Detección de la respuesta inmune humoral y celular a la vacuna anti‑SARS‑CoV‑2 BNT162b2 en mujeres que amamantan y en personas sin tratamiento previo y previamente infectadas

Este estudio exploró las respuestas humorales y celulares a la vacuna de ARNm anti-SARS-CoV-2 BNT162b2 en mujeres que amamantan y en personas naïve y seropositivas en los primeros seis meses después de la vacunación. En el estudio se inscribieron sesenta y un voluntarios vacunados con dos dosis de la vacuna de ARNm BNT162b2. Se utilizó ELISA desarrollado internamente para la cuantificación de anticuerpos específicos de RBD del SARS-CoV-2. La expresión del marcador de superficie celular y el análisis de IFN intracelular se llevaron a cabo mediante citometría de flujo. Las concentraciones de IFN-, IL-6 y TNF se determinaron mediante ELISA. Se observó un aumento significativo en los niveles de anticuerpos IgG anti-RBD 14 días después de la primera dosis de vacuna (p< 0.0001) in serum and milk. The expression of CD28 on CD4+ T cells was significantly higher compared to baseline (p< 0.05). There was a significant increase (p≤ 0.05) in the B cell lymphocyte subset after revaccination and an increased percentage of CD80+ B cells. The expression of IFN-γ in peripheral blood lymphocytes, CD3+ T cells, and serum was significantly increased (p< 0.05). No significant difference in immune response was observed between breastfeeding women and other study participants. The anti-SARS CoV-2 BNT162b2 mRNA vaccine induced measurable and durable immune response in breastfeeding women and naïve and previously infected individuals. 

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1. Introducción 

La propagación mundial del virus SARS-CoV-2 después de que se registrara el primer caso especial el 31 de diciembre de 2019 en Wuhan, China, provocó una pandemia mundial de la enfermedad del coronavirus-19 (COVID{{ 5}}), con alrededor de 648 millones de casos y 6,6 millones de muertes hasta el 18 de diciembre de 20221. La mortalidad en COVID-19 se ha asociado con la producción excesiva de citocinas proinflamatorias como IL-6, TNF- y IL-1, la llamada "tormenta de citoquinas", que puede provocar síndrome de dificultad respiratoria aguda y daño tisular extenso que resulta en falla multiorgánica2. Sin embargo, se esperaba que las rápidas mejoras en el diagnóstico, el tratamiento y la introducción de la vacunación contribuyeran a una disminución constante del número de personas infectadas, la necesidad de hospitalización y, en última instancia, a una reducción de la tasa de mortalidad. En Serbia, el primer caso registrado oficialmente se produjo el 6 de marzo de 2020 y la vacunación se inició el 24 de diciembre de 2020. Actualmente, hay cuatro vacunas disponibles para la población general: Vero Cell–Inactivated (Sinopharm), Vaxzevria (ChAdOx{{ 22}}S [recombinante], AstraZeneca), Sputnik V (Gam-COVID-Vac, Gamaleya) y Comirnaty (BNT162b2, BioNTech–Pfizer). Además de la producción de anticuerpos específicos, la respuesta inmune eficaz contra el SARS-CoV-2 requiere la activación de la inmunidad celular. Se espera que los componentes de la inmunidad celular, incluidas las células T CD4+ auxiliares y CD8+ citotóxicas, las células asesinas naturales (NK) y las células B, dentro de las primeras horas y días después de la exposición a este virus reducir los síntomas de la enfermedad, previniendo la progresión de la enfermedad, la hospitalización y la muerte. Las células T colaboradoras (T) activadas pueden matar indirectamente las células infectadas y favorecer la función de las células B y la respuesta de los anticuerpos mediante la producción de interferón-(IFN-)3,4. Se ha demostrado que el fenotipo T1 se asocia con una menor gravedad de la enfermedad COVID-195, por lo que las estrategias para el desarrollo de vacunas COVID-19 también deberían considerar la posibilidad de activación de las células T para la producción de IFN-. Se informa que la inmunidad celular al SARS-CoV-2 es detectable hasta 6 meses después de la infección en más del 90 % de las personas6. Así, se esperaba que la vacunación diera lugar a una inmunidad celular mensurable que contribuyera a la batalla contra la pandemia. Nuevos resultados han demostrado que, además de activar las células B en los centros germinales7, las vacunas de ARNm anti-SARS-CoV-2 deberían generar respuestas de células T CD4+ y CD8+ específicas de la proteína de pico8. Aunque el título de anticuerpos suele correlacionarse con la eficacia de la vacuna, las células B y T son importantes en la protección tras una nueva exposición a los antígenos del virus. Se espera que estas células B y T de memoria sean generadas por las vacunas de ARNm del SARS-CoV-2 y deberían desempeñar un papel en el control de la replicación del virus, limitando la diseminación viral9. Aunque no se han informado eventos adversos graves, la respuesta específica a la vacunación anti-SARS-CoV-2 en mujeres embarazadas y lactantes y en bebés cuyas madres recibieron la vacuna durante la lactancia aún está bajo evaluación y sigue siendo un tema controvertido10,11. Esta investigación tuvo como objetivo explorar por primera vez las respuestas humorales y celulares mensuales a la vacuna de ARNm anti-SARS-CoV-2 BNT162b2 en mujeres que amamantan y en personas naïve y seropositivas, en los primeros seis meses después de la vacunación en Serbia, y un seguimiento de dos años de seguridad a largo plazo autoinformado.

material y métodos

Diseño del estudio y recogida y procesamiento de muestras.

