Acteoside: investigación sobre la actividad antioxidante y antihipertensiva

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Actividades antioxidantes y antihipertensivas de Acteoside y sus análogos

Chao-Hsiang CHEN1,2, Yin-Shiou LIN3, Mei-Yin CHIEN2,4, Wen-Chi HOU5,6,* y Miao-Lin HU1,*

Resumen. Acteósido(Act), un glucósido feniletanoide, es un compuesto activo en varias plantas y medicinas herbales tradicionales. Actúa junto con su isómero estructural,isoactósido(Isoact), y un análogo, 6-O-acety-lacteósido (6-O-acetilacto), se utilizaron en el estudio para investigar laantioxidante, enzima convertidora de antiangiotensina (ECA) y actividades inhibidoras de la hemólisisen vitroy actividad antihipertensiva contra ratas espontáneamente hipertensas (SHR)en vivos. Mostramos que Act, Isoact y 6-OEl -acetilacto eliminó de forma eficaz los radicales 1,1-difenil-2-picril-hidrazilo (con IC50 a 11,4, 9,48 y 9,55 μM, respectivamente) y radicales superóxido (con IC50 a 66,0, 38,5 , y 39,1 μM, respectivamente). Como Isoact y 6-O-acetilact tenía actividades similares de barrido de radicales, solo Act e Isoact se usaron para los siguientes estudios. Tanto Act como Isoact inhibieron la actividad de la xantina oxidasa con IC50 a 53,3 y 62,2 μM, respectivamente. Tanto Act como Isoact también inhibieron significativamente la actividad de la ECA y la hemólisis inducida por el diclorhidrato de 2,2'-azo-bis(2-amidinopropano), pero los efectos de Act fueron más fuertes que los de Isoact. Luego administramos por vía oral una dosis única de Act o Isoact (10 mg/kg de peso corporal) a SHR y medimos los cambios de la presión arterial sistólica (PAS) y la presión arterial diastólica (PAD) durante 24 h. Act, pero no Isoact, mostró actividad antihipertensiva en la reducción de la PAS y la PAD. Los resultados sugieren la utilidad potencial de la Ley como un producto alimenticio saludable paraantioxidanteprotección y regulación de la presión arterial.

Palabras clave: Acteósido; actividad antihipertensiva; Enzima convertidora de angiotensina (ECA); antioxidante; hemólisis.

ingrediente activo acteoside en cistanche

Introducción

Acteósido(Act), un glucósido feniletanoide que contiene ácido cafeico, 3',4'-dihidroxi feniletanol, glucosa y ramnosa, se aisló por primera vez de las flores deJeringuilla Vul- garis(Birkofer et al., 1968), y junto con el isómero estructural deisoactósido(Isoact) y la derivada de6-O-acetilactósido(6-O-acetilact), se ha encontrado en muchas plantas y hierbas medicinales, comoLigstrum purpurascens(Wong et al., 2001),calicarpa dichotoma(Koo et al., 2006; Lee et al., 2006),Cistanche deserticolayboschniakia rossica(Wu et al., 2006),escrofularia ningpoenis(Huang et al., 2008),Rehmannia glutinosa(Li et al., 2006). Se informó que la ley exhibió actividad antimetastásica en células de melanoma B16 en modelos de ratones C57BL/6 (Ohno et al., 2002). Acto, Isoacto y 6-O-acetilact se demostró recientemente que inhibe la expresión activada por IL-1 -de CAM intercelular-1 y CAM vascular-1 en células endoteliales de la vena umbilical humana (Chen et al., 2009). Act también protege a las células endoteliales pulmonares bovinas del estrés oxidativo inducido por radicales hidroxilo (Chiou et al., 2004) e inhibe la producción de óxido nítrico y TNF mediante el bloqueo de la activación de AP-1 en macrófagos estimulados por lipopolisacáridos (Rao et al. , 2009). Act e Isoact exhiben actividades neuroprotectorasen vitro(Koo et al., 2005). Koo et al. (2006) informaron que Act y sus agliconas eliminan de manera efectiva 1,1-difenil-2-picril-hidrazilo (DPPH) y óxido nítricoen vitro. Sin embargo, pocos estudios han comparado lado a lado laen vitro antioxidanteactividades de Act y sus compuestos estructuralmente relacionados, como Isoact y 6-O- acetilacto.

