Estudio sobre la especificación óptima de las piezas Herba Cistanches Fuju

Cistanche deserticola se registró por primera vez en Herbal Classic de Shennong. Tiene los efectos denutritivo yang del riñón, reponiendo esencia y sangre, y humedeciendo los intestinos yaliviar el estreñimiento. Se ha utilizado en la práctica clínica comomedicina china tónica. La edición de 2020 de la Farmacopea de la República Popular China (en adelante, la "Farmacopea China") estipula que Cistanche deserticola se deriva de los tallos carnosos secos con hojas escamosas de Cistanche deserticola o Cistanche tubulosa, plantas de la familia Orobanchaceae. Las especificaciones de los materiales medicinales de Cistanche deserticola suelen tener de 2 a 8 cm de diámetro y de 3 a 15 cm de longitud.

Según las "Reglas generales de procesamiento 0213" de la Farmacopea China, la Cistanche deserticola se forma en rodajas gruesas e irregulares durante el proceso de procesamiento, con un espesor de 2 a 4 mm. La mayoría de las rodajas de Cistanche deserticola cortadas son rodajas grandes y gruesas con un diámetro de 2 a 8 cm y un grosor de 2 a 4 mm [1].

EXTRACTO DE CISTANCHE TUBULOSA DE ALTA CALIDAD PARA LA VENTA

Esta pieza de decocción tradicional tiene un tamaño desigual y una gran diferencia de calidad. Es difícil controlarlo durante el ajuste clínico. Además, los ingredientes eficaces son difíciles de disolver uniformemente durante la decocción, lo que da lugar a una gran diferencia en la calidad de cada decocción.

Además, estudios relevantes han informado que el contenido de la composición química de diferentes partes de Cistanche deserticola es bastante diferente, y la capacidad de las diferentes partes para eliminar los radicales libres 1,1-difenil-2-trinitrofenilhidrazina (DPPH) en vitro también es diferente [2], lo que dificulta garantizar la eficacia clínica de las rodajas tradicionales de Cistanche deserticola. Entre los métodos para mejorar la eficacia clínica, las rebanadas de medicina china son un tipo de rebanadas heredadas e innovadoras que siguen la teoría de la medicina tradicional china y los métodos de procesamiento de la medicina tradicional china, seleccionan materiales medicinales de alta calidad de la fuente y se procesan y procesan con características especiales. Tienen una alta tasa de utilización, calidad uniforme, eficacia estable y son fáciles de ajustar y preparar. Conservan las características identificativas de las lonchas tradicionales.

El tamaño de las rodajas de medicina china se clasifica principalmente según la parte medicinal del material medicinal, las características de textura y la aplicación clínica [3]. Por ejemplo, las especificaciones de las rebanadas tradicionales se describen como "como soja", "como frijoles ma", "polvo grueso", etc. [4].

Cistanche deserticola es un material medicinal especial de tallo carnoso. Después del secado, el material medicinal es grande y largo. Es adecuado para cortarlo en tiras o cubos utilizando tecnología de corte moderna, que no solo puede mejorar la tasa de utilización de Cistanche deserticola y uniformar su calidad, sino que también conserva las características de identificación de las piezas medicinales tradicionales. Este estudio utiliza piezas medicinales tradicionales de Cistanche deserticola como puente y mastica Cistanche deserticola en pedazos y bloques de diferentes especificaciones. Las mejores especificaciones de las piezas medicinales masticadas de Cistanche deserticola se optimizan en función de las propiedades de la pieza medicinal, el ángulo de reposo, la tasa de decocción y la tasa de transferencia de verbascósido y equinacósido como indicadores de evaluación. Al mismo tiempo, se compara la uniformidad y consistencia de los atributos de calidad de las piezas medicinales tradicionales y las piezas medicinales masticadas, con el fin de proporcionar una referencia para la selección de especificaciones, el procesamiento y la producción de piezas medicinales masticadas de Cistanche deserticola.

1 materia

1.1 Instrumentos

HPLC termo U3000; columna cromatográfica XBridge C18 (250,0 mm × 4,6 mm, 5 μm); Cortadora de medicamentos alternativa CNC serie SQW (Kanghua Pharmaceutical Machinery Co., Ltd.); molino de corte tipo AM300S (Ant Source Scientific Instrument Co., Ltd.); Limpiador ultrasónico inteligente tipo DL-60J (Shanghai May Instrument Co., Ltd.); Vaporizador eléctrico tipo QM-Q5-H30DW (Changsha Quanmin Electric Co., Ltd.); Balanza analítica electrónica tipo MS204S una diezmilésima (Mettler Toledo); Balanza electrónica un millón tipo XPE26 (Mettler Toledo).

