El efecto de los antidiabéticos en el riñón de las ratas

Contacto: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com

R Mary Sujin et al.

Resumen

La optimización de este estudio es unaanti-diabéticoefecto en elriñónde ratas Wistar albinas utilizando Gymnema Sylvestre (Retz) R.Br. polvo de hierbas Los ensayos histopatológicos y bioquímicos se realizaron en el órgano y suero sanguíneo delriñón. Las diferentes concentraciones de polvo tratadas como 5, 10, 15, 20/gms/25 días. El efecto de las drogas crudas en ratas redujo el peso corporal y la extensión dediabéticosfue evaluado en elriñónmidiendo los niveles de parámetros sanguíneos seleccionados de proteína, glucosa, colesterol, insulina y triglicéridos y el efecto de la histopatología. Los medicamentos crudos redujeron el peso corporal y renal de los animales y redujeron significativamente los niveles de insulina, proteínas, triglicéridos, colesterol y glucosa. Los datos se analizaron mediante cálculos matemáticos y los valores se expresaron como significativos.

Palabras clave:Anti-diabéticoefecto, Gymnema Sylvestre, ensayo histopatológico y bioquímico enRiñón.

Cistanche tubulosa previene la enfermedad renal, haga clic aquí para obtener la muestra

Introducción

La herboristería es una práctica de medicina tradicional o popular basada en el uso de plantas y extractos de plantas. Los medicamentos a base de hierbas están fácilmente disponibles en el mercado en las tiendas naturistas sin receta y se usan ampliamente en India, China, EE. UU. y en todo el mundo. Según una encuesta reciente, la mayoría de las personas que usan medicamentos a base de hierbas no informan a sus médicos sobre su consumo, lo que puede causar resultados anormales en las pruebas y confusión en el diagnóstico adecuado. Las interacciones entre medicamentos y hierbas pueden dar como resultado concentraciones inesperadas de los medicamentos terapéuticos. Varios productos a base de hierbas interfieren con los inmunoensayos utilizados para controlar las concentraciones de fármacos terapéuticos. Los medicamentos a base de hierbas también pueden causar efectos no deseados. Por lo tanto, la creencia común de que todo lo natural es seguro no es correcta.

Gymnema Sylvestre es una gran trepadora leñosa. Su componente principal es el ácido gimnémico que tieneanti-diabéticoy propiedades de hiperglucemia. Suprime el sabor del azúcar y se cree que neutraliza el exceso de azúcar presente en el cuerpo en la diabetes mellitus¹.

Toda la planta es estomacal, estimulante, laxante y diurética. Es bueno para la tos, la bilis y el dolor de ojos. Si se mastican las hojas de la planta, se suprime el sentido del gusto por las sustancias dulces y amargas.

El ácido germánico está formado por moléculas cuya disposición atómica es similar a la de las moléculas de glucosa. Esas moléculas llenan las ubicaciones de los receptores en las papilas gustativas durante un período de una a dos horas, lo que evita que las papilas gustativas se activen por cualquier molécula de azúcar presente en el alimento. De manera similar, las moléculas similares a la glucosa en el ácido gimnémico llenan las ubicaciones de los receptores en las capas externas de absorción del intestino, evitando así que el intestino absorba las moléculas de azúcar.

Indiscutiblemente, dos de los más pasados ​​por alto cuando se trata de la desintoxicación son el hígado y los riñones. Cuando el hígado está sobrecargado de trabajo, los riñones intentan tomar el relevo. Los riñones son dos órganos con forma de frijol, cada uno del tamaño del primero. Aunque los riñones son órganos pequeños en peso, reciben una gran cantidad (aproximadamente el 20 por ciento) de la sangre bombeada por el corazón. Todos los días, los riñones procesan alrededor de 200 cuartos de galón de sangre, para tamizar 2 cuartos de galón de productos de desecho y exceso de agua. Sin los riñones, los productos de desecho y las toxinas se acumularían en la sangre hasta niveles peligrosos y posteriormente dañarían el cuerpo. En consecuencia, debido a la acumulación de sustancias tóxicas o al abandono de la dieta, estos importantes órganos que filtran toxinas pueden inflamarse, infectarse y desarrollar cálculos renales o fallar por completo.

