Peroxidación antilipídica y efectos antirradiación del glucósido total de Cistanche

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Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei, Mu Hu Yati, Du Niansheng

[Resumen]:Glucósido total de Cistanche(GC) puede mejorar significativamente la actividad soD de los glóbulos rojos de ratón, reducir el contenido sérico de MDA, aumentar el contenido de ADN y ARN en los tejidos hepáticos y renales, y puede promover significativamente el daño causado por⁶⁰Coirradiación. La restauración de la actividad de SOD en los glóbulos rojos de ratón y el contenido de ácido nucleico en el bazo reduce el contenido de MDA hepática, lo que sugiere que el efecto protector de los GC (Glucósido total deCistanche) sobre ácidos nucleicos yradioprotecciónestá estrechamente relacionado con superoxidación antilipídicaefecto.

Palabras clave:Glucósido total de Cistanche, ADN, ARN,peroxidación antilipídica,radiaciónprotección

Cistanchetiene los efectos de nutrir la energía vital, nutrir la esencia y fortalecer el yang. En las prescripciones antiguas antienvejecimiento y prolongantes del pasado, la probabilidad de aparición es solo superada por el ginseng. La literatura reciente informa queCistanchepuede mejorar la función inmune del cuerpo (1); promover la memoria y mejorar la inteligencia; regular el sistema nervioso, mejorar la función sexual y antienvejecimiento (2). La preparación cruda deCistanchepuede mejorar la actividad SOD de los glóbulos rojos de ratón; reducir significativamente el contenido de lipofuscina miocárdica (3); mejorar la capacidad de síntesis de ADN de los animales con deficiencia de yang y extender significativamente la vida útil de las moscas de la fruta (4). Sin embargo, no hay ningún informe sobre los efectos farmacológicos de los GC (Glucósido total de Cistanche) en el país y en el extranjero. Este estudio tiene como objetivo explorar el efecto protector de los GC (Glucósido total de Cistanche) sobre ácidos nucleicos,radiaciónprotección, yantilipídicoperoxidación.

Glucósido total de Cistancheperoxidación antilipídica

1 Material y métodos

1.1 Medicamentos y reactivos

Glucósido total de Cistanche, extraído deCistanche Salsa(Salsa cistanche C.A.Mey) del norte de Xinjiang, el ingrediente principal esPhnylethanoildGlucósidodeCistanche, y el método de extracción se basa en la literatura japonesa (Publicación patentada (A) Sho 63-198627) Procedimiento, proporcionado por el Profesor Du Niansheng, Departamento de Química vegetal, Departamento de Farmacia. Ácido tiobarbitúrico, producido por Shanghai Reagent No. 1 Factory; Los productos estándar de ADN y ARN fueron proporcionados por Shanghai Milk Company y el Instituto de Bioquímica de la Academia China de Ciencias, y ambos fueron probados para determinar su pureza de acuerdo con el método de determinación de fósforo [5].

1.2 Efecto de peroxidación antilipídica de los GC (Glucósido total de Cistanche)

110 ratones NIH, con un peso (22,5 ± 2,1) g, tanto machos como hembras, se dividieron aleatoriamente en 4 grupos: el grupo control recibió solución salina normal (NS) 20 ml · kg -1 · d-1 sonda (ig); GC (Glucósido total de Cistanche) grupo, GC (Glucósido total de Cistanche) 62.5, 125, 250 mg·kg -1 día -1, ig se administraron durante 18 días cada uno, después de la última administración durante 2 horas, se extrajeron los globos oculares y se tomaron 50 μl de sangre para analizar la SOD en los glóbulos rojos Vitality; la sangre restante para preparar el suero, medir el contenido sérico de MDA; tomar rápidamente el corazón, el hígado, el cerebro, el riñón y otros órganos, enjuagar con hielo solución salina normal, preparar cada tejido homogeneizado, el extracto de SOD de glóbulos rojos se prepara de acuerdo con la literatura (6). Preparación de extracto de ADN y ARN: tome el corazón, pese los órganos del hígado, el cerebro y el riñón, córtelos en un molinillo, agregue 2 ml, ácido tricloroacético al 15%, muela en un homogeneizado en un baño de agua helada y transfiera al tubo de centrifugación, enjuague el recipiente de la amoladora con 2 ml de ácido tricloroacético al 15% durante un total de 3 veces, transfiera todo el líquido de lavado al tubo de la centrífuga, centrífuga 4000r·min-1 durante 10min, deseche el sobrenadante. Después de agregar 2 ml de etanol absoluto a la precipitación y mezcla, colóquelo en un baño de agua a 90 ° C y caliéntelo durante 2 min. Después del enfriamiento, se centrifuga a 4000 r·min-1 durante 10 min, y el sobrenadante se descarta. Agregue 8 ml de ácido tricloroacético al 5% a la precipitación y mezcle bien, póngalo en un baño de agua a 90 ° C durante 15 minutos, centrífuga después del enfriamiento, 4000r ·min-1 durante 10 minutos, vierta el sobrenadante en un matraz aforado de 10 ml y agregue 1 ml a la precipitación 5% de ácido tricloroacético, mezcle bien, centrífuga, 4000r · min-1, 5 min, y luego vierta el sobrenadante en un matraz aforado de 10 ml, diluir el volumen con agua destilada y mezclar bien. Se han preparado los extractos de ADN y ARN. Determinación de indicadores bioquímicos: la actividad de la SOD de los glóbulos rojos se midió por el método de autoxidación del pirogalol [7]; el contenido sérico de M DA se midió mediante el método de coloración TBA [8]; Los extractos de ADN y ARN se midieron por método de coloración de difenilamina y orcinol respectivamente El contenido de ADN y ARN en cada tejido se midió por colorimetría (5).