1.2 Medicamentos de prueba

Sustancia de referencia de echinacósido (Instituto de Inspección de Alimentos y Medicamentos de China, número de lote 111670-201907, pureza 91,80%), sustancia de referencia de verbascósido (Instituto de Inspección de Alimentos y Medicamentos de China, número de lote 111530-201914, pureza 95,2%), metanol ( grado cromatográfico); Wahaha agua purificada; Otros reactivos son de grado analítico.

Los materiales medicinales de Cistanche deserticola fueron recolectados por el equipo de investigación de Alxa, Mongolia Interior, Bayannur, Mongolia Interior y Jiuquan, Gansu, y fueron identificados como los tallos carnosos secos con hojas de escamas de Cistanche deserticola por el profesor Liu Shoujin de la Universidad de Chino Tradicional de Anhui. Medicamento.

2 métodos

2.1 Método de preparación de muestras

La Cistanche deserticola se dividió en 7 porciones, cada una de las cuales pesaba unos 500 g. Se eliminaron las impurezas, se lavaron las rodajas y se remojó la mezcla. Las rodajas se cortaron en rodajas tradicionales y en rodajas de 2- a 4- mm de grosor. Las rodajas de 2- a 4- mm de espesor se cortaron en hilos con un ancho de 2 mm × 2 mm, 2 mm × 4 mm y 4 mm × 4 mm, y cubos con longitudes de lados de 5 mm. , 8 mm y 10 mm, respectivamente.

2.2 Determinación de los componentes principales

Según la Farmacopea China, los dos componentes de los glucósidos de feniletanol representativos, verbascósido y equinacósido, se utilizaron como indicadores para la determinación [1].

2.2.1 Condiciones cromatográficas y prueba de idoneidad del sistema

Como carga se utilizó gel de sílice unido a octadecilsilano; se usó metanol como fase móvil A y 0. se usó una solución de ácido fórmico al 1% como fase móvil B. La elución en gradiente se realizó de acuerdo con los requisitos de la Tabla 1; la longitud de onda de detección fue de 330 nm. El número de placas teóricas calculadas en función del pico de echinacósido no debe ser inferior a 3000. El espectro de HPLC se muestra en la Figura 1.

2 métodos

2.1 Método de preparación de muestras

El material medicinal de Cistanche deserticola se dividió en 7 porciones, cada una de aproximadamente 500 g, y se eliminaron las impurezas. El material se lavó y humedeció, y luego se cortó en rodajas tradicionales y en rodajas. Las rodajas tradicionales eran principalmente rodajas de 2-4 mm de espesor, y las rodajas se cortaban en filamentos con un ancho × espesor de 2 mm × 2 mm, 2 mm × 4 mm y 4 mm × 4 mm, y cubos con longitudes laterales de 5 mm, 8 mm y 10 mm, respectivamente.

2.2 Determinación de los componentes principales

Se hizo referencia a la Farmacopea China y los dos componentes, verbascósido y equinacósido, que eran componentes representativos de los glucósidos de feniletanol, se utilizaron como indicadores para la determinación [1].

2.2.1 Condiciones cromatográficas y prueba de idoneidad del sistema

Como carga se utilizó gel de sílice unido con octadecilsilano; se usó metanol como fase móvil A y 0. Se usó una solución de ácido fórmico al 1% como fase móvil B. La elución en gradiente se realizó de acuerdo con las disposiciones de la Tabla 1; la longitud de onda de detección fue de 330 nm. El número de placas teórico calculado en función del pico de equinacósido no debe ser inferior a 3000. El espectro de HPLC se muestra en la Figura 1.

Figura 1 Cromatogramas de HPLC de muestras de prueba y referencia de equinacósido y verbascósido

2.2.2 Preparación de la solución de referencia.

Tome cantidades adecuadas de referencia de equinacósido y verbascósido, pese con precisión y agregue una solución de metanol al 50 % para obtener una solución mixta de 1 ml que contenga 0,2 mg de equinacósido y verbascósido, respectivamente.