Se han utilizado varias clases de agentes farmacológicos en el tratamiento de la hipertensión (Mark y Davis, 2000). Una clase de medicamentos antihipertensivos, conocida como inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina I (ECA) (es decir, inhibidores de la peptidasa), tiene una baja incidencia de efectos secundarios adversos y es la clase preferida de medicamentos antihipertensivos.

en el tratamiento de pacientes con enfermedades secundarias concurrentes (Fotherby y Panayiotou, 1999). ACE (peptidil-dipéptido hidrolasa EC 3.4.15.1) es una exopeptidasa que contiene Zn liberadora de dipéptidos, que elimina un dipéptido del extremo C de la angiotensina I para formar angiotensina II, un compuesto muy hipertensivo. VariosantioxidanteLos péptidos (péptidos relacionados con glutatión reducido y carnosina) exhiben actividades inhibidoras de ACE (Hou et al., 2003). El primer inhibidor de la ECA activo por vía oral clínicamente disponible, el captopril, se desarrolló para tratamientos de hipertensión (Ondetti et al., 1977; Borer, 2007). Se ha informado que el acto ejerce efectos relajantes mediados por el óxido nítrico en los anillos aórticos con endotelio intacto de ratas SD (Wong et al., 2001). Ahmed et al. (1995) informaron que Act induce una disminución dependiente de la dosis en la presión arterial sistólica (PAS) y la presión arterial diastólica (PAD) después de su inyección intravenosa en ratas Wistar anestesiadas normotensas. Sin embargo, no está claro si Act administrado por vía oral y/o sus isómeros relacionados son antihipertensivos.en vivos. En el presente estudio, investigamos laen vitro antioxidantela capacidad y las actividades inhibidoras de la ECA, así como laen vivosactividad antihipertensiva de Act, Isoact y/o 6-O-acetilact usando las ratas hipertensas espontáneas (SHRs). Se espera que estos estudios proporcionen datos útiles para el desarrollo de Act como un producto alimenticio saludable.

Materiales y métodos

Materiales

diclorhidrato de 2,2'-azo-bis(2-amidinopropano) (AAPH), ACE (unidad I, pulmón de conejo), hidroxitolueno butilado (BHT), DPPH, N-(3-[{{7 }}furil]acriloil)-Phe-Gly-Gly (FAPGG), NADH, metosulfato de fenazina (PMS), xantina y xantina oxidasa se adquirieron de Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, EE. UU.). El captopril se adquirió de Calbiochem Co. (CA, EE. UU.). Acto, Isoacto y 6-O-acetilact (Figura 1) se adquirieron de Equal Corp. (purezas > 98 por ciento, Shanghái, China). Otros productos químicos y reactivos eran de Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, EE. UU.).

Barrido actividad de Acto, isoacto, y 6-O- acetilacto contra dHPP radicales por espectrofotometría

Un volumen (0.3 mL) de Act, Isoact y 6-O-acetilact (las concentraciones finales fueron de 1,56 a 50 µM), BHT y ácido ascórbico (las concentraciones finales fueron de 2,4 a 60 µM) se agregaron a 0,1 ml de tampón Tris-HCl 1 M (pH 7,9 ) y luego se mezcló con 0,6 ml de DPPH 100 µM en metanol hasta una concentración final de 60 µM durante 20 min bajo protección lumínica a temperatura ambiente (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Se midió la disminución de la absorbancia a 517 nm y se expresó como ΔA517 nm. Se utilizó agua desionizada como experimento en blanco. La actividad depuradora del radical DPPH (porcentaje) se calculó con la ecuación: (ΔA517blanco - ΔA517muestra) ÷ ΔA517blanco × 100. El IC50 representa la concentración de inhibición media.