Como prácticamente todos los órganos del cuerpo, los riñones están sujetos a una variedad de trastornos y enfermedades. El daño renal generalmente ocurre gradualmente y sin síntomas, y es posible que solo después de años de enfermedad renal el funcionamiento de los riñones disminuya notablemente. En la enfermedad renal, generalmente se puede perder hasta el 75 por ciento de las funciones renales antes de que los efectos se vuelvan evidentes. Si no se trata, la enfermedad renal puede volverse irreversible y puede ser una amenaza importante para su salud. Las personas con diabetes, presión arterial alta o antecedentes familiares de enfermedad renal también necesitan prevenir activamente la enfermedad renal y mantener los órganos en condiciones óptimas.

La enfermedad renal asociada con el ácido aristolóquico (llamada nefropatía por hierbas chinas) puede provocar insuficiencia renal terminal con relativa rapidez. La nefropatía por hierbas chinas se identificó por primera vez en Bélgica en la década de 1990. Se descubrió que alrededor de 100 pacientes con insuficiencia renal habían tomado un "régimen de adelgazamiento" que luego se identificó como ácido aristolóquico. Las biopsias de riñón entre estos pacientes fueron muy similares y mostraron una cicatrización extensa y grave de los riñones. Al menos 70 de esos pacientes requirieron diálisis o trasplante de riñón. Posteriormente se identificaron casos adicionales de nefropatía por hierbas chinas en Francia, el Reino Unido y los Estados Unidos. Como resultado, en 2001, la FDA de EE. UU. emitió una advertencia severa y prohibió la importación de suplementos dietéticos que contuvieran este compuesto.

En el presente estudio, los efectos de diferentes concentraciones de G. Sylvestre en las ratas Wistar albinas a través de la reacción histopatológica y bioquímica en ratas.

Materiales y métodos

Recolección y Preparación de drogas crudas

La planta se recolectó y comparó con el herbario de Holy Cross College en Nagercoil, distrito de Kanyakumari, Tamil Nadu, India. Los especímenes se secaron a la sombra y se pulverizaron gruesos.

animales de experimentación

Se mantuvieron ratas Wister albinas de ambos sexos, con un peso de 180-210g, en jaulas separadas en condiciones ambientales estándar de temperatura de 20 a 30ºC y humedad con comida estándar para ratas y agua ad libitum. Los procedimientos experimentales se llevaron a cabo en estricto cumplimiento de las normas del comité institucional de ética animal.

Protocolo de estudio

Se realizó un estudio piloto para estudiar la relación dosis-respuesta del polvo vegetal de Gymnema, a dosis de 5, 10, 15, 20, 25 gms con arroz y leche por un periodo de 25 días.

Protocolo de tratamiento

Los animales se dividieron en 5 grupos de 5 animales cada uno y se trataron según el protocolo que se indica a continuación.

Grupo de Control (G1) :

Grupo de tratamiento (G2): Grupo de tratamiento (G3): Grupo de tratamiento (G4): Grupo de tratamiento (G5):

Los animales recibieron una dieta normal de arroz y leche durante 25 días.

Los animales recibieron 5 g de polvo con arroz y leche.

Los animales recibieron 10 g de polvo con arroz y leche.

Los animales recibieron 15 g de polvo con arroz y leche.

Los animales recibieron 20 g de polvo con arroz y leche.

La reducción de peso corporal en ratas se realizó en ayunas durante la noche posterior al período experimental. Se sacrificaron mediante anestesia usando vapor de cloroformo y se recogió sangre mediante sangrado de la arteria cardíaca y se transfirió inmediatamente a un tubo tratado con EDTA. A continuación, la sangre se centrifugó a 4000 rpm durante 10 min para eliminar los glóbulos rojos y recuperar el plasma. El riñón fue disecado, pesado y preservado para estudios histopatológicos. Se pesó el Riñón de diferentes grupos y se observaron las diferencias de peso.

Estudios histopatológicos

Las secciones del estómago se conservaron en formalina al 10 por ciento. Se tiñeron con hematoxilina y eosina, las secciones teñidas se observaron al microscopio para estimar la extensión de la diabetes Mellitus.