2.2.3 Preparación de la solución de prueba

Tomar aproximadamente 1 g del polvo de este producto (pasado por el tamiz No. 4), pesarlo exactamente, ponerlo en un matraz aforado marrón de 100 mL, agregar exactamente 50 mL de solución de metanol al 50%, taparlo, agitarlo bien, Péselo, déjelo en remojo durante 30 min, trátelo con ultrasonido durante 40 min (potencia: 250 W, frecuencia: 35 kHz), déjelo enfriar, péselo nuevamente, agregue una solución de metanol al 50% para compensar el peso perdido, agítelo. bueno se deja reposar, se toma el sobrenadante, se filtra y se toma el filtrado para obtenerlo.

2.2.4 Investigación de relaciones lineales

Aspire con precisión {{0}}.1, 0.2, 0.5, 1.0, 2.0 ml de solución de referencia de verbascósido. , colocar en matraces volumétricos de {{10}} mL y agregar metanol a la báscula. Aspire con precisión 0.1, 0.2, 0.5, 1,0, 2,0 ml de solución de referencia de equinacósido, colóquelo en matraces volumétricos de 5 10 ml y agregue el 50 %. solución de metanol a la escala, mida de acuerdo con el método "2.2.1" y registre el área del pico correspondiente.

2.2.5 Prueba de precisión

Aspire con precisión las soluciones de referencia de verbascósido y equinacósido, inyecte 6 veces seguidas y mida la RSD de las áreas máximas de verbascósido y equinacósido.

2.2.6 Prueba de estabilidad

Aspire con precisión la misma solución de prueba y mídala según el método "2.2.1". Mídalo una vez cada 4 horas y pruébelo durante 24 horas. Calcule la RSD del área del pico de verbascósido y equinacósido.

2.2.7 Prueba de repetibilidad

Según el método de preparación de la solución de prueba, prepare 6 soluciones de prueba respectivamente, mídalas según el método "2.2.1" y calcule su RSD según el área del pico de verbascósido y equinacósido.

2.2.8 Prueba de recuperación de muestra

Pese con precisión 6 soluciones de prueba con contenido conocido de verbascósido y equinacósido, agregue 1 ml de solución de referencia de verbascósido y solución de referencia de equinacósido respectivamente, mida según el método de "2.2.1" y calcule la tasa de recuperación.

2.2.9 Determinación del ángulo de reposo

Utilice el método de inclinación. Llene una caja rectangular con el material medicinal hasta un grado moderado de holgura e incline gradualmente la caja hasta que el polvo comience a salir. El ángulo de inclinación es el ángulo de reposo. Sea la altura del ángulo de inclinación H y el fondo L. La fórmula para calcular el ángulo de reposo θ es:

tanθ=H/L

2.2.10 Determinación de la tasa de decocción

Tomar 50 g de rodajas de Cistanche deserticola, colocar en un matraz de fondo redondo de 1000 mL, agregar 10 veces la cantidad de agua, remojar por 30 min, decocción por 45 min, filtrar con tela filtrante de malla 200 en caliente, agregar 8 veces la cantidad de agua al residuo, decocción durante 30 min, filtrar con tela filtrante de malla 200 mientras está caliente, combinar el filtrado; concentrar a presión reducida (60 grados) para extraer, liofilizar para obtener polvo liofilizado de Cistanche deserticola y calcular la tasa de decocción de acuerdo con la siguiente fórmula [5]:

Donde, Y es la tasa de decocción; Wa es el peso del polvo liofilizado; Wb es el peso de las rebanadas.

2.2.11 Determinación de la tasa de transferencia

Según las condiciones cromatográficas indicadas en "2.1.1", se determinaron las fracciones de masa de verbascósido y echinacósido en las rodajas y el polvo liofilizado de Cistanche deserticola y se calculó la tasa de transferencia según la siguiente fórmula:

Donde, Z es la tasa de transferencia; Wc es la fracción masiva de verbascósido y equinacósido en polvo liofilizado; Wd es la fracción de masa de verbascósido y echinacósido en las rodajas.

2.2.12 Indicadores de observación

Se registraron el rendimiento del extracto, la tasa de transferencia total de verbascósido y echinacósido de diferentes especificaciones de rodajas de 㕮 抽 y rodajas tradicionales, y la tasa de decocción, la tasa de transferencia total de verbascósido y echinacósido se evaluaron mediante el método de puntuación ponderada. El coeficiente de peso de la determinación de la tasa de decocción fue {{0}}.5, y el coeficiente de peso de la tasa de transferencia total de verbascósido y equinacósido fue 0,5.

