Identificación de biomarcadores de disfunción de las glándulas de Meibomio en una cohorte de pacientes afectados por DM tipo II Parte Ⅰ

Abstracto:

(1) Antecedentes: la disfunción de las glándulas de Meibomio (DGM) en pacientes con diabetes mellitus (DM) es una manifestación común del síndrome del ojo seco (DES).

(2) Métodos: El propósito de este estudio es identificar parámetros clínicos y biomarcadores útiles para mejorar el seguimiento y tratamiento de estos pacientes. Hemos utilizado un cuestionario del índice de enfermedad de la superficie ocular (OSDI), la prueba de Schirmer I/II, el tiempo de ruptura de la película lagrimal (TF-BUT), la tinción con fluoresceína más verde lisamina, la línea de Marx (ML) y la morfología de las glándulas de Meibomio (MG). utilizando Sirius® Topographer (CSO, Costruzione Strumenti Oftalmici, Florencia, Italia). El análisis de muestras de sangre incluyó glucosa, hemoglobina glicosilada, perfil lipídico, cortisol, sulfato de dehidroepiandrosterona (DHEA-S), androstenediona (ASD) y testosterona.

(3) Resultados: el cortisol y el TEA se correlacionaron positivamente con un aumento de la tortuosidad de las MG, y un nivel elevado de triglicéridos se asoció con una reducción de la longitud de las MG. Los niveles de DHEAS disminuyeron con la edad y se asociaron con la tinción de la superficie ocular.

(4) Conclusiones: los estudios futuros, que quizás incluyan el análisis de lípidos de meibum y los niveles de citocinas en lágrimas, también pueden aclarar aún más la conexión entre estos parámetros, la arquitectura de MG y la función.

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Palabras clave: disfunción de las glándulas de Meibomio; diabetes mellitus; hormonas; biomarcadores

1. Introducción

Las glándulas de Meibomio (MG) son glándulas sebáceas modificadas dentro de la placa tarsal superior e inferior y se distribuyen verticalmente hasta el margen del párpado. Las MG son más abundantes en los párpados superiores y son más largas, almacenando el doble de lípidos en comparación con las MG del párpado inferior [1]. Los lípidos secretados por las MG se denominan meibum y se liberan de sus orificios visibles justo por detrás de la unión mucocutánea a lo largo del borde del párpado. Meibum juega un papel clave en la estabilidad de la película lagrimal, reduciendo la evaporación de la capa acuosa y protegiendo la superficie del ojo como una barrera hidrofóbica [1].

El deterioro de las MG conduce a la disfunción de las glándulas de Meibomio (MGD), una inflamación crónica que provoca la oclusión del conducto terminal y la secreción lipídica modificada. MGD es la razón más común para el síndrome del ojo seco evaporativo (DES). Los pacientes a menudo sufren de sequedad prolongada, ardor y sensación de cuerpo extraño, y pueden experimentar una calidad de vida comprometida [2]. Numerosos estudios han sugerido una conexión entre la DGM y factores sistémicos, como la deficiencia de andrógenos [3], la hiperlipidemia [4] y la diabetes mellitus (DM) [5]. Recientemente se ha descubierto que la DM es un factor de riesgo significativo para el desarrollo de DGM [4].

La asociación entre la DM y el riesgo de desarrollar SFA también está respaldada por un metaanálisis reciente que consideró a más de 2,5 millones de pacientes de un total de 17 estudios [6]. Esta asociación tiene una justificación patogenética considerando que la MG es una glándula sebácea modificada y que la estructura y función de las glándulas sebáceas están alteradas en sujetos diabéticos [4,5]. Se ha planteado la hipótesis de que la producción/respuesta alterada de insulina y la hiperglucemia son elementos clave en la patogenia de la DGM en sujetos diabéticos. La insulina es fundamental para el correcto metabolismo de las glándulas sebáceas; una deficiencia de insulina promovería la disfunción [5].

Además, la hiperglucemia es un estímulo para la lipólisis en los adipocitos y esta respuesta en las MG puede reducir la calidad del meibum [7]. Estos mecanismos patogénicos están respaldados por evidencia reciente que muestra que la insulina puede estimular la proliferación de células epiteliales de las glándulas de Meibomio humanas inmortalizadas (HMGEC), mientras que se descubrió que la glucosa alta es tóxica para las HMGEC [5]. La DGM y la pérdida de lágrimas por evaporación asociada son seguidas por un aumento de la inflamación en la superficie del ojo con el crecimiento de poblaciones bacterianas respaldadas por lípidos anormales como sustratos [8]. También se ha encontrado recientemente que el estado inflamatorio crónico en pacientes con DGM está relacionado con altas concentraciones de citocinas inflamatorias en la película lagrimal [9,10]. En nuestro estudio, analizamos los marcadores séricos y el desarrollo de DGM en pacientes con DM.

