Respuestas longitudinales de anticuerpos neutralizantes y funcionales a las variantes del coronavirus 2 del síndrome respiratorio agudo severo después de la vacunación contra la enfermedad del coronavirus de ARN mensajero 2019

En esta cohorte prospectiva longitudinal de adultos sanos en los Estados Unidos, encontramos que la serie primaria de ARN mensajero de la enfermedad por coronavirus de 2019 y las vacunas de refuerzo provocaron títulos altos de anticuerpos de citotoxicidad mediada por células dependientes de anticuerpos y neutralizantes con reacción cruzada amplia, que disminuyeron gradualmente durante 6 meses, particularmente contra las variantes del coronavirus 2 del síndrome respiratorio agudo severo. Estos datos apoyan la indicación de una posterior vacunación de refuerzo.

Palabras clave.

ADCC; citotoxicidad mediada por células dependiente de anticuerpos; durabilidad; inmunidad híbrida; Omicrón.

planta cistanche que aumenta el sistema inmunológico

Hasta marzo de 2023, la pandemia de coronavirus 2019 (COVID-19) causada por el síndrome respiratorio agudo severo coronavirus 2 (SARS-CoV-2) ha causado más de 600 millones de casos y 6,8 millones de muertes en todo el mundo [1 ]. La pandemia se ha caracterizado por la aparición secuencial de variantes del SARS-CoV-2 con mayor transmisibilidad y capacidad de escapar parcialmente de los anticuerpos neutralizantes inducidos por la vacuna y la infección natural [2]. Una de esas variantes fue la cepa Omicron (B.1.1.529), que fue declarada variante preocupante (VOC) por la Organización Mundial de la Salud en noviembre de 2021 [3].

Beneficios de cistanche para hombres: fortalece el sistema inmunológico.

Haga clic aquí para ver los productos Cistanche Enhance Immunity

【Pregunte por más】 Correo electrónico:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Desde que se identificó por primera vez Omicron, han surgido múltiples sublinajes, incluidos BA.1, BA.2, BA.2.12.1 y BA.4/5 (Figura 1 complementaria), que se convirtió en la cepa predominantemente circulante en los Estados Unidos en junio de 2022. [4]. Si bien Omicron se ha caracterizado por una enfermedad menos grave [5–7], puede evadir parcialmente los anticuerpos neutralizantes debido a mutaciones en el dominio de unión al receptor de la proteína de pico (RBD) [8]. Se sabe menos sobre la capacidad de las variantes de Omicron para evadir los anticuerpos que median las funciones efectoras de Fc. Si bien el papel de los anticuerpos neutralizantes en la protección contra la COVID-19 está bien establecido [9–11], más recientemente se ha reconocido la importancia de los anticuerpos efectores Fc [12, 13]. Los anticuerpos pueden mediar funciones efectoras de Fc, incluida la citotoxicidad mediada por células dependiente de anticuerpos (ADCC), la fagocitosis mediada por células dependiente de anticuerpos, la fagocitosis de neutrófilos dependiente de anticuerpos y la deposición de complemento dependiente de anticuerpos mediante la unión de Fab a antígenos diana y el compromiso de Fc con cualquiera de los dos. Receptores Fc (FcR; presentes en todas las células inmunes innatas) o componentes del sistema del complemento. Debido a que los anticuerpos efectores Fc pueden unirse a sitios antigénicos distintos de los anticuerpos neutralizantes, pueden conservar la funcionalidad y conferir protección independientemente de la neutralización. Por lo tanto, en este estudio, medimos la ADCC funcional longitudinal y las respuestas de anticuerpos neutralizantes a los COV-2 del SARS-CoV actualmente en circulación después de las vacunas primarias y de refuerzo de ARN mensajero (ARNm) de COVID-19 en individuos con y sin inmunidad híbrida. .

cistanche tubulosa-mejora el sistema inmunológico

MÉTODOS

Declaración de consentimiento del paciente

Este estudio fue aprobado por la Junta de Revisión Institucional de la Universidad Emory y todos los participantes dieron su consentimiento informado por escrito.