Inhibitorio actividad de Acto y Isoacto contra xantina oxidasa

La actividad xantina oxidasa se midió determinando la formación de ácido úrico a 295 nm usando xantina como sustrato (Kalckar, 1947). Las diferentes cantidades de Act e Isoact (las concentraciones finales fueron 25, 50 y 75 µM) se mezclaron previamente con 50 µL de 1 mU/ml de xantina oxidasa a 4 grados durante 1 h, y luego los 300 µL de xantina 1 mM. fueron agregados. Los cambios de absorbancia a 295 nm se registraron durante 2 min y se expresaron como ΔA295 nm/min. La actividad inhibidora de la xantina oxidasa (porcentaje) se calculó de la siguiente manera: (ΔA295 nm/min negro - ΔA295 nm/min muestra) ÷ ΔA295 nm/min negro × 100. Se utilizó agua desionizada en lugar de la solución de muestra como experimento en blanco. IC50 representa la concentración de media inhibición.

Barrido actividad de Acto, isoacto, y 6-O- acetilacto contra superóxido radicales por espectrofotometría

El radical superóxido fue generado por el sistema PMS-NA-DH (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Todas las muestras de 0,2 ml, que contienen diferentes cantidades de Act, Isoact y 6-O-acetilato (la concentración final fue 15,6, 31,3, 62,5, 125 y 250 µM), se añadieron en secuencia a 0,2 ml de nitroazul de tetrazolio 630 µM, 0,2 ml de PMS 33 µM y 0,2 ml de NADH 156 µM en tampón fosfato 100 mM (pH 7,4). Se usó agua desionizada en lugar de la solución de muestra como experimento en blanco. Se utilizó ácido ascórbico (la concentración final fue de 6, 9, 12 y 24 µM) como control positivo. Los cambios de absorbancia a 560 nm se registraron durante 2 min y se expresaron como ΔA560 nm/min. La actividad depuradora de los radicales superóxido (porcentaje) se calculó de la siguiente manera: (ΔA560 nm/min negro - ΔA560 nm/min muestra) ÷ ΔA560 nm/min negro × 100. IC50 representa la concentración de inhibición media.

determinación de As inhibitorio actividad de Acto y Isoacto por HPLC

Cada 50 µL de Act (0.2, 0.4, 0.5 y 2.0 µmol) e Isoact ({{ 11}}.1, 0.2, 0.5, 1.0 y 2.0 µmol) se premezclaron con 15 µL de 1U/mL de ACE durante 5 min, y luego se añadieron 200 µL de FAPGG 0,5 mM y se hizo reaccionar a temperatura ambiente durante 10 min (Anzenbacherova et al., 2001). Se añadieron 800 µl de metanol para detener la reacción. El experimento en blanco fue solo FAPGG. En el experimento de control, ACE reaccionó con FAPGG en las mismas condiciones. La separación cromatográfica de FAPGG y FAP se llevó a cabo en el sistema cromatográfico Hitachi (Japón) con un bucle de 10 µL. El análisis de HPLC se realizó en una columna Biosil Aqua-ODS-W de 5 µ (Biotic Chemical Co., Ltd., Taiwán, 250 × 4,6 mm id), tamaño de partícula de 5 µm. La mezcla reaccionada se separó isocráticamente con una fase móvil compuesta por nonilamina 0,02 M (ajustada a pH 2,4 con ácido fosfórico) y acetonitrilo en una proporción de 67,5:32,5 (V/V) (Anzenbacherova et al., 2001). El caudal fue de 1 ml/min; el volumen de inyección fue de 10 µL; el detector se fijó a 345 nm. Las inhibiciones de ACE (porcentaje) de Act e Isoact se calcularon de la siguiente manera: [(Área de FAPGGblank - Área de FAPGGcontrol) - (Área de FAPGGblank - Área de FAPGGsample) ÷ (Área de FAPGGblank - Área de FAPGGcontrol) × 100.

