Permeabilidad intestinal y depresión en pacientes con enfermedad inflamatoria intestinalⅠ
Dec 20, 2023
Resumen: La depresión es un problema de salud global que requiere un diagnóstico temprano y preciso para garantizar un rápido acceso al tratamiento adecuado. La atención reciente se ha centrado en analizar el eje cerebro-intestino-microbiota entre múltiples vías psicopatológicas. La barrera intestinal juega un papel clave y las disfunciones que se producen a este nivel tienen implicaciones para la salud mental. El presente estudio tuvo como objetivo investigar el papel de los biomarcadores de permeabilidad intestinal, es decir, calprotectina, zonulina, proteína fijadora de lipopolisacáridos (LBP) y proteína transportadora de ácidos grasos intestinales (I-FAB), en la depresión en pacientes con enfermedad inflamatoria intestinal (EII). ).
Éste es el primer estudio de este tipo que se realiza en Rumania, Europa del Este, con énfasis en pacientes con enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa. Las correlaciones identificadas entre la depresión y la calprotectina y la depresión y el dolor lumbar tienen el potencial de arrojar luz sobre el proceso de diagnóstico rápido de la depresión con la ayuda de biomarcadores. Dado que la depresión se correlaciona con una disminución de la calidad de vida de los pacientes hospitalizados con EII, la necesidad de acceso a tratamientos adecuados debe ser urgente.
1. Introducción
La depresión es una discapacidad individual, profesional y social asociada a morbilidades somáticas [1,2] y con un alto riesgo de mortalidad por suicidio [3]. Sin embargo, el acceso a especialistas, un diagnóstico correcto y una cura eficaz son limitados [4]. Un diagnóstico temprano y preciso [5,6], así como una selección personalizada del tratamiento [7], son necesarios para disminuir el sufrimiento y la carga financiera de la enfermedad [3]. Según los criterios de diagnóstico del Manual Diagnóstico y Estadístico de los Trastornos Mentales (DSM V) [8], la depresión es un trastorno afectivo con un grupo heterogéneo de síntomas. Para ser diagnosticado se requiere la presencia de cinco de los nueve síntomas siguientes: estado de ánimo deprimido, falta de placer, dificultad para dormir y apetito, bajos niveles de energía, cambios cognitivos, sentimientos de culpa y culpa e ideas suicidas. Hasta el momento, los datos exactos Se desconocen los mecanismos fisiopatológicos para beneficiarse de un tratamiento eficaz. Se han puesto en duda varios mecanismos, pero las teorías aún están desarrollándose.
Por lo tanto, se han investigado las disfunciones en el eje hipotalámico-pituitario, los neurotransmisores, el nervio vago, los metabolitos de los ácidos grasos de cadena corta, el triptófano, los factores inflamatorios y el eje cerebro-intestino-microbiota [9-12]. Se ha demostrado que los trastornos relacionados con el estrés no sólo provocan cambios en la composición de la microbiota intestinal a través del eje hipotalámico-pituitario-suprarrenal, sino que también el intestino afecta a la
sistema nervioso central a través de la estimulación vagal, la permeabilidad intestinal y la liberación de compuestos inflamatorios y antiinflamatorios y cambios en los agentes circulantes en la sangre [13]. En las últimas dos décadas, el estudio de la implicación del eje cerebro-intestino-microbiota en los trastornos mentales ha cobrado impulso [9,14]. En este contexto, el papel del síndrome del intestino permeable ha recibido más atención [15,16].