Pruebas bioquímicas

Estimación de la glucosa:La mezcla de reactivos (tampón de fosfato pH 7,5:250 mmol/1, fenol 5 mmol/1, 4- aminoantipirina 0,5 mmol/1, glucosa oxidasa (GOD) mayor o igual a 10 KU/1 , Peroxidasa (POD), mayor o igual a 1 KU/1) se tomó en tres tubos de ensayo de 1000 µl de cada estándar (S), prueba (T) y blanco (B). Se agregaron 10 µl de suero a (T). Se añadió una solución estándar de 10 µl/100 mg/dl a (S) y 10 µl de agua destilada a (B). El contenido se mezcló bien y se incubó

por 10min a 37oC. La absorbancia de (S) y (T) se leyó contra el reactivo

(B) espectrofotométricamente. La intensidad se midió a 505 nm.
Estimación de proteína:La mezcla de reactivos de Biuret Hidróxido de sodio 500 mmol/1, Tartrato de sodio y potasio 35 mmol/1, Yoduro de potasio 30 mmol/1, Sulfato de cobre 10 mmol/1) se tomó en tres tubos de ensayo de 1000 µl cada uno, estándar (S) y blanco de prueba (T). (B) y se añadieron 10 µl de suero (T). Se añadió una solución estándar de 10 µl/6 g/dl al estándar (S) y se agregaron 10 µl de agua destilada a (B). El contenido se mezcló bien y se incubó durante 10 min a 37oC. La absorbancia de (S) y (T) se leyó frente al reactivo (B) espectrofotométricamente. La intensidad se midió a 546 nm.

Estimación del colesterol:La mezcla de reactivos (Tampón de Good pH 6,7:50 mmol/1, Fenol 5 mmol/1, 4-Aminoantipirina 0,3 mmol/1, Colesterol esterasa (CHE) mayor o igual a 200 U/1, Colesterol oxidasa (CHOD) Mayor o igual a 50 U/1, Peroxidasa (POD) Mayor o igual a 3 kU/1) se tomaron en tres tubos de ensayo cada uno de 1000 µl estándar (S) y prueba (T) en blanco (B) y se añadieron 10 µl de suero (T). Se añadió una solución estándar de 10 µl/200 mg/dl a (S) y 10 µl de agua destilada a (B). El contenido se mezcló bien y se incubó durante 10 min a 37oC. La absorbancia de (S) y (T) se leyó frente al reactivo (B) espectrofotométricamente. La intensidad se midió a 505 nm.

Estimación de triglicéridos:Los reactivos mezclan tampón de Good pH 7,2:50 mmol/1, 4-clorofenol 4 mmol/1, ATP 2 mmol/1, Mg2 más 15 mmol/1, gliceroquinasa (GK) mayor o igual a {{20}}.4 kU/1, Peróxido (POD) Mayor o igual a 2 kU/1, Lipoproteína lipasa (LPL) Mayor o igual a 2 kU/1, 4- Aminoantipirina 0,5 mmol/1, glicerol-3-fosfato-oxidasa mayor o igual a 0,5 kU/1) ) se tomaron en tres tubos de ensayo de 1000 µl cada uno estándar (S) y ensayo (T) blanco (B) y 10 µl de suero se añadió (T). Se añadió una solución estándar de 10 µl/200 mg/dl a (S) y 10 µl de agua destilada a (B). El contenido se mezcló bien y se incubó durante 10 min a 37oC. La absorbancia de (S) y (T) se leyó frente al reactivo (B) espectrofotométricamente. La intensidad se midió a 546 nm.

Estimación de la insulina:La medición cuantitativa de la insulina se realizó mediante ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) competitivo en fase sólida. La insulina se estimó en los laboratorios Vivek, Nagercoil.

análisis estadístico

Todos los valores se expresaron como Media ± DE. Los datos se analizaron mediante cálculos matemáticos. Los valores se expresaron como significativos.

Resultados y discusión

Parámetros bioquímicos

En la presente investigación, las ratas alimentadas con G. Sylvestre a G2 mostraron una disminución en el peso corporal de 178.0 ± 17.6 a 156 ± 12.2 g. De manera similar, en los animales alimentados con G3, G4 y G5 mostraron una disminución significativa en comparación con el día inicial al final del día 25 (Tabla 1).

