Identificación de diecisiete componentes en Cistanches Herba cultivados en el desierto de Tarim por HPLC-MS

NAN Ze-dong1 ,ＲEN Hua-zhong1 ,ZHAO Ming-bo2 ,JIANG Yong2 ,TU Peng-fei2*

( 1. Colegio Técnico y Vocacional de Leshan, Leshan 614000, China; 2. Laboratorio Estatal Clave de Medicamentos Naturales y Biomiméticos, Facultad de Ciencias Farmacéuticas, Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad de Pekín, Pekín 100191, China)

[Abstracto]Objetivo: Identificar los componentes cromatográficos del extracto metanólico al 60 por ciento enCistanches desertica Herbacultivado en el desierto de Tarim por HPLC-MS．Método: El análisis HPLC-MS se realizó en una columna Agilent ZOＲBAX Eclipse Plus C18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μm) . La fase móvil fue acetonitrilo-0. Solución acuosa de ácido fórmico al 1 por ciento mediante elución en gradiente a una velocidad de flujo de 1 ml·min - 1, y la longitud de onda de detección fue de 254 nm. La temperatura de la columna se fijó en 25 grados y el volumen de inyección fue de 10 μL. Ｒresultado: se identificaron con precisión dieciséis picos cromatográficos/diecisiete componentes comparando el tiempo de retención, los pesos moleculares y los iones de fragmentos de los compuestos que aislamos e identificamos. Estos componentes cromatográficos se determinaron como coniferina, desmetil siringina, siringina, equinacósido, cistanosido A, verbascósido (tubulósido A), cistanósido B, isoverbascósido, 2'-acetilcistanosido A, cistanósido C, isocistanósido C, 2'-acetilverbascósido, tubulósido B, epimeriridinósido. A, cistanósido K y cistanósido J．

Conclusión: El método HPLC-MS es adecuado para la identificación de los componentes cromatográficos del extracto de metanol al 60 por ciento en Cistanches Herba. Este estudio proporcionará la evidencia científica para analizar exhaustivamente los componentes químicos de esta hierba medicinal.

［Palabras clave］ Cistanches deserticahierba; Cistanche; HPLC-MS; extracto de metanol

Cistanche deserticola YCMa

Cistanche deserticola, también conocida como "ginseng del desierto",es un famoso tónico de la medicina china, que se distribuye en Mongolia Interior, Ningxia, Gansu y Xinjiang de China [1].Tiene el efecto de tonificar el yang del riñón, beneficiando la esencia de la sangre, humedeciendo los intestinos y defecando. Se usa comúnmente en clínicas para tratar la impotencia masculina, la infertilidad femenina, el dolor por frío en la cintura y la rodilla, el estreñimiento por estasis de sangre., etc [2-3].Cistanche deserticola maincluido en la primera parte de la Farmacopea China (edición de 2015) está el tallo carnoso seco de Cistanche deserticola y Cistanche tubulosa (4). Nuestro equipo de investigación ha llevado a cabo una investigación sistemática y profunda sobre las plantas de Cistanche durante muchos años.Los componentes químicos de las plantas de Cistanche son principalmente glucósidos feniletanoides, además de iridoides y sus glucósidos, lignanos y sus glucósidos, glucósidos de alcohol bencílico, etc.[5]. Los estudios farmacológicos modernos muestran que los glicósidos de feniletanol, los principales componentes del género, tienen efectos neuroprotectores, antioxidantes, protectores del hígado, antibacterianos, antivirales, antitumorales, antiinflamatorios y otros [6-11].

