples vías, se alinea bien con la compleja patogénesis de NAFLD y ofrece ventajas únicas en su tratamiento.
Cistanche deserticolaycistanche tubulosason plantas medicinales de la familia Orobanchaceae, incluidas en elShennong Bencao Jing. Sus tallos carnosos, ricos en escamas, se utilizan tradicionalmente para tonificar el hígado y los riñones, reponer esencias y sangre y humedecer los intestinos. Los componentes activos principales, los glucósidos de feniletanoide, tienen propiedades antiinflamatorias, hipolipemiantes y hepatoprotectoras. Sin embargo, aún faltan estudios sistemáticos sobre sus efectos contra la NAFLD.
Este estudio tiene como objetivo analizar la base farmacológica y los mecanismos potenciales de los glucósidos feniletanoides de Cistanche en el tratamiento de NAFLD utilizando farmacología en red, y explorar más a fondo sus mecanismos a través de experimentos celulares, proporcionando una base teórica para el desarrollo de nuevos fármacos.
2. Materiales
2.1 Herramientas de farmacología de red
TCMSP: https://tcmspw.com/tcmsp.php
CNKI: https://www.cnki.net/
PubMed: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/
PubChem: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/
SwissTargetPrediction: http://www.swisstargetprediction.ch/
NetInfer: http://lmmd.ecust.edu.cn/netinfer/
SuperPred: https://prediction.charite.de/subpages/target_prediction.php
Tarjetas Gene: https://www.genecards.org/
DisGeNET: http://www.disgenet.org/
CUERDA: https://string-db.org/
Bioinformática: https://www.bioinformatics.com.cn/
UniProt: https://www.uniprot.org/
RCSB AP: https://www.rcsb.org/
Citoscape 3.9.1: https://cytoscape.org/
R 4.3.3: https://www.r-project.org/
AutoDock Vina 1.5.7: https://vina.scripps.edu/
2.2 Línea celular
Células de cáncer de hígado humano HepG2, adquiridas de Wuhan Procell Life Science & Technology Co., Ltd.
2.3 Reactivos y Fármacos
Glicósidos de feniletanoide cistanche (n.º de lote . 201610, pureza mayor o igual al 80 %, que contienen 44,5 % de echinacósido y 16,1 % de verbascósido), adquiridos en Hotan Dechen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd. Solución madre preparada a 6,40 mg/ml, filtrada y almacenada a –20 grados.
Los reactivos adicionales incluyen:
Suero bovino fetal (FBS), medio DMEM, penicilina-estreptomicina, kit de tinción Oil Red O, kit BCA, kit de detección de ROS, Hoechst 33342, BSA-V, oleato de sodio, palmitato de sodio, kits de ensayo TG y TC, ensayo CCK-8, kit de potencial de membrana mitocondrial JC-1, anticuerpos para TNF-, PI3K p85, Akt, Bax, -actina y anticuerpos secundarios conjugados con HRP.
2.4 Instrumentos
Incubadora de CO₂ (Forma 371)
Armario de bioseguridad (HERASAFE KS18)
Lector de microplacas (Multiskan GO)
Microscopio invertido (Nikon TS2-S-SM)
Baño María, centrífuga (H1750R), balanza analítica, sistema de imágenes por quimioluminiscencia (Azure 600), microscopio de fluorescencia (Leica DMi8)