2. Material y Métodos

Este estudio transversal incluyó pacientes con DM tipo II y síntomas de DGM que asistieron al Departamento de Oftalmología del Hospital A. Fiorini en Terracina (Latina, Italia) en los últimos seis meses. El estudio se realizó de conformidad con los principios de la Declaración de Helsinki, la Conferencia Internacional sobre Armonización y las recomendaciones de Buenas Prácticas Clínicas. Se obtuvo el consentimiento informado de todos los sujetos antes del inicio del estudio. Los criterios de inclusión fueron pacientes afectados por DM tipo II con síntomas de DGM. Los criterios de exclusión incluyeron: infecciones oculares recientes, alergias estacionales, antecedentes de cirugía ocular, uso de medicamentos o gotas para los ojos que se sabe que afectan la superficie ocular, usuaria actual o anterior de lentes de contacto, embarazada por autoinforme, enfermedad tiroidea, enfermedad autoinmune , uso de anticonceptivos, fumadores y terapia de reemplazo hormonal antiandrógeno y menopausia.

Se solicitó a todos los sujetos que completaran el Índice de enfermedad de la superficie ocular (OSDI) Allergan, Inc., Irvine, CA, EE. UU. Cuestionario [11]. Brevemente, los pacientes marcan la intensidad de sus síntomas en una escala de 0–4 (0: nunca, 1: algunas veces, 2: la mitad de las veces, 3: la mayoría del tiempo, 4: todo el tiempo). La puntuación final se midió y osciló entre 0 y 100 (puntuación 0-12: normal, 13-22: ojo seco leve, 23-32: ojo seco moderado, mayor de 33 : enfermedad grave del ojo seco). Se realizó un examen biomicroscópico del segmento anterior y se analizó el margen palpebral para detectar la presencia de telangiectasias, anomalías del margen palpebral, orificios MG ocluidos y desplazamiento anterior/posterior de la unión mucocutánea. Este último se evaluó según Yamaguchi et al. [12]. En la Tabla 1 se informa una puntuación de la línea de Marx (ML).

El tiempo de ruptura de la película lagrimal (TFBUT) se determinó de la siguiente manera: se pidió a los sujetos que parpadearan 3 o 4 veces después de la instilación de fluoresceína en el fórnix inferior. TFBUT fue evaluado por el tiempo entre el último parpadeo y la aparición del primer punto negro; se registraron los resultados de tres mediciones. [13] Se usó la tinción de la superficie ocular con verde de lisamina para determinar la puntuación de Van Bijsterveld (vBS): la superficie ocular se divide en tres áreas; conjuntiva bulbar nasal, conjuntiva bulbar temporal y córnea. Cada área se evalúa en una escala de 0 a 3, donde 0 indica que no hay tinción y 3 indica tinción confluente; la puntuación máxima alcanzable con este sistema es 9 [13].

La prueba de Schirmer evalúa la producción de lágrimas acuosas y se realiza utilizando tiras de papel estériles aplicadas en el lado temporal inferior del saco conjuntival de ambos ojos. La longitud mojada, en milímetros, se mide después de 5 min. Existen dos versiones de la prueba: sin anestesia tópica para evaluar la secreción lagrimal total, que es la suma del flujo lagrimal reflejo y basal (prueba de Schirmer I), y con anestesia tópica para cuantificar la secreción lagrimal basal (prueba de Schirmer II) [14 ]. Solo se incluyeron en los resultados los datos del mismo ojo en el que se realizó la meibografía. La meibografía se realizó en un ojo seleccionado al azar de cada sujeto utilizando el topógrafo Sirius® (CSO, Costruzione Strumenti Oftalmici, Florencia, Italia) [15].

Only upper eyelids were analyzed. Three images for each eye were recorded. The device determines the dropout area semi-automatically by percentage and assesses meiboscore as follows: grade 0, no loss at all; grade 11 4, ≤25%; grade 2, 26–50%; grade 3, 51–75%; and grade 4, >75 por ciento (Figura 1).

