El efecto del estrés oxidativo y la interferencia de la interleucina-1 sobre la inflamación crónica en ratas EAP y la intervención de la anémona tomentosa
Dec 09, 2025
Abstracto
Objetivos: Investigar el papel del estrés oxidativo y la interferencia de la interleucina-1 (IL-1) en la inflamación prostática crónica en ratas con prostatitis autoinmune experimental (EAP), y dilucidar el mecanismo por el cual Anemone tomentosa trata a las ratas EAP. Métodos: Se asignaron aleatoriamente treinta ratas Wistar a cinco grupos (n=6 cada uno): normal, modelo, Anemone tomentosa en dosis baja, Anemone tomentosa en dosis media y Anemone tomentosa en dosis alta. Después de la intervención farmacológica, se utilizó la transferencia Western para detectar las proteínas p65 TLR-4, IRAK1 y pNF-κB en el tejido prostático. La superóxido dismutasa sérica (SOD), la glutatión peroxidasa (GSH-Px) y el malondialdehído (MDA) se midieron utilizando kits de ensayo. Se midieron mediante ELISA las citocinas inflamatorias, incluidas la interleucina-1 y la interleucina-10. Resultados: En comparación con el grupo normal, la expresión de las proteínas p65 TLR-4, IRAK1 y pNF-κB en la próstata del grupo modelo aumentó significativamente (P <0,01). Los niveles séricos de SOD y GSH-Px disminuyeron (P <0,01), mientras que los niveles de MDA e interleucina-1 aumentaron (P <0,01). En comparación con el grupo modelo, la intervención de Anemone tomentosa reguló significativamente a la baja la expresión de las proteínas TLR-4, IRAK1 y pNF-κB p65 en la próstata de ratas EAP (P <0,01). La SOD, el GSH-Px y la interleucina-10 en suero estuvieron significativamente regulados al alza (P <0,01 o P <0,05), mientras que la MDA y la interleucina-1 estaban reguladas a la baja (P <0,01 o P <0,05). La histología indicó que la lesión de la próstata y la infiltración de células inflamatorias mejoraron después del tratamiento con Anemone tomentosa. Conclusión: IRAK1 puede ser un nodo clave que media la comunicación cruzada entre el estrés oxidativo y la IL-1 durante la inflamación en ratas EAP. El mecanismo antiinflamatorio de Anemone tomentosa en ratas EAP puede implicar la reducción del estrés oxidativo y la IL-1 mediante la regulación de la vía de señalización TLR-4/IRAK1/NF-κB p65.
Suplementos de hierbas Cistanche
Palabras clave
prostatitis crónica; prostatitis autoinmune experimental (EAP); estrés oxidativo; interleucina-1 (IL-1); IRAK1; Vía de señalización TLR‑4/IRAK1/NF‑κB p65; CÉSPED; GSH‑Px; MDA; ELISA; transferencia occidental; Anémona tomentosa; Dahuocao (medicina Zhuang); Medicina Tradicional China; Hierba MTC para la prostatitis; etnomedicina china; antiinflamatorio; terapia antioxidante
Prostatitis crónica (PC)Es una de las enfermedades más frecuentes en urología y andrología. En China, la prevalencia informada de parálisis cerebral oscila entre el 6,0% y el 32,9% [1]. Clínicamente, se caracteriza principalmente por dolor pélvico crónico y puede ir acompañado de diversos grados de síntomas urinarios y disfunción sexual, afectando gravemente la calidad de vida de los pacientes. Según informes de investigación [2], la patogénesis de la parálisis cerebral puede estar relacionada con infección por patógenos, estrés oxidativo, reflujo urinario, cambios en los niveles de hormonas sexuales, desequilibrio neuroendocrino y respuestas inmunoinflamatorias. Los estudios actuales indican que en el estado inflamatorio de la próstata se produce una gran cantidad de especies reactivas de oxígeno (ROS); un microambiente con alto contenido de ROS induce estrés oxidativo y participa en la aparición y desarrollo de la PC [3]. Las citoquinas son polipéptidos proteicos reguladores que desempeñan funciones importantes en la aparición y desarrollo de la parálisis cerebral; La gravedad de la enfermedad se correlaciona con el nivel de interleucina-1 (IL-1) en las secreciones prostáticas [4], lo que proporciona un posible enfoque terapéutico. Dada la compleja fisiopatología, los tratamientos médicos modernos para la parálisis cerebral tienen ciertas limitaciones [5]. En los últimos años, la Medicina Tradicional China (MTC) ha demostrado una eficacia favorable en el tratamiento de la parálisis cerebral, aliviando el dolor y los síntomas urinarios y demostrando ventajas características.