Cohorte de estudio 

Adultos ambulatorios sanos con o sin antecedentes de COVID sintomático-19 diagnosticado mediante pruebas de atención estándar se inscribieron prospectivamente en un protocolo de recolección de muestras del 27 de abril de 2020 al 12 de abril de 2021. 9}} se administraron series de vacunas primarias y vacunas de refuerzo monovalentes a los participantes según su proveedor/ubicación de elección (Tabla 1). Los participantes fueron seguidos en los momentos previos a la vacunación, después de la dosis 2, de refuerzo y después de la dosis 3 al mes, 3 meses y 6 meses después del refuerzo. Se recogieron muestras de suero en cada momento en tubos separadores de suero, se dividieron en alícuotas y se congelaron a -80 grados hasta el análisis. Neutralización de pseudovirusEnsayos

Pseudovirus con SARS-CoV-2 de tipo salvaje (Wuhan-Hu-1), Delta (B.1.617.2) y Omicron (subvariantes BA.1, BA.2, BA.2.12.1 , y BA.4/5) se desarrollaron proteínas de pico y los ensayos se realizaron como se describió anteriormente (Métodos complementarios) [14, 15]. Las placas se revelaron utilizando sustrato de luciferasa Britelite Plus (PerkinElmer) y las unidades relativas de luminiscencia (RLU) se leyeron en un luminómetro TopCount NXT. El título de anticuerpos neutralizantes para cada proteína de pico variante se expresó como la concentración efectiva a la que se neutralizó el 50% del virus.

Ensayos ADCC El desarrollo de líneas celulares de proteína fluorescente verde inducible por tetraciclina y luciferasa de doble indicador que expresan proteínas de pico variantes del SARS-CoV-2 se realizó como se describió anteriormente [14, 15]. La citotoxicidad se determinó a partir de una lectura de luminiscencia que indicaba células vivas residuales. ADCC se calculó de acuerdo con la siguiente fórmula: ADCC (%)=[RLU × (sin anticuerpo) – RLU (con anticuerpo)] / RLU (sin anticuerpo) × 100 y se expresó como un título de criterio de valoración.

cistanche tubulosa-mejora el sistema inmunológico

RESULTADOS

Cohorte de estudio Se inscribieron de forma prospectiva dieciséis participantes con y 10 participantes sin antecedentes de COVID-19 que posteriormente recibieron la vacuna de ARNm de COVID-19 (Tabla 1 y Tabla complementaria 1). Los diagnósticos de COVID-19 se produjeron entre marzo y diciembre de 2020, lo que precedió en gran medida a la aparición de COV en los Estados Unidos. De aquellos con antecedentes de COVID-19, 1 (7%) recibió ARNm-1273 y 15 (93%) recibieron BNT162b2 para las dosis 1 y 2, mientras que 3 (19%) recibieron ARNm{{ 19}} y 13 (81%) recibieron BNT162b2 para la dosis 3. De aquellos sin antecedentes de COVID-19, 3 (30%) recibieron ARNm-1273 y 7 (70%) recibieron BNT162b2. para las dosis 1, 2 y 3.

Respuestas de anticuerpos neutralizantes de pseudovirus Como se esperaba, algunos participantes con antecedentes de COVID-19 tenían anticuerpos neutralizantes detectables contra cepas de tipo salvaje (9/16 [56 %]) y variantes (4/16 [25 %]) en al inicio, mientras que el grupo sin experiencia previa con COVID-19 tenía anticuerpos neutralizantes al inicio indetectables (Figura 1A). La serie de vacunación primaria de 2-dosis provocó anticuerpos neutralizantes en ambos grupos contra las 6 cepas analizadas, pero redujo los títulos contra las variantes, particularmente entre el grupo sin tratamiento previo con COVID-19 (Figura 2A complementaria y Tabla 2 complementaria). ). Después de la serie primaria, los títulos neutralizantes disminuyeron significativamente con el tiempo en ambos grupos hasta la administración de la tercera dosis de refuerzo. Tras la vacunación de refuerzo, los anticuerpos neutralizantes aumentaron significativamente en ambos grupos contra las 6 cepas. La dosis de refuerzo redujo efectivamente la brecha entre los participantes sin experiencia previa con COVID-19 y los previamente infectados y proporcionó una mayor amplitud de respuestas neutralizantes a las variantes Delta y Omicron. Durante el 6-mes de seguimiento posterior a la dosis de refuerzo, los títulos de anticuerpos neutralizantes permanecieron detectables en todos los grupos y contra todas las variantes. Sin embargo, los títulos disminuyeron gradualmente, especialmente en los participantes sin experiencia previa con COVID-19.