ginseng del desierto

En China,Cistanche deserticase distribuye en el oeste de Mongolia Interior, el norte de Xinjiang y la cuenca de Qaidam en Qinghai, pero no en la cuenca de Tarim en el sur de Xinjiang. A fines de la década de 1990, para proteger el yacimiento petrolífero de Tazhong y controlar el desierto, la sede del yacimiento introdujo una gran cantidad de dendron de munición Haloxylon alrededor del yacimiento petrolífero de Tazhong y en ambos lados de la carretera del desierto e inoculó el dendron de munición Haloxylon con cistanche, que ha sido más de 10 años. Debido al clima cálido en el sur de Xinjiang y las buenas condiciones de riego por goteo en la base de aceite, el rendimiento de cistanche deserticola es muy alto, y el rendimiento de cistanche deserticola fresca por mu alcanza más de 500 kg [8]. Muchos componentes químicos en Cistanche deserticola han producido una gran cantidad de isómeros debido a las diferentes posiciones de conexión de los sustituyentes. Esto trae grandes dificultades para la identificación del pico cromatográfico de este material medicinal. Es difícil identificar con precisión los componentes del pico cromatográfico si solo se confía en LC-MS sin compuestos monoméricos como control. Por lo tanto, hay pocos informes de literatura sobre este trabajo en la etapa inicial. El autor aisló muchos compuestos monoméricos [9-11] de Cistanche deserticola cultivada en el desierto de Tazhong en la etapa inicial. A través de estos compuestos monoméricos obtenidos en la etapa inicial, se identificaron con precisión los picos cromatográficos parciales de HPLC del extracto de 60 por ciento de metanol de Cistanche deserticola. Esto no solo evitará la identificación repetida de algunos compuestos conocidos en los constituyentes químicos de Cistanche deserticola, sino que también proporcionará alguna referencia para futuras investigaciones sobre el control de calidad del material medicinal. En este documento, se identificaron 17 componentes del extracto metanol al 60 por ciento de Cistanche deserticola mediante HPLC-MS.

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1.Material

instrumento de resonancia magnética nuclear Inova-500 (Varian, EE. UU.); Espectrómetro de masas LC-MS 6320IonTrap, columna EclipseXDB-C18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μ m) (Agilent, EE. UU.); Balanza electrónica QUINTIX313-1CN tipo 1/10000 (División Sedaris); Limpiador ultrasónico KQ-500DV (Jiangsu Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); KMUP - Ⅰ Sistema analítico de generación de agua ultra pura Trace (Chengdu Haochun Instrument Equipment Co., Ltd.).

Las 39 sustancias de control utilizadas en este experimento fueron aisladas por el autor en la etapa inicial de Cistanche deserticola cultivada en el desierto en Tazhong, y sus estructuras fueron determinadas por RMN y otras técnicas de espectroscopia. Las estructuras de 39 muestras de control se identificaron como Cistanche deserticosido J, Cistanche deserticosido K, Cistanche deserticosido L, Cistanche deserticosido M, Cistanche deserticosido N, epimeridinoside A, Isocistancheside C, angiocianina B, Cistanche heterofilina, Isocornicina, Cistanche deserticosido D, Cistanche deserticosido C, Cistanche cymosin, 2 '- acetyl Cistanche deserticoside A, 2' - acetyl Cistanche deserticoside A, Cistanche deserticola B, Cistanche deserticola A, Echinoside A, Cistanche deserticola glucósido E, Salidroside, 6 '- acetyl salidroside, saliside B, syringin, demethyl syringin , enebro, (2E, 6E) - 3, 7-dimetil-8-hidroxictadien-1-O- - D-glucósido, ( más ) - siringina, ( más ) - jeringa-4 '- O- - D-glucopiranósido, ( plus ) - isoeucomminA, eucomminA, ( plus ) - éter monometílico de colofonia- - D-glucósido, larvicida-4 ' - O- - D-glucósido, larvicida-4-O- - D-glucósido- - D glucopiranósido, hesperidina A, área aparte A, 6-desoxicatapol. La pureza de todas las sustancias de referencia anteriores es superior al 98.0 por ciento. El acetonitrilo es cromatográficamente puro (DikmaPure, EE. UU.), el agua es agua ultrapura y otros reactivos utilizados en el proceso de prueba son reactivos analíticos puros, producidos por la planta química de Beijing.

El material medicinal utilizado en este experimento, Cistanche deserticola, se recolectó en la zona desértica de Tazhong, Xinjiang, en noviembre de 2010. El profesor Tu Pengfei de la Facultad de Farmacia de la Universidad de Pekín lo identificó como el tallo seco y carnoso de la planta Leobaceae. Cistanche desertica. La muestra se almacenó en el Centro de Investigación Moderna de Medicina Tradicional China de la Universidad de Pekín (número de muestra: CD201011).

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2.Métodos y resultados

2.1 Preparación de la solución de referencia

Tome alrededor de 1 mg de cada una de las 39 muestras de control obtenidas de Cistanche deserticola en la etapa inicial, péselas con precisión, póngalas en un matraz volumétrico de 5 ml respectivamente, disuélvalas con metanol y llévelas a la báscula, y luego obtenga el control único. solución.