Desde la perspectiva de la medicina tradicional china, la etiología y patogénesis de esta enfermedad implican deficiencia renal, calor húmedo y estasis sanguínea [6]. La hierba etnomedicina Zhuang Dahuocao (Anemone tomentosa; picante, ligeramente amarga, de propiedad neutra) tiene las funciones de eliminar el calor y disipar la humedad, promover la diuresis para aliviar la estranguria, tonificar el qi y fortalecer el riñón [7]. Las observaciones clínicas sugieren que Dahuocao puede mejorar los síntomas de la parálisis cerebral [8] y regular la secreción de citoquinas inflamatorias en ratas modelo de parálisis cerebral [9]. Su mecanismo puede estar relacionado con la vía del microARN-146a/receptor tipo Toll-4 (TLR-4)/factor de transcripción nuclear-κB (NF-κB) que se origina en los cuerpos amiláceos prostáticos [10]. Con base en esto, el presente estudio observó el papel de la interacción cruzada entre el estrés oxidativo y la IL-1 en la inflamación prostática crónica en el modelo experimental de rata con prostatitis autoinmune (EAP) e investigó el efecto de intervención de la decocción de Dahuocao.
Materiales
1.1 animales de experimentación
Se compraron treinta ratas Wistar macho de Changsha Tianqin Biotechnology Co., Ltd. (n.º de licencia: SCXK2019‑0013), de 8 semanas de edad y peso corporal de 200 ± 17 g. Número de aprobación de ética animal: DW20220926‑202, Universidad de Medicina China de Guangxi. Los animales se alojaron en el Laboratorio Clave de Biología Molecular para la Prevención y el Tratamiento en TCM, Guangxi.
1.2 Principales instrumentos y reactivos
Aparato de electroforesis (Beijing Liuyi, DYCZ‑24DN), cuantificador de ácidos nucleicos/proteínas (Denovix DS‑11), sistema de transferencia semiseco (ATTO WSE‑4040, AE6675L). Adyuvante completo de Freund (Sigma‑Aldrich, F5881). Anticuerpo TLR-4 (Affinity, AF7017), anticuerpo quinasa-1 asociado al receptor de interleucina-1 (IRAK1) (Affinity, AF4742), anticuerpo fosfo-NF-κB p65 (Affinity, AF2006). Kit GSH‑Px (Nanjing Jiancheng, A005‑1), kit SOD (Nanjing Jiancheng, A001‑1), kit MDA (Nanjing Jiancheng, A003‑1). IL-1 ELISA (Lianke Bio, EK301BHS), IL-10 ELISA (Lianke Bio, EK310).
Métodos
2.1 Preparación del modelo de rata EAP
La preparación de proteínas prostáticas de rata purificadas siguió métodos anteriores [10]. El modelado de inmunización [10-11] se llevó a cabo según protocolos establecidos. El modelado exitoso estuvo indicado por la desaparición de los pliegues mucosos dentro de los conductos prostáticos, acinos incompletos, edema estromal e infiltración de células inflamatorias [12].
2.2 Preparación de la decocción de Dahuocao
La decocción de Dahuocao (Anemone tomentosa) se preparó según procedimientos experimentales previos [10].
2.3 Agrupación y administración de medicamentos
Se asignaron aleatoriamente treinta ratas mediante una tabla de números aleatorios a grupos normales, modelo y de dosis baja, media y alta de Dahuocao (n=6 por grupo). Después de un modelado exitoso, los grupos de dosis baja, media y alta recibieron decocción de Dahuocao por sonda en concentraciones de 1,46 g/ml, 2,92 g/ml y 5,84 g/ml, respectivamente (4 ml/kg·d). Los grupos normal y modelo recibieron solución salina (4 ml/kg·d). Los tratamientos se administraron una vez al día durante 4 semanas.
2.4 Histopatología de la próstata (tinción H&E)
Los tejidos de la próstata se fijaron, incluyeron y seccionaron; Las secciones se tiñeron con hematoxilina-eosina y se examinaron mediante microscopía óptica para evaluar los cambios estructurales acinares y la infiltración de células inflamatorias.
2.5 Marcadores de estrés oxidativo sérico: SOD, MDA, GSH‑Px
Los niveles séricos de SOD, MDA y GSH-Px se midieron estrictamente de acuerdo con las instrucciones del kit respectivo.
2.6 Detección ELISA de IL-1 e IL-10 en suero
Las concentraciones séricas de IL-1 e IL-10 se midieron estrictamente según los protocolos del kit ELISA.
2.7 Detección por transferencia Western de TLR‑4, IRAK1 y pNF‑κB p65 en próstata
Se trituraron aproximadamente 50 mg de tejido prostático hasta obtener un polvo fino en nitrógeno líquido, se dividieron en alícuotas y se lisaron en tampón RIPA. Las proteínas se separaron mediante electroforesis, se transfirieron, se bloquearon, se incubaron con anticuerpos primarios, se lavaron, se incubaron con anticuerpos secundarios, se lavaron y se tomaron imágenes. La expresión de proteínas se cuantificó como valores grises de banda objetivo/constitutiva.
2.8 Análisis estadístico
Los datos se analizaron utilizando SPSS 22.0. Los datos distribuidos normalmente con homogeneidad de varianza se presentan como media ± DE y se analizan mediante ANOVA unidireccional con pruebas post hoc de LSD-t. Los datos no normales o heterocedásticos se presentan como M (QR) y se analizan mediante pruebas no paramétricas. Una P bilateral < 0,05 se consideró estadísticamente significativa.