Un total de 61 voluntarios (45 sin SARS-CoV-2 sin tratamiento previo, 16 SARS-CoV-2 recuperados según informes confirmados por PCR) se inscribieron en el estudio y se monitorearon en el período de enero al 2 de noviembre. {11}}21. El tiempo promedio entre la infección natural y la vacunación en individuos previamente infectados fue de 3,18 ± 0,98 meses, con un rango de 2 a 5 meses. Todos los participantes eran mayores de 18 años y no presentaban signos de infecciones respiratorias en el momento de la vacunación. La mayoría de los participantes eran trabajadores sanitarios del Instituto de Oncología y Radiología de Serbia (44; 72%). Los participantes fueron vacunados con dos dosis de la vacuna de ARNm BNT162b2 (con 3 semanas de diferencia). Todas las extracciones de sangre se realizaron en centros médicos aprobados bajo estrictos protocolos y observación. Cuatro participantes eran madres lactantes que se ofrecieron como voluntarias para comparar muestras de sangre y leche. Las muestras se recolectaron en 6-puntos temporales: punto 1: prevacunación (línea de base), punto 2 a 14 días después de la inmunización primaria, punto 3 a 1 mes después de la inmunización primaria, punto 4 a 2 meses después de la inmunización primaria, punto 5 a 3 meses después de la inmunización primaria, y punto 6 a 6 meses después de la inmunización primaria. Se tomaron muestras de 10 a 20 ml de sangre periférica para cada momento, así como 1 ml de leche para 4 mujeres que amamantaban participantes. El suero se obtuvo de sangre periférica mediante centrifugación inmediatamente después de la extracción de sangre y se almacenó a -20 grados. Se aislaron células mononucleares de sangre periférica (PBMC) a partir de sangre heparinizada usando un gradiente de densidad Lymphoprep (Nypacon, Oslo, Noruega), se centrifugaron a 500 g durante 40 minutos y se lavaron tres veces en medio de cultivo (CM) RPMI 1640 (Sigma, St. Louis). , MO) suplementado con suero fetal de ternera (FCS) al 10% (Sigma, St. Louis, MO). Después del lavado, las PBMC se utilizaron inmediatamente para el análisis inmunofenotípico. El estudio fue aprobado por el Comité de Ética del Instituto de Oncología y Radiología de Serbia (Nº 899-01 del 01.04.2021), y todos los participantes firmaron un consentimiento informado. Todos los participantes fueron entrevistados por personal médico experimentado. El seguimiento a largo plazo de los efectos adversos posvacunación se realizó durante dos años después de la primera dosis de la vacuna.

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Detección y cuantificación de anticuerpos específicos de RBD del SARS‑CoV‑2.

La expresión de RBD de la proteína de pico del SARS-CoV-2 (NCBI: YP_009724390, AA319-541) se llevó a cabo en la línea de células T HEK-293 siguiendo un procedimiento publicado previamente12 . La proteína recombinante se purificó hasta homogeneidad y el rendimiento obtenido fue de 5{{20}}0 mg por L de cultivo celular. Brevemente, se usó la proteína RBD recombinante para recubrir placas de 96-pocillos con fondo grueso (Thermo Scientific NUNC-MaxiSorp, EE. UU.) a una concentración final de 10 ug/mL (50 μL/pocillo) en tampón de recubrimiento (15 mM). Na2CO3/NaHCO3 35 mM, pH 9,5) a 4 grados durante la noche. Las placas se lavaron con TBS que contenía Tween 20 al 0,05 % (TBST) y se bloquearon con BSA al 1 % en TBST durante 2 h a 37 grados. Los sueros diluidos se incubaron a 37 grados durante 1 h en TBST que contenía BSA al 0,1% y luego las placas se lavaron con TBST. Para la determinación de IgG específica total, se diluyó 1/1000 en solución de bloqueo el anticuerpo de cabra anti-IgG humana-AP conjugado (Novus Biologicals, EE. UU.) y se añadió a los pocillos. Después de la incubación durante 1 hora a 37 grados, las placas se lavaron 5 veces con TBST y se revelaron con 4-nitrofenilfosfato durante 1 hora a 37 grados. La absorbancia se midió a 450 nm (A450).

Análisis de citometría de flujo.