La barrera intestinal tiene el papel principal en la digestión y absorción de nutrientes; en segundo lugar, controla estrictamente el transporte de antígenos desde la luz a la submucosa y mantiene el equilibrio entre la tolerancia y la respuesta inmune que causa la inflamación. La integridad de la barrera intestinal puede verse afectada por la dieta, la disbiosis de la microbiota intestinal u otros factores. Estos tienen el potencial de causar activación inmune mediante la translocación de antígenos y metabolitos microbianos. Actualmente, se han analizado la zonulina sérica, la proteína transportadora de ácidos grasos intestinales (IFABP/FABP2) y la LBP, así como la albúmina fecal, la calprotectina y la zonulina como permeabilidad intestinal. marcadores [17]. La calprotectina es una proteína que se une al calcio y al zinc, inicialmente aislada de los leucocitos; es útil para diferenciar la enfermedad inflamatoria intestinal del síndrome del intestino irritable. Desempeña un papel importante durante la inflamación y se considera una proteína de fase aguda [18 ].
Los valores normales están entre 10 y 50 o 60 (ug/g). Valores superiores a 200 (ug/g) pueden indicar una enfermedad inflamatoria, y valores superiores a 500-600 (ug/g) ciertamente indican la existencia de una enfermedad intestinal [19]. La proteína fijadora de lipopolisacáridos (LBP) es un componente lipídico esencial de la membrana externa. de bacterias Gram-negativas [20], que causa endotoxemia [21]. La LBPis producida por hepatocitos, tejido adiposo y células intestinales funciona como una proteína de fase I aguda y desempeña un papel importante en la respuesta inmune [22]. El dolor lumbar está presente en suero en concentraciones de 5 a 15 mg/ml y aumenta de 10 a 50 veces durante la reacción de fase aguda. La función de barrera se mantiene mediante la zonulina, conocida como el único modulador fisiológico de las uniones intracelulares cercanas (UT) [15,23, 24]. La zonulina abre reversiblemente la TJ, actuando sobre el receptor 2 activado por proteasa ubicado en el espacio intracelular del complejo de unión [25]. El valor medio de zonulina es 34 ng/ml [26].
La proteína de unión a ácidos grasos intestinales (I-FABP/FABP2) es una de las nueve FABP diferentes identificadas, que pertenecen a una superfamilia de proteínas que se unen a lípidos. La función principal es el transporte intracelular y la regulación de la absorción de ácidos grasos [27]. Cuando se produce daño a la barrera intestinal epitelial, la I-FABP se libera a la circulación y su concentración plasmática aumenta [28]. El valor umbral para I-FAPB se considera 2 ng/ml. En este contexto, nuestro objetivo fue investigar el papel de los biomarcadores de permeabilidad intestinal en la depresión en pacientes con enfermedad inflamatoria intestinal (EII) mediante (i) examinar la relación entre calprotectina, zonulina, dolor lumbar , IFABP/FABP2 y la depresión y (ii) evaluando la influencia de la depresión en la calidad de vida.
2. Materiales y métodos
2.1. Grupo de estudio
El grupo inicial incluyó a 60 pacientes de la Clínica de Gastroenterología del Hospital Clínico del Condado de Constanta entre abril y junio de 2021. Los criterios de inclusión fueron diagnóstico de EII, tener 18 años o más, conocimiento de lectura y escritura y aceptación de participar en el estudio. Los criterios de exclusión fueron negación de consentimiento, depresión severa u otros trastornos mentales severos por los cuales fueron remitidos al servicio psiquiátrico especializado. Luego del consentimiento informado, los pacientes fueron contactados telefónicamente por un investigador para aplicarles un cuestionario sociodemográfico sobre depresión y un cuestionario sobre calidad de atención. vida.En el estudio se incluyeron 30 pacientes que pasaron por todas las etapas del estudio.
2.2. Cuestionarios utilizados
Se aplicó el Cuestionario de salud del paciente-9 (PHQ-9) [29] a los participantes para evaluar el nivel de depresión que los afectaba. Este cuestionario estándar contiene nueve ítems que se deben responder en función de los síntomas que tuvo el paciente durante los últimos 14 días. Los puntajes se clasifican de la siguiente manera: 1-4 depresión mínima, 5-9 depresión leve, 10-14 depresión moderada, 15-19 depresión moderadamente severa y 20-27 depresión severa. De manera similar, se aplicó un cuestionario de calidad de vida (EQ{{ 14}}D) [30,31] para recopilar datos sobre la calidad de vida. Los ítems que comprende esta herramienta son la movilidad del paciente, el autocuidado, la realización de actividades habituales, el dolor o malestar y la ansiedad o depresión experimentada. Los ítems se responden en una escala de cinco niveles.