3 Resultados y análisis

3.1 Resultados de la investigación metodológica de la determinación del componente principal

Utilizando las condiciones cromatográficas de "2.2.1", la separación cromatográfica de verbascósido y equinacósido fue superior a 1,5. Los resultados de la investigación metodológica se muestran en la Tabla 2. Este método tiene buena precisión, estabilidad, repetibilidad, tasa de recuperación y efecto de separación, y puede usarse para determinar los contenidos de echinacósido y verbascósido en rodajas de Cistanche deserticola y polvo liofilizado.

Tabla 3 Resultados de pruebas de propiedades de diferentes especificaciones de rodajas de Cistanche deserticola (Cistanche deserticola)

3.3 Análisis de los resultados de diferentes especificaciones de piezas de decocción tradicionales y piezas de decocción de Yuzui y selección de especificaciones de Yuzui

Se puede observar en la Tabla 4 que los ángulos de reposo de los diferentes tamaños de piezas masticadas son menores que los de las piezas tradicionales. Cuanto menor sea el tamaño de los trozos masticados, menor será el ángulo de reposo. El cubo de 5 mm tiene el ángulo de reposo más pequeño con 30 grados, seguido por el cubo de 8 mm con 31,2 grados, y otras especificaciones son superiores a 35 grados.

En comparación con las piezas tradicionales, cuanto más pequeño sea el tamaño de las piezas, mayor será la tasa de decocción. Cuando el tamaño es de 2 mm × 2 mm, la tasa de decocción es la más alta, 63,61%, 2 mm × 4 mm, 60,33%, seguida de los cubos de 5 mm. Para piezas es del 60,18%, y en el resto de especificaciones es inferior al 60%. Cuando el tamaño del masticable es de cubos de 8 mm, es básicamente igual que las piezas tradicionales. No hubo un patrón significativo en el contenido total de verbascósido y equinácea en piezas de decocción, el contenido total de verbascósido y equinácea en polvo liofilizado y la tasa de transferencia.

A diferencia de la búsqueda de una mayor tasa de pasta seca y cantidad de decocción de ingredientes activos en piezas de decocción hervidas y en polvo [6], el principio de mantener la tasa de decocción y la tasa de transferencia de las piezas de decocción de Erzui es consistente con el de las piezas de decocción tradicionales. Se utilizó el método de puntuación ponderada para comparar la tasa de decocción y la tasa de transferencia total de verbascósido y equinácea entre diferentes especificaciones. Los resultados mostraron que la puntuación total de las piezas del tamaño de un cubo de 8 mm era consistente con la de las piezas tradicionales. Por lo tanto, esta especificación puede utilizarse como la mejor especificación para las piezas de Cistanche deserticola nuzui.

3.4 Análisis comparativo de la uniformidad de calidad de las lonchas tradicionales y 㕮嘴

Se tomaron muestras aleatoriamente del mismo lote de rebanadas tradicionales y 㕮嘴 7 veces de acuerdo con el ajuste clínico de 7 series como ciclo de tratamiento, y se compararon la humedad, la tasa de decocción, el contenido total de verbascósido y equinacósido y la tasa de transferencia de las 7 rebanadas. . Como se muestra en la Tabla 5, los valores de RSD de humedad, tasa de decocción, contenido total de verbascósido y equinacósido y tasa de transferencia de las 7 rebanadas tradicionales fueron mayores que los de las rebanadas 㕮嘴, y los valores de RSD de las rebanadas 㕮嘴 fueron todos menos del 2%. Se puede observar que la uniformidad de las rodajas de Cistanche deserticola 㕮嘴 de 8 mm cúbicos es mejor que la de las rodajas tradicionales.