Efecto protector de los GC (Glucósido total de Cistanche) enradiaciónprotección

1.3 El efecto antirradiación de los GC (Glucósido total de Cistanche)

120 ratones NIH con un peso (21,0 ± 2,2) g, tanto machos como hembras, se dividieron aleatoriamente en 4 grupos: grupo normal, NS 20ml kg -1 día-1 durante 18 días; los 90 ratones restantes recibidos⁶⁰Co rayos gamma una vez Cuerpo enteroirradiación, la dosis de exposición es de 6 Gy, y luego se divide en grupos de lesiones: NS 20ml·kg -1·día-1 inmediatamente despuésirradiación; GC (Glucósido total de Cistanche) grupo de tratamiento: 125 y 250 mg·kg respectivamente después deirradiación-1·d-1, 18 días cada uno, 2 horas después de la última administración de cada grupo, se determinó la actividad de SOD en los glóbulos rojos, el contenido de MDA hepática, el contenido de ADN y ARN en los tejidos del hígado y el bazo, y el hígado y el bazo de acuerdo con los métodos experimentales antes mencionados. Observación de la morfología tisular. Todos los datos se expresan como x ±s, y el procesamiento de la prueba t se realiza entre grupos.

2 Resultados

2.1 Efecto de peroxidación antilipídica de los GC (Glucósido Total de Cistanche)

2.1.1 El efecto de los GC (glucósido total de Cistanche) sobre la actividad de la SOD en eritrocitos y el contenido sérico de MDA en ratones normales:Como puede verse en el cuadro 1, GC (Glucósido total de Cistanche)62,5 mg·kg -1 grupo se compara con el grupo control No hubo diferencia (P> 0,05). GC (TGlucósido otal de Cistanche) 125, 250mg·kg -1 grupo puede aumentar significativamente la actividad soD en los glóbulos rojos (P<0.01) and="" reduce="" the="" serum="" mda="" content="" (p=""><>

Tabla 1: El efecto de los GC (Glucósido Total de Cistanche) sobre la actividad de SOD en eritrocitos y el contenido sérico de M DA en ratones normales

2.1.2 El efecto de los GC (Glucósido Total de Cistanche) sobre el contenido de ADN de varios órganos en ratones normales:Como se puede observar en la Tabla 2, en comparación con el grupo control, no hubo diferencias significativas en elADNcontenido del corazón y el cerebro en cada grupo de administración (P>0,05) ). GC (Glucósido total de Cistanche) El grupo de 62,5 mg·kg -1 no tuvo ningún efecto sobre el contenido de ADN del hígado y el riñón; GC (Glucósido total de Cistanche) 125mg·kg -1 grupo y 250mg·kg -1 grupo tenían contenido de ADN hepático en comparación con el grupo control aumentado en un 9,6% (P<0.05), 14.2%="" (p=""><0.01); the="" content="" of="" dna="" in="" the="" kidney="" increased="" by="" 15.4%,="" 16.0%,="" respectively,="" compared="" with="" the="" control="" group="" (p=""><>

Tabla 2 Efectos de los GC (Glucósido Total de Cistanche) sobre el contenido de ADN de varios órganos en ratones normales

2.1.3 El efecto de los GC (Glucósido Total de Cistanche) sobre el contenido de ARN de varios órganos en ratones normales:Como se puede observar en la Tabla 3, en comparación con el grupo control, no hubo diferencias significativas en el contenido de ARN del corazón y el cerebro en cada grupo de administración (P>0,05) ). Los GC (Glucósido total de Cistanche) El grupo de 62,5 mg·kg -1 no tuvo ningún efecto sobre el contenido de ARN del hígado y el riñón; el contenido de ARN hepático de los GC (Glucósido total de Cistanche) El grupo de 125 y 250 mg·kg -1 aumentó un 18,1% y un 26,2% respectivamente en comparación con el grupo control. % (Todo P<0.01); compared="" with="" the="" control="" group,="" the="" rna="" content="" of="" the="" kidney="" increased="" by="" 20.9%="" and="" 25.4%="" respectively="" (all=""><>