El inmunofenotipo de la superficie celular de las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) se identificó utilizando las siguientes combinaciones de anticuerpos monoclonales (mAb) directamente marcados: CD3FITC/CD28PE/CD4PerCP, CD80PE/CD19PerCP, CD80PE/CD14PerCP (Becton Dickinson, San José, EE. UU.). Las muestras se prepararon como se describió anteriormente13 usando 1 × 105 PBMC recién aisladas en 100 μL de RPMI 1640 suplementado con suero fetal bovino al 10% (FCS, Sigma), se incubaron durante 30 minutos a 4 grados con 20 μL de una combinación de mAb apropiada, se lavaron dos veces con solución salina tamponada con fosfato (PBS) enfriada con hielo y fijada con paraformaldehído al 1% antes de los análisis FACS. La expresión del marcador de superficie se cuantificó en el citómetro de flujo FACSCalibur (Becton-Dickinson, San José, EE. UU.). Un total de 10,000–50,000 eventos controlados verificados como linfocitos de sangre periférica (PBL) y monocitos, según sus características físicas, características de dispersión directa (FSC) y características de dispersión lateral (SSC). ), se recolectaron por muestra y se analizaron utilizando el software CellQUEST. Los subconjuntos de células se expresaron como porcentaje en sangre periférica.

Análisis de IFN intracelular.

Para la tinción intracelular de IFN 1×, se incubaron 106 PBMC con 12-miristato 13-acetato de forbol (PMA) (50 ng/ml) más ionomicina (500 ng/ml) durante 4 h a 37 grados y con Brefeldin A (10 ug/mL) durante las últimas 3 h, como se describió previamente14. Las células se tiñeron primero para detectar el antígeno de superficie con el anticuerpo CD3 PerCP, se fijaron y después de la permeabilización con solución permeabilizante 2 de BD FACS (BD Biosciences) se tiñeron para anti-IFN-PE (Becton Dickinson). El IFN intracelular se expresa como porcentaje en PBL, así como en linfocitos T CD3.

ELISA.

Las concentraciones de IFN-, IL-6 y TNF en los sueros de los participantes investigados se determinaron mediante kits ELISA comerciales sin recubrimiento, de acuerdo con las instrucciones del fabricante (Invitrogen). Las concentraciones de citocinas se determinaron en los puntos 1 (antes de la vacunación), punto 3 (1 mes después de la inmunización primaria) y punto 4 (2 meses después de la inmunización primaria). Brevemente, se recubrieron placas de ELISA con anticuerpos de captura apropiados en tampón de recubrimiento y se incubaron durante la noche a 4 grados. Primero, las placas se lavaron y bloquearon con diluyente ELISA/ELISAASPOT. Después de 1 h de incubación, se lavaron las placas y se añadieron muestras de suero y estándares a los pocillos. Después de la incubación, lavado y aspiración, según las instrucciones del fabricante, se añadió a cada pocillo la solución del anticuerpo de detección. Posteriormente las placas fueron lavadas y aspiradas; Se añadió la solución de avidina-HRP a los pocillos y se incubó durante 30 min. A continuación, se lavaron las placas y se añadió solución de (3,3',5,5'-tetrametilbencidina)TMB a cada pocillo. Las placas se incubaron durante 15 minutos a temperatura ambiente y la reacción enzimática se terminó añadiendo una solución de parada. La absorbancia se midió a 450/520 nm utilizando el lector de placas Multiskan EX Termo Labsystems15. Análisis estadístico. Los resultados se presentan como valores individuales con error estándar de la media (SEM). Las diferencias entre los valores se compararon mediante una prueba t no apareada y una prueba de rangos con signo de Wilcoxon y los resultados se consideraron estadísticamente significativos si p<0.05. The analysis was performed using GraphPad Prism 9.0 (GraphPad, La Jolla, CA, USA).

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Resultados

3.1 Participantes del estudio y procesamiento de suero/leche.

Las características de los participantes del estudio se presentan en la Tabla 1. De 61 voluntarios que recibieron la vacuna de ARNm anti-SARS-CoV-2 BNT162b2, se recogieron un total de 344 muestras de suero en 6 momentos, a partir de la línea de base previa a la vacunación. a 6 meses después del primer punto de vacunación. La mayoría de los participantes en el estudio (97%) informaron reacciones adversas locales a la vacunación en forma de dolor leve en el brazo/hombro y fatiga, que duraron entre 1 y 2 días. Sólo tres participantes recibieron la segunda dosis de la vacuna con retraso, dos debido a efectos adversos de la vacunación primaria (erupción cutánea, alergia) y uno debido al hallazgo de embarazo después de la primera dosis. No se informó ninguna infección entre las dos dosis de vacuna. Después de seis meses de seguimiento, solo 3 (5%) de los participantes estaban infectados con el SARS-CoV-2 y no se detectó ninguna forma grave de enfermedad que requiriera hospitalización. Siete participantes quedaron embarazadas después de la vacunación, una 2 semanas después de la primera dosis, otra 4 meses después de la primera dosis y 5 más de 12 meses después de la primera dosis. El seguimiento a largo plazo autoinformado no reveló efectos adversos relacionados con la vacunación hasta dos años después de la primera dosis, en mujeres que amamantaban o en cualquier otro participante del estudio.