2.2 Preparación de la solución de prueba

Refiriéndose a la Farmacopea China, edición 2015, tome aproximadamente 1 g del producto en polvo (a través del cuarto tamiz), péselo con precisión, colóquelo en una botella marrón de 100 ml, agregue con precisión 50 ml de metanol al 60 por ciento, apisone agitar bien, pesar la masa, remojarla durante 30 min, tratamiento ultrasónico durante 40 min, enfriarla, pesar la masa nuevamente, agregar 50 por ciento de metanol para completar la masa reducida, agitar bien, dejar reposar, tomar el sobrenadante, y use una filtración de membrana microporosa de 0,45 μ M, tome el filtrado continuo para obtener la solución de prueba.

2.3 Condiciones cromatográficas

columna cromatográfica AgilentEclipse XDB-C18 (4,6 mm × 250mm, 5 μ m), longitud de onda de detección 254 nm, temperatura de columna 25 grados; Usando acetonitrilo (A) - 0.1 por ciento de solución acuosa de ácido fórmico (B) como fase móvil, elución en gradiente (0 - 20min, 5 por ciento - 15 por ciento de A; 20 - 50 min, 15 por ciento - 30 por ciento A; 50 - 60 min, 30 por ciento - 50 por ciento A; 60 - 70 min, 50 por ciento - 95 por ciento A); Caudal: 1,0 ml · min-1, volumen de inyección: 10 μ L.

2.4 Condiciones del espectro de masas

Temperatura capilar 350 grado; Tensión capilar 3500V; caudal de gas de camisa (nitrógeno) 12,0 l · min-1; Presión de gas auxiliar (nitrógeno) 206,8 kPa; El rango de exploración completo de la espectrometría de masas es m/z 50~1000; Helio de gas de colisión, la energía de colisión se selecciona automáticamente durante la prueba; Recoja 1 aguja para cada modo de iones positivos y negativos.

2.5 Prueba de una sustancia de referencia

Las 39 soluciones de referencia preparadas bajo 2.1 se probaron bajo condiciones cromatográficas 2.3 y condiciones espectrométricas de masas 2.4, y se registraron su tiempo de retención y peso molecular relativo (Tabla 1).

2.6 Determinación de la solución de prueba

Tome el material medicinal Cistanche deserticola recolectado del área desértica de Tazhong, Xinjiang, y prepare la solución de prueba de acuerdo con el método descrito en 2.2. Luego, realice la determinación de acuerdo con las condiciones cromatográficas descritas en 2.3 y las condiciones de espectrometría de masas descritas en 2.4, y determine su cromatograma HPLC y espectrometría de masas en el modo de iones positivos y negativos (Figuras 1-3).

Higo. 1 cromatograma HPLC de extracto metanol al 60 por ciento de Cistanches Herba

Higo. 2 Cromatograma TIC MS positivo de extracto metanol al 60 por ciento de Cistanches Herba

Higo. 3 Cromatograma TIC MS negativo de extracto metanol al 60 por ciento de Cistanches Herba

2.7 Identificación del cromatograma HPLC de materiales medicinales

Bajo las mismas condiciones (2.3 condiciones cromatográficas y 2.4 condiciones de espectrometría de masas), los componentes se identificaron comparando el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la muestra de prueba y la muestra de control. El proceso de identificación específico del pico del cromatograma de la muestra de prueba (Figura 1) es el siguiente.

2.7.1 Identificación del pico cromatográfico 1

El tiempo de retención del pico cromatográfico 1 es de 16,67 minutos. En el modo de iones positivos, el pico de iones excimer m/z365 se da como [M más Na] más , mientras que en el modo de iones negativos, se da el pico de iones excimer m/z387 [M más COOH] -. Se determina que el peso molecular relativo del pico 1 es 342. También se proporciona el ión del fragmento m/z179, que se origina a partir de la pérdida de 1 molécula de glucosa 163 Da debido a la escisión del enlace glucósido. De acuerdo con el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia, el pico cromatográfico 1 se identificó como coniferina.

2.7.2 Identificación del pico cromatográfico 2

El tiempo de retención del pico cromatográfico 2 es de 17,36 min. En el modo de iones negativos, se dan los picos de iones excimer m/z357 [M – H] -, 393 [M más Cl] - y se determina que el peso molecular relativo del pico 2 es 358. Al mismo tiempo, el el fragmento ion m/z195 se deriva de la pérdida de 1 molécula de glucosa 163 Da debido a la ruptura del enlace glucósido. El pico cromatográfico 2 se identificó como desmetilsiringina según el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia.