3.5 Comparación de la evaluación de la consistencia de la calidad de las rebanadas tradicionales y 㕮嘴

Para permitir que las rebanadas de 㕮嘴 ​​tengan los atributos de calidad de las rebanadas de la medicina china, como la seguridad y la eficacia, se utilizó la decocción estándar preparada por las rebanadas tradicionales como puente para llevar a cabo la evaluación de la consistencia de la calidad de las rebanadas de 㕮嘴 ​​y las rebanadas tradicionales. A través de la investigación textual de hierbas, la investigación de la literatura, el área de producción y la investigación de mercado, se determinaron el área de producción auténtica y el área de producción principal de Cistanche deserticola, y luego se recolectaron muestras. Se recogieron no menos de 3 lotes de muestras en cada área de producción, y se recogieron un total de 15 lotes. Se procesaron diferentes lotes de Cistanche deserticola en rodajas tradicionales y rodajas de 㕮 jiu, y se determinó el rendimiento de las rodajas, la tasa de decocción y la tasa de transferencia de verbascósido y echinacósido.

Como se muestra en la Tabla 6, el rendimiento de 15 lotes de lonchas tradicionales estuvo entre 95.1% y 98.00%, con un promedio de 96.54%, la tasa de decocción estuvo entre 48.34% y 61.88%, con un promedio de 55,93%, y la tasa de transferencia estuvo entre 43,5% y 84,30%, con un promedio de 65,88%. El rendimiento de 15 lotes de rodajas decocadas osciló entre 81,80% y 97,70%, con un promedio de 91,40%, la tasa de decocción osciló entre 52,20% y 59,39%, con un promedio de 58,46%, y la tasa de transferencia osciló entre 60,5% y 72,80%, con un promedio de 8,15%. Se puede observar que los atributos de calidad de las piezas de 8 mm cúbicos de rodajas decocidas de Cistanche deserticola son relativamente consistentes con los de las rodajas tradicionales.

3.4 Análisis comparativo de la uniformidad de calidad de las lonchas tradicionales y 㕮嘴

Se tomaron muestras aleatoriamente del mismo lote de rebanadas tradicionales y 㕮嘴 7 veces de acuerdo con el ajuste clínico de 7 series como ciclo de tratamiento, y se compararon la humedad, la tasa de decocción, el contenido total de verbascósido y equinacósido y la tasa de transferencia de las 7 rebanadas. . Como se muestra en la Tabla 5, los valores de RSD de humedad, tasa de decocción, contenido total de verbascósido y equinacósido y tasa de transferencia de las 7 rebanadas tradicionales fueron mayores que los de las rebanadas 㕮嘴, y los valores de RSD de las rebanadas 㕮嘴 fueron todos menos del 2%. Se puede observar que la uniformidad de las rodajas de Cistanche deserticola 㕮嘴 de 8 mm cúbicos es mejor que la de las rodajas tradicionales.

3.5 Comparación de la evaluación de la consistencia de la calidad de las rebanadas tradicionales y 㕮嘴

Para permitir que las rebanadas de 㕮嘴 ​​tengan los atributos de calidad de las rebanadas de la medicina china, como la seguridad y la eficacia, se utilizó la decocción estándar preparada por las rebanadas tradicionales como puente para llevar a cabo la evaluación de la consistencia de la calidad de las rebanadas de 㕮嘴 ​​y las rebanadas tradicionales. A través de la investigación textual de hierbas, la investigación de la literatura, el área de producción y la investigación de mercado, se determinaron el área de producción auténtica y el área de producción principal de Cistanche deserticola, y luego se recolectaron muestras. Se recogieron no menos de 3 lotes de muestras en cada área de producción, y se recogieron un total de 15 lotes. Se procesaron diferentes lotes de Cistanche deserticola en rodajas tradicionales y rodajas de 㕮 jiu, y se determinó el rendimiento de las rodajas, la tasa de decocción y la tasa de transferencia de verbascósido y echinacósido.

Como se muestra en la Tabla 6, el rendimiento de 15 lotes de lonchas tradicionales estuvo entre 95.1% y 98.00%, con un promedio de 96.54%, la tasa de decocción estuvo entre 48.34% y 61.88%, con un promedio de 55,93%, y la tasa de transferencia estuvo entre 43,5% y 84,30%, con un promedio de 65,88%. El rendimiento de 15 lotes de rodajas decocadas osciló entre 81,80% y 97,70%, con un promedio de 91,40%, la tasa de decocción osciló entre 52,20% y 59,39%, con un promedio de 58,46%, y la tasa de transferencia osciló entre 60,5% y 72,80%, con un promedio de 8,15%. Se puede observar que los atributos de calidad de las piezas de 8 mm cúbicos de rodajas decocidas de Cistanche deserticola son relativamente consistentes con los de las rodajas tradicionales.