2.3. Recogida de muestras y análisis de laboratorio.
Se recolectaron muestras serológicas para zonulina, IFABP/FABP2, dolor lumbar y muestras fecales para calprotectina de acuerdo con el protocolo para la recolección y transporte de muestras biológicas potencialmente infecciosas. Las muestras de suero se recolectaron mediante punción venosa, en ayunas y en el vacutainer con un paño activador. Se recogieron muestras fecales de heces emitidas espontáneamente en recipientes sin medio portador. El suero se analizó para detectar zonulina con MyBioSource Kit, Inc. (San Diego, CA, EE. UU.). e IFABP/FABP2 y LBP con el kit Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. (Wuhan, China). Las muestras se analizaron para detectar calprotectina con el kit EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG. Todas las pruebas se realizaron mediante prueba inmunoabsorbente relacionada con enzimas (ELISA) en un analizador ADALTIS GEN-4 y Victor X4 de acuerdo con las instrucciones del fabricante del kit.
El fabricante del kit definió el rango de valores normales solo para la calprotectina de la siguiente manera: menor o igual a 50.0 mcg/g como normal, 50.1– 120,0 mcg/g como valor límite, y Mayor o igual a 120,1 mcg/g como positivo para enfermedad intestinal. Para la zonulina, el fabricante del kit de reacción no especificó ningún límite de detección inferior. El límite inferior de detección para el kit IFABP/FABP2 fue de 0,156 ng/ml, 3,125 ng/ml para dolor lumbar y 3,125 ng/ml para calprotectina. Para la zonulina, I-FABP/FABP2 y LBS/LBP, el fabricante del kit no comunicó un rango de valores normales y se utilizaron los valores utilizados por otros autores en sus estudios. El suero se extrajo de cada muestra de sangre mediante centrifugación a 3000 × g. durante 30 min utilizando una centrífuga Thermo Scientific SL16R.
Todos los sueros obtenidos se mantuvieron congelados a -200 ◦C hasta la realización de los análisis. Para IFABP/FABP2 y LBP, las muestras se diluyeron a la mitad con un tampón de dilución de muestra antes de realizar la prueba. Las muestras de heces se mantuvieron a -20 ◦C hasta el día de la prueba. La extracción de la muestra de heces se realizó utilizando un tampón de extracción de 980 ui junto con 20 mg de heces, se agitó durante 30 segundos y luego se centrifugó a 2000 × g durante 10 minutos utilizando la centrífuga Thermo Scientific SL16R. Luego se realizó la dilución de las muestras con 980 ui de tampón de muestra y 20 ui de sobrenadante de extracción.
Para los cuatro marcadores se utilizaron microplacas con 96 pocillos recubiertos con anticuerpos de captura: anticuerpos anticalprotectina, anticuerpos anti-IFABP/FABP2, anticuerpos anti-LBP o anticuerpos antizonulina. Los principios de la prueba se basaron en la misma tecnología de pruebas inmunológicas relacionadas con enzimas (ELISA). Posteriormente se agregaron a los pocillos muestras estándar, muestras de prueba y anticuerpos de detección conjugados con biotina. Se utilizaron sustratos de TMB (3,30,5,50-tetrametilbencidina) para visualizar la reacción enzimática HRP (peroxidasa de rábano picante). HRP catalizó TMB para producir un producto azul que cambió a amarillo después de la adición de una solución de parada ácida.
La densidad de la mancha amarilla fue proporcional a la cantidad de muestra capturada en la placa. La intensidad del color se midió a 450 nm en el lector de microplacas y luego se calculó la concentración objetivo.