2.7.3 Identificación del pico cromatográfico 3

El tiempo de retención del pico cromatográfico 3 es 19,04 min, el pico de iones excimer m/z395 [M más Na] más se da en el modo de iones positivos, y el pico de iones excimer m/z417 [M más HCOO] - se da en el modo de iones positivos. modo de ion negativo, y se determina que el peso molecular relativo del pico 3 es 372. Al mismo tiempo, el fragmento de ion m/z209 se deriva de la pérdida de 1 molécula de glucosa 163 Da debido a la ruptura del enlace glucósido. El pico cromatográfico 3 se identificó como siringina según el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia.

2.7.4 Identificación del pico cromatográfico 4

El tiempo de retención del pico cromatográfico 4 es de 27,66 min. El pico de iones excimer m/z804 [M más NH4] plus se da en el modo de iones positivos, y el pico de iones excimer m/z785 [M – H] - se da en el modo de iones negativos. Se determina que el peso molecular relativo del pico 4 es 786. Al mismo tiempo, el fragmento de ion m/z623 se deriva de la pérdida por ruptura del enlace éster de 1 molécula de cafeína 163 Da. Combinado con el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia, el pico cromatográfico 4 se identificó como equinácea.

2.7.5 Identificación del pico cromatográfico 5

El tiempo de retención del pico cromatográfico 5 es de 31,48 min, el pico de iones excimer m/z818 [M más NH4] plus se da en el modo de iones positivos, y el pico de iones excimer m/z799 [M – H] - se da en el modo de iones positivos. modo de ión negativo, y se determina que el peso molecular relativo del pico 5 es 800. Al mismo tiempo, el fragmento de ión m/z637 se deriva de la pérdida por ruptura del enlace éster de 1 molécula de cafeína 163Da. Combinando el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia, se confirmó que el pico cromatográfico 5 era el glucósido A de cistanche.

Tabla 1 Peso molecular y tiempo de retención( tＲ ) de 39 compuestos estándar

2.7.6 Identificación del pico cromatográfico 6

El tiempo de retención del pico cromatográfico 6 es de 34,17 min. Dos picos de iones excimer m/z846642 [M más NH4] plus se dan en el modo de iones positivos, y dos picos de iones excimer m/z827623 [M – H] - también se dan en el modo de iones negativos. Se especula que el pico 6 puede contener dos compuestos con un peso molecular relativo de 828624. Al mismo tiempo, el ion del fragmento m/z665461 se deriva de la pérdida por rotura del enlace éster de 1 molécula de cafeína 163 Da, y el ion del fragmento m /z622 se deriva de la ruptura del enlace éster de acetilo. Estos dos compuestos fueron aislados y combinados con el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia, el pico cromatográfico 6 fue una mezcla de Cimicifugarina y antocianina A.

2.7.7 Identificación del pico cromatográfico 7

El tiempo de retención del pico cromatográfico 7 es de 35,34 min. El pico de iones excimer m/z832 [M más NH4] más , 837 [M más Na] más se da en el modo de iones positivos, y el pico de iones excimer m/z813 [M – H] - se da en el modo de iones negativos , y el peso molecular relativo del pico 7 es 814. Al mismo tiempo, el fragmento de ion m/z637 se deriva de la pérdida por ruptura del enlace éster de 1 molécula de ácido ferúlico 177Da. Combinado con el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia, el pico cromatográfico 7 se identificó como glucósido B de cistanche.

2.7.8 Identificación del pico cromatográfico 8

El tiempo de retención del pico cromatográfico 8 es de 36,17 min, el pico de iones excimer m/z647 [M más Na] plus se da en el modo de iones positivos y el pico de iones excimer m/z623 [M – H] - se da en el modo de iones positivos. modo de ion negativo, y se determina que el peso molecular relativo del pico 8 es 624. Al mismo tiempo, se da el fragmento de ion m/z461, que se origina a partir de la ruptura del enlace éster y la pérdida de 1 molécula del grupo cafeína 163 Da. Combinado con el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia, el pico cromatográfico 8 se identificó como heterocoenósido.