Cuantificación de anticuerpos específicos de RBD del SARS-CoV-2 en el suero y la leche de los participantes del estudio.

Al analizar los niveles de anticuerpos IgG anti-RBD en suero posvacunación, se observó un aumento significativo en los niveles de IgG anti-RBD incluso 14 días después de la primera dosis de vacuna en todo el grupo analizado en comparación con los niveles de IgG antes de la vacunación (17,47 ± 51,49 AU /mL frente a 7828,28±24.157,29 AU/mL, pág.<0.0001) (Fig. 1a). Te serum levels of anti-RBD IgG continued to rise to 2 months post-vaccination, when a decrease was detected, which lasted up to 6 months, steadily. The levels of anti-RBD IgG antibodies were compared at each time point between naïve and previously infected individuals (Fig. 1b-c), and it was determined that the difference was statistically significant at baseline (point 1), as previously infected individuals had a higher level of antibodies before vaccination (7.23±0.77 AU/mL vs. 54.47±101.40 AU/mL, p<0.01). The difference was statistically significant also in points 2 (3979.48±3277.27 AU/mL vs. 22,581.99±49,570.63 AU/mL, p<0.05), 5 (2369.16±1934.31 AU/ mL vs. 6366.83±6875.85 AU/mL, p<0.01), and 6 (461.96±375.41 AU/mL vs. 766.04±317.35 AU/mL, p<0.05). The decline in antibody levels had the same dynamics in both groups but remained at higher levels in previously infected individuals for up to 6 months. No other analyzed parameters were correlated with a significantly different level of antibodies in serum (age, gender, smoking status). When comparing levels of anti-RBD IgG antibodies in other participants and breastfeeding women (Fig. 1d-e), no significant differences in serum antibody levels were observed in any of the comparisons. Anti-RBD IgG antibodies were also detected in the milk of 4 breastfeeding women (Fig. 1f). In lower levels, they presented with the same dynamics of rising and decline as detected in the serum. Comparing the levels of anti-RBD IgG antibodies in milk at each time point to baseline, (Fig. 1f), it was determined that the difference was statistically significant at points 2 (6.57±0.77 AU/mL vs. 152.13±35.83 AU/ mL, p<0.01) and 6 (6.57±0.77 AU/mL vs. 117.31±25.64 AU/mL, p<0.01).

Tabla 1. Características de los participantes del estudio.

Figura 1. Niveles séricos de anticuerpos IgG anti-RBD en (a) el grupo completo analizado, (b sin tratamiento previo, c) individuos previamente infectados, (d) el grupo completo sin mujeres que amamantan, (e) mujeres que amamantan y (f) en el leche de mujeres lactantes. Los resultados se presentan como valores individuales con error estándar de la media (SEM) de tres réplicas independientes. Las diferencias entre los valores se compararon mediante una prueba t no apareada y los resultados se consideraron estadísticamente significativos si p<0.05. * p<0.05; **p<0.01; *** p<0.0001.

Análisis de citometría de flujo y de IFN intracelular.

Los datos obtenidos mediante análisis de citometría de flujo mostraron que la expresión de CD28 en células T CD4+ en sangre periférica 2 meses después de la segunda dosis de vacuna fue significativamente mayor en comparación con los valores antes de la vacunación (42,84 ± 5,37 % frente a 37,75 ±5,96%, pág.<0.05, Wilcoxon signed-rank test) (Fig. 2a). Tere was a signifcant increase (p≤0.05, Wilcoxon signed rank test) in the prevalence of B cell lymphocyte subset (CD19+) from 6.87±1.17% to 8.73±1.54%, two months afer revaccination, as well as an increased percentage of CD80+ B cells from 1.72±0.28% to 1.99±0.28% (Fig. 2b). Furthermore, fve weeks afer revaccination, a signifcant (p≤0.05, Wilcoxon signed rank test) increase in the percentage of CD14+CD80+ cells from 1.15±0.38% to 5.87±0.95% was detected in the monocyte gate (Fig. 2c). Te expression of IFN-γ in PBLs, as well as in CD3+ T cells was signifcantly (p < 0.05, Wilcoxon signed rank test) increased at 1 week afer the second vaccine dose (1.84 ± 0.13% in PBL and 1.32 ± 0.10% in CD3+ T cells) compared to pre-vaccination baseline values (0.88 ± 0.13% in PBL and 0.72 ± 0.12% in CD3+ T cells) (Fig. 3a). Furthermore, serum levels of IFN-γ were signifcantly increased in all participants from the initial value of 16.69±0.29 pg/mL to 17.72±0.41 pg/mL (p<0.05, Wilcoxon signed rank test) (Fig. 3b), as well as in naive from 16.55±1.77 pg/mL to 17.26±2.53 pg/mL and in a group and previously infected individuals, from 15.93±2.01 pg/mL to 19.90±4.32 pg/mL at 1 week afer revaccination (Fig. 3c). Tere was no signifcant (p>0.05, prueba de rango con signo de Wilcoxon) diferencia en los niveles séricos de IL-6 y TNF- 1 semana y cinco semanas después de la segunda dosis de vacuna en comparación con los valores previos a la vacunación en el conjunto grupo, así como en individuos ingenuos o previamente infectados (Figuras complementarias 1a-d).