Inhibitorio actividad de Acto y Isoacto contra mediada por AAPH hemólisis

La oxidación en cadena de radicales libres de glóbulos rojos de rata (RBC) a través de hemólisis mediada por AAPH (Miki et al., 1987). Se colocó sangre de rata en tubos heparinizados y se centrifugó a 1000 ×gdurante 10 min. Después de lavarse tres veces con NaCl 0,15 M, los glóbulos rojos empaquetados se obtuvieron por centrifugación a 1000 ×gdurante 10 min. Las diferentes cantidades de Act e Isoact (las concentraciones finales fueron 2, 5 y 10 μM) se mezclaron con 25 μL de suspensión de glóbulos rojos al 20 % (V/V, en PBS 10 mM) y 25 μL de solución de AAPH 500 mM a 37 grados durante 0 , 1, 1,5, 2, 2,5, 3 y 3,5 h con agitación suave. Cada mezcla se centrifugó a 1000 ×gdurante 10 min y el sobrenadante se midió a 536 nm. Se usó agua desionizada en lugar de solución de AAPH o solución de muestra, respectivamente, como grupo blanco o como grupo de control. La inhibición de hemólisis (porcentaje) de Act e Isoact a las 3 h o a las 3,5 h se calculó de la siguiente manera: (ΔA536 nm control - ΔA536 nmmuestra) ÷ ΔA536 nmcontrol × 100.

antihipertensivo efectos de Acto y Isoacto en SHr

Los efectos de Act, Isoact y captopril administrados por vía oral por sonda de alimentación (2,0 × 80 mm) sobre la PAS reducida y la PAD reducida se determinaron de acuerdo con el método de informes anteriores (Lin et al., 2006; Lin et al., 2008; Han et al., 2011). Todos los procedimientos experimentales con animales siguieron las pautas publicadas (Consejo Nacional de Ciencias, 1994). Los SHR machos (8 semanas de edad, Centro Nacional de Animales de Laboratorio, Taipei) se alojaron individualmente en jaulas de acero mantenidas a 24 grados con un ciclo de luz-oscuridad de 12-h y tenían libre acceso a un alimento estándar para ratones/ratas ( Prolab RMH2500, 5P14 Diet, PMI Nutrition International, Brentwood, MO) y agua. Los SHR se dividieron aleatoriamente en tratamientos de control y de muestra para las determinaciones de SBP y DBP (seis ratas por grupo). Para un experimento antihipertensivo a corto plazo, se administraron por vía oral una vez 0,5 ml de 10 mg de Act o Isoact/Kg de SHR o 5 mg de captopril/Kg de SHR, y se midió la presión arterial de la cola a los 2, 4, 6 y 24 h después de una única administración oral. Los 0,5 ml de agua destilada se utilizaron para un experimento en blanco. Se usó un tensiómetro indirecto (BP-98A, Softron Co. Ltd. Tokio, Japón) para medir la PAS y la PAD cuatro veces en cada determinación para cada tratamiento.

datos análisis

Los valores se presentan como medias ± SD y se analizan utilizando ANOVA unidireccional, seguido de la prueba post hoc de Tukey para comparaciones de medias múltiples. Los estudiantest-se realizó la prueba, cuando solo se compararon dos grupos de datos (como entre Act e Isoact a la misma concentración). Un valor p < 0.05="" se="" considera="" estadísticamente="" significativo.="" el="" análisis="" estadístico="" se="" realizó="" con="" spss="" para="" windows,="" versión="" 10="" (spss,="" inc.,="" chicago,="" il,="" ee.="">

acteósidoen cistanche para mejorar la memoria

Resultados

Barrido actividad de HPP y superóxido radicales

Actúa, Isoactúa y 6-O-acetilact exhibió actividades de eliminación de DPPH dependientes de la dosis a pH 7,9 (Figura 2). Los valores de IC50 fueron 11,4, 9,48 y 9,55 µM, respectivamente, para Act, Isoact y 6-O-acetilacto. Los valores IC50 de los controles positivos de ácido ascórbico y BHT fueron 13,1 y 18,5 µM, respectivamente.

Inhibición de xantina oxidasa actividad

Se demostró que Act e Isoact exhiben una inhibición de la xantina oxidasa dependiente de la dosis (Figura 3). El IC50 se calculó en 53,3 y 62,2 µM, respectivamente, para Act e Isoact.