2.7.9 Identificación del pico cromatográfico 9

El tiempo de retención del pico cromatográfico 9 es de 38,20 minutos. Los picos de iones excimer m/z860 [M más NH4] plus , 865 [M plus Na] plus se dan en el modo de iones positivos, y los picos de iones excimer m/z841 [M – H ] -, 877 [M más Cl] - se dan en el modo de iones negativos. Se determina que el peso molecular relativo del pico 9 es 842. Al mismo tiempo, el fragmento de ion m/z679636 se deriva de la pérdida por ruptura del enlace éster de 1 molécula de cafeína 163 Da y 1 molécula de acetil 43 Da. El tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia son consistentes, y el pico de identificación 9 es 2'-acetil cistanche glucósido A.

2.7.10 Identificación de cromap tograficapico 10

El tiempo de retención del pico cromatográfico 10 es de 39,04 min. El pico de iones excimer m/z656 [M más NH4] más , 661 [M más Na] más se da en el modo de iones positivos, y el pico de iones excimer m/z637 [M – H] -, 673 [M más Cl] - se da en el modo de iones negativos. Se determina que el peso molecular relativo del pico 10 es 638. Al mismo tiempo, el ion del fragmento m/z475 se deriva de la pérdida por rotura del enlace éster de 1 molécula de cafeína 163 Da. El tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia son consistentes y el pico de identificación 10 es Cistanche C.

2.7.11 Identificación del pico cromatográfico 11

El tiempo de retención del pico cromatográfico 11 es de 40,82 min. El pico de iones excimer m/z661 [M más Na] más , 677 [M más K] más se da en el modo de iones positivos, y el pico de iones excimer m/z637 [M – H] -, 673 [M más Cl] - se da en el modo de iones negativos. Puede determinarse que el peso molecular relativo del pico 11 es 638. Al mismo tiempo, el ion del fragmento m/z475 se deriva de la pérdida por ruptura del enlace éster de 1 molécula de cafeína 163 Da. Combinando el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia, el pico cromatográfico 11 se identificó como isocistanche glucósido C.

2.7.12 Identificación del pico cromatográfico 12

El tiempo de retención del pico cromatográfico 12 es de 41,48 min. El pico de iones excimer m/z684 [M más NH4] más , 689 [M más Na] más se da en el modo de iones positivos, y el pico de iones excimer m/z665 [M – H] - se da en el modo de iones negativos . Se puede determinar que el peso molecular relativo del pico 12 es 666. A su vez, se demuestra que el ion fragmento m/z503460 proviene de la pérdida por rotura del enlace éster de 1 molécula de cafeína 163 Da y 1 molécula de acetil 43 da. De acuerdo con el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia, el pico cromatográfico 12 se identificó como 2'-acetil coeliaósido.

Experimento Cistanche deserticola

2.7.13 Identificación del pico cromatográfico 13

El tiempo de retención del pico cromatográfico 13 es de 44,29 min, el pico de iones excimer m/z689 [M más Na] plus se da en el modo de iones positivos, y el pico de iones excimer m/z665 [M – H] - se da en el modo de iones positivos. modo de ion negativo, y el peso molecular relativo del pico 13 es 666. Al mismo tiempo, se muestra que el fragmento de ion m/z503460 proviene de la pérdida por ruptura del enlace éster de 1 molécula de cafeína 163 Da y 1 molécula de acetil 43 da. Combinado con el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia, el pico cromatográfico 13 se identificó como antocianina B.

2.7.14 Identificación del pico cromatográfico 14

El tiempo de retención del pico cromatográfico 14 es de 46,67 min. El pico de iones excimer m/z675 [M más Na] plus se da en el modo de iones positivos, y el pico de iones excimer m/z651 [M – H] - se da en el modo de iones negativos. El peso molecular relativo del pico 14 es 652. Al mismo tiempo, el fragmento de ion m/z475 se deriva de la pérdida por ruptura del enlace éster de 1 molécula del grupo de ácido ferúlico 177Da. Combinado con el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia, el pico cromatográfico 14 se identificó como epimeridinósido A.

2.7.15 Identificación del pico cromatográfico 15

El tiempo de retención del pico cromatográfico 15 es de 49,90 min. El pico de iones excimer m/z698 [M más NH4] más , 703 [M más Na] más se da en el modo de iones positivos, y el pico de iones excimer m/z679 [M – H] -, 715 [M más Cl] - se da en el modo de iones negativos. El peso molecular relativo del pico 15 es 680. Al mismo tiempo, el fragmento de ion m/z517474 se deriva de la pérdida por ruptura del enlace éster de 1 molécula de cafeína 163 Da y 1 molécula de acetil 43 Da. El pico cromatográfico 15 se identificó como glucósido K de cistanche basándose en el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia.