Discusión

El brote de infección respiratoria por SARS-CoV-2 tuvo un profundo efecto negativo en diversos aspectos de la vida cotidiana, incluidas cuestiones sociales, educativas y relacionadas con la salud que no están directamente relacionadas con la enfermedad COVID-19 en sí16–18 . Era necesario un enfoque de vacunación global para complementar las medidas de distanciamiento en la lucha contra la enfermedad, y muchos estudios exploraron la eficiencia y eficacia de varios tipos de vacunas distribuidas en todo el mundo durante 2021. En Serbia, actualmente solo están disponibles informes provisionales sobre la inmunidad humoral 2 y 3 meses después de la vacunación19 ,20 y están de acuerdo con los datos informados en este estudio. En nuestra cohorte analizada de hasta 6 meses después de la vacunación, se detectó una tasa de seroconversión del 100% después de la primera dosis de vacuna. Sólo el 5% de los participantes tuvo que recibir la segunda dosis de la vacuna con retraso. No hubo informes de infección por SARS-CoV-2 entre dos dosis de vacuna. Hasta seis meses de seguimiento, sólo el 5% de los participantes estaban infectados, sin necesidad de hospitalización. Los títulos de anticuerpos IgG anti-RBD SARS-CoV-2 fueron significativamente más altos en comparación con el valor inicial incluso después de la primera dosis de la vacuna, lo que contribuye a la idea de que el uso de la vacuna de ARNm BNT162b2 es un enfoque eficaz para respuestas humorales rápidas contra la vacuna original. cepas de virus. Los niveles séricos de IgG continuaron aumentando hasta 2 meses después de la vacunación, cuando se detectó una disminución constante hasta el período analizado de 6 meses. Se encontró que los individuos previamente infectados tenían títulos de IgG más altos en comparación con los individuos sin tratamiento previo hasta por 6 meses, que fue el único factor que contribuyó a los diferentes niveles de anticuerpos. En nuestro estudio y en algunos estudios previos21 también se detectaron anticuerpos IgG anti-RBD en la leche de mujeres lactantes, con una dinámica de títulos similar a la del suero. Se han publicado informes similares para los anticuerpos IgA después de una infección natural22. Como actualmente se dispone de datos limitados sobre los riesgos y beneficios de la vacunación de las mujeres lactantes, estos resultados son prometedores a la luz de una posible inmunización pasiva de los lactantes alimentados con leche materna, incluso después de 6 meses de la vacunación de las madres. No se observaron diferencias significativas en los niveles de anticuerpos séricos entre personas sin tratamiento previo o previamente infectadas y mujeres que amamantan, lo que refuerza las observaciones de que la respuesta a las vacunas anti-SARS-CoV-2 no se ve influenciada por la lactancia. Las recomendaciones actuales establecen que se debe considerar la vacunación para todas las personas de 6 meses o más, incluidas aquellas que están embarazadas o que intentan concebir ahora o en el futuro y las que están amamantando, independientemente de su estado previo de infección por COVID-1923. Nuestro estudio contribuye a la carga de evidencia24 que sugiere que no hubo ningún daño inmediato para las mujeres lactantes que recibieron la vacuna anti-SARS-CoV-2 ni para sus bebés amamantados. Además, siete participantes del estudio quedaron embarazadas después de la vacunación, una 2 semanas después de la primera dosis, otra 4 meses después de la primera dosis y 5 más de 12 meses después de la primera dosis. Las entrevistas de seguimiento a largo plazo realizadas recientemente a los participantes del estudio confirmaron que tampoco hubo daños imprevistos para las mujeres que amamantaban o sus bebés amamantados, ni para cualquier otro participante, dos años después de recibir la vacuna anti-SARS-CoV-2.

Figura 2. Porcentaje de (a) linfocitos T CD3+CD28+ y CD4+CD28+, (b) CD19+ y CD{{6 }}CD80+ linfocitos B, (c) monocitos CD14+CD80+ en sangre periférica. Los resultados se presentan como valores individuales con media ± error estándar de la media (SEM). Las diferencias entre los valores se compararon mediante la prueba de rangos con signos de Wilcoxon y los resultados se consideraron estadísticamente significativos si p<0.05. * p<0.05.