Inhibición de superóxido dismutasa actividad

Debido a que tanto Act como Isoact inhibían la actividad de la xantina oxidasa, usamos el sistema PMS-NADH para generar radicales superóxido (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008). Acto,

Isoact y 6-O-acetilact exhibió actividades de eliminación de radicales superóxido dependientes de la dosis (Figura 4). Los valores de IC50 fueron 66,0, 38,5 y 39,1 µM, respectivamente, para Act, Isoact y 6-O-acetilacto. Los valores IC50 del control positivo de ácido ascórbico fueron 9,0 µM. De los resultados de las Figuras 2 y 4, quedó claro que Isoact y 6-O-acetilato tenía actividades de captación de radicales similares contra DPPH y radicales superóxido y, por lo tanto, solo se seleccionaron Act e Isoact para exámenes de actividad biológica adicionales.

As inhibitorio actividades de Acto y Isoacto

En la prueba preliminar, encontramos que Act e Isoact interfirieron con la absorbancia del sustrato ACE FAPGG y su producto hidrolizado FAP a 345 nm como se usa para el ensayo espectrofotométrico continuo (Holmquist et al., 1979). Por lo tanto, la separación junto con la detección de Act o Isoact y FAPGG por HPLC se usó para monitorear las actividades inhibidoras de ACE. La Figura 5A a la Figura 5D son cromatogramas de HPLC típicos de mezclas de reacción de 10 µl de una prueba en blanco (solo FAPGG, Figura 5A); prueba de control (ACE reaccionó con FAPGG para producir FAP, Figura 5B); 0,5 µmoles de Act (312,5 µg), ACE y FAPGG (Figura 5C); y 0,5 µmol de Isoact (312,5 µg), ACE y FAPGG (Figura 5D). El área de FAPGG en la Figura 5B fue la más baja y la de la Figura 5A la más alta de cuatro cromatogramas típicos de HPLC. Las áreas de FAPGG en las Figuras 5C y 5D dependen de las actividades inhibidoras de ACE de diferentes concentraciones de Act e Isoact. Las inhibiciones ACE calculadas de Act e Isoact se muestran en la Figura 5E. Act mostró actividades inhibidoras de ACE más altas que Isoact, y se calculó que la IC50 de la primera era de 472 µM por área en los cromatogramas de HPLC.

Inhibitorio actividad de Acto y Isoacto contra mediada por AAPH hemólisis

Las actividades inhibidoras de Act e Isoact frente a la hemólisis mediada por AAPH en concentraciones de 2, 5 y 10 µM se evaluaron durante 3,5 h (Miki et al., 1987). Los resultados de la Figura 6A demuestran que la hemólisis en RBC de rata aumentó drásticamente (expresado como ΔA536 nm) después de 3-h o 3.5-h de reacciones en presencia de radicales AAPH (como grupos de control, símbolo de ciclo blanco ). Se observó poca o ninguna hemólisis en ausencia de radicales AAPH durante la reacción de 3.5-h (como grupos en blanco, símbolo de ciclo negro). Por lo tanto, la inhibición de la hemólisis de Act e Isoact a las 3 h o a las 3,5 h se calculó de la siguiente manera: (ΔA536 nmcontrol - ΔA536 nmmuestra) ÷ ΔA536 nmcontrol × 100. Figura 6B

muestra que tanto Act como Isoact a 2, 5 y 10 µM exhibieron una inhibición dependiente de la concentración en la hemólisis inducida por AAPH, con los efectos inhibidores de Act significativamente más fuertes que los de Isoact en cada concentración utilizada.

antihipertensivo efectos de Acto y Isoacto en SHr

Los SHR recibieron una única administración oral de Act e Isoact (10 mg/Kg SHR), y se registraron los cambios en la PAS y la PAD durante 24 h. Previamente informamos que la presión arterial (SBP y DBP) de SHR era variable durante 24-h (Lin et al., 2006; Han et al., 2011). Por lo tanto, se usó una comparación en un tiempo fijo (tal como 2, 4, 6, 8 y 24 h) entre el blanco y la muestra en lugar de antes y después de la propia administración oral. Se encontró que Act, pero no Isoact, redujo efectivamente la PAS y la PAD de SHR en comparación con el grupo en blanco (agua destilada). La PAS se redujo significativamente en el grupo Act a las 2, 4 y 6 h en 18,8, 16,5 y 14,9 mmHg, respectivamente, pero la reducción de la PAS (3,3 mmHg) a las 24 h después del tratamiento con Act no se estabilizó.