En G2 hubo un ligero aumento (0.20 ± 0.05) en comparación con el G1 (0.13 ± 0.02). Pero G4 y G5 mostraron una disminución en el nivel de insulina en comparación con el G1. G. Sylvestre afectó significativamente el perfil de insulina plasmática de ratas albinas macho normales en grupos de mayor concentración de G4 y G5 respectivamente (Tabla 2).

El nivel de glucosa mostró un valor normal de 88,98 ± 4,6, 84,87 ± 4,3 y 83,70 ± 4,2 en el G1, G2 y G3 respectivamente. Sin embargo, en el grupo de concentraciones más altas de G4 y G5, el contenido de glucosa disminuyó constantemente con una disminución máxima en G5. En los grupos de mayor concentración de G4 y G5, el contenido de glucosa disminuyó constantemente con una disminución máxima en G5 (Tabla 3).

El G2 y el G3 no lograron producir una reducción estadísticamente significativa. Pero G4 y G5 (7,94 ± 0,4 y 8,12 ± {{10}},1 mg/dl) mostraron un ligero aumento en comparación con el G1 (7,16 ± 0,3 gm/dl). G. Sylvestre no afecta significativamente el perfil de proteínas plasmáticas de ratas albinas macho normales, incluso hasta una concentración más alta de G5 (Tabla 4).

El nivel de triglicéridos mostró un valor normal de 51,47 ± 3,8, 44,75 ± 2,7 y 42,30 ± 3,7 gm/dl en el G1, G2 y G3 respectivamente. Sin embargo, en los grupos de mayor concentración de G4 y G5, el valor disminuyó constantemente con una disminución máxima en G5 (Tabla 5).

La diferencia del nivel de colesterol de 72,05 ± 4,0 y 49,40 ± 5,9 mg/dl se observó en las ratas alimentadas con Gymnema a G4 y G5 en comparación con el valor G1 de 87,15 ± 3,6 mg/dl. El grupo de dosis baja de G2 y G3 fue similar al normal (Tabla 6).

Estudios histopatológicos

Los resultados de los estudios histopatológicos se muestran en la Lámina 1. Las secciones de G1 mostraron una histología normal del riñón de rata. Los túbulos contorneados proximales, el túbulo contorneado distal y los corpúsculos renales con glomérulo y cápsula glomerular son muy claros y prominentes. Se observa claramente el corpúsculo renal con capa visceral, capa parietal y espacio capsular. Los animales tratados con polvo para G2 y G3 no se vieron muy afectados. El tratamiento G (4) y (5) de riñón en animales alimentados con polvo muestra necrosis, vacuolización y ruptura de los túbulos glomerulares. Hubo cambios degenerativos moderados y necrosis del epitelio de los túbulos renales y glomérulos con ambas dosis altas (15 y 20 g/kg de peso corporal) del polvo de hierbas. También se observó vacuolización en ambas dosis G4 y G5; sin embargo, esto no se observó en los grupos de dosis baja de peso corporal G2 y G3.

Los cambios significativos se observaron en los niveles de colesterol sérico y niveles de triglicéridos en animales alimentados con una dosis baja de G. Sylvestre, lo que puede deberse a la dieta normal y las ratas normales observadas. En la concentración más alta de G4 y G5 en el peso corporal, hubo una disminución en el colesterol que puede deberse a que la gimnemagenina y los ácidos gimnémicos interactuaron con los esteroides, especialmente el colesterol y los ácidos biliares derivados de CA en el tracto intestinal de las ratas. Por lo tanto, la disminución del colesterol puede deberse a la excreción fecal de colesterol que podría deberse a una interrupción en la formación de micelas que contienen colesterol y ácidos biliares en el intestino y la consiguiente interferencia con la absorción de colesterol. Se observó una reducción en los niveles de colesterol, triglicéridos y ácidos grasos libres en plasma en dos estudios de pacientes diabéticos que recibieron suplementos de Gymnema además de su medicación antidiabética habitual (p. ej., insulina, glibenclamida o tolbutamida). En contraste; estos niveles aumentaron gradualmente desde el inicio en los pacientes del grupo de control que no tomaban medicamentos. Cabe señalar que la reducción de lípidos fue un criterio de valoración secundario en estos estudios, que fueron diseñados para demostrar los efectos antidiabéticos de Gymnema.