2.7.16 Identificación del pico cromatográfico 16

El tiempo de retención del pico cromatográfico 16 es de 55,36 minutos. En el modo de iones positivos, se da el pico de iones excimer m/z717 [M más Na] más, mientras que en el modo de iones negativos, los picos de iones excimer m/z693 [M – H] -, 729 [M más Cl] - se dan, dando como resultado un peso molecular relativo de 694 para el pico 16. Al mismo tiempo, se muestra que el ion fragmento m/z517474 proviene de la pérdida por ruptura del enlace éster de 1 molécula del grupo de ácido ferúlico 177 Da y 1 molécula de grupo acetilo 43 Da. En combinación con el tiempo de retención y el peso molecular relativo de la sustancia de referencia, el pico cromatográfico 16 se identificó como glucósido de cistanche J. Los picos cromatográficos del extracto de 60 % metanol de Cistanche deserticola se identificaron mediante HPLC-MS en combinación con el peso molecular relativo, la retención tiempo, y fragmento de ión de la sustancia de referencia separada. Los resultados mostraron que se identificaron con precisión 17 componentes de los 16 picos cromatográficos (Tabla 2).

Tabla 2 Picos cromatográficos identificados de Cistanches Herba y compuestos estándar de referencia

3 .Discusión

3.1 Selección del método de preparación del artículo de prueba

El objetivo principal de este estudio es identificar los picos de HPLC de Cistanche deserticola. Por lo tanto, la selección del solvente de extracción y el método de extracción se basa en la capacidad de obtener más picos de HPLC. El equipo de investigación ha llevado a cabo investigaciones a largo plazo sobre Cistanche deserticola y ha trabajado mucho en análisis de calidad. En este documento, el solvente de extracción y el método de extracción de Cistanche deserticola también se seleccionaron con base en el trabajo de análisis previo del grupo de investigación y la Farmacopea China (edición de 2015). Finalmente, se seleccionó como método de extracción la extracción ultrasónica con disolvente de metanol al 60 por ciento durante 40 min.

3.2 Selección de condiciones de HPLC-MS

La selección de la columna cromatográfica en este artículo se basa en el análisis de calidad de Cistanche deserticola en la etapa inicial del grupo de investigación, y la investigación de AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μ m), DionexC18 (4,6 mm × 250 mm,5 μ m), columna cromatográfica ThermoC18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μ m), finalmente seleccione la columna cromatográfica AgilentZORBAXEclipsePlusC18 (4,6 mm × 250 mm, 5 μ m) Tiene un buen efecto de separación en Cistanche deserticola; Las 39 sustancias de referencia incluyen feniletanoide, lignanos y fenilpropanoide, por lo que la longitud de onda de detección es de 254 nm; Al mismo tiempo, los efectos de la fase móvil como metanol-agua, acetonitrilo-agua, metanol-0.1 por ciento de agua con ácido fosfórico, acetonitrilo-0.1 por ciento de agua con ácido fórmico en la separación cromatográfica y la masa Se investigó la detección por espectrometría y finalmente se seleccionó acetonitrilo-0.1 por ciento de agua con ácido fórmico como fase móvil.

3.3 Resumen

El método establecido en este estudio identificó con precisión 17 componentes de 16 picos cromatográficos de 60 por ciento de metanolextractodeCistanche desertica. 

extracto de cistanche en polvo

Los resultados de la investigación no solo tienen un cierto valor de referencia para el análisis de calidad adicional del material medicinal, sino que también pueden evitar algún trabajo repetitivo en la identificación de la estructura de los compuestos conocidos del material medicinal. Sin embargo, en general, hay relativamente pocos picos cromatográficos identificados y muchos picos cromatográficos no se han identificado porque no se han asignado a la sustancia de referencia. La mayoría de los componentes identificados son glucósidos de feniletanoide, mientras que los lignanos son raros. Esto puede deberse a que el método de extracción al que se hace referencia en la edición de 2015 de la Farmacopea China está dirigido principalmente a los glucósidos feniletanoides, o a que el contenido de equinacósido y compuestos similares a coliformes en el extracto de este material medicinal es demasiado alto, lo que dificulta para detectar otros compuestos con poco contenido. Las razones específicas deben aclararse más.

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