artísticamente significativo (Figura 7A). Como se muestra en la Figura 7B, la PAD disminuyó en el grupo Act a las 2, 4 y 6 h (en 8,5, 7,6 y 12.0 mmHg, respectivamente), aunque solo el resultado obtenido a las 6 h fue estadísticamente significativo (P<0.05). se="" observó="" que="" act="" y="" captopril="" (como="" control="" positivo)="" tuvieron="" efectos="" similares="" sobre="" la="" pas="" en="" etapas="" tempranas="" (2,="" 4="" y="" 6="" h)="" después="" de="" la="" administración="">

acteósidoen cistanche tienen buenos efectos sobre los antioxidantes

DISCUSIÓN

Las especies de oxígeno activo y las reacciones mediadas por radicales libres están implicadas en procesos degenerativos o patológicos como el envejecimiento, el cáncer, la cardiopatía coronaria y la enfermedad de Alzheimer (Ames, 1983; Gey, 1990; Smith et al., 1996). Varios informes se han centrado en la detección de laantioxidanteactividades a partir de los recursos naturales. En el presente estudio, primero comparamos laantioxidanteactividades de Act, Isoact y 6-O-acetilato. Act e Isoact son isómeros estructurales en los que el constituyente del resto de ácido cafeico está unido al grupo hidroxilo C-4 de la glucosa en el primero y al grupo hidroxilo C-6 de la glucosa en el segundo. Mientras que los constituyentes de la ramnosa y el 3',4'-dihidroxi fenil etanol, respectivamente, están unidos a los grupos hidroxilo C-3 y C-1 del resto glucosa en la misma molécula Act e Isoact, { {8}}O-acetilact es un derivado de Act en el que el ácido acético está unido al grupo hidroxilo C-6 en el resto de glucosa (Figura 1). Koo et al. (2006) informaron que Act y sus agliconas exhibían actividades de eliminación de DPPH, y el orden de estas actividades (expresado como IC50) era Act (1,28 µM) > ácido cafeico (2,22 µM) > 3',4'-dihidroxi fenil etanol ( 7,72 µM) > -tocoferol (15,1 µM). En el presente informe (Figura 2), el orden de las actividades de recolección de residuos de DPPH (expresado como IC50) es 6-O-acetilato (9,55 µM) ≈ Isoact (9,48 µM) > Act (11,4 µM). Estos valores fueron comparables o mejores que los del ácido ascórbico (IC50 de 13,1 µM) y BHT (IC50 de 18,5 µM) para eliminar los radicales DPPH. La IC50 más alta de Act en el presente informe podría deberse a la concentración final de 60 µM de DPPH en lugar de los 30 µM utilizados por Koo et al. reportado (2006). Como el ensayo de radicales DPPH pertenece a la reacción de transferencia de electrones (Huang et al., 2005), se especula que el derivado en C-6 grupo hidroxilo de la fracción de glucosa, como el grupo acetilo en {{21 }}O- el resto de acetilato y ácido cafeico en Isoact, puede proporcionar más fácilmente una reacción de transferencia de electrones que las del grupo hidroxilo libre C-6 en el resto de glucosa de Act para el ensayo de eliminación de DPPH.