La experiencia tradicional puede ser de poca ayuda en el reconocimiento de interacciones dañinas con medicamentos convencionales^9,10. La mortalidad y los cambios de comportamiento se consideran parámetros básicos para evaluar la toxicidad de cualquier producto a base de hierbas. Las hojas de G. Sylvestre se han utilizado ampliamente como alimentos saludables, ya que los usuarios a menudo esperan una reducción de peso y una mejora de la diabetes debido a su capacidad para suprimir el sabor dulce e inhibir la absorción de glucosa8.

En el presente estudio, la ganancia de peso corporal y la ingesta de alimentos disminuyeron de manera dependiente de la dosis en las ratas a las que se les administró G. Sylvestre. La disminución en el aumento de peso corporal puede deberse a la disminución en la ingesta de alimentos. Además, se sabe que este polvo vegetal suprime el receptor del sabor dulce en la lengua y puede ser otra causa.

También se observaron cambios dependientes de la dosis en semillas de fenogreco. En la presente observación, no se observó mortalidad significativa. La posible razón podría ser que Gymnema no interfiere con las diversas funciones vitales del animal y, por lo tanto, no presenta una toxicidad grave que pueda conducir a la muerte del animal. Las hojas elevan los niveles de insulina, según investigaciones en voluntarios sanos2, posiblemente debido a la regeneración de las células - del páncreas³.

Los agentes tóxicos pueden afectar al riñón y alterar sus funciones fisiológicas. Estos efectos son detectables y/o cuantificables mediante la verificación cruzada de las funciones normalmente esperadas del riñón en la excreción de los productos de desecho nitrogenados sin umbral del metabolismo, como la urea y la creatinina. Además, al determinar la capacidad del riñón para filtrar y reabsorber las sustancias umbral necesarias para el cuerpo, como los electrolitos, se puede detectar toxicidad para el riñón7. Algunos autores han demostrado que la estimación de los niveles de urea y creatinina no es lo suficientemente sensible para detectar un bajo nivel de toxicidad o daño renal. Otros han observado que el peso absoluto del riñón es un indicador relativamente sensible de nefrotoxicidad para nefrotóxicos conocidos. Por lo tanto, la nefrotoxicidad se ha definido como un aumento del peso del riñón (ya sea absoluto o relativo) junto con una alteración significativa en al menos un parámetro sérico. ⁶.

Los estudios histopatológicos se realizaron en hígado de ratas. La fibrosis hepática fue inducida por CCL4 y la extensión de la enfermedad se evaluó midiendo el nivel de HP y TBL usando Trigonella foenumgraecum¹¹Los tratamientos de animales con G2 y G3 no se vieron muy afectados por G. Sylvestre. Las secciones de riñón en animales alimentados con polvo para G4 y G5 muestran necrosis, vacuolización y ruptura de los túbulos glomerulares. Hubo cambios degenerativos moderados y necrosis del epitelio de los túbulos renales y glomérulos con ambas dosis altas (15 y 20 g/kg de peso corporal) del polvo de hierbas. También se observó vacuolización en ambas dosis; sin embargo, esto no se observó en los grupos de dosis baja de G2 y G3. Se notó necrosis e infiltración celular en algunos de los glomérulos y túbulos renales de las ratas en el grupo de dosis alta.

Los glomérulos, debido a que reciben una cuarta parte del gasto cardíaco y se perfunden a la presión más alta de cualquier lecho capilar en el cuerpo, son vulnerables a la lesión por una serie de fármacos y otros agentes tóxicos. Estos agentes pueden causar daño por uno de dos mecanismos básicos: 1) daño tóxico directo relacionado con la dosis; 2) lesión indirecta mediada inmunológicamente, que depende en gran medida de la dosis. Un riñón de los animales de control mostró una morfología renal normal. Debido a que las hierbas medicinales generalmente son autoprescritas por los consumidores, faltan recomendaciones para el uso de medicamentos prescritos como la dosis, la forma y la frecuencia de administración, que son revisadas y controladas por el médico que las prescribe. Estos factores aumentan el riesgo de toxicidad de Gymnema ya que los consumidores usan el extracto mientras duran sus condiciones, e incluso en dosis más altas. Extracto de hoja de Gymnema Sylvestre: un estudio de toxicidad dietética de 52-semanas en ratas Wistar⁵.