La aparición de nuevas variantes preocupantes, así como la existencia de informes de una rápida disminución en los niveles de anticuerpos anti-SARS CoV-2 después de la infección natural y la vacunación25 han generado incertidumbre sobre el papel de los componentes de la inmunidad celular. Unos pocos estudios que exploran la respuesta inmunológica de personas vacunadas en Serbia han informado sólo de inmunidad humoral19,20. En este estudio, se detectó un aumento de la expresión de los receptores coestimuladores CD28 en las células T CD4+ y CD80 en las células B 2 meses después de la administración de la segunda dosis de vacuna. Además, la expresión de CD80 en los monocitos aumentó 1-mes después de la vacunación completa.

La proliferación y diferenciación de las células T en células efectoras o de memoria requiere la presentación de antígenos, coestimulación y citoquinas. Los coestimuladores de células T mejor defendidos son los pares de moléculas, B7-1 (CD80) y B7-2 (CD86). Por lo general, se expresan en células presentadoras de antígenos (APC), como células dendríticas, células B, macrófagos, monocitos y células T. Su expresión en monocitos también es importante para la activación de linfocitos y la inmunidad adaptativa26. Los dos receptores principales presentes en la superficie de los linfocitos T que se unen a CD80 y CD86 son el CD28 y la proteína 4 citotóxica asociada a los linfocitos T (CTLA-4). La unión a CD28 activa los linfocitos y en consecuencia mejora la respuesta inmune27. Los resultados obtenidos en este estudio muestran que las células T CD4+ son activadas por los epítopos derivados del antígeno S presentados en las células B activadas y los monocitos 2 meses después de la segunda dosis de la vacuna. Varios datos sugirieron que las células T CD4 se activaron predominantemente después de la vacuna de ARNm28,29, mientras que en algunos estudios se informa que tanto las células T CD4 como las CD8 se presentan y activan por igual30. Tan et al. observaron recientemente que 3 meses después de la vacunación, la cantidad media de células T específicas de Spike era equivalente a la detectada en pacientes convalecientes en un momento similar después de la infección por SARS-CoV-231. Además, los componentes de la inmunidad adaptativa (tanto en infectados previamente como en vacunados) parecen estar regulados de forma independiente6,32,33 y existe una falta de correlación entre la producción de anticuerpos antivirales y la frecuencia de células T. Además, las vacunas de ARNm actuales provocan respuestas inmunitarias limitadas a la proteína Spike. Sin embargo, también habrá que evaluar el papel potencialmente protector de las células T específicas para otras proteínas estructurales y no estructurales34. La idea de que las vacunas poliantigénicas podrían ejercer un mayor control contra las variantes virales que las monoantigénicas, como las vacunas basadas en la proteína Spike, podría tener una sólida justificación35,36.

Figura 3. (a) Expresión de IFN- en todos los linfocitos T CD3+ de sangre periférica. Nivel sérico de IFN- en (b) todo el grupo analizado, (c) individuos sin tratamiento previo y previamente infectados. Los resultados se presentan como valores individuales con error estándar de la media (SEM). Las diferencias entre los valores se compararon mediante la prueba de rangos con signos de Wilcoxon y los resultados se consideraron estadísticamente significativos si p<0.05. * p<0.05.

En este estudio se detectaron niveles elevados de IFN- en todos los linfocitos y en las células T CD3+ 7 días después de la vacunación completa. Además, se observó un aumento del nivel de IFN- en el suero de todos los individuos vacunados, tanto en individuos sin tratamiento previo con SARS-CoV-2 como en individuos previamente infectados, 7 días después de la vacunación completa. Por lo tanto, las células T específicas de Spike inducidas por la vacuna basadas en ARNm que producen abundantemente IFN-. El IFN- es una citoquina clave con propiedades antivirales y se ha demostrado que inhibe la replicación del SARS-CoV-28. La rápida obtención de IFN- por la vacuna BNT162b2 demostrada en este estudio indica una respuesta inmune favorable de las células T contra el virus SARS-CoV-2. La reacción inmunológica desencadenada por el SARS-CoV-2 también incluye la producción de numerosas citocinas proinflamatorias, principalmente IL-6 y TNF, y los cambios en sus niveles podrían estar asociados con el pronóstico de la enfermedad. Se notificaron casos graves y mortales de COVID-19 en personas con niveles elevados de citocinas37. Sin embargo, en este estudio, no se detectaron diferencias significativas en los niveles séricos de IL-6 y TNF- 7 días y hasta 1 mes después de la vacunación completa, lo que podría deberse a características específicas de la cohorte y al momento del muestreo.

Estos datos representan los primeros informes publicados sobre inmunidad duradera teniendo en cuenta tanto el componente humoral como celular, y que se centra en mujeres que amamantan. Esto podría ser especialmente útil para futuros metanálisis de este y otros subgrupos de población sensibles, ya que los datos de la zona de los Balcanes sobre la población eslava generalmente faltan en esfuerzos multinacionales más grandes.