Acto, 6-OSe ha informado que el acetilato e Isoact poseen actividad eliminadora de superóxido in vitro usando el sistema xantina/xantina oxidasa para generar radicales superóxido (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999). Sin embargo, nuestro presente estudio indicó que Act exhibió actividades inhibidoras de la xantina oxidasa (Figura 3). Por lo tanto, el radical superóxido se generó usando el sistema PMS-NADH en el presente informe (Liu et al., 2004; Lin et al., 2008) en lugar del sistema xantina/xantina oxidasa. De hecho, usando el sistema xantina/xantina oxidasa para generar radicales superóxido, Wang et al. (1996) obtuvieron una CI50 de 63 µM Act frente a radicales superóxido, y este valor es cercano al de inhibición de la actividad xantina oxidasa por Act, como se reporta en el presente estudio (53.3 µM). Se informó que el ácido cafeico exhibió actividades inhibidoras de la xantina oxidasa (Chiang et al., 1994). Se puede especular que las actividades de captación de superóxido utilizando el sistema generador de xantina/xantina oxidasa de algunos fitoquímicos con estructuras asociadas con ácidos cafeicos, como Act o Isoact (Wang et al., 1996; Gao et al., 1999), pueden tener ha contribuido, al menos en parte, a las inhibiciones de la xantina oxidasa. Curiosamente, Wang et al. (1996) encontraron que Act (0,5 y 2,5 mM) no inhibió la actividad de la xantina oxidasa, lo que se determinó mediante un electrodo de oxígeno para el consumo de oxígeno durante la oxidación de la xantina. Por lo tanto, es importante tener en cuenta que los diferentes métodos para evaluar la actividad de captación de superóxido pueden producir datos contradictorios.

Li et al. (1993) informaron un grado similar de inhibición de Act e Isoact contra la hemólisis mediada por AAPH en los RBC de ratones. Sin embargo, mostramos aquí que Act exhibió una actividad inhibitoria mucho mayor contra la hemólisis inducida por AAPH en glóbulos rojos de ratas que Isoact (Figura 6). No está claro si tal inconsistencia puede deberse a la diferencia en las especies de roedores.

Kang et al. (2003) informaron que Act exhibió actividades inhibidoras de la ECA y la IC50 fue de 373,3 µg/mL, que se calculó en 598 µM utilizando Hip-His-Leu como sustratos. En el presente informe, Act mostró actividades inhibidoras de ACE más altas que Isoact, y el IC50 del primero se calculó en 472 µM por área en los cromatogramas de HPLC (Figura 5). Se ha informado que el acto ejerce efectos relajantes mediados por el óxido nítrico en los anillos aórticos intactos con el endotelio de ratas SD (Wong et al., 2001). Aunque se ha demostrado que Act es antihipertensivo en ratas Wistar,

el estudio empleó la inyección intravenosa de Act en una rata anestesiada para descartar el factor de adsorción (Ahmad et al., 1995). En este documento, administramos Act oralmente a los SHR y determinamos los cambios en la presión arterial. Encontramos que el hecho de la administración oral, pero no de Isoact, exhibió efectos antihipertensivos al disminuir la PAS y la PAD durante 24 h después de una sola administración (Figura 7). Act en una dosis de 10 mg/kg de peso corporal tuvo un efecto similar al de captopril en la dosis de 5 mg/kg SHR en la reducción de la PAS y fue mejor que el captopril en la reducción de la PAD.

En conclusión, Acto expuestoantioxidanteactividades inhibidoras de la ECA y efectos antihipertensivos en los SHR. Los resultados presentados aquí beneficiarán el esfuerzo para desarrollar medicinas a base de hierbas o productos relacionados utilizando la Ley, que se ha encontrado en muchas plantas y medicinas a base de hierbas, para la protección antioxidante y los efectos terapéuticos en el futuro.

Cistancheacteósidopara la antioxidante y anti-envejecimiento

1Departamento de Ciencias Alimentarias y Biotecnología, Universidad Nacional Chung Hsing, Taichung, Taiwán

2Ko Da Pharmaceutical Co., Ltd, Tao-Yuan, Taiwán

3Escuela de Farmacia, Universidad Médica de Taipei, Taipei, Taiwán

4Instituto de Graduados en Ingeniería y Materiales Biomédicos, Universidad Médica de Taipei, Taipei, Taiwán

5Centro de Investigación de Medicina Herbal Tradicional, Hospital de la Universidad Médica de Taipei, Taipei, Taiwán

6Instituto de Graduados en Farmacognosia, Universidad Médica de Taipei, Taipei, Taiwán

(Recibido el 12 de marzo de 2012; Aceptado el 20 de abril de 2012)

LITERATURA CITADA

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