Tabla 1. Características iniciales de la cohorte del estudio

Anticuerpos ADCC

Al igual que los anticuerpos neutralizantes, los anticuerpos ADCC se detectaron en niveles bajos al inicio del estudio contra las 6 cepas de SARS-CoV-2 en participantes con COVID previo-19, mientras que no se detectaron anticuerpos ADCC al inicio del estudio en COVID{{ 4}}–individuos ingenuos (Figura 1B). La serie de vacunación primaria de 2-dosis provocó anticuerpos ADCC en ambos grupos contra las 6 cepas analizadas, pero a niveles más bajos entre el grupo sin tratamiento previo con COVID-19, especialmente contra las variantes de Omicron (Figura 2B complementaria y Tabla complementaria 3). Luego, los títulos de anticuerpos contra ADCC disminuyeron con el tiempo en ambos grupos contra todas las variantes antes de la administración de una tercera dosis de refuerzo. Después de la tercera dosis, los anticuerpos ADCC aumentaron significativamente en ambos grupos contra las 6 variantes del SARS-CoV-2. Durante el 6-mes de seguimiento posterior a la dosis de refuerzo, los anticuerpos ADCC persistieron en ambos grupos y contra todas las variantes. Sin embargo, se observaron disminuciones significativas en los títulos de anticuerpos contra las variantes de Omicron, especialmente entre los participantes sin experiencia previa con COVID-19. Correlación entre anticuerpos neutralizantes y ADCC

Los títulos de anticuerpos neutralizantes y ADCC se correlacionaron significativamente en ambos grupos de participantes después de la dosis 2, que correspondió al momento de los títulos máximos de anticuerpos, con la excepción de BA.2.12.1 en el grupo sin tratamiento previo con COVID-19 (suplementario). Figura 3). La mayor disociación entre la neutralización y los anticuerpos ADCC se observó antes de la dosis de refuerzo en los individuos sin tratamiento previo con COVID-19, lo que correspondió al nadir posterior a la vacuna de los anticuerpos neutralizantes contra las variantes del SARS-CoV-2. En ese momento, varios participantes en el grupo vacunado sin experiencia previa con COVID-19 tenían anticuerpos ADCC persistentes en el contexto de anticuerpos neutralizantes indetectables.

DISCUSIÓN

Este estudio de cohorte longitudinal prospectivo encontró que la 2-serie de dosis primaria de la vacuna de ARNm contra la COVID-19 provocó anticuerpos ampliamente neutralizantes cruzados y ADCC cruzados contra el SARS-CoV-2 de tipo salvaje, Delta, y cepas variantes de Omicron, que disminuyeron rápidamente. Una vacuna de refuerzo con una tercera dosis redujo efectivamente la brecha entre los participantes sin experiencia previa con COVID-19 y los previamente infectados y proporcionó una mayor amplitud de respuestas neutralizantes y ADCC a las variantes Delta y Omicron. La tercera dosis también mejoró la durabilidad de las respuestas serológicas, ya que los anticuerpos contra las seis cepas permanecieron detectables durante 6- meses de seguimiento. Sin embargo, tanto los títulos de anticuerpos neutralizantes como los de ADCC disminuyeron gradualmente a los 6 meses, especialmente ante la variante Omicron entre personas sin experiencia previa con COVID-19. Estos hallazgos respaldan la indicación de una vacunación de refuerzo posterior en caso de inmunidad decreciente. Como muchas otras infecciones virales [16], se ha descubierto que los anticuerpos neutralizantes contra el SARS-CoV-2 se correlacionan con la protección contra la enfermedad sintomática [9-11].