2.4. Análisis estadístico
El análisis estadístico se realizó utilizando el software estadístico IBM SPSS versión 23 (Armonk, NY, EE. UU.: IBM Corp.). Los datos se presentan como mediana y RIC (intercuartil).rango P75–P25) para variables continuas en caso de distribuciones asimétricas o como porcentajes para variables categóricas.
Dado que la prueba de normalidad de Shapiro-Wilk indicó, en el caso de las variables continuas analizadas, valores estadísticos de la prueba cuya probabilidad (p) fue inferior al nivel de significancia {{0}}.05, se cumple la condición de no se cumplió la normalidad, excepto para las variables LBP y PHQ 9, para las cuales p >=0.05. Consideramos que era más apropiado un enfoque no paramétrico para el estudio de la correlación entre las variables en cuestión, con la presentación del coeficiente de correlación rho de Spearman (ρ) y la probabilidad (p) asociada al mismo. El nivel de significancia se fijó en 0,05.
Medicina herbaria natural para aliviar el estreñimiento-Cistanche
Cistanche es un género de plantas parásitas que pertenece a la familia Orobanchaceae. Estas plantas son conocidas por sus propiedades medicinales y se han utilizado en la Medicina Tradicional China (MTC) durante siglos. Las especies de Cistanche se encuentran predominantemente en regiones áridas y desérticas de China, Mongolia y otras partes de Asia Central. Las plantas de cistanche se caracterizan por sus tallos carnosos y amarillentos y son muy valoradas por sus potenciales beneficios para la salud. En la medicina tradicional china, se cree que Cistanche tiene propiedades tónicas y se usa comúnmente para nutrir los riñones, mejorar la vitalidad y apoyar la función sexual. También se utiliza para abordar problemas relacionados con el envejecimiento, la fatiga y el bienestar general. Si bien Cistanche tiene una larga historia de uso en la medicina tradicional, la investigación científica sobre su eficacia y seguridad está en curso y es limitada. Sin embargo, se sabe que contiene varios compuestos bioactivos como glucósidos feniletanoides, iridoides, lignanos y polisacáridos, que pueden contribuir a sus efectos medicinales.
Wecistanche'scistanche en polvo, tabletas de cistanche, cápsulas de cistanchey otros productos se desarrollan utilizandodesiertocistancheComo materias primas, todos los cuales tienen un buen efecto para aliviar el estreñimiento. El mecanismo específico es el siguiente: Se cree que Cistanche tiene beneficios potenciales para aliviar el estreñimiento según su uso tradicional y ciertos compuestos que contiene. Si bien la investigación científica específicamente sobre el efecto de Cistanche sobre el estreñimiento es limitada, se cree que tiene múltiples mecanismos que pueden contribuir a su potencial para aliviar el estreñimiento. Efecto laxante:cistancheSe ha utilizado durante mucho tiempo en la Medicina Tradicional China como remedio para el estreñimiento. Se cree que tiene un efecto laxante suave, que puede ayudar a promover las deposiciones e inducir el estreñimiento. Este efecto puede atribuirse a varios compuestos de Cistanche, como los glucósidos y polisacáridos de feniletanoide. Humedecer los intestinos: según el uso tradicional, se considera que Cistanche tiene propiedades humectantes, dirigidas específicamente a los intestinos. Promover la hidratación y lubricación de los intestinos puede ayudar a ablandar las herramientas y facilitar el paso, aliviando así el estreñimiento. Efecto antiinflamatorio: el estreñimiento a veces puede estar asociado con inflamación en el tracto digestivo. Cistanche contiene ciertos compuestos, incluidos glucósidos feniletanoides y lignanos, que se cree que tienen propiedades antiinflamatorias. Al reducir la inflamación en los intestinos, puede ayudar a mejorar la regularidad de las deposiciones y aliviar el estreñimiento.