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Conclusiones

La vacuna de ARNm anti-SARS-CoV-2 BNT162b2 indujo respuestas humorales y celulares mensurables y duraderas en mujeres que amamantan y en personas ingenuas y previamente infectadas durante los primeros seis meses después de la vacunación en Serbia. No se informaron efectos adversos graves a la vacunación y solo el 5 % de los participantes se infectaron con el SARS-CoV-2 en los primeros seis meses después de la vacunación, sin necesidad de hospitalización. No se informaron daños imprevistos para las mujeres que amamantan ni para sus bebés amamantados dos años después de recibir la vacuna anti-SARS-CoV-2. Los próximos estudios en el campo deberían centrarse en estrategias de investigación y desarrollo de vacunas que puedan mantener a la COVID-19 y posibles pandemias similares bajo un control más rápido y duradero. También es necesario invertir esfuerzos para proporcionar directrices basadas en conocimientos, abordar adecuadamente la información errónea, especialmente en torno a subpoblaciones sensibles, como las mujeres que amamantan, facilitar el acceso a las vacunas en momentos de gran necesidad y reforzar la confianza general en la ciencia.

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Referencias

1. Panel de control del coronavirus (COVID{1}}) de la OMS, Organización Mundial de la Salud de la OMS. https://covid19.who.int/ (2022).

2. Hojyo, S. et al. Cómo COVID-19 induce una tormenta de citoquinas con alta mortalidad. Infamia. Regeneración. 40, (2020).

3. van Eeden, C., Khan, L., Osman, MS y Tervaert, JWC Disfunción de las células asesinas naturales y su papel en COVID-19. En t. J. Mol. Ciencia. 21, 6351 (2020).

4. Sette, A. & Crotty, S. Inmunidad adaptativa al SARS-CoV-2 y COVID-19. Celda 184, 861–880 (2021).

5. Chen, G. et al. Características clínicas e inmunológicas de la enfermedad por coronavirus grave y moderada 2019. J. Clin. Invertir. 130, 2620–2629 (2020).

6. Dan, JM y cols. Memoria inmunológica al SARS-CoV-2 evaluada hasta 8 meses después de la infección. Ciencia 80, 371 (2021).

7. Turner, JS y cols. Las vacunas de ARNm del SARS-CoV-2 inducen respuestas persistentes del centro germinal humano. Nat. 596, 109-113 (2021).

8. Pintor, MM et al. La inducción rápida de células T CD4+ específicas de antígeno se asocia con inmunidad humoral y celular coordinada a la vacunación con ARNm del SARS-CoV-2. Inmunidad 54, 2133-2142.e3 (2021).

9. Goel, RR et al. La vacunación con ARNm induce una memoria inmune duradera al SARS-CoV-2 con una evolución continua hacia variantes preocupantes. Preparación bioRxiv. Serv. Biol. https://doi.org/10.1101/2021.08.23.457229, (2021)

10. Muyldermans, J., De Weerdt, L., De Brabandere, L., Maertens, K. & Tommelein, E. Los efectos de la vacunación contra el covid-19 en mujeres lactantes: una revisión sistemática de la literatura. Frente. Inmunol. 13, 1498 (2022).

11. Golán, Y. et al. Vacunación con ARNm de Covid-19 en la lactancia: evaluación de eventos adversos y anticuerpos relacionados con la vacuna en parejas madre-hijo. Frente. Inmunol. 12, 777103 (2021).

12. Arbeitman, CR et al. Comparación estructural y funcional del dominio de unión al receptor de picos del SARS-CoV-2- producido en Pichia pastoris y células de mamíferos. Ciencia. Rep. 10, 21779 (2020).

13. Konjevic, G. et al. Evaluación de la capacidad funcional de células NK de pacientes con melanoma en un modelo in vitro de contacto de células NK con líneas celulares tumorales K562 y femx. J. Miembro. Biol. 250, 507–516 (2017).

14. Konjević, G. et al. La disminución de la activación de CD161 y el aumento de la expresión del receptor inhibidor de CD158a en las células NK son la base de la citotoxicidad alterada de las células NK en pacientes con mieloma múltiple. J.Clin. Patol. https://doi.org/10.1136/jclinpath-2016-203614 (2016).

15. Stanojković, TP et al. Evaluación de la expresión de citoquinas y subconjuntos de células inmunes circulantes como parámetros potenciales de toxicidad aguda por radiación en pacientes con cáncer de próstata. Ciencia. Rep. 10, 19002 (2020).

16. Cavic, M. et al. Explorando el efecto en el mundo real de la pandemia de SARS-CoV-2 en el diagnóstico molecular de pacientes con cáncer e individuos de alto riesgo. Experto Rev. Mol. Diagnóstico. 21, 101-107 (2021).