En los riñones, los cambios histopatológicos fueron de necrosis tubular aguda con hemorragia intersticial y glomerular difusa. Esto sugiere que se produjo una lesión celular irreversible que afectó al parénquima epitelial ya las células endoteliales. La histología renal de las ratas tratadas mostró características consistentes con daño epitelial renal por toxinas. Se ha encontrado que muchas preparaciones de hierbas exhiben necrosis tubular renal que muestra fibrosis intersticial extensa y pérdida tubular severa más prominente en la corteza externa4 (Lámina 1).

Conclusión

G. Sylvestre no representa una amenaza grave para los diabéticos en concentraciones de hasta 10 g/kg de peso corporal. Concentraciones más altas de 15 y 20 g/kg de peso corporal causan cambios histopatológicos, la gravedad se reduce mucho y la dosis de hasta 10 g/kg de peso corporal no afecta las proteínas, la glucosa, la insulina, el colesterol o los triglicéridos. Por lo tanto, se podría recomendar que G. Sylvestre podría usarse en varias dolencias en dosis limitadas con el consejo de un médico.

Referencias

1. Shanmugasundaram KR, Panneerselvam C, Sumudram P y Shanmugasundaram ER, 1983. Cambios enzimáticos y utilización de glucosa en conejos diabéticos el efecto degimnema Silvestre, J. etnofarmaco 2: 205-34.

2. Beckles GLA, American Diab AK, Mathur KK, Datta SK, Tandon y Dikshith TSS, 1998. Centro de Investigación de Toxicología Industrial,Diabetes Cuidado 21:1432-1438.

3. Mhasker KS y Caius JF, 1930. Un estudio de plantas medicinales indias. II.gimnema syvestreR.Br,,Indio. J. Medicina. Res. Memorias 16: 72-75.

4. Vanherweghem JL, Depierreux M, Tielemans C, Abramowicz D, Dratwa M, Jadoul M, Richard C, Vandervelde D, Verbeelen D y Vanhaelen-Fastre R, 1993. Fibrosis renal intersticial rápidamente progresiva en mujeres jóvenes,Chino Hierbas Lanceta 341 : 387–391.

5. Ogawa Y, Sekita K, Umemura T, Saito M, Ono A, Kawasaki Y, Uchida O, Matsushima Y, Inoue T y Kanno J,2004. gimnema Silvestreextracto de hoja: un estudio de toxicidad dietética de 52-semanas en ratas Wistar,Shokuhin Eiseigaku zashi, 45(1): 8-18.

6. Srivasta S, Srivastava AK, Patnaik GK y Dhawan BN. 1996. Efecto de picroliv en la regeneración del hígado en ratas,Fitoterapia, 67: 252-256.

7. Barzaghi N, Creama F, Gatti G, Pifferi G y Perucca E, 1990. Estudios farmacocinéticos sobre un complejo de silibina-fosfatidilcolina, en sujetos humanos sanos,EUR. J. Droga Meta farmacocinética 15: 333-338.

8. Ueno G, 1997. Aplicaciones degimnema Silvestreextractos en alimentos,Shokuhin a Kagaku 1 : 100-103.

9. De Smet PAGM, 1993.Una introducción a la farmacoepidemiología a base de hierbas.J. etnofarmaco 38: 197-208.

10. DJ Atherton. 1994, Hacia un uso más seguro de los remedios tradicionales, se necesita una mayor conciencia de la toxicidad.BMJ, 308: 673-674.

11. Santha Rani Thakur, Saraswathy GR, Maheswari E, Sunil Kumar N, Hazarathiah T, Sowmya K, Dwarakanadha Reddy P y Ramesh Kumar B, 2007. Inhibición de la fibrosis hepática inducida por CCl4 porTrigonella fenumgraecum L, Natural Producto Resplandor 6(1): 11-17.