Sin embargo, la correlación entre los anticuerpos neutralizantes y la protección es incompleta. Dado que también se ha descubierto que los anticuerpos efectores Fc se correlacionan con la protección en modelos preclínicos [12, 13], la combinación de anticuerpos neutralizantes y efectores Fc puede mejorar la correlación con la protección. Los anticuerpos efectores de Fc pueden unirse a sitios antigénicos únicos [17] que son distintos de los epítopos neutralizantes, lo que facilita la interacción de Fc con el FcR en las células efectoras. Esto implica que los anticuerpos funcionales Fc pueden tener la capacidad de conferir protección contra COVID-19 a pesar de la disminución de los anticuerpos neutralizantes después de la vacunación y en el contexto de la aparición de COV [17]. Se necesitan estudios futuros para determinar la eficacia de los anticuerpos funcionales Fc en la prevención de la COVID-19 causada por los COV que circulan actualmente.

Beneficios de la cistanche tubulosa-fortalecer el sistema inmunológico

Las limitaciones de nuestro estudio incluyen el pequeño tamaño de la cohorte inscrita en un solo centro. Las 2 cohortes no fueron emparejadas y las diferencias en las características iniciales podrían haber contribuido a las respuestas inmunes. Debido a que las vacunas se administraron como estándar de atención en el proveedor/lugar elegido por los participantes, hubo variabilidad en el momento de las dosis de vacuna en relación con el momento de la recolección de muestras. El momento de las inscripciones coincidió con la aparición de la variante Omicron, y las infecciones irruptivas pueden haber afectado los títulos de anticuerpos. Este estudio no evaluó las respuestas inmunitarias después de la vacunación con ARNm que contiene variantes, que fue autorizada por la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos y recomendada después de completar este estudio. El estudio tampoco evaluó las respuestas de anticuerpos a otras variantes del SARS-CoV-2, la durabilidad de los anticuerpos más allá de los 6 meses, las respuestas inmunitarias celulares, otras respuestas funcionales de los anticuerpos ni la eficacia de la vacuna. En conclusión, la serie primaria de ARNm de COVID-19 y la vacunación de refuerzo provocaron títulos elevados de anticuerpos ampliamente neutralizantes cruzados y ADCC cruzados, que disminuyeron gradualmente a lo largo de 6 meses, particularmente contra las variantes de SARS-CoV-2 y entre las personas con COVID. -19–individuos ingenuos. Estos datos respaldan la indicación de una vacunación de refuerzo posterior en el contexto de una inmunidad decreciente y variantes emergentes del SARS-CoV-2.

figura 1. Actividad de citotoxicidad mediada por células (ADCC) dependiente de anticuerpos y neutralización de pseudovirus después de la vacunación contra la enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19). Neutralización de pseudovirus (concentración efectiva a la que se neutralizó el 50% del virus [EC50]) (A) y títulos de anticuerpos de criterio de valoración de ADCC funcional (B) contra el síndrome respiratorio agudo severo coronavirus 2 (SARS-CoV-2) Wuhan Hu{ Las variantes {10}} (Wu-1), Delta y Omicron (BA.1, BA.2, BA.2.12.1 y BA.4/5) se midieron longitudinalmente después de la COVID-19 Vacunación con ARN mensajero en participantes con o sin antecedentes de COVID-19. Se calcularon los títulos medios geométricos para cada variante y momento, y se realizaron comparaciones estadísticas de los títulos transformados logarítmicamente mediante pruebas de Mann-Whitney. Las líneas discontinuas representan el límite inferior de detección del ensayo. *P < 0,05; **P < 0,01; ***P < 0,001; ****P < 0,0001; ns, no significativo. Los mapas de calor muestran títulos de anticuerpos de punto final neutralizantes de pseudovirus (EC50) (C) y ADCC (D) contra variantes del SARS-CoV-2 a lo largo del tiempo.

Referencias

1. Universidad Johns Hopkins y Medicina. Centro de recursos sobre coronavirus. Disponible en: https://coronavirus.jhu.edu/map.html. Consultado el 30 de diciembre de 2022.