17. Hassan, I., Mukaigawara, M., King, L., Fernandes, G. y Sridhar, D. ¿En retrospectiva es 2020? Lecciones de gobernanza sanitaria mundial a un año de la pandemia. Nat. Medicina. 27, 396–400 (2021).

18. Cavic, M., Grahovac, J., Zec, R., Stefanovic, M. y Aleksic, E. Descripción general del primer año de la pandemia de SARS-CoV-2 en Serbia y el condado de Pirot. Pirot. Zb. 46, 1-23 (2021).

19. Lijeskić, O. et al. Un estudio de cohorte prospectivo sobre la cinética de anticuerpos específicos contra la infección por sars-cov-2 y contra cuatro vacunas contra el SARS-CoV-2 disponibles en Serbia, y la eficacia de la vacuna: un informe provisional de 3-meses. Vacunas 9, (2021).

20. Petrović, V., Vuković, V., Patić, A., Marković, M. & Ristić, M. Inmunogenicidad de las vacunas BNT162b2, BBIBP-CorV y Gam-COVID-Vac e inmunidad después del SARS-CoV natural{{7 }} infección: un estudio comparativo de Novi Sad. Serbia. PLoS One 17, e0263468 (2022).

21. Yeo, KT y cols. Actividad neutralizante y persistencia del ARNm de la vacuna SARS-CoV-2 en suero y leche materna después de la vacunación BNT162b2 en mujeres lactantes. Frente. Inmunol. 12, (2022).

22. Pace, RM y cols. La leche de mujeres diagnosticadas con COVID-19 no contiene ARN del SARS-CoV-2, pero tiene niveles persistentes de anticuerpos IgA específicos del SARS-CoV-2-. Frente. Inmunol. 12, 5566 (2021).

23. CDC, C. para DC y P. Vacunas COVID-19 durante el embarazo o la lactancia. https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/vaccines/recommendations/pregnancy.html (2022).

24. Bethesda (MD), NI de CH y HD Base de datos de medicamentos y lactancia (LactMed). Vacunas contra la COVID-19. (2022).

25. Jo, DH et al. Títulos de anticuerpos contra el SARS-CoV-2 en rápida disminución dentro de los 4 meses posteriores a la vacunación con BNT162b2. Vacunas 9, (2021).

26. Carreno, BM & Collins, M. La familia de ligandos B7 y sus receptores: nuevas vías de coestimulación e inhibición de respuestas inmunes. Año. Rev. Immunol. 20, 29–53 (2002).

27. Esensten, JH, Helou, YA, Chopra, G., Weiss, A. y Bluestone, JA Coestimulación CD28: del mecanismo a la terapia. Inmunidad 44, 973–988 (2016).

28. Geers, D. y otros. Las variantes preocupantes del SARS-CoV-2 escapan parcialmente a las respuestas humorales, pero no a las de las células T, en donantes y vacunados convalecientes de COVID-19. Ciencia. Inmunol. 6, (2021).

29. Tarke, A. et al. Impacto de las variantes del SARS-CoV-2 en la reactividad total de las células T CD4 + y CD8 + en individuos infectados o vacunados. Informes celulares. Medicina. 2, (2021).

30. Sahin, U. et al. La vacuna BNT162b2 induce anticuerpos neutralizantes y células T poliespecíficas en humanos. Nat. 2021 5957868 595, 572–577 (2021).

31. Tan, AT et al. Medición rápida de células T de pico de SARS-CoV-2 en sangre total de personas vacunadas e infectadas de forma natural. J.Clin. Invertir. 131, (2021).

32. Chia, WN et al. Dinámica de las respuestas de anticuerpos neutralizantes del SARS-CoV-2 y duración de la inmunidad: un estudio longitudinal. Te Lancet Microbe 2, e240 – e249 (2021).

33. Reynolds, CJ y otros. Respuestas discordantes de anticuerpos neutralizantes y células T en infecciones asintomáticas y leves por SARS-CoV-2. Ciencia. Inmunol. 5, (2020).

34. Lopandić, Z. et al. Inmunoreactividad IgM e IgG de la proteína m recombinante del SARS-CoV-2. En t. J. Mol. Ciencia. 22, (2021).

35. Altmann, DM, Boyton, RJ y Beale, R. Inmunidad a las variantes preocupantes del SARS-CoV-2. Ciencia 371, 1103–1104 (2021).

36. Matchett, WE et al. Vanguardia: la vacuna de nucleocápside provoca inmunidad protectora contra el SARS-CoV-2 independiente de picos. J. Inmunol. 207, 376–379 (2021).

37. Costela-Ruiz, VJ, Illescas-Montes, R., Puerta-Puerta, JM, Ruiz, C. & Melguizo-Rodríguez, L. Infección por SARS-CoV-2: el papel de las citocinas en COVID{{ 7}} enfermedad. Factor de crecimiento de citocinas Rev. 54, 62 (2020).