2.1. Análisis de imagen

Las tres imágenes representativas mejor enfocadas de un ojo aleatorio, con buen brillo y contraste de imagen, se seleccionaron para el análisis de longitud, anchura y área de MG. Dos observadores enmascarados (AF y FA) realizaron el análisis de la imagen de la mamografía. Brevemente, la longitud de la MG se cuantificó con Neuron, un complemento de ImageJ (http://www.imagescience.org/Beijing/software, (consultado el 10 de octubre de 2022)) que se usó anteriormente para el rastreo semiautomático del nervio corneal [16] pero también puede ser útil para cuantificar la longitud y el ancho de MG (Figura 2).

Las MG principales se definieron como el número total de MG en una imagen; Las longitudes de MG fueron longitud de MG/área de cuadro convertidas a mm/mm2. El ancho de MG se calculó en la parte superior, central e inferior de cada glándula y se informó como ancho de MG/área del marco convertida a mm/mm2. El número total de MG y la longitud y el ancho de la MG se calcularon sumando las MG principales, la longitud y el ancho, respectivamente. El área de MG se analizó utilizando el método anterior informado [15,17] pero, a diferencia de este método, configuramos la imagen exterior en blanco y el interior en negro para generar una máscara de verdad de tierra binaria. Se creó y guardó un borde poligonal alrededor de las glándulas. El valor se reportó como área en mm2 (Figura 3).

Se recolectó una muestra de sangre en ayunas para analizar los niveles de glucosa, hemoglobina glicosilada (HbA1c), triglicéridos, colesterol total, colesterol HDL (lipoproteína de alta densidad), LDL (lipoproteína de baja densidad), sulfato de dehidroepiandrosterona (DHEA-S), androstenediona (ASD) , cortisol y nivel de testosterona.

2.2. Análisis estadístico

Las variables continuas se expresaron como media ± error estándar de la media. En términos de la prueba de Kolmogorov-Smirnov y la prueba de Shapiro-Wilk, nuestros datos se distribuyeron aproximadamente normalmente. Los valores p estaban por encima de 0.05 para todas las variables excepto para el nivel de testosterona. Se realizó la correlación de Spearman para medir la intensidad y dirección de la asociación entre dos variables. Se utilizó la prueba ANOVA de una vía para la comparación de más muestras. Se realizó un análisis de regresión lineal para analizar los biomarcadores según las variables de MG obtenidas mediante meibografía. Se realizó un análisis de regresión utilizando un método de selección por pares para identificar la variable más importante asociada con la DGM. El coeficiente de correlación intraclase (ICC) se calculó entre dos observadores enmascarados para la longitud, el ancho y el área de las MG. El análisis estadístico se realizó con SPSS versión 22 (SPSS Inc., Chicago, IL, EE. UU.), y se consideró significativo un valor de p inferior a 0,05.

El mecanismo de Cistanche potencia el efecto de la testosterona

Se ha descubierto que Cistanche aumenta los niveles de testosterona de varias maneras. En primer lugar, contiene compuestos conocidos como equinacósido y acteósido, que se ha demostrado que mejoran la producción de la hormona luteinizante (LH) en la glándula pituitaria. LH estimula las células de Leydig en los testículos para producir testosterona. Cistanche también contiene polisacáridos y glucósidos feniletanoides, que han demostrado tener propiedades antioxidantes y antiinflamatorias. Esto puede ayudar a reducir el estrés oxidativo y la inflamación en los testículos, lo que puede afectar la producción de testosterona. Además, se ha descubierto que Cistanche aumenta la expresión de genes involucrados en la síntesis de testosterona y reduce la actividad de las enzimas que descomponen la testosterona, como {{1} }alfa-reductasa. En general, se cree que la combinación de estos mecanismos contribuye a los efectos potenciadores de la testosterona de Cistanche.

Continuará...

Alessandro Abbouda 1,* , Antonio Florido 1,2 , Filippo Avogaro 1,2 , John Bladen 3 y Enzo Maria Vingolo 1,2

1 Departamento de Oftalmología, Hospital Alfredo Fiorini, 04019 Terracina, Italia

2 Departamento de Biotecnología y Ciencias Médico-Quirúrgicas, Universidad "Sapienza" de Roma, 04100 Latina, Italia

3 Departamento de Oculoplástica King's College Hospital NHS Foundation Trust, Denmark Hill, Londres SE5 9RS, Reino Unido