Resultados (reformulación concisa para mayor claridad)
Comparado con lo normal: TLR‑4 prostático, IRAK1 y pNF‑κB p65 ↑ (P < 0,01); SOD y GSH‑Px↓ séricos (P < 0,01); MDA e IL-1 ↑ (P < 0,01).
Comparado con el modelo: Anemone tomentosa (Dahuocao) redujo TLR‑4/IRAK1/pNF‑κB p65 (P < 0,01); aumento de SOD, GSH-Px e IL-10 (P <0,01 o P <0,05); Disminución de MDA e IL-1 (P <0,01 o P <0,05). La histología mostró lesión glandular aliviada e infiltración inflamatoria.
Conclusión
IRAK1 puede representar un nodo fundamental en la interacción entre el estrés oxidativo y la IL-1 durante la inflamación prostática crónica en ratas EAP. La anémona tomentosa (Dahuocao), una hierba de etnomedicina TCM/Zhuang para la prostatitis, puede inhibir la inflamación crónica al reducir el estrés oxidativo y la IL-1 mediante la regulación de la vía de señalización TLR-4/IRAK1/NF-κB p65.
Notas de autoridad y abastecimiento
La epidemiología y el contexto biomédico se basan en la literatura nacional de urología/andrología [1–6].
La identidad, las propiedades y las indicaciones de la MTC de Anemone tomentosa (Dahuocao) hacen referencia al compendio de Materia Médica China de la Administración Estatal de MTC [7], una fuente autorizada.
La observación clínica y los estudios mecanicistas en animales sobre Dahuocao para CP/CNP están respaldados por revistas chinas revisadas por pares y pautas experimentales estandarizadas [8–12], lo que mejora la credibilidad del uso de hierbas de la medicina tradicional china para la prostatitis.
Referencias
[1] Mi H, Chen K, Mo ZN. Características epidemiológicas de la prostatitis crónica en China. Chin J Androl. 2012;18(7):579‑582.
[2] Zheng XT, Chen SH, Yao WL, et al. Avances en la etiología y patogénesis de la prostatitis crónica. Diagnóstico y tratamiento modernos. 2019;30(11):1810‑1813.
[3] Paulis G. Mecanismos inflamatorios y estrés oxidativo en la prostatitis: el posible papel de la terapia antioxidante. Representante Urol. 2018;10:75‑87.
[4] Kang SW, Park JH, Seok H, et al. Los efectos del ginseng rojo coreano sobre las citocinas inflamatorias y la apoptosis en un modelo de rata de prostatitis crónica no bacteriana. Biomed Res Int. 2019;2019:2462561.
[5] Xue Y, Duan Y, Gong X, et al. Medicina tradicional china para la prostatitis crónica/síndrome de dolor pélvico crónico: una revisión sistemática y un metanálisis. Medicina (Baltimore). 2019;98(26):e16136.
[6] Sun ZX, Li PC. Pensamiento diagnóstico y terapéutico de la MTC para la prostatitis crónica. Liaoning J Tradit Chin Med. 2019;46(2):268‑269.
[7] Comité editorial de Materia Médica China, Administración Estatal de MTC. Materia Médica China. Shanghai: Prensa de Ciencia y Tecnología de Shanghai; 1999:1768, 3166.
[8] Lu LX, Wu JY, Huang ZM, et al. Observación clínica del enema de retención con Dahuocao (medicamento Zhuang) en 60 casos de prostatitis crónica. Hunan J Tradit Chin Med. 2019;35(6):55‑56. doi:10.16808/j.cnki.issn1003‑7705.2019.06.024.
[9] Wang WJ, Shi H, Zhang J, et al. Dahuocao inhibe las respuestas inflamatorias en un modelo de rata con prostatitis no bacteriana. Inmunología moderna. 2021;41(6):504‑508. doi:10.35541/cjd.20201030.
[10] Lu LX, Shi H, Huang ZM, et al. Papel de la vía del miRNA-146a/TLR-4/NF-κB de los cuerpos amiláceos prostáticos en la inflamación crónica de ratas EAP e intervención de Dahuocao. Práctica de Chin Gen. 2023;26(20):2518‑2524.
[11] Qian Y, Qian XQ, Gong DW, et al. Intervención del resveratrol sobre las citocinas en el tejido prostático del modelo de rata con prostatitis. Chin J Androl. 2017;31(3):14‑18.
[12] Comité Profesional de Farmacología Experimental de MTC, Asociación China de Medicina China. Proyecto de especificación para la preparación de modelos animales de prostatitis crónica. Fórmulas de Chin J Exp Tradit Med. 2018;24(19):10‑14.
Palabras clave de autor opcionales para indexación (para visibilidad)
Medicina Tradicional China; etnomedicina Zhuang; Dahuocao; Anémona tomentosa Maxim.; prostatitis; síndrome de dolor pélvico crónico; TLR4; IRAK1; NF‑κB; estrés oxidativo; enzimas antioxidantes; citocinas; ELISA; transferencia occidental; modelo de rata; PEA; antiinflamatorios a base de hierbas; Hierba MTC para la prostatitis.