Tabla 3 Efectos de los GC (Glucósido Total de Cistanche) sobre el contenido de ARN de varios órganos en ratones normales

2.2 Efecto antirradiación de los GC (Glucósido Total de Cistanche)

2.2.1 El efecto de los GC (glucósido total de Cistanche) sobre la actividad de soD en eritrocitos y el contenido de M DA en el hígado de ratones irradiados:Como se puede observar en la Tabla 4, la actividad de la SOD en los eritrocitos en el grupo lesionado fue un 46,8% inferior a la del grupo normal (P<0.01), compared="" with="" the="" injury="" group,="" the="" gcs="">Glucósido total de Cistanche) 125 y 250 mg·kg -1 grupo de tratamiento aumentó en un 52,1% y 52,4% respectivamente (P<0.01). compared="" with="" the="" normal="" group,="" the="" liver="" mda="" content="" of="" the="" injury="" group="" was="" significantly="" increased="" by="" 24.3%="" (p=""><0.01), and="" the="" liver="" mda="" content="" of="" each="" treatment="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" of="" the="" injury="" group="" by="" 18.4%,="" 17.9%=""><0.01), slightly="" higher="" than="" that="" of="" the="" normal="" group="" (p="">0.05).

2.2.2 El efecto de los GC (glucósido total de Cistanche) en el hígadoADNy contenido de ARN de ratones irradiados:El contenido de ADN hepático y ARN del grupo lesionado fue menor que el del grupo normal, pero no hubo diferencias significativas (P>0,05); el ADN hepático del grupo de tratamiento Aunque el contenido de ARN aumentó ligeramente en comparación con el grupo de lesión, la diferencia no fue significativa (P>0,05).

Tabla 4 Efecto de los GC (Glucósido Total de Cistanche) sobre la actividad de soD en los glóbulos rojos y el contenido de MDA en el hígado de ratones irradiados

2.2.3 El efecto de los GC (Glucósido Total de Cistanche) sobre el contenido de ADN y ARN del bazo de ratones irradiados:La Tabla 5 muestra que el contenido de ADN del bazo del grupo lesionado fue menor que el del grupo normal en un 15,5% (P<0.01), and="" each="" treatment="" group="" was="" more="" damaged="" the="" group="" increased="" by="" 14.9%="" and="" 15.2%="" respectively=""><0.01), which="" were="" close="" to="" the="" normal="" group="" (p="">0,05). El contenido de ARN del bazo en el grupo lesionado fue un 18,6% inferior al del grupo normal (P<0.05). compared="" with="" the="" injured="" group,="" each="" treatment="" group="" increased="" by="" 15.0%="" and="" 20.3%="" (p=""><0.01), which="" were="" close="" to="" the="" normal="" group="" (p="">0.05).

Tabla 5 Efectos de los GC (Glucósido Total de Cistanche) sobre el contenido de ADN y ARN del bazo de ratones irradiados

2.2.4 El efecto de los GC (Glucósido Total de Cistanche) sobre la morfología del bazo de ratones irradiados:La Figura 1 a continuación muestra que en el grupo lesionado y el grupo normal, la tinción del núcleo en la pulpa blanca esplénica y los corpúsculos del bazo es más ligera, el contenido de ADN se reduce, la tinción del citoplasma es más ligera y el contenido de ARN es significativamente menor. En comparación con el grupo gc (glucósido total de Cistanche) 125mg·kg -1 y el grupo lesionado, la estructura general del bazo fue cercana a la normalidad. El núcleo del corpúsculo esplénico se tiñó con púrpura profundo, el contenido de ADN aumentó significativamente, el citoplasma se tiñó con rojo intenso y el contenido de ARN aumentó significativamente.

Figura 1 El efecto de los GC (Glucósido Total de Cistanche) sobre la morfología del bazo de ratones irradiados

2.2.5 El efecto de los GC (Glucósido Total de Cistanche) sobre la morfología de los tejidos hepáticos de ratones irradiados:La Figura 2 muestra que el grupo de lesión tiene una tinción más ligera de los núcleos de hepatocitos alrededor del área portal del lóbulo hepático que el grupo normal, el contenido de ADN se reduce significativamente y el citoplasma se tiñe Las células hepáticas se vuelven más ligeras y las partículas de ARN de las células hepáticas se reducen significativamente. Los GC (Glucósido total de Cistanche) 125mg·kg -1 grupo de tratamiento es de color púrpura más oscuro en el núcleo de hepatocitos alrededor del área portal lobulillar hepática del grupo de lesión, y el contenido de ADN aumenta significativamente, y el citoplasma se tiñe de rojo oscuro, ARN El contenido ha aumentado significativamente.