2. Harvey WT, Carabelli AM, Jackson B, et al. Variantes del SARS-CoV-2, mutaciones de pico y escape inmunológico. Nat Rev Microbiol 2021; 19:409–24.

3. Organización Mundial de la Salud. Clasificación de Omicron (B.1.1.529): variante preocupante del SARS-CoV-2. 2021. Disponible en: https://www.who.int/news/item/26-11- 2021-clasificación-de-omicron-(b.1.1.529)-sars-cov-2-variante-de- inquietud. Consultado el 30 de diciembre de 2022.

4. Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades. Rastreador de datos COVID. 2023. Disponible en: https://covid.cdc.gov/covid-data-tracker/#variant-proportions. Consultado el 9 de enero de 2023.

5. Iuliano AD, Brunkard JM, Boehmer TK, et al. Tendencias en la gravedad de la enfermedad y la utilización de la atención médica durante el período inicial de la variante Omicron en comparación con períodos anteriores de alta transmisión del SARS-CoV-2, Estados Unidos, diciembre de 2020 a enero de 2022. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2022; 71:146–52.

6. Havers FP, Patel K, Whitaker M, et al. Hospitalizaciones asociadas a COVID-19 confirmadas por laboratorio entre adultos durante el predominio de la variante SARS-CoV-2 Omicron BA.2 - COVID-19–Red de vigilancia de hospitalizaciones asociadas, 14 estados, 20 de junio de 2021 al 31 de mayo de 2022. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2022; 71:1085–91.

7. Adjei S, Hong K, Molinari NM, et al. Riesgo de mortalidad entre pacientes hospitalizados principalmente por COVID-19 durante los períodos pandémicos de las variantes Omicron y Delta: Estados Unidos, abril de 2020 a junio de 2022. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2022; 71: 1182–9.

8. Cao Y, Wang J, Jian F, et al. Omicron escapa a la mayoría de los anticuerpos neutralizantes del SARS-CoV-2 existentes. Naturaleza 2022; 602:657–63.

9. Feng S, Phillips DJ, White T, et al. Correlatos de protección contra la infección por SARS-CoV-2 sintomática y asintomática. Nat Med 2021; 27:2032–40.

10. Gilbert PB, Montefiori DC, McDermott AB, et al. Análisis de correlaciones inmunitarias del ensayo clínico de eficacia de la vacuna ARNm-1273COVID-19. Ciencia 2022; 375: 43–50.

11. Khoury DS, Cromer D, Reynaldi A, et al. Los niveles de anticuerpos neutralizantes predicen en gran medida la protección inmunitaria contra la infección sintomática por SARS-CoV-2. Nat Med 2021; 27:1205–11.

12. Mercado NB, Zahn R, Wegmann F, et al. La vacuna Ad26 de inyección única protege contra el SARS-CoV-2 en macacos rhesus. Naturaleza 2020; 586:583–8.

13. Gorman MJ, Patel N, Guebre-Xabier M, et al. Fab y Fc contribuyen a la máxima protección contra el SARS-CoV-2 después de la vacuna de la subunidad NVX-CoV2373 con la vacunación Matrix-M. Representante Celular Med 2021; 2:100405.

14. Chen X, Rostad CA, Anderson LJ, et al. El desarrollo y la cinética de la citotoxicidad mediada por células dependiente de anticuerpos funcionales (ADCC) contra la proteína de pico del SARS-CoV-2. Virología 2021; 559:1–9.

15. Rostad CA, Chen X, Sun HY, et al. Respuestas funcionales de anticuerpos a las variantes del SARS-CoV-2 en niños con COVID-19, MIS-C y después de dos dosis de la vacuna BNT162b2. J Infect Dis 2022; 226:1237–42.

16. Plotkin SA. Correlatos de protección inducida por la vacunación. Clin Vaccine Immunol 2010; 17:1055–65.

17. Kaplonek P, Fischinger S, Cizmeci D, et al. Los anticuerpos inducidos por la vacuna de ARNm-1273 mantienen las funciones efectoras de Fc en todas las variantes preocupantes del SARS-CoV-2. Inmunidad 2022; 55:355–365.e4.