3 Discusión

La actividad soD de los eritrocitos humanos disminuye significativamente con el aumento de la edad y los peróxidos séricos: el contenido ha aumentado gradualmente [9]. En este trabajo, se observó que los GC (Glucósido total de Cistanche) mejoró significativamente la actividad de SOD en los glóbulos rojos de ratón, disminuyó el contenido sérico de MDA y aumentó el contenido de ARN de banda del tejido hepático y renal, lo que indica que los GC (Glucósido total de Cistanche) puede complementar el consumo de SOD o reducir la disminución de la actividad de SOD, mejorando así la capacidad de eliminar los radicales libres endógenos, disminuyendo la tasa deperoxidación lipídicaen el cuerpo, mejorando la capacidad antioxidante y reduciendo el daño de los radicales libres al ácido nucleico y otras macromoléculas biológicas, lo que provoca el efecto protector de CGS (Glucósido total de Cistanche) en ácidos nucleicos está relacionado con superoxidación antilipídicaefecto. También sugiere que los GC (Glucósido total de Cistanche) puede tener el efecto de promover la síntesis de ácidos nucleicos y ralentizar la descomposición y destrucción de los ácidos nucleicos, y promover aún más la síntesis de proteínas, ayudando así a la producción de sustancias inmunes, acelerar la reparación y regeneración de las células tisulares y mejorar las capacidades de defensa del cuerpo [6], su mecanismo de acción debe estudiarse en profundidad. Se ha informado en la literatura que mejorar la función inmune del cuerpo puede retrasar el envejecimiento prematuro, y la naturaleza del envejecimiento está estrechamente relacionada con el metabolismo de los ácidos nucleicos[10]. Por lo tanto, combinado con elperoxidación antilipídicay los efectos de mejora inmunológica de los GC (TGlucósido otal de Cistanche), sugiere que los GC (Glucósido total de Cistanche) tienenperoxidación antilipídicay efectos de mejora inmunológica.TotalGlucósido de Cistanchetiene efectos antienvejecimiento.

Figura 2 El efecto de los GC (Glucósido Total de Cistanche) sobre la morfología del tejido hepático de ratones irradiados

Después de que el cuerpo es irradiado con⁶⁰Co, se puede producir una gran cantidad de radicales libres de oxígeno tóxicos, causando un fuerteperoxidación lipídicareacción, destruyendo ácidos nucleicos, proteínas, enzimas y otras macromoléculas biológicas, y causando daño celular y tisular [11]. Se puede ver que el efecto dañino deradiaciónestá estrechamente relacionado conperoxidación lipídica. Los GC(Glucósido total de Cistanche) el grupo de tratamiento en este experimento puede promover significativamente la recuperación de la actividad de SOD en los glóbulos rojos de los ratones irradiados y la recuperación del contenido de ácido nucleico del bazo, e inhibir el hígadoperoxidación lipídica. Formación. Muestra que elradiaciónefecto de protección de los GC (Glucósido total de Cistanche) es importante para prevenir el daño de los radicales libres. La histomorfología también muestra que los GC (Glucósido total de Cistanche) puede restaurar la estructura del hígado y el bazo dañados después deirradiación, y puede promover la recuperación de ácidos nucleicos, lo que sugiere que el efecto radioprotector de los GC (Glucósido total de Cistanche) también esantilipídico Peroxidaciónestá relacionado, y su mecanismo debe explorarse más a fondo.

4 Referencias

1. Gao Haiqian. Investigación sobre medicina china de patentes, 1984;11(11):34

2. Sato Tiao et al. Foreign Medicine, Chinese Medicine and Chinese Medicine Section, 1987; 9(6): 33

3. Li Qiaoru et al. Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine, 1990; (11): 22

4. Yu Nancai et al. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 1990; 15(6): 22

5. Zhang Longxiang et al. Beijing: People's Education Press, 1984: 217

6. Ding Kexiang et al. Revista de Gerontología, 1987; 7(2): 42

7. Zhou G L et al. Biochemi Biophys, 1986; 4:71

8. Chen Shunzhong et al. J C lin Lab Tech, 1984; 2(4): 7

9. Wu Li et al. Revista de Gerontología, 1990; 10(6):353

10. Liu Junda. Revista de Gerontología, 1993; 13(6): 375

11. Kergonon J F et al. Biochimi